浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中八種免疫因子的影響

鄭　堯，邴旭文，裘麗萍，范立民，宋　超，孟順龍，李丹丹，張　聰，胡庚東，吳　偉，徐　跑*，陳家長*

（1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，江蘇 無錫 214081；2.農(nóng)業(yè)部淡水魚類遺傳育種與養(yǎng)殖生物學(xué)重點開放實驗室，江蘇 無錫 214081；3.農(nóng)業(yè)部長江下游漁業(yè)資源環(huán)境科學(xué)觀測實驗站，江蘇 無錫 214081；4.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院內(nèi)陸漁業(yè)生態(tài)環(huán)境和資源重點開放實驗室，江蘇 無錫 214081；5.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)無錫漁業(yè)學(xué)院，江蘇 無錫 214081）

浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中八種免疫因子的影響

鄭堯1，2，3，4，5，邴旭文1，2，3，4，5，裘麗萍1，2，3，4，范立民1，2，3，4，宋超1，2，3，4，孟順龍1，2，3，4，李丹丹1，2，3，4，張聰1，2，3，4，胡庚東1，2，3，4，吳偉1，2，3，4，5，徐跑1，2，3，4，5*，陳家長1，2，3，4，5*

（1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，江蘇 無錫 214081；2.農(nóng)業(yè)部淡水魚類遺傳育種與養(yǎng)殖生物學(xué)重點開放實驗室，江蘇 無錫 214081；3.農(nóng)業(yè)部長江下游漁業(yè)資源環(huán)境科學(xué)觀測實驗站，江蘇 無錫 214081；4.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院內(nèi)陸漁業(yè)生態(tài)環(huán)境和資源重點開放實驗室，江蘇 無錫 214081；5.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)無錫漁業(yè)學(xué)院，江蘇 無錫 214081）

為研究浮床栽培魚腥草（0、5%、10%和15%種植面積）對吉富羅非魚膽汁液中免疫因子的影響，測定了金屬硫蛋白（Metallothionein，MT）、免疫球蛋白（Immunoglobulin M，IgM）、轉(zhuǎn)鐵蛋白（Transferrin，TRF）、干擾素-γ（Interferon-γ，IFN-γ）、白細胞介素-8（Interleukin-8，IL-8）、白細胞介素-10（IL-10）、腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）和表皮生長因子（Epidermal growth factor，EGF）等指標。結(jié)果表明，不同魚腥草種植面積能造成吉富羅非魚膽汁液中IgM、TRF、TNF-α、EGF含量的升高，且5%魚腥草處理組還能造成吉富羅非魚膽汁液中MT、IFN-γ、IL-8和IL-10含量的升高。5%魚腥草處理組能顯著增強吉富羅非魚膽汁液中所測八種免疫因子的活性。

生物浮床；魚腥草；免疫因子；吉富羅非魚

鄭堯，邴旭文，裘麗萍，等.浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中八種免疫因子的影響［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報，2016，35（9）：1680-1685.

ZHENG Yao，BING Xu-wen，QIU Li-ping，et al.Changes of eight biliary immune factors of GIFT tilapia after floating-bed cultivation of Houttuynia Cordata Thunb［J］.Journal of Agro-Environment Science，2016，35（9）：1680-1685.

集約化養(yǎng)殖在帶來產(chǎn)量的同時，也使水質(zhì)惡化和水產(chǎn)品質(zhì)量安全問題加劇。就水質(zhì)凈化而言，池塘原位修復(fù)技術(shù)主要以“魚-菜共生”養(yǎng)殖模式為代表，該模式利用人工構(gòu)建的生態(tài)浮床在養(yǎng)殖水體上層栽培蔬菜，達到水體凈化目的的同時，也額外增加經(jīng)濟效益［1］。作者所在課題組前期采用循環(huán)水養(yǎng)殖［2］和“魚菜共生”體系構(gòu)建［3］在池塘原位修復(fù)上做了諸多工作，研究結(jié)果均表明魚菜共生體系不僅能提高農(nóng)戶單位面積的產(chǎn)值，還能對池塘水體氮、磷有很好的去除效果。近幾年來，中草藥已經(jīng)被廣泛用于調(diào)控池塘水質(zhì)，國內(nèi)也早已開始將中草藥用于治療（或預(yù)防）魚類的單殖吸蟲等疾病［4］，增強魚類免疫能力［5］。

