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    rhG-CSF對(duì)大鼠急性缺血性腦梗死的保護(hù)及治療作用機(jī)制研究

    2016-10-27 07:24:51付宏亮
    關(guān)鍵詞:干細(xì)胞缺血性神經(jīng)功能

    付宏亮

    (山西省臨汾市醫(yī)院,山西 臨汾 041000)

    rhG-CSF對(duì)大鼠急性缺血性腦梗死的保護(hù)及治療作用機(jī)制研究

    付宏亮

    (山西省臨汾市醫(yī)院,山西 臨汾 041000)

    目的 分析rhG-CSF對(duì)大鼠急性缺血性腦梗死的保護(hù)及治療作用機(jī)制。方法 選取健康雌性SD大鼠12只,采用線拴法建立大鼠急性缺血性腦梗死模型(MCAO),分別納入研究組和對(duì)照組,研究組皮下注射rhG-CSF。TTC染色、流式細(xì)胞儀及免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)梗死體積、凋亡細(xì)胞、CD34+細(xì)胞及神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白的表達(dá)。結(jié)果 研究組大鼠腦梗死灶體積明顯小于對(duì)照組,且Garcia神經(jīng)功能評(píng)分更高,腦梗死部位出現(xiàn)CD34+細(xì)胞及nestin陽(yáng)性細(xì)胞浸潤(rùn)。結(jié)論 rhG-CSF可以減輕大鼠急性缺血性腦梗死程度,減小腦梗死體積,其機(jī)理可能是rhG-CSF對(duì)缺血神經(jīng)元具有保護(hù)作用,減少細(xì)胞凋亡,并動(dòng)員骨髓干細(xì)胞,促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞再生。

    急性缺血性腦梗死;重組人粒細(xì)胞集落刺激因子;CD34+細(xì)胞;nestin陽(yáng)性細(xì)胞

    在臨床上,急性缺血性腦梗死非常常見(jiàn),具有比較高的致殘率和致死率,嚴(yán)重影響著人們的身體健康和生活質(zhì)量,甚至生命安全[1]。隨著急性缺血性腦梗死發(fā)病率的逐年升高,如何提高腦卒中患者的療效、改善其預(yù)后成為臨床不斷研究的重要問(wèn)題之一。近年來(lái),不斷有研究認(rèn)為人重組粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF)有被應(yīng)用在急性缺血性腦梗死治療中的可能性,且對(duì)于縮小急性缺血性腦梗死患者的梗死面積、恢復(fù)急患者的神經(jīng)功能等具有一定的作用。本研究通過(guò)進(jìn)行分組研究,rhG-CSF對(duì)大鼠急性缺血性腦梗死的保護(hù)及治療作用機(jī)制進(jìn)行研究,以期能夠提供一定的參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 一般材料

    選取健康雌性SD大鼠13只,參照Koizumi等建立的方法建立MCAO模型。將其分別納入研究組和對(duì)照組,各6只。按Garcia等的方法對(duì)大鼠術(shù)后進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分,采用TTC染色、流式細(xì)胞儀及免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)梗死體積、凋亡細(xì)胞、CD34+細(xì)胞及nestin的表達(dá)。

    1.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計(jì)量資料以“±s”表示,采用t檢驗(yàn);以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 兩組Garcia神經(jīng)功能評(píng)分在不同時(shí)間點(diǎn)的對(duì)比(見(jiàn)表1)

    表1 兩組Garcia神經(jīng)功能評(píng)分在不同時(shí)間點(diǎn)的對(duì)比(±s)

    表1 兩組Garcia神經(jīng)功能評(píng)分在不同時(shí)間點(diǎn)的對(duì)比(±s)

    注:#與24 h、48 h的Garcia神經(jīng)功能評(píng)分相比,P<0.05;△與對(duì)照組Garcia神經(jīng)功能評(píng)分相比,P<0.05

    組別只數(shù)24 h48 h1 w研究組69.15±2.199.17±2.0212.66±0.85#△對(duì)照組69.10±2.219.20±2.1111.62±0.45#

    2.2 兩組在急性缺血性腦梗死后大鼠腦梗死體積上的對(duì)比(見(jiàn)表2)

    表2 兩組在急性缺血性腦梗死后大鼠腦梗死體積上的對(duì)比(±s)

    表2 兩組在急性缺血性腦梗死后大鼠腦梗死體積上的對(duì)比(±s)

    注:#與24 h、48 h的腦梗死體積相比,P<0.05;△與對(duì)照組腦梗死體積相比,P<0.05

    組別只數(shù)24 h48 h1 w研究組6270.48±27.44△270.65±36.87△98.45±22.45#△對(duì)照組6276.59±30.41274.14±41.25155.21±28.47#

    2.3 兩組在急性缺血性腦梗死后神經(jīng)細(xì)胞、新生血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖上的對(duì)比

