• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞抗氧化酶活性和脂質(zhì)過氧化的影響

    2016-10-27 06:16:22吳麗華陳燕飛陳鵬儀慧蘭
    生態(tài)毒理學(xué)報 2016年3期
    關(guān)鍵詞:胞內(nèi)酵母抗氧化

    吳麗華,陳燕飛,陳鵬,儀慧蘭

    1.太原師范學(xué)院生物系,太原030031

    2.山西大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,太原030006

    亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞抗氧化酶活性和脂質(zhì)過氧化的影響

    吳麗華1,陳燕飛1,陳鵬1,儀慧蘭2,*

    1.太原師范學(xué)院生物系,太原030031

    2.山西大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,太原030006

    以模式生物釀酒酵母為材料,研究亞砷酸鈉對細(xì)胞生長、抗氧化酶活性、丙二醛(MDA)含量及胞內(nèi)活性氧(ROS)水平的影響。結(jié)果顯示,加入亞砷酸鈉(終濃度0.1~0.6 mmol·L-1)后,培養(yǎng)液在600 nm處的光密度值(OD600值)低于對照組,并呈濃度依賴性降低。經(jīng)亞砷酸鈉處理12 h后,酵母細(xì)胞中過氧化物酶(POD)、過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和總抗氧化能力(T-AOC)活性均增高,但胞內(nèi)ROS水平和MDA含量與對照組無顯著差異。砷處理24 h后,POD在0.2 mmol·L-1砷處理組中活性最高,而CAT、SOD和T-AOC活性呈濃度依賴性增高;胞內(nèi)ROS水平和MDA含量在高濃度砷組(0.4和0.6 mmol·L-1)顯著增高。結(jié)果表明,亞砷酸鈉可抑制酵母細(xì)胞生長,改變細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶活性,較高濃度時可引起細(xì)胞氧化損傷。

    亞砷酸鈉;酵母菌;抗氧化物酶;丙二醛;ROS

    吳麗華,陳燕飛,陳鵬,等.亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞抗氧化酶活性和脂質(zhì)過氧化的影響[J].生態(tài)毒理學(xué)報,2016,11(3):302-307

    Wu L H,Chen Y F,Chen P,et al.Sodium arsenite exposure affects the levels of antioxidant enzymes and lipid peroxidation inSaccharomyces cerevisiae [J].Asian Journal of Ecotoxicology,2016,11(3):302-307(in Chinese)

    砷是環(huán)境中常見的、具有毒性作用的類金屬元素,其分布范圍及濃度除了受地質(zhì)條件、地球化學(xué)條件、水文地質(zhì)條件等多種環(huán)境因素的影響外,由于砷還廣泛應(yīng)用于工、農(nóng)、醫(yī)藥等行業(yè)及含砷廢水、廢渣的不合理排放,從而導(dǎo)致部分地區(qū)環(huán)境中砷含量超標(biāo),嚴(yán)重威脅著生態(tài)系統(tǒng)和人類的身體健康[1]。氧化應(yīng)激機(jī)制是目前被廣泛認(rèn)可的砷毒性機(jī)制之一,砷化物進(jìn)入植物或動物體后,機(jī)體內(nèi)抗氧化物酶活性升高,以維持胞內(nèi)氧化還原平衡,從而達(dá)到解毒作用[2-3];當(dāng)體內(nèi)累積砷濃度過高,細(xì)胞內(nèi)超氧陰離子(O2·-)、羥基自由基(·OH)和過氧化氫(H2O2)等活性氧自由基大量產(chǎn)生而無法被及時清除時,則會影響機(jī)體生理功能,抑制細(xì)胞生長,誘導(dǎo)細(xì)胞死亡[4-5]。

    酵母細(xì)胞是目前公認(rèn)的研究真核生物細(xì)胞學(xué)機(jī)制的模式生物,且具有生長周期短、易培養(yǎng)等特點(diǎn)。本課題組已有研究證明,亞砷酸鈉可通過誘導(dǎo)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)升高而誘導(dǎo)酵母細(xì)胞死亡[6],但砷對酵母細(xì)胞氧化損傷機(jī)理還不清楚。因此,本實(shí)驗通過分析亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞生理生化指標(biāo)的影響,研究砷化物的氧化損傷效應(yīng),進(jìn)一步探討砷化物的毒性作用機(jī)制。

    1 材料與方法(Materials and methods)

    1.1 實(shí)驗材料

    釀酒酵母購于中國科學(xué)院微生物研究所菌種保藏中心。酵母細(xì)胞接種于YPD液體培養(yǎng)中,28℃,180 r·min-1振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期后用于毒性實(shí)驗。

    1.2 藥物處理及生長曲線測定

    取對數(shù)期細(xì)胞至含有不同濃度亞砷酸鈉(0、0.1、0.2、0.4和0.6 mmol·L-1)的液體培養(yǎng)基中,使各處理組培養(yǎng)液在600 nm處的初始光密度值(OD600)相等且小于0.1,28℃,180 r·min-1振蕩培養(yǎng),每隔2 h以培養(yǎng)基為對照測定培養(yǎng)液OD600,繪制生長曲線;培養(yǎng)24 h后檢測抗氧化物酶活性、MDA含量及ROS水平,每個處理設(shè)置3個重復(fù)。

    1.3 抗氧化酶的測定

    1.3.1 細(xì)胞酶液的提?。?]