魚類主要免疫因子包括金屬硫蛋白（MT）、免疫球蛋白（IgM）、轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF）、干擾素-γ（IFN-γ）、白細胞介素-8（IL-8）、白細胞介素-10（IL-10）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和表皮生長因子（EGF）等。MT能夠調(diào)節(jié)機體必需重金屬的穩(wěn)態(tài)及對有害重金屬進行解毒，并起氧化應(yīng)激防護作用；IgM是魚類適應(yīng)性體液免疫應(yīng)答中最主要的介質(zhì)［6］；TRF主要功能是負責(zé)機體中的Fe3+在吸收、儲存和利用部位間的傳遞，是呼吸鏈中的重要因子［7］；IFN-γ在天然免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答（如抗病毒感染和皮膚免疫）中均發(fā)揮著重要的作用［6］；白細胞介素是一類促炎反應(yīng)的前期細胞因子［6］，IL-8/IL-10是一種中性粒細胞、T細胞及嗜堿性粒細胞的趨化因子，因此在免疫和炎癥過程中具有重要調(diào)節(jié)意義；TNF-α是一種能殺傷某些腫瘤細胞并使體內(nèi)腫瘤組織發(fā)生壞死的因子［6］；EGF是促進細胞內(nèi)DNA、RNA以及蛋白質(zhì)的合成，從而誘導(dǎo)細胞的有絲分裂、遷移和分化等過程［8］。

吉富羅非魚（GIFT tilapia，Oreochromis niloticus）是1993年以來在菲律賓利用尼羅羅非魚的四個非洲品系和四個亞洲品系等廣泛的優(yōu)良種質(zhì)資源選育而成的新品種，目前該品種已在蘇北地區(qū)大量養(yǎng)殖。魚腥草（Houttuynia cordata Thunb）在四川、重慶、湖南、貴州、安徽以及廣東地區(qū)有大量種植，研究表明浮床栽培魚腥草不僅可以改善羅非魚池塘水質(zhì)指標［9］，還可明顯提高吉富羅非魚非特異免疫能力［10］。膽汁作為肝臟的分泌產(chǎn)物，對污染物的蓄積能力很強［11］。前期觀察發(fā)現(xiàn)不同養(yǎng)殖狀態(tài)下吉富羅非魚膽汁液顏色出現(xiàn)差異，其主要原因在于膽汁液中的膽紅素（黃色）和膽綠素（膽紅素氧化而來）之間可以互相轉(zhuǎn)化。本試驗選擇膽汁作為研究對象的原因：通過對膽汁液的分析不僅可以反映環(huán)境水體的污染狀況［12］，還能在一定程度上反映魚體自身的免疫能力；吉富羅非魚膽較大易于取樣。本研究針對魚腥草-羅非魚共生這一實例，旨在從魚類免疫增強角度，探究魚腥草種植后對吉富羅非魚膽汁液中免疫因子的影響，為魚腥草-羅非魚共生體系構(gòu)建的應(yīng)用前景及其推廣提供數(shù)據(jù)支撐。

1　材料與方法

1.1試驗材料與設(shè)計

試驗基地為中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心宜興屺亭養(yǎng)殖基地。試驗用池塘每口面積為1333 m2，水深1.5 m，并配備微孔增氧系統(tǒng)。養(yǎng)殖品種為大規(guī)格“新吉富”羅非魚（Oreochromis niloticus）越冬種，平均投放規(guī)格為（42±2.1）g·尾-1，養(yǎng)殖密度為1750尾·667m-2，同時搭配少量濾食性鰱魚（20尾·塘-1）和鳙魚（30尾·塘-1）。浮床植物選用魚腥草，試驗分4口塘進行種植（浮床面積占池塘面積比例分別為0、5%、10%和15%），試驗于2015年5月開始，至10月結(jié)束。每日上午8：00進行定量投喂1次，飼料為天邦羅非魚膨化料（編號5532、5533、5534、5536），飼料飼喂量占魚體重比例為3%。養(yǎng)殖期間的病害防控及日常管理基本一致，除池塘水分滲漏、蒸發(fā)補水外，養(yǎng)殖過程池塘不換水，且用水符合漁業(yè)水質(zhì)標準（GB 11607—1989）。