    研究組大鼠的手術(shù)側(cè)腦組織在給藥后24 h有CD34+單個(gè)核細(xì)胞存在,且在給藥后48 h、1 w,所檢測(cè)到的CD34+單個(gè)核細(xì)胞出現(xiàn)浸潤(rùn)且數(shù)量增加趨勢(shì)明顯,而對(duì)照組大鼠未發(fā)生這種情況。

    對(duì)照組nestin只在個(gè)別區(qū)域(如室管膜區(qū)、室管膜下區(qū)等)有所表達(dá),且表達(dá)呈低水平狀態(tài),呈稀疏排列。表達(dá)nestin的細(xì)胞在腦梗死后24 h稍微有所增加,在腦梗死后48 h持續(xù)增加,在腦梗死后1 w時(shí)達(dá)到最大數(shù)量。研究組nestin陽(yáng)性細(xì)胞1 w時(shí),在梗死灶周?chē)–D34+細(xì)胞分布區(qū))檢測(cè)到有一定數(shù)量的存在。所具有的規(guī)律為:表達(dá)nestin的細(xì)胞如果距離梗死灶比較近,則數(shù)量會(huì)比較多,反之,數(shù)量會(huì)比較少。

    3 討 論

    急性缺血性腦梗死后,自身動(dòng)員和修復(fù)的效率很低,在局部無(wú)法產(chǎn)生顯著性的效果[2-3]。骨髓干細(xì)胞動(dòng)員可以使外周血干細(xì)胞的數(shù)量得以明顯的增加,繼而對(duì)腦組織的自然修復(fù)過(guò)程可以起到良好的促進(jìn)作用。通過(guò)進(jìn)行分組研究,筆者對(duì)rhG-CSF大鼠急性缺血性腦梗死的保護(hù)機(jī)制有一定的推測(cè),即:(1)當(dāng)局灶性腦梗死發(fā)生時(shí),人重組粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF)對(duì)受損細(xì)胞起到保護(hù)作用,使腦細(xì)胞壞死得以減少,對(duì)神經(jīng)修復(fù)速度起到良好的促進(jìn)作用。(2)作為骨髓干細(xì)胞的強(qiáng)有力動(dòng)員劑,人重組粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF)可以對(duì)骨髓干細(xì)胞起到調(diào)動(dòng)作用,經(jīng)破壞的血腦屏障,到達(dá)腦梗死及其周?chē)@樣可以往神經(jīng)細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞分化,對(duì)神經(jīng)細(xì)胞、血管的再生起到促進(jìn)作用,使腦梗死的體積得以縮小,對(duì)腦梗死后神經(jīng)功能的修復(fù)起到良好的促進(jìn)作用。

    此外,還有研究認(rèn)為,骨髓干細(xì)胞接受動(dòng)員后,能夠同腦組織彼此發(fā)揮作用,進(jìn)而增加自分泌和旁分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,可以對(duì)受到損傷的神經(jīng)元的再生起到良好的促進(jìn)作用,可以使神經(jīng)元的病理狀態(tài)得以有效的改善,有助于保護(hù)缺血后神經(jīng)損傷,并對(duì)此加以有效的修復(fù)[4-5]。

    本次研究中研究組大鼠腦梗死灶體積明顯小于對(duì)照組,且Garcia神經(jīng)功能評(píng)分更高,腦梗死部位出現(xiàn)CD34+細(xì)胞及nestin陽(yáng)性細(xì)胞浸潤(rùn)。

    綜上所述,rhG-CSF可以減輕大鼠急性缺血性腦梗死程度,減小腦梗死體積,其機(jī)理可能是rhG-CSF對(duì)缺血神經(jīng)元具有保護(hù)作用,減少細(xì)胞凋亡,并動(dòng)員骨髓干細(xì)胞,促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞再生。

    [1] 程元元,劉瑞珍,任建宏,等.rhG-CSF聯(lián)合胞磷膽堿處理對(duì)大鼠腦缺血再灌注后Bcl-2,Bax的影響[J].中國(guó)醫(yī)療前沿,2012,(02):16-17.

    [2] 方 立,王雪晶,荊 婧,等.rhG-CSF對(duì)大鼠缺血缺氧神經(jīng)元巨自噬水平的影響[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2013,(11):42-46.

    [3] 田 沈,林佳才,張朝東.RhG-CSF對(duì)糖尿病及非糖尿病大鼠缺血性腦卒中預(yù)后及神經(jīng)生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響[J].華西藥學(xué)雜志,2012,(08):61-63.

    [4] 鄧文靜,李東瑞,楚廣磊,滕軍放.重組人粒細(xì)胞集落刺激因子對(duì)腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)保護(hù)和血管再生作用[J].中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志,2015,(08):15-17.

    [5] 辛國(guó)棟,鮑月寧.重組人粒細(xì)胞集落刺激因子佐治急性腦梗死40例療效觀察[J].疑難病雜志,2011,(01):62-64.

    本文編輯:吳宏艷

    R743.3

    B

    ISSN.2095-6681.2016.16.121.02

    付宏亮(1980-),男,臨汾人,碩士研究生,主治醫(yī)師,研究方向:腦血管病

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