    將酵母細(xì)胞懸浮于預(yù)冷的細(xì)胞裂解液中,加入一定體積的酸性玻璃珠,高速震蕩10 min(每震蕩2 min冰浴1 min)后,冰浴15 min。11 500 r·min-1低溫離心10 min,取上清液即為酶提取液。

    1.3.2 抗氧化酶活性和MDA含量測定

    過氧化物酶(POD)活力測定用POD測定試劑盒;超氧化物歧化酶(SOD)活力測定用T-SOD測定試劑盒;過氧化氫酶(CAT)活力測定用CAT測定試劑盒;總抗氧化能力(T-AOC)測定用T-AOC測定試劑盒;丙二醛(MDA)含量參照[8]方法測定。

    1.4 胞內(nèi)ROS水平測定

    收集酵母細(xì)胞,洗滌并懸浮于終濃度為5 μmol ·L-1的二氯熒光黃雙乙酸酯(DCFH-DA)中,30℃避光孵育30 min后,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞熒光水平。

    1.5 統(tǒng)計分析

    計算每組3個重復(fù)實(shí)驗的平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±SD),采用SPSS 18.0和Duncan方法對實(shí)驗結(jié)果進(jìn)行F檢驗并多重比較,分析各處理組之間的差異顯著性(檢驗標(biāo)準(zhǔn)為P<0.05)。

    2 結(jié)果(Results)

    2.1 亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞生長的影響

    圖1 亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞生長的影響

    由圖1可知,在初始OD600相同的情況下培養(yǎng)24 h后,各處理組培養(yǎng)液OD600均明顯低于對照組,且隨著處理濃度的增加而逐漸降低。在0.6 mmol· L-1處理組中酵母細(xì)胞幾乎完全停止生長。結(jié)果說明,亞砷酸鈉可抑制酵母細(xì)胞生長和分裂,并具有一定的濃度依賴性。

    2.2 亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞抗氧化酶活性的影響

    酵母細(xì)胞抗氧化酶活性如圖2所示。與對照組相比,酵母細(xì)胞經(jīng)亞砷酸鈉脅迫12 h后,抗氧化酶活性隨濃度增高而逐漸升高,高濃度處理組(0.4和0.6 mmol·L-1)中酶活性均顯著高于對照組,其中POD活性在0.2 mmol·L-1處理組中與對照組間已具顯著差異,說明酵母POD對亞砷酸鈉脅迫相對敏感。

    酵母細(xì)胞經(jīng)亞砷酸鈉脅迫24 h后,CAT活性隨處理濃度升高而增強(qiáng),在0.4和0.6 mmol·L-1處理組中明顯增加,均與對照組具有顯著差異;SOD活性在處理濃度范圍內(nèi)與砷濃度顯著正相關(guān)(r=0.99),說明SOD活性在一定程度上能反映環(huán)境中砷污染程度;POD活性則呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,0.2 mmol·L-1處理組中,POD活性達(dá)到最高,高濃度組中,POD活性下降,可能與亞砷酸鈉脅迫后酵母胞內(nèi)的氧自由基濃度有關(guān),低濃度時可激活機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)[9],而濃度過高時,對酵母細(xì)胞造成嚴(yán)重傷害,抗氧化物酶系統(tǒng)受到破壞,POD活性下降;TAOC活性在0.1 mmol·L-1處理組中略低于對照組,但無顯著差異;在0.2~0.6 mmol·L-1處理組中其活性顯著高于對照組。結(jié)果表明,亞砷酸鈉脅迫后,酵母細(xì)胞中抗氧化物酶在逆境生理中發(fā)揮了重要作用。

    2.3 亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞ROS水平的影響

    圖2 亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞抗氧化酶活性的影響

    本實(shí)驗采用流式細(xì)胞術(shù)檢測酵母細(xì)胞ROS水平,發(fā)現(xiàn)酵母細(xì)胞經(jīng)不同濃度亞砷酸鈉脅迫后,胞內(nèi)ROS水平隨處理濃度的升高和處理時間延長而逐漸增加,并具有一定的濃度效應(yīng)和時間效應(yīng)(圖3)。經(jīng)亞砷酸鈉脅迫12 h后,各處理組胞內(nèi)ROS水平與對照組之間均無顯著差異;經(jīng)0.2~0.6 mmol·L-1亞砷酸鈉脅迫24 h后,酵母胞內(nèi)ROS水平顯著高于對照組,這可能是因為砷濃度較低或作用時間較短時,機(jī)體內(nèi)抗氧化物酶可有效降低由砷脅迫產(chǎn)生的氧自由基;當(dāng)砷濃度升高或作用時間較長時,機(jī)體內(nèi)抗氧化物防御系統(tǒng)與過多的氧自由基失去動態(tài)平衡,導(dǎo)致ROS水平顯著增高。