試驗選用PVC管材料（φ50 mm）制作的浮床，規(guī)格為2 m×2 m。浮床兩面分別用網(wǎng)孔為30 mm（便于魚腥草扦插）的網(wǎng)片包裹。試驗開始前，將預(yù)先培育好的魚腥草苗（株高20 cm），按株距30 cm×行距20 cm進行扦插，種植前根莖和葉總重在43～129 g·m-2之間，收割后根莖和葉總重在173～519 g·m-2之間［9］，浮床集中固定在池塘中排列整齊，每3個浮床用尼龍繩連接成組。

1.2八種免疫因子測定

試驗結(jié)束后，從每個處理組中隨機挑選30尾魚，采集吉富羅非魚膽汁液。八種免疫指標包括：金屬硫蛋白（MT，檢測范圍0.05～20 ng·mL-1）、免疫球蛋白（IgM，檢測范圍0.05～10 mg·mL-1）、轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF，檢測范圍5～2000 mg·L-1）、干擾素-γ（IFN-γ，檢測范圍5～1000 ng·L-1）、白細胞介素-8（IL-8，檢測范圍0.5～200 ng·L-1）、白細胞介素-10（IL-10，檢測范圍2～600 ng·L-1）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α，檢測范圍3～900 ng·L-1）和表皮生長因子（EGF，檢測范圍5～2000 ng· L-1），其測定方法均按南京酶聯(lián)免疫試劑盒說明書進行，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析

2　結(jié)果

5%和10%處理組顯著提高吉富羅非魚膽汁液中MT的含量（圖1），15%處理組與對照組沒有顯著性差異。

5%、10%和15%處理組均顯著提高吉富羅非魚膽汁液中IgM的含量（圖2），且濃度依賴性下降（P＜0.05）。

5%、10%和15%處理組均顯著提高吉富羅非魚膽汁液中TRF的含量（圖3），隨處理面積增加雖呈依賴性下降趨勢，但5%和10%處理組并未達到顯著水平（P＞0.05）。

圖1　浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中MT的影響Figure 1 Biliary MT of GIFT tilapia after floating-bed cultivation of H.cordata Thunb

圖2　浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中IgM的影響Figure 2 Biliary IgM of GIFT tilapia after floating-bed cultivation of H.cordata Thunb

5%處理組顯著提高吉富羅非魚膽汁液中IFN-γ的含量（圖4），10%和15%處理組顯著降低吉富羅非魚膽汁液中IFN-γ的含量，且10%處理組顯著高于15%處理組。

5%處理組顯著提高吉富羅非魚膽汁液中IL-8 和IL-10的含量（圖5、圖6），10%和15%處理組顯著降低吉富羅非魚膽汁液中IL-8和IL-10的含量。10%處理組IL-8顯著低于15%處理組，但10%處理組IL-10與15%處理組無顯著性差異（P＞0.05）。

5%、10%和15%處理組均顯著提高吉富羅非魚膽汁液中TNF-α的含量（圖7），且10%處理組和15%處理組無顯著性差異（P＞0.05）。

5%、10%和15%處理組均顯著提高吉富羅非魚膽汁液中EGF的含量（圖8），且10%處理組和15%處理組無顯著性差異（P＞0.05）。

圖3　浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中TRF的影響Figure 3 Biliary TRF of GIFT tilapia after floating-bed cultivation of H.cordata Thunb

圖4　浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中IFN-γ的影響Figure 4 Biliary IFN-γ of GIFT tilapia after floating-bed cultivation of H.cordata Thunb

圖5　浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中IL-8的影響Figure 5 Biliary IL-8 of GIFT tilapia after floating-bed cultivation of H.cordata Thunb

