首發(fā)重度抑郁癥患者不同亞類T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生主要細(xì)胞因子水平的研究*

何軍，畢斌，羅潔，許琦，張姝，尹科，張捷，韓小娟

（貴州省第二人民醫(yī)院1.檢驗(yàn)科，2.心身科，貴州貴陽550004）

首發(fā)重度抑郁癥患者不同亞類T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生主要細(xì)胞因子水平的研究*

何軍1，畢斌2，羅潔1，許琦1，張姝1，尹科1，張捷1，韓小娟1

（貴州省第二人民醫(yī)院1.檢驗(yàn)科，2.心身科，貴州貴陽550004）

目的觀察首發(fā)重度抑郁癥患者不同亞類T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生主要細(xì)胞因子水平的變化。方法選取2014年3月-2014年11月該院首發(fā)重度抑郁癥患者30例為研究對象，按治療前和治療后留取血清樣本，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血清細(xì)胞因子水平，30例健康體檢者為對照組；用漢密爾頓抑郁量表（HAMD）評價(jià)患者抑郁程度，抑郁組治療前后血清細(xì)胞因子水平與HAMD各因子分進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析。結(jié)果抑郁組治療前血清中干擾素-γ（IFN-γ）、白介素-9（IL-9）水平高于對照組（P<0.05）；抑郁組治療前IFN-γ水平與胃腸道癥狀呈負(fù)相關(guān)，與疑病呈正相關(guān)（P<0.05）；IL-4水平與早醒呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）；IL-9水平與睡眠不深、疑病呈正相關(guān)（P<0.05），與自卑感呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）；IL-17水平與胃腸道癥狀呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）；抑郁組治療后IFN-γ水平與憂郁情緒、性行為呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）；IL-9水平與工作和興趣呈正相關(guān)（P<0.05），與全身癥狀、絕望感呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）；IL-17水平與疑病呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論首發(fā)重度抑郁癥患者存在免疫失衡，細(xì)胞因子可能參與重度抑郁癥的發(fā)生、發(fā)展。

首發(fā)重度抑郁癥；亞類T淋巴細(xì)胞；細(xì)胞因子；漢密爾頓抑郁量表

抑郁癥是一種常見的精神病理狀態(tài)或綜合征，以情感低落、思維遲緩，以及言語動(dòng)作減少、遲緩為典型癥狀。其發(fā)病原因和機(jī)制十分復(fù)雜，目前尚處于假說階段，免疫研究學(xué)說主要集中在免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子研究方面，特別是白細(xì)胞介素（Interleukin，IL）等細(xì)胞因子研究尤顯重要[1-2]。目前，對抑郁癥的研究主要是對比治療前后細(xì)胞因子水平，研究的方法和報(bào)道的結(jié)果存在差異。對首發(fā)重型抑郁患者的免疫功能進(jìn)行治療前、后分組，從不同亞類T淋巴細(xì)（Th1、Th2、Th3、Th9、Th17）產(chǎn)生主要細(xì)胞因子[干擾素-γ（Interferon-γ，IFN-γ）、IL-4、轉(zhuǎn)換生長因子-β1（tran-sforming growth factor-β1，TGF-β1）、IL-9、IL-17]水平進(jìn)行研究，探討上述細(xì)胞因子與漢密爾頓抑郁量表（hamilton depression rating scal，HAMD）各因子分的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2014年3月-2014年11月在貴州省第二人民醫(yī)院心身科住院的抑郁癥患者血清樣本，共30例。其中，男性15例，女性15例；平均年齡（41.33±14.00）歲，將其按治療前后進(jìn)行分組。患者納入標(biāo)準(zhǔn)：符合美國精神病學(xué)會《精神疾病診斷與統(tǒng)計(jì)手冊》第5版有關(guān)重度抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，抑郁癥狀為首次發(fā)作，24項(xiàng)HAMD抑郁量表評分≥35分，平均（45.6±4.72）分。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有酒精及藥物濫用者；②近半年內(nèi)過免疫調(diào)節(jié)劑、各種抗抑郁藥、鋰鹽等，過電抽搐治療；③較嚴(yán)重心、肝、腎疾病及其他嚴(yán)重軀體疾病病史，近兩周內(nèi)感冒、發(fā)熱等感染性疾病史。30例對照組為健康成年人，選擇同期在本院進(jìn)行健康體檢的人群，排除標(biāo)準(zhǔn)同上。其中，男性13例，女性17例；平均年齡（40.7±12.45）歲。患者組和對照組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2方法