    圖3 亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞ROS水平的影響

    圖4 亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞MDA含量的影響

    2.4 亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞MDA含量的影響

    從圖4可看出,酵母細(xì)胞經(jīng)亞砷酸鈉脅迫后MDA含量隨砷濃度的升高和時間延長而逐漸增加。酵母細(xì)胞經(jīng)亞砷酸鈉脅迫12 h或經(jīng)低濃度(0.1和0.2 mmol·L-1)亞砷酸鈉脅迫24 h后,各處理組中MDA含量均與對照組無顯著差異;經(jīng)高濃度(0.4和0.6 mmol·L-1)亞砷酸鈉處理24 h后,MDA含量顯著升高,與對照組相比分別增加了107.07%和386.17%。研究結(jié)果說明,低濃度砷或短時間的砷脅迫不會對酵母細(xì)胞造成嚴(yán)重的氧化損傷;隨著砷濃度升高,活性氧增多,導(dǎo)致細(xì)胞脂質(zhì)過氧化程度加劇,MDA含量升高,引起酵母細(xì)胞氧化損傷。

    3 討論(Discussion)

    眾所周知,砷是一種廣泛存在于自然界中的環(huán)境誘變劑,對植物、動物和微生物均可產(chǎn)生毒害作用[6,10-11]。Wu等[12]研究發(fā)現(xiàn),砷化物可抑制骨髓瘤細(xì)胞生長。本實(shí)驗以模式生物釀酒酵母為材料研究砷化物的毒性作用,發(fā)現(xiàn)亞砷酸鈉可抑制酵母細(xì)胞生長,并隨著砷濃度的提高抑制作用增強(qiáng),說明亞砷酸鈉對酵母細(xì)胞具有一定的毒性作用。

    大量研究表明,氧化應(yīng)激機(jī)制是砷毒性作用機(jī)制之一,那么砷對酵母細(xì)胞的毒性作用是否與氧化應(yīng)激有關(guān)?正常情況下,當(dāng)機(jī)體受到外源物質(zhì)脅迫時,即可誘導(dǎo)細(xì)胞抗氧化物酶表達(dá)以清除脅迫產(chǎn)生的過量ROS,從而使細(xì)胞內(nèi)ROS等自由基的產(chǎn)生與清除處于動態(tài)平衡狀態(tài);當(dāng)體內(nèi)ROS等氧自由基增加過多或抗氧化系統(tǒng)能力下降時,機(jī)體則會發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng),胞內(nèi)ROS水平升高,從而引起細(xì)胞發(fā)生氧化損傷[13]。SOD、POD和CAT是生物體內(nèi)抗氧化酶系中最重要的酶類,其活性可在一定程度上反映細(xì)胞的抗氧化能力;ROS是氧在細(xì)胞內(nèi)不能被完全還原而生成的產(chǎn)物的總稱,包括·、·OH及H2O2等,其水平能反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)氧化系統(tǒng)情況;MDA含量是反映細(xì)胞膜脂損傷的重要指標(biāo),可間接反映細(xì)胞發(fā)生氧化損傷的情況,常用來評價環(huán)境污染物的潛在毒性[14]。因此,我們進(jìn)一步檢測了酵母抗氧化酶活性、胞內(nèi)ROS水平及MDA含量。

    本研究結(jié)果顯示,酵母細(xì)胞經(jīng)亞砷酸鈉脅迫12 h后,抗氧化酶活性隨著處理濃度的升高而逐漸增強(qiáng),胞內(nèi)ROS水平和MDA含量與對照組相比均無顯著差異。這說明較短時間的砷脅迫可激活抗氧化物酶活性以清除酵母體內(nèi)過量的氧自由基,抑制胞內(nèi)ROS水平升高,此時亞砷酸鈉并不會對酵母造成氧化脅迫,這是酵母對逆境環(huán)境的適應(yīng)性反應(yīng)。酵母細(xì)胞經(jīng)亞砷酸鈉處理24 h后,SOD活性隨處理濃度升高而增強(qiáng),說明SOD在整個實(shí)驗中將超氧陰離子催化生成H2O2的能力逐漸增強(qiáng)。CAT和POD可將H2O2轉(zhuǎn)變?yōu)檠鯕夂退?,從而消除H2O2對細(xì)胞造成的毒性作用。在本研究中,酵母細(xì)胞經(jīng)亞砷酸鈉脅迫24 h后,CAT活性隨處理濃度升高而增強(qiáng);在高濃度處理組中,POD活性呈下降趨勢,胞內(nèi)ROS水平顯著高于對照組水平。這有可能是因為低濃度砷即可快速激活抗氧化酶活性以清除酵母細(xì)胞內(nèi)氧自由基,而砷濃度較高時,POD活性下降,細(xì)胞清除H2O2的能力減弱;雖然CAT和SOD活性持續(xù)增加,但胞內(nèi)產(chǎn)生的氧自由基超過了抗氧化酶的清除能力,自身氧化還原系統(tǒng)平衡遭到破壞,使胞內(nèi)ROS水平升高。

    總之,在亞砷酸鈉脅迫下,酵母細(xì)胞內(nèi)SOD、POD和CAT活性發(fā)生改變,ROS水平升高,MDA含量增加,表明砷脅迫引起酵母細(xì)胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生和清除失衡,細(xì)胞發(fā)生氧化損傷,最終引起酵母細(xì)胞的生理代謝紊亂,細(xì)胞生長受到抑制。