圖6　浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中IL-10的影響Figure 6 Biliary IL-10 of GIFT tilapia after floating-bed cultivation of H.cordata Thunb

3　討論

免疫毒理學(xué)（Immunotoxicology）是毒理學(xué)的一個新分支，主要研究藥物和物理因素對人和動物免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的不良影響和機理。魚類參加免疫應(yīng)答的細胞主要有巨噬細胞和淋巴細胞，這些免疫細胞產(chǎn)生的細胞因子包括白細胞介素（參與免疫和炎癥過程）、IFN-γ（參與免疫調(diào)節(jié)）、EGF（促免疫細胞分化）和TNF-α（參與機體免疫調(diào)節(jié)、巨噬細胞活化）等。史麗娜等［10］對魚腥草-羅非魚共生體系的研究表明，吉富羅非魚血清溶菌酶（LSZ）、一氧化氮（NO）、堿性磷酸酶（AKP）以及超氧化物歧化酶（SOD）酶活力均高于對照塘，從而提高其成活率及產(chǎn)量。感染黃桿菌（Flavobacterium psychrophilum）的虹鱒魚鰓、肝臟、脾臟和腎臟等器官中MT、IL1β和TNF-β基因表達量顯著降低［13］。本研究中不同魚腥草種植面積能提高吉富羅非魚膽汁液中IgM、TRF、TNF-α、EGF的含量，這與魚腥草在施氏鱘上表現(xiàn)出的抗氧化能力結(jié)果相一致［14］，表明魚腥草浮床可明顯提高吉富羅非魚非特異免疫能力。

圖7　浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中TNF-α的影響Figure 7 Biliary TNF-α of GIFT tilapia after floating-bed cultivation of H.cordata Thunb

圖8　浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚膽汁液中EGF的影響Figure 8 Biliary EGF of GIFT tilapia after floating-bed cultivation of H.cordata Thunb

本研究結(jié)果表明浮床栽培魚腥草顯著提高羅非魚免疫力，主要原因在于中草藥根系化感作用分泌的黃酮類等物質(zhì)增加了魚類的免疫能力［10］，中草藥的根系對水體氨氮、硝態(tài)氮、總磷、總氮等主要富營養(yǎng)化因子具有很好的吸收轉(zhuǎn)化作用，進而可以通過改善水質(zhì)指標達到預(yù)防魚病發(fā)生的目的［10］。作者前期工作表明浮床栽培魚腥草能降低水體中的污染物含量，并帶走一定的氮、磷，5%魚腥草種植面積（相比10%和15%）適合進行中試，魚腥草處理組-N下降［9］，且其收獲魚總重和所測生物學(xué)指標（除體重）顯著高于對照和其他處理組，并對成活率和餌料系數(shù)無大的影響［9］。本研究中5%魚腥草處理組能顯著提高吉富羅非魚膽汁液中MT、IFN-γ、IL-8和IL-10的含量，表明吉富羅非魚養(yǎng)殖池塘種植5%的魚腥草不僅可以起到免疫增強作用，還能獲得良好養(yǎng)殖效益，具有較好的推廣應(yīng)用價值。研究表明農(nóng)藥草甘膦的使用能通過改變草魚IFN-γ，IL-1β（IL-1亞型）和TNF-α的含量破壞魚類非特異性免疫能力［15］，且魚體內(nèi)IFN-γ、IL-10（與IL-1同屬白細胞介素家族）、TNF-α等細胞因子之間能相互作用（如彼此間提供胞內(nèi)信號）［16］，如TNF-α和白細胞介素共同參與促或抗炎癥反應(yīng)；IFN-γ參與抗病毒和殺死胞內(nèi)病原體等。池塘集約化養(yǎng)殖會帶來大量的污染物，魚腥草根系若能帶走養(yǎng)殖過程所帶來的污染物，將有益于羅非魚的健康養(yǎng)殖。精養(yǎng)團頭魴池塘的整個停餌期間表層沉積物微生物群落的豐富度和多樣性指數(shù)較高［17］，史麗娜等［5］的研究表明魚腥草浮床具有增加羅非魚池塘沉積物菌群功能多樣性和優(yōu)化菌群結(jié)構(gòu)的作用。因此，魚腥草根系分泌物對水體不同分層微生物的群落結(jié)構(gòu)以及對羅非魚免疫增強的效應(yīng)值得進一步研究。