1.2.1IFN-γ、IL-4、TGF-β1、IL-9、IL-17水平檢測所有研究對象在清晨空腹用普通生化管采集肘靜脈血3.5ml，自然狀態(tài)下放置30min，3000r/min離心10min，分離血清后用環(huán)氧樹脂管取1.5ml置于-70℃冰箱內(nèi)冷凍保存待測，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzymelinked immunosorbent assay，ELISA）測定，試劑盒由上海瓦蘭生物有限公司提供，測定時(shí)嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.2.2HAMD抑郁量表指標(biāo)評定應(yīng)用24項(xiàng)HAMD抑郁量表評定患者的抑郁嚴(yán)重程度。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，用t檢驗(yàn)，Spearman相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1抑郁組治療前后與對照組血清IFN-γ、IL-4、TGF-β1、IL-9、IL-17水平比較

抑郁組治療前血清IFN-γ、IL-9水平與對照組比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），治療前血清IFN-γ、IL-9水平高于對照組；抑郁組治療前血清IL-4、TGF-β1、IL-17水平與對照組比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。抑郁組治療后各細(xì)胞因子與治療前及對照組比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2抑郁組治療前各細(xì)胞因子與HAMD各因子分的相關(guān)性分析

通過對首發(fā)重度抑郁癥患者治療前各細(xì)胞因子與24項(xiàng)HAMD各因子分相關(guān)性檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)IFN-γ水平與胃腸道癥狀呈負(fù)相關(guān)，與疑病呈正相關(guān)（P< 0.05）；IL-4水平與早醒呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）；IL-9水平與睡眠不深、疑病呈正相關(guān)（P<0.05），與自卑感呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）；IL-17水平與胃腸道癥狀呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。見表2。

2.3抑郁組治療后各細(xì)胞因子與HAMD各因子分的相關(guān)性分析

IFN-γ水平與憂郁情緒、性行為呈負(fù)相關(guān)（P< 0.05）；IL-9水平與工作和興趣呈正相關(guān)（P<0.05），與全身癥狀、絕望感呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）；IL-17水平與疑病呈正相關(guān)（P<0.05）。見表3。

表1　抑郁組治療前后與對照組血清各細(xì)胞因子水平的比較（pg/ml±s）

表1　抑郁組治療前后與對照組血清各細(xì)胞因子水平的比較（pg/ml±s）

組別IFN-γIL-4TGF-β1IL-9IL-17治療前治療前治療前治療前治療前治療后抑郁組466.29±145.03 416.83±184.75 11.05±12.97 12.13±7.46 118.24±69.85 126.34±54.99 18.12±4.08 16.36±4.79 72.59±20.95 69.15±17.30對照組371.02±117.1514.27±10.30129.41±37.9013.49±3.0472.92±14.77 t值2.8781.1221.0801.0780.7260.2264.2681.2500.0690.873 P值0.0070.2710.2890.2900.4740.8230.0000.2210.9450.390治療后治療后治療后治療后

3 討論

細(xì)胞因子是一類由免疫細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分泌的生物活性蛋白，不僅是免疫系統(tǒng)中細(xì)胞間相互作用的調(diào)節(jié)者，也是免疫系統(tǒng)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)間相互作用的關(guān)鍵因子。抑郁情緒通過作用于神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，影響免疫功能，產(chǎn)生相應(yīng)免疫學(xué)改變[3]，研究抑郁癥患者血清中的細(xì)胞因子水平，進(jìn)一步認(rèn)識抑郁患者的免疫功能狀態(tài)及細(xì)胞因子與抑郁發(fā)病的相關(guān)性有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

CD4+T細(xì)胞根據(jù)產(chǎn)生細(xì)胞因子及生物學(xué)功能的不同，分為Th1、Th2、Th3、Th9、Thl7細(xì)胞等。Th1細(xì)胞主要產(chǎn)生IFN-γ，與Th2細(xì)胞主要產(chǎn)生的IL-4相互拮抗，調(diào)控Th1、Th2細(xì)胞的擴(kuò)增和功能。Th3細(xì)胞分泌的TGF-β1，作為廣譜的負(fù)調(diào)節(jié)因子，在免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮重要作用。Th9細(xì)胞產(chǎn)生的IL-9對炎性疾病有促進(jìn)作用。Th17細(xì)胞產(chǎn)生的IL-17在炎癥和自身免疫性疾病中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。