    研究結(jié)果表明,0.1~0.6 mmol·L-1的亞砷酸鈉能夠誘導(dǎo)酵母細(xì)胞內(nèi)ROS水平升高,抗氧化酶活性增強(qiáng),從而提高酵母細(xì)胞對逆境的適應(yīng)能力,但胞內(nèi)ROS水平超過一定閾值無法被及時清除時,就會導(dǎo)致膜脂過氧化水平加劇,MDA含量升高,從而對酵母細(xì)胞造成氧化損傷。

    (References):

    [1] Garelick H,Jones H,Dybowska A,et al.Arsenic pollution sources[J].Reviews of Environmental Contamination and Toxicology,2008,197:17-60

    [2] Malik J A,Goel S,Kaur N,et al.Selenium antagonises the toxic effects of arsenic on mungbean(Phaseolus aureusRoxb.)plants by restricting its uptake and enhancing the antioxidative and detoxification mechanisms[J].Environmental and Experimental Botany,2012,77:242-248

    [3] Sharma I.Arsenic induced oxidative stress in plants[J]. Biologia,2012,67(3):447-453

    [4] 薛美昭,儀慧蘭.活性氧介導(dǎo)砷誘導(dǎo)的蠶豆保衛(wèi)細(xì)胞死亡[J].生態(tài)毒理學(xué)報,2013,8(2):257-261

    Xue M Z,Yi H L.Involvement of ROS in arsenic-induced guard cell death in detached epidermis ofVicia fabaleaves[J].Asian Journal of Ecotoxicology,2013,8(2): 257-261(in Chinese)

    [5] Wu L H,Yi H L,Yi M.Assessment of arsenic toxicity usingAllium/Viciaroot tip micronucleus assays[J].Journal of Hazardous Materials,2010,176(1/3):952-956

    [6] Wu L H,Yi H L,Zhang H F.Reactive oxygen species and Ca2+are involved in sodium arsenite-induced cell killing in yeast cells[J].FEMS Microbiology Letter,2013, 343:57-63

    [7] 劉向勇.釀酒酵母Bdf1p轉(zhuǎn)錄因子在高鹽脅迫反應(yīng)中調(diào)控機(jī)制的研究[D].濟(jì)南:山東大學(xué),2008:84-85

    Liu X Y.Regulation of the Bdf1p transcription factor in the salt stress response ofSaccharomyces cerevisiae[D]. Jinan:Shandong University,2008:84-85

    [8] 潘軍航.釀酒酵母耐鋁機(jī)制中可能包含抗氧化作用[D].杭州:浙江大學(xué),2005:17

    Pan J H.The involvement of antioxidant inSaccharomyces cerevisiaealuminum tolerance[D].Hangzhou:Zhejiang University,2005:17

    [9] 于慶云,王悠,徐彥,等.鎘和鉛對菲律賓蛤仔脂質(zhì)過氧化及抗氧化酶活性的影響[J].生態(tài)毒理學(xué)報,2013, 8(4):504-512

    Yu Q Y,Wang Y,Xu Y,et al.Effects of cadmium and lead on the lipid peroxidation and levels of antioxidant enzymes inRuditapes philippinarum[J].Asian Jounal of Ecotoxicology,2013,8(4):504-512(in Chinese)

    [10] Wang Q,Xiong D,Zhao P,et al.Effect of applying an arsenic-resistant and plant growth-promoting rhizobacterium to enhance soil arsenic phytoremediation byPopulus deltoidsLH05-17[J].Journal of Applied Microbiology, 2011,111:1065-1074

    [11] Ivanov V N,Gengyun W,Hei T K.Sodium arsenite exposure inhibits AKT and Stat3 activation,suppresses self-renewal and induces apoptotic death of embryonic stem cells[J].Apoptosis,2013,18(2):188-200

    [12] Wu X,Shi J,Wu Y,et al.Arsenic trioxide-mediated growth inhibition of myeloma cells is associated with an extrinsic or intrinsic signaling pathway through activation of TRAIL or TRAIL receptor 2[J].Cancer Biology and Therapy,2010,10:1201-1214

    [13] Li L J,Liu X M,Guo Y P,et al.Activity of the enzymes of the antioxidative system in cadmium-treated oxyachinensis(Orthoptera acridoidae)[J].Environmental Toxicology and Pharmacology,2005,20:412-416

    [14] 龍奕,劉珊珊,王萌,等.納米Al2O3和Cd聯(lián)合暴露對銅銹環(huán)棱螺體內(nèi)Cd的生物積累和抗氧化酶活性的影響[J].生態(tài)毒理學(xué)報,2015,10(2):216-223

    Long Y,Liu S S,Wang M,et al.Effect of Cd and Al2O3-NPs co-exposure on bioaccumulation of Cd and antioxidase enzyme activities inBellamya aeroginosa[J].Asian Journal of Ecotoxicology,2015,10(2):216-223(in Chinese)

    [15] Yannic M,Robert B.Repression of gene express by oxidative stress[J].Biochemical Journal,1999,342:481-496

    [16] Du L,Yu Y,Chen J,et al.Arsenic induces caspase-and mitochondria-mediated apoptosis inSaccharomyces cerevisiae[J].FEMS Yeast Research,2007,7:860-865