作者所在課題組前期研究結(jié)果表明，吉富羅非魚在低濃度氨氮和亞硝酸鹽氮脅迫下，自身機體采取一種主動調(diào)節(jié)措施，但隨著氨氮和亞硝酸鹽氮濃度的升高，一些免疫相關(guān)酶活性則呈下降的趨勢［18］，MT、TNF-α、IL-1β基因表達量顯著上升，但IgM和IGF-1基因表達量顯著下降［19］。本試驗中10%和15%魚腥草處理造成IFN-γ、IL-8和IL-10含量顯著下降（圖4～圖6），可能與不同表達水平有關(guān)（文獻［19］從基因表達方面入手，本研究在蛋白水平）。

4　結(jié)論

試驗表明5%魚腥草處理能顯著增強吉富羅非魚膽汁液中所測八種免疫因子的活性。

［1］陳家長，孟順龍，胡庚東，等.空心菜浮床栽培對集約化養(yǎng)殖魚塘水質(zhì)的影響［J］.生態(tài)與農(nóng)村環(huán)境學(xué)報，2010，26（2）：155-159.

CHEN Jia-zhang，MENG Shun-long，HU Geng-dong，et al.Effect of ipomoea aquatica cultivation on artificial floating rafts on water quality of intensive aquaculture ponds［J］.Journal of Ecology and Rural Environment，2010，26（2）：155-159.

［2］胡庚東，宋超，陳家長，等.池塘循環(huán)水養(yǎng)殖模式的構(gòu)建及其對氮磷的去除效果［J］.生態(tài)與農(nóng)村環(huán)境學(xué)報，2011，27（3）：82-86.

HU Geng-dong，SONG Chao，CHEN Jia-zhang，et al.Modeling of water circulating pond aquaculture system and its N＆P removal effect［J］.Journal of Ecology and Rural Environment，2011，27（3）：82-86.

［3］Fan L M，Barry K，HU G D，et al.Bacterioplankton community analysis in tilapia ponds by Illumina high-throughput sequencing［J］.World Journal of Microbiology&Biotechnology，2016，32（1）：10.

［4］王高學(xué)，徐鈺，王建華，等.29種天然植物提取物對指環(huán)蟲殺滅作用的研究［J］.淡水漁業(yè)，2006，36（3）：3-8.

WANG Gao-xue，XU Yu，WANG Jian-hua，et al.Study on the killing of the29speciesofplantsextractiontothedactylogyrus［J］.FreshwaterFisherie，2006，36（3）：3-8.

［5］史麗娜，可小麗，劉志剛，等.羅非魚-魚腥草共生養(yǎng)殖池塘沉積物菌群結(jié)構(gòu)與功能特征［J］.中國農(nóng)學(xué)通報，2015，31（14）：64-73.

SHI Li-na，KE Xiao-li，LIU Zhi-gang，et al.Effect of Houttuynia cordata floating-bed on the structure and function of bacterial community in thesedimentsoftilapia aquacultural system［J］.Chinese Agricultural Science Bulletin，2015，31（14）：64-73.

［6］杜金梁，曹麗萍，劉英娟，等.甘草提取物對2，3，7，8-四氯二苯并-p-二噁惡英致建鯉精密肝切片組織損傷中生化指標及免疫功能的影響［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報，2015，34（5）：837-843.

DU Jin-liang，CAO Li-ping，LIU Ying-juan，et al.Effects of Glycyrrhiza glabra extract on biochemical indices and immune function of jian carp（Cyprinus carpio var.Jian）precision cut liver slices injured by 2，3，7，8 tetrachlorodibenzo-p-dioxin［J］.Journal of Agro-Environment Science，2015，34（5）：837-843.

