氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定馬甲子果脂溶性成分

馬怡 趙玉丹 江滔 楊孝容

摘要：用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)鑒定馬甲子果脂溶性成分，馬甲子果用95%乙醇提取，濃縮液分別用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，將石油醚層減壓濃縮近干后用正己烷溶解，用氣相色譜——質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)其分析鑒定，以峰面積歸一化法計(jì)算各組分的相對(duì)含量。結(jié)果檢出51種化學(xué)組分，鑒定出其中28種，含量占總量的84.71%，其中甾類物質(zhì)和酯類物質(zhì)分別為65.13% 和11.38%。甾體是馬甲子果的主要成分。

關(guān)鍵詞：氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用；馬甲子[Paliurus ramosissimus （Lour.） Poir.]果；脂溶性成分，測(cè)定

中圖分類號(hào)：R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）05-1281-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.05.049

Determination for Liposoluble Compounds from the Fruit of

Paliurus Ramosissimus by GC-MS

MA Yia，ZHAO Yu-dana，JIANG Taob，YANG Xiao-rongb

（Leshan Normal University， a. Applied Chemistry， College of Chemistry； b. College of Chemistry， Leshan 614004， Sichuan， China）

Abstract： To analyze the liposoluble compounds from the fruit of Paliurus ramosissimus by gas chromatograph - mass sepectrometer （GC-MS）. The fruit solution concentrated with 95% ethanol was extracted by petroleum ether， ethyl acetate and n-butyl alcohol successively. The petroleum ether layer was evaporated and dissolved with hexane， then the liposoluble compounds were separated and identified by GC-MS. The relative content of each component was identified by method of peak area normalization. The results showed that 51 chemical components were separated and 28 components were identified， accounting about 84.71% from petroleum ether extracts， in which sterides and esters were 65.13% and 11.38% respectively. The sterides were the most liposoluble components in the fruit of Paliurus ramosissimus.

Key words：GC-MS；fruit of Paliurus ramosissimus；liposoluble components

馬甲子為鼠李科銅錢樹屬植物馬甲子[Paliurus ramosissimus （Lour.） Poir.]，又名鐵籬笆、竻子、雄虎刺、鐵菱角等，分布于西南及江蘇、浙江、福建、江西、湖南、廣西、臺(tái)灣等地[1]。農(nóng)戶種植馬甲子作果園、菜園、苗圃和魚塘等圍園籬笆衛(wèi)士。民間馬甲子是一種中藥，主要功效為祛風(fēng)散瘀，解毒消腫，用于治療風(fēng)濕痹痛，跌打損傷，咽喉腫痛，癰疽，除寒活血，發(fā)表解毒，瘋狗咬傷等；馬甲子果主治化瘀生新，治吐血，療痔瘡等，民間用于治療不明腫塊[1]。馬甲子化學(xué)成分的研究主要集中在根和莖，有三萜類、環(huán)肽生物堿等[1-7]，馬甲子果化學(xué)成分的研究較少，其成分有三萜類、香豆素類和二氫黃酮類等[8，9]。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）作為一種分析手段在揮發(fā)性組分和脂溶性成分測(cè)定方面應(yīng)用廣泛[