    [17] Li B,Li X,Zhu B,et al.Sodium arsenite induced reactive oxygen species generation,nuclear factor(erythroid-2 related)factor 2 activation,heme oxygenase-1 expression, and glutathione elevation in Chang human hepatocytes[J]. Environmental Toxicology,2013,28:401-410

    [18] Wolff S P,Dean R T.Fragmentation of proteins by free radicals and its effect on their susceptibility to enzymic hydrolysis[J].Biochemical Journal,1986,234:399-403

    [19] Stadtman E R.Protein oxidation and aging[J].Science, 1992,257:1220-1224

    [20] Gasch A P,Spellman P T,Kao C M,et al.Genomic expression programs in the response of yeast cells to environmental changes[J].Molecular Biology of the Cell, 2000,11:4241-4257◆

    Sodium Arsenite Exposure Affects the Levels of Antioxidant Enzymes and Lipid Peroxidation in Saccharomyces cerevisiae

    Wu Lihua1,Chen Yanfei1,Chen Peng1,Yi Huilan2,*

    1.Department of Biology,Taiyuan Normal University,Taiyuan 030031,China
    2.School of Life Science,Shanxi University,Taiyuan 030006,China

    5 November 2015 accepted 29 January 2016

    Arsenic is a high toxic metalloid widely distributed in the environment.However,the underlying mechanisms of arsenic toxicity are not yet well understood.Saccharomyces cerevisiaeas a model organism was selected as the materials to investigate the toxic mechanism of sodium arsenite(As).The results showed that cell culture density(OD600)of yeast cells was lower in all As-treatment groups(in the concentration range of 0.1-0.6 mmol· L-1)than in the control group.The values of OD600decreased in a concentration-dependent manner.The activities of antioxidant enzymes such as superoxide dismutase(SOD),peroxidase(POD),catalase(CAT)and total antioxidant capacity(T-AOC)increased with increasing arsenic concentrations after yeast cells were exposed to sodium arsenite for 12 h,but no significant difference in intracellular reactive oxygen species(ROS)level or malondialdehyde(MDA)content was found between the control and As-treatment group.After 24 h of exposure,the activitiesof CAT,POD,SOD and T-AOC increased also in a concentration-dependent manner,however POD reached its peak in 0.2 mmol·L-1As-treatment group.And both intracellular ROS levels and MDA contents significantly increased in yeast cells after they were exposed to 0.4 mmol·L-1or 0.6 mmol·L-1sodium arsenite.These results suggested that sodium arsenite can induce cell growth inhibition,alter the activities of antioxidant defense system,and result in oxidative damage in yeast cells.

    sodium arsenite;yeast;antioxidant enzymes;malondialdehyde;ROS

    2015-11-05 錄用日期:2016-01-29

    1673-5897(2016)3-302-06

    X171.5

    A

    10.7524/AJE.1673-5897.20151105001

    簡介:儀慧蘭(1963—),女,博士,教授,博士生導(dǎo)師,主要研究方向為環(huán)境生物學(xué)與逆境生理學(xué),已發(fā)表研究論文90余篇,獲國家發(fā)明專利授權(quán)2項。

    國家自然科學(xué)基金青年基金(21307087);山西省高等學(xué)校大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項目(2015363)