［7］冉春麗，龍華，楊健.瓶鼻海豚和糙齒海豚血清轉(zhuǎn)鐵蛋白的初步研究［J］.水產(chǎn)學(xué)報，2007，31（4）：551-555.

RAN Chun-li，LONG Hua，YANG Jian.A preliminary study of serum transferrins in Tursiops truncatus and Steno bredanensis［J］.Journal of Fisheries of China，2007，31（4）：551-555.

［8］朱文杰，黃桂菊，張東玲，等.合浦珠母貝表皮生長因子樣（EGF-like）基因的克隆與表達分析［J］.水產(chǎn)學(xué)報，2015，39（5）：648-657.

ZHU Wen-jie，HUANG Gui-ju，ZHANG Dong-ling，et al.Cloning and expression of an novel EGF-like gene from Pinctada martensii［J］.Journal of Fisheries of China，2015，39（5）：648-657.

［9］鄭堯，邴旭文，范立民，等.浮床栽培魚腥草對吉富羅非魚養(yǎng)殖池塘水質(zhì)的影響［J］.中國農(nóng)學(xué)通報，2016，32（9）：11-16.

ZHENG Yao，BING Xu-wen，F(xiàn)AN Li-min，et al.Houttuynia cordata thunb cultivation on floating bed affecting water quality of GIFT tilapia aquaculturepond［J］.ChineseAgriculturalScienceBulletin，2016，32（9）：11-16.

［10］史麗娜，可小麗，劉志剛，等.魚腥草浮床對養(yǎng)殖水質(zhì)及羅非魚非特異免疫力的影響［J］.生態(tài)科學(xué)，2015，34（4）：105-113.

SHI Li-na，KE Xiao-li，LIU Zhi-gang，et al.Effect of Houttuynia cordata floating-bed on water quality and non-specific immunity of GIFT Tilapia，Oreochromis niloticus［J］.Ecological Science，2015，34（4）：105-113.

［11］潘辰苑.環(huán)境內(nèi)分泌干擾物在魚膽汁中的檢測及其誘導(dǎo)斑馬魚胚胎細胞凋亡的研究［D］.上海：上海大學(xué)，2014.

PANChen-yuan.Thedetectionofenvironmentaldisruptingchemicalsin fishbileandtheirinductiveeffectson apoptosis in zebrafish embryos［D］. Shanghai：Shanghai University，2014.

［12］宋超，裘麗萍，范立民，等.利用固定波長熒光分光光度法研究苯并（a）芘暴露下羅非魚膽汁代謝物的動態(tài)變化［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報，2014，33（4）：783-787.

SONG Chao，QIU Li-ping，F(xiàn)AN Li-min，et al.Dynamics of benzo（a）pyrene metabolites in tilapia bile by fixed wavelength fluorescence to：A lab experiment［J］.Journal of Agro-Environment Science，2014，33 （4）：783-787.

［13］Orieux N，Douet D G，Le Hénaff M，et al.Prevalence of Flavobacterium psychrophilum bacterial cells in farmed rainbow trout：Characterization of metallothionein A and interleukin1-β genes as markers overexpressed in spleen and kidney of diseased fish［J］.Veterinary Microbiology，2013，162（1）：127-135.

［14］黃江，魏巍，王荻，等.中草藥方劑對施氏鱘血漿和肝臟中一氧化氮、丙二醛含量及一氧化氮合酶活性的影響［J］.水產(chǎn)學(xué)雜志，2009，22（3）：28-31.

HUANG Jiang，WEI Wei，WANG Di，et al.Efects of the Chinese medicinal herb complex additives on NO and NOS and MDA contents in serum and liver of Amur sturgeon（Acipenser schrencki Brandt）［J］. Chinese Journal Fisheries，2009，22（3）：28-31.

［15］MA J，LI X.Alteration in the cytokine levels and histopathological damage in common carp induced by glyphosate［J］.Chemosphere，2015，128：293-298.

［16］Biswas G，Korenaga H，Nagamine R，et al.Cytokine mediated immune responses in the Japanese pufferfish（Takifugu rubripes）administered with heat-killed Lactobacillus paracasei spp.paracasei（06TCa22）isolated from the Mongolian dairy product［J］.International Immunopharmacology，2013，17（2）：358-365.