本研究顯示，抑郁組治療前IFN-γ、IL-9水平高于對照組，抑郁組治療后IFN-γ、IL-9水平與對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示首發(fā)重度抑郁癥患者可能存在免疫激活狀態(tài)，IFN-γ水平升高，與鄭蕾等[4]的研究一致，而與楊權(quán)[5]和PAVON等[6]的報(bào)道存在差異。IL-9水平在首發(fā)重度抑郁癥患者表現(xiàn)升高為本研究首次報(bào)道，其能否作為抑郁癥新的病理基礎(chǔ)，因研究的例數(shù)較少，排除因素尚欠完善，仍需進(jìn)一步研究；而抑郁組治療前后IFN-γ、IL-9水平改變不明顯，可能是因?yàn)檠芯咳后w存在其他未排除的因素，尚需進(jìn)一步研究。抑郁組治療前后IL-4、TGF-β1、IL-17水平與對照組相當(dāng)，IL-17作為促炎因子，可能在首發(fā)重度抑郁癥患者血清中表現(xiàn)為不升高，與KIM等[7]報(bào)道一致，與國內(nèi)毛麗娟等[8]報(bào)道的IL-17水平升高存在差異，其可能與研究的分組及排除標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)。Th1產(chǎn)生的IFN-γ升高，而Th2產(chǎn)生的IL-4水平不高，提示首發(fā)重度抑郁患者可能存在免疫失衡狀態(tài)，表現(xiàn)細(xì)胞免疫功能亢進(jìn)，體液免疫功能改變不明顯。

有學(xué)者研究認(rèn)為，IL-9是影響Thl7細(xì)胞分化的關(guān)鍵分子，IL-9可由Th17細(xì)胞產(chǎn)生，并與TGF-β1協(xié)同作用，分化天然CD4+T細(xì)胞為Thl7細(xì)胞[9]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，IL-9水平升高時(shí)，IL-17水平正常，可能是因?yàn)樵谑装l(fā)重度抑郁患者中IL-9無關(guān)Thl7細(xì)胞分化。Th9細(xì)胞可由TGF-β1作用于Th2細(xì)胞，由Th2細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來，也可由IL-4聯(lián)合TGF-β1刺激CD4+初始T細(xì)胞而產(chǎn)生[10]，本實(shí)驗(yàn)中首發(fā)重度抑郁患者血清IL-4和TGF-β1水平不高，而IL-9水平升高，其原因尚需進(jìn)一步探討。

本研究中，抑郁組治療前IFN-γ水平與胃腸道癥狀呈負(fù)相關(guān)，與疑病呈正相關(guān)；IL-4水平與早醒呈負(fù)相關(guān)；IL-9水平與睡眠不深、疑病呈正相關(guān)，與自卑感呈負(fù)相關(guān)；IL-17水平與胃腸道癥狀呈負(fù)相關(guān)。抑郁組治療后，IFN-γ水平與憂郁情緒、性行為呈負(fù)相關(guān)；IL-9水平與工作和興趣呈正相關(guān)，與全身癥狀、絕望感呈負(fù)相關(guān)；IL-17水平與疑病呈正相關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示首發(fā)重度抑郁癥患者癥狀程度與細(xì)胞因子變化有關(guān)。可能的機(jī)制為促炎細(xì)胞因子可強(qiáng)效地激活丘腦-垂體-腎上腺，誘導(dǎo)下丘腦、垂體等腦區(qū)的皮質(zhì)醇受體功能改變。促炎細(xì)胞因子能損傷糖皮質(zhì)激素受體（glucocorticoid reccptor，GR）功能，GR功能受損后對皮質(zhì)激素的反應(yīng)下降，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)得不到抑制，促皮質(zhì)激素釋放激素和交感神經(jīng)系統(tǒng)活動(dòng)過度，引起相應(yīng)疾病和行為改變。本課題研究報(bào)道促炎細(xì)胞因子IL-6、IL-18、TNF-a水平在首發(fā)重度抑郁癥患者血清中升高，可能參與首發(fā)重度抑郁的發(fā)生、發(fā)展[11]。

總之，本研究采用特異性和敏感性相對較局限的ELISA法，結(jié)果影響因素相對流式細(xì)胞術(shù)和化學(xué)發(fā)光法等較多，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果尚需進(jìn)一步研究證實(shí)。免疫功能激活可能是抑郁癥發(fā)生的病理生理機(jī)制。細(xì)胞因子在抑郁癥發(fā)病機(jī)制中的地位仍存在爭議，抑郁癥的病因復(fù)雜，其生物學(xué)異常涉及體內(nèi)多個(gè)系統(tǒng)，各細(xì)胞因子間相互關(guān)系如何，細(xì)胞因子是否對抑郁癥的發(fā)病起主要作用，還有待進(jìn)一步研究。

[1]MARIANA P,SIMONE A.The importance of cytokines and autoantibodies in depression[J].Autoimmunity Reviews,2015,14(1): 30-35.