    吳麗華(1981—),女,博士,副教授,研究方向為環(huán)境毒理學(xué),E-mail:wlh1981622_510@163.com

    *通訊作者(Corresponding author),E-mail:yihl@sxu.edu.cn

    猜你喜歡
    胞內(nèi)酵母抗氧化
    6000倍抗氧化能力,“完爆”維C!昶科將天然蝦青素研發(fā)到極致
    HIV/AIDS患者繼發(fā)鳥-胞內(nèi)分枝桿菌復(fù)合群感染診療進(jìn)展
    傳染病信息(2021年6期)2021-02-12 01:52:08
    尿感方清除受感染膀胱上皮細(xì)胞胞內(nèi)尿道致病性大腸桿菌的作用
    中成藥(2017年12期)2018-01-19 02:06:27
    姬松茸胞內(nèi)多糖和胞外多糖的抗氧化活性研究
    福建輕紡(2017年12期)2017-04-10 12:56:39
    酵母抽提物的研究概況
    酵母魔術(shù)師
    人CyclinD1在畢赤酵母中的表達(dá)
    生物量高的富鋅酵母的開發(fā)應(yīng)用
    豬皮膠原蛋白抗氧化肽的分離純化及體外抗氧化活性研究
    乳清低聚肽的制備及其抗氧化活性
    在线观看免费视频日本深夜| 亚洲av一区综合| 国产三级在线视频| netflix在线观看网站| 女人被狂操c到高潮| 亚洲精品国产成人久久av| 小说图片视频综合网站| 成人二区视频| 成人无遮挡网站| 九色成人免费人妻av| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 免费看日本二区| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 韩国av在线不卡| 干丝袜人妻中文字幕| a级毛片a级免费在线| 日日夜夜操网爽| 欧美中文日本在线观看视频| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产成人影院久久av| 最后的刺客免费高清国语| 国产精品精品国产色婷婷| 听说在线观看完整版免费高清| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产精品福利在线免费观看| 1000部很黄的大片| 22中文网久久字幕| 精品人妻1区二区| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产真实伦视频高清在线观看 | 日韩欧美精品免费久久| 一级av片app| 亚洲图色成人| 啦啦啦韩国在线观看视频| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 国产黄a三级三级三级人| 国产一区二区在线观看日韩| 久久久久久九九精品二区国产| 又紧又爽又黄一区二区| 在线国产一区二区在线| 国产av一区在线观看免费| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 天天躁日日操中文字幕| 久久精品综合一区二区三区| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产高潮美女av| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产探花在线观看一区二区| 天堂影院成人在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产 | 中文资源天堂在线| 又爽又黄a免费视频| 亚洲成人久久爱视频| 国模一区二区三区四区视频| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲真实伦在线观看| av.在线天堂| 不卡视频在线观看欧美| 99热精品在线国产| 干丝袜人妻中文字幕| 国产美女午夜福利| 亚洲精品久久国产高清桃花| 免费看美女性在线毛片视频| 日韩欧美三级三区| 国产一区二区三区av在线 | 欧美黑人巨大hd| 乱人视频在线观看| 亚洲精品色激情综合| 亚洲精品成人久久久久久| 不卡一级毛片| 白带黄色成豆腐渣| av在线亚洲专区| 联通29元200g的流量卡| 色av中文字幕| 亚洲人成伊人成综合网2020| 久久久久国内视频| 久久久久久久精品吃奶| 国产精品日韩av在线免费观看| 高清日韩中文字幕在线| 国内揄拍国产精品人妻在线| 无遮挡黄片免费观看| 日韩精品青青久久久久久| 欧美区成人在线视频| 国产毛片a区久久久久| 成人精品一区二区免费| 久久人妻av系列| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国产亚洲欧美98| 99精品久久久久人妻精品| 一边摸一边抽搐一进一小说| 欧美成人性av电影在线观看| 久9热在线精品视频| 1024手机看黄色片| 欧美激情在线99| av在线天堂中文字幕| АⅤ资源中文在线天堂| 在线免费观看的www视频| www日本黄色视频网| 欧美又色又爽又黄视频| 一区二区三区高清视频在线| 波野结衣二区三区在线| 日韩精品中文字幕看吧| 91在线观看av| 窝窝影院91人妻| 天堂影院成人在线观看| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲av不卡在线观看| 精品无人区乱码1区二区| 久9热在线精品视频| 99久久精品国产国产毛片| 中亚洲国语对白在线视频| av视频在线观看入口| 嫩草影院精品99| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 日韩欧美三级三区| 国产私拍福利视频在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 久久精品国产自在天天线| 亚洲自拍偷在线| 日本与韩国留学比较| 国产一区二区在线观看日韩| 免费av毛片视频| 免费高清视频大片| 露出奶头的视频| 日韩欧美国产一区二区入口| 97碰自拍视频| 国产三级在线视频| 成人三级黄色视频| 美女大奶头视频| 午夜福利欧美成人| av国产免费在线观看| av国产免费在线观看| 日韩中字成人| 国产免费av片在线观看野外av| 久久久久久伊人网av| 美女黄网站色视频| АⅤ资源中文在线天堂| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| АⅤ资源中文在线天堂| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 两个人视频免费观看高清| 午夜老司机福利剧场| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 国产v大片淫在线免费观看| 国产av一区在线观看免费| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 在线观看免费视频日本深夜| 一进一出抽搐gif免费好疼| 嫩草影视91久久| 久久人人精品亚洲av| www日本黄色视频网| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲18禁久久av| 久久久久久国产a免费观看| 中文字幕熟女人妻在线| 最近中文字幕高清免费大全6 | 亚洲欧美精品综合久久99| 色av中文字幕| 中文字幕av在线有码专区| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 舔av片在线| 男女视频在线观看网站免费| 真人一进一出gif抽搐免费| 久久久久性生活片| 国产精品一区二区免费欧美| 中文资源天堂在线| av福利片在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 欧美+亚洲+日韩+国产| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产高清视频在线观看网站| 一级毛片久久久久久久久女| 高清毛片免费观看视频网站| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产色婷婷99| netflix在线观看网站| 婷婷亚洲欧美| 国产高潮美女av| 国产三级在线视频| 久久99热这里只有精品18| 麻豆国产97在线/欧美| 一本精品99久久精品77| x7x7x7水蜜桃| 啦啦啦啦在线视频资源| 窝窝影院91人妻| 在线观看免费视频日本深夜| 日本色播在线视频| 免费av毛片视频| 中文字幕熟女人妻在线| 亚洲五月天丁香| 亚洲四区av| 最新在线观看一区二区三区| 直男gayav资源| 亚洲无线观看免费| 午夜福利高清视频| 久久人人精品亚洲av| 国产成人福利小说| 观看美女的网站| 午夜老司机福利剧场| 欧美xxxx性猛交bbbb| 最新在线观看一区二区三区| 麻豆一二三区av精品| 精品一区二区三区人妻视频| 日本精品一区二区三区蜜桃| 九九热线精品视视频播放| 99精品久久久久人妻精品| 中文字幕久久专区| 亚洲无线观看免费| 国产高清不卡午夜福利| 男人舔奶头视频| www.