［17］李曉，李冰，董玉峰，等.精養(yǎng)團頭魴池塘沉積物微生物群落的結(jié)構(gòu)特征及組成多樣性分析［J］.水產(chǎn)學(xué)報，2014，38（2）：218-227.

LI Xiao，LI Bing，DONG Yu-feng，et al.Analysis of sediment microbial communities in Megalobrama amblycephala intensive rearing pond［J］. Journal of Fisheries of China，2014，38（2）：218-227.

［18］臧學(xué)磊.三種環(huán)境因子脅迫下羅非魚（GIFT Oreochromis niloticus）機體免疫力的變化及其對海豚鏈球菌易感性的影響［D］.南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010：43-44.

ZANG Xue-lei.The immune response of GIFT Oreochromis niloticus and its susceptibility to streptococcus iniae under stress in three environmental factors［D］.Nanjing：Nanjing Agricultural University，2010：43-44.

［19］Jia R，Liu B L，Han C，et al.The physiological performance and immune response of juvenile turbot（Scophthalmus maximus）to nitrite exposure［J］.Comparative Biochemistry and Physiology C，2016，181/182：40-46.

Changes of eight biliary immune factors of GIFT tilapia after floating-bed cultivation of Houttuynia Cordata Thunb

ZHENG Yao1，2，3，4，5，BING Xu-wen1，2，3，4，5，QIU Li-ping1，2，3，4，F(xiàn)AN Li-min1，2，3，4，SONG Chao1，2，3，4，MENG Shun-long1，2，3，4，LI Dan-dan1，2，3，4，ZHANG Cong1，2，3，4，HU Geng-dong1，2，3，4，WU Wei1，2，3，4，5，XU Pao1，2，3，4，5*，CHEN Jia-zhang1，2，3，4，5*
（1.Freshwater Fisheries Research Center，Chinese Academy of Fishery Sciences，Wuxi 214081，China；2.Key Laboratory of Genetic Breeding and Aquaculture Biology of Freshwater Fishes，Ministry of Agriculture，Wuxi 214081，China；3.Scientific Observing and Experimental Station of Fishery Resources and Environment in the Lower Reaches of the Changjiang River，Ministry of Agriculture，Wuxi 214081，China；4.Key Open Laboratory of Ecological Environment and Resources of Inland Fisheries，Chinese Academy of Fishery Sciences，Wuxi 214081，China；5.Wuxi Fishery College of Nanjing Agricultural University，Wuxi 214081，China）

Changes of biliary immune factors of GIFT Tilapia were examined after floating-bed cultivation of Houttuynia cordata Thunb.Different vegetation areas（0，5%，10%and 15%）were used.Metallothionein（MT），immunoglobulin M（IgM），transferrin（TRF），iterferon-γ （IFN-γ），interleukin-8（IL-8），interleukin-10（IL-10），tumor necrosis factor-α（TNF-α）and epidermal growth factor（EGF）of tilapia were measured.Results showed that biliary IgM，TRF，TNF-α，and EGF significantly increased as the plant area increased（5%，10%，and 15%）.However，the content of MT，IFN-γ，IL-8，and IL-10 was found to be the highest in the treatment with 5%H.cordata Thunb.In conclusion，5%H.cordata Thunb significantly enhanced actvities of eight biliary immune factors.

ecological floating-bed cultivation；Houttuynia cordata Thunb；immune factors；GIFT tilapia

S959

A

1672-2043（2016）09-1680-06doi：10.11654/jaes.2016-0238

2016－02－29

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項（CARS-49）；國家科技支撐計劃（2015BAD13B03）；中央級科研院所基本科研業(yè)務(wù)費（2015JBFR03）

鄭堯（1986—），男，安徽太湖人，助理研究員，主要從事水產(chǎn)品質(zhì)量安全與分子毒理學(xué)研究。E-mail：zhengy@ffrc.cn

陳家長E-mail：chenjz@ffrc.cn；徐跑E-mail：xup@ffrc.cn