[2]CHARLOTTE M,KATHERINE E T,LEONARD C S,et al.The inflammatory cytokines:molecular biomarkers for major depressive disorder[J].Biomarkersin Medicine,2015,9(2):169-180.

[3]KIM Y K,NA K S,SHIN K H,et al.Cytokine imbalance in the pathophysiology of major depressive disorder[J].Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry,2012,31(5):1044-1053.

[4]鄭蕾,王藝明.抑郁癥患者血清IFN-γ、IL-10的變化及與生活事件、防御方式的相關(guān)研究[J].免疫學(xué)雜志,2012,28(7):607-609.

[5]楊權(quán),林凌云,李景吾,等.抑郁癥患者血清細(xì)胞因子水平的研究[J].中華精神科雜志,2001,34(1):13-14.

[6]PAVON L,SANDOVAL LOPEZ G,HERN?NDEZ M E,et al. Th2 cytokine response in major depressive disorder patients beforetreatment[J].Neuroimnunol,2014,172(1/2):156-165.

[7]KIM J W,KIM Y K,HWANG J A,et al.Plasma levels of IL-23 and IL-17 before and after antidepressant treatment in patients with major depressive disorder[J].Psychiatry Investigation,2013, 10(3):294-299.

[8]毛麗娟,田峰,崔曉紅,等.首發(fā)抑郁障礙患者血清IL-17水平測定及相關(guān)研究[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2012,18(11):10-12.

[9]ELYAMAN W,BRADSHAW E M,UYTTENHOVEC,et al. IL-9 induces differentiation of Th17 cells and enhances function of FoxP3+natural regμlatory T cells[J].PNAS,2013,106:12885-12890.

[10]VELDHOEN M,UYTTENHOVE C,SNICK V J,et al.Transforming growth factor-beta reprograms the differentiation of T helper 2 cells and promotes an interleukin 9 producing subset[J]. Nat immunol,2012,9(12):1341-1346.

[11]張麗,何軍,畢斌,等.首發(fā)重度抑郁癥患者血清中促炎物質(zhì)水平的檢測[J].中華微生物和免疫學(xué)雜志,2015,35(1):33-36.

（童穎丹編輯）

Serum levels of main cytokines produced by T lymphocyte subsets in patients in first episode of major depressive disorders*

Jun He1，Bin Bi2，Jie Luo1，Qi Xu1，Shu Zhang1，Ke Yin1，Jie Zhang1，Xiao-juan Han1
（1.Clinical Laboratory；2.Department of Clinical Psychology，the Second People`s Hospital of Guizhou Province，Guiyang，Guizhou 550004，China）

Objective To explore the changes of the serum levels of the main cytokines produced by T lymphocyte subsets in patients of the first episode of major depressive disorders.Methods Totally 30 cases of patients with the first episode of major depression in our hospital from Mar.2014 to Nov.2014 were selected as study subjects（depressive group）.The control group included 30 normal people.Their serum samples were collected before and after treatment.The levels of cytokines in sera were detected by ELISA.Hamilton Depression Rating Scale（HAMD）was used to assess the degree of depression.The relationships between HAMD scores and cytokine levels before and after treatment were analyzed by Spearman correlation in the depressive group.Results Serum IFN-γ and IL-9 levels before treatment in the depressive group were higher than those in the control group（P＜0.05）.Before treatment，IFN-γ level had a negative correlation with gastrointestinal symptoms，and a positive correlation with hypochondriasis（P＜0.05）；IL-4 level was negatively correlated with early awakening（P＜0.05）；IL-9 level was positively correlated with shallow sleep and hypochondriasis（P＜0.05），but negatively correlated with the sense of inferiority（P＜0.05）；IL-17 level was negatively correlated with gastrointestinal symptoms（P＜0.05）in the depressive group.After treatment，IFN-γ level was negatively correlated to depression and sexual behavior（P＜0.05）；IL-9 level was positivelycorrelated to work and interest（P＜0.05），while negatively correlated with systemic symptoms and hopelessness（P＜0.05）；IL-17 level was positively correlated with hypochondriasis（P＜0.05）in the depressive group. Conclusions The immune imbalance exists in the patients with the first episode of severe depression，and cytokines could be involved in the occurrence and development of severe depression.

firstepisodeofmajordepressivedisorder；cytokine；Tlymphocytesubset；Hamilton Depression Rating Scale

R 749.4

B

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.17.024

1005-8982（2016）17-0112-04

2015-12-23

貴州省科教青年英才培養(yǎng)工程[No：黔省專合字（2012）194號]