色视频.com| 亚洲最大成人av| 午夜福利在线观看吧| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产探花在线观看一区二区| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 久久精品影院6| 日本免费a在线| 午夜激情欧美在线| av黄色大香蕉| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 久久久久久久精品吃奶| 国产亚洲av嫩草精品影院| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲人成网站高清观看| 亚洲无线观看免费| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 亚洲av中文av极速乱 | 麻豆精品久久久久久蜜桃| 黄色丝袜av网址大全| av在线亚洲专区| 亚洲中文字幕日韩| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久久成人免费电影| av视频在线观看入口| 亚洲四区av| 久久久国产成人精品二区| 亚洲在线自拍视频| 日本熟妇午夜| 亚洲av中文av极速乱 | 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 在线观看66精品国产| 国产91精品成人一区二区三区| 国产成人福利小说| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲av免费高清在线观看| 美女高潮的动态| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 日本熟妇午夜| 国产乱人视频| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 最近视频中文字幕2019在线8| 国产精品一区www在线观看 | 欧美+亚洲+日韩+国产| 色吧在线观看| 69av精品久久久久久| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产激情偷乱视频一区二区| .国产精品久久| 国产三级中文精品| 99热网站在线观看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 少妇高潮的动态图| 91麻豆精品激情在线观看国产| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲国产色片| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 老司机深夜福利视频在线观看| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲专区中文字幕在线| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国产亚洲91精品色在线| 搡老妇女老女人老熟妇| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产精品人妻久久久影院| 最近在线观看免费完整版| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 麻豆精品久久久久久蜜桃| 午夜视频国产福利| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产黄色小视频在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 干丝袜人妻中文字幕| 欧美+日韩+精品| 日韩人妻高清精品专区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 国产高清视频在线观看网站| 在线观看午夜福利视频| 直男gayav资源| 亚洲三级黄色毛片| 看十八女毛片水多多多| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产91精品成人一区二区三区| 国产黄色小视频在线观看| 韩国av在线不卡| 国产亚洲精品av在线| 一进一出抽搐gif免费好疼| 床上黄色一级片| 久久九九热精品免费| 观看免费一级毛片| 两个人的视频大全免费| 91麻豆精品激情在线观看国产| 精品久久久久久久末码| 成人鲁丝片一二三区免费| 在线播放无遮挡| 91av网一区二区| 日韩av在线大香蕉| 国产精品永久免费网站| 欧美日韩综合久久久久久 | 丝袜美腿在线中文| 国产精品久久久久久久久免| 伦理电影大哥的女人| 久久精品影院6| 久久久国产成人精品二区| 免费无遮挡裸体视频| 国产精品三级大全| 精品久久久久久成人av| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 成人鲁丝片一二三区免费| 成年版毛片免费区| 久久久成人免费电影| 人妻少妇偷人精品九色| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产精品,欧美在线| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 搡老熟女国产l中国老女人| 少妇被粗大猛烈的视频| 性色avwww在线观看| av在线亚洲专区| 男女下面进入的视频免费午夜| а√天堂www在线а√下载| 亚洲人成网站高清观看| 大型黄色视频在线免费观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 中文字幕久久专区| 久久精品人妻少妇| 久久午夜福利片| 看片在线看免费视频| avwww免费| 免费在线观看成人毛片| 在线观看66精品国产| 我要看日韩黄色一级片| 在线播放国产精品三级| 中文字幕av成人在线电影| 毛片一级片免费看久久久久 | 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 国产伦一二天堂av在线观看| 一区福利在线观看| 精品久久久久久久末码| 国产成人a区在线观看| 日本五十路高清| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 日本一本二区三区精品| 亚洲美女黄片视频| 最后的刺客免费高清国语| 别揉我奶头 嗯啊视频| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 禁无遮挡网站| 久久国产精品人妻蜜桃| 一区二区三区激情视频| 亚洲av免费在线观看| 午夜精品在线福利| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 日本黄大片高清| 亚洲内射少妇av| 国产真实乱freesex| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 欧美+亚洲+日韩+国产| 黄色视频,在线免费观看| 色视频www国产| 免费看光身美女| 黄片wwwwww| 性插视频无遮挡在线免费观看| 欧美高清性xxxxhd video| 亚洲色图av天堂| 亚洲av.av天堂| 好男人在线观看高清免费视频| 联通29元200g的流量卡| 大型黄色视频在线免费观看| 露出奶头的视频| 最新在线观看一区二区三区| 不卡视频在线观看欧美| 男女下面进入的视频免费午夜| 日本 欧美在线| 真实男女啪啪啪动态图| 成人av一区二区三区在线看| 精品久久久久久久久av| 亚洲欧美激情综合另类| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 男女视频在线观看网站免费| 国产综合懂色| 精品一区二区三区人妻视频| 久久精品综合一区二区三区| 99热这里只有是精品在线观看| 欧美人与善性xxx| www日本黄色视频网| 欧美成人a在线观看| av在线老鸭窝| 免费在线观看影片大全网站| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 很黄的视频免费| 黄色配什么色好看| 亚洲av.av天堂| 人妻少妇偷人精品九色| 欧美日韩国产亚洲二区| 婷婷色综合大香蕉| 日韩高清综合在线| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲乱码一区二区免费版| 色播亚洲综合网| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 免费人成视频x8x8入口观看| 国产精品一区二区免费欧美| 日韩精品有码人妻一区| 国产成人av教育| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 婷婷六月久久综合丁香| 男人和女人高潮做爰伦理| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 可以在线观看的亚洲视频| 色5月婷婷丁香| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 久久久色成人| 91在线观看av| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产三级在线视频| 免费搜索国产男女视频| 成人美女网站在线观看视频| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 大型黄色视频在线免费观看| а√天堂www在线а√下载| 日韩欧美国产在线观看| 日韩人妻高清精品专区| 欧美成人性av电影在线观看| 真实男女啪啪啪动态图| 神马国产精品三级电影在线观看| 91久久精品国产一区二区成人| 国内精品久久久久精免费| 村上凉子中文字幕在线| 日韩高清综合在线| 观看免费一级毛片| 久久久午夜欧美精品| 亚洲精华国产精华精| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲中文日韩欧美视频| 草草在线视频免费看| 精品人妻熟女av久视频| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲精品色激情综合| 欧美3d第一页| 成年女人看的毛片在线观看| 国产精品女同一区二区软件 | 欧美日本亚洲视频在线播放| 久久久久国内视频| 亚洲午夜理论影院| 久久中文看片网| 日本黄色片子视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 俺也久久电影网| 亚洲无线观看免费| 99热只有精品国产| 亚洲精品456在线播放app | 在线观看午夜福利视频| 亚洲午夜理论影院| 美女黄网站色视频| 精品日产1卡2卡| 日韩欧美国产一区二区入口| 俺也久久电影网| 国产免费男女视频| 亚洲18禁久久av| 久久久国产成人精品二区| 国产一区二区三区视频了| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲av成人精品一区久久| 精华霜和精华液先用哪个| 在线免费十八禁| av福利片在线观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久人妻av系列| 欧美bdsm另类| 久久精品国产亚洲网站| 动漫黄色视频在线观看| 成人特级av手机在线观看| 51国产日韩欧美| 网址你懂的国产日韩在线| 久久久精品欧美日韩精品| 日本一本二区三区精品| 午夜福利在线在线| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲在线自拍视频| 又粗又爽又猛毛片免费看| 91久久精品国产一区二区三区| 乱码一卡2卡4卡精品| 一级a爱片免费观看的视频| 乱系列少妇在线播放| 九九在线视频观看精品| 一夜夜www| 窝窝影院91人妻| 亚洲精品色激情综合| 精品久久久久久成人av| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲成人久久爱视频| 国产高清不卡午夜福利| 午夜亚洲福利在线播放| 赤兔流量卡办理| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 九九爱精品视频在线观看| 午夜福利18| 日韩 亚洲 欧美在线| 成年女人看的毛片在线观看| 日韩av在线大香蕉| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产黄a三级三级三级人| 国产综合懂色| 一区福利在线观看| 亚洲av不卡在线观看| 99国产极品粉嫩在线观看| 日韩亚洲欧美综合| 久久香蕉精品热| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 午夜日韩欧美国产| 国产黄a三级三级三级人| 日韩大尺度精品在线看网址| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲国产精品久久男人天堂| 最新中文字幕久久久久| 婷婷丁香在线五月| 一级a爱片免费观看的视频| 免费看av在线观看网站| av天堂在线播放| 三级毛片av免费| 国产乱人视频| 人妻少妇偷人精品九色| 91久久精品电影网| 国产淫片久久久久久久久| 精品一区二区三区人妻视频| 春色校园在线视频观看| 女同久久另类99精品国产91| 免费人成视频x8x8入口观看| 看免费成人av毛片| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 中文资源天堂在线| 中文字幕熟女人妻在线| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 九九热线精品视视频播放| 国产精品亚洲美女久久久| 国产精品精品国产色婷婷| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产成人一区二区在线| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产伦一二天堂av在线观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 成人永久免费在线观看视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 欧美高清成人免费视频www| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日韩一区二区视频免费看| 99在线人妻在线中文字幕| 成人综合一区亚洲| 国产亚洲91精品色在线| 免费人成在线观看视频色| 国产一区二区在线av高清观看| a级一级毛片免费在线观看| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲熟妇熟女久久| 联通29元200g的流量卡| 久久精品影院6| 麻豆一二三区av精品| 久久久久久大精品| 国产精品人妻久久久久久| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 在线观看舔阴道视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产伦一二天堂av在线观看| 深爱激情五月婷婷| 特级一级黄色大片| 一区二区三区四区激情视频 | 国产精品精品国产色婷婷| 在线观看舔阴道视频| 听说在线观看完整版免费高清| 国产亚洲精品av在线| av在线天堂中文字幕| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲最大成人中文| 亚洲黑人精品在线| 波野结衣二区三区在线| 天天躁日日操中文字幕| 一级黄色大片毛片| 亚洲欧美清纯卡通| 永久网站在线| 久99久视频精品免费| 男人舔奶头视频| 国产69精品久久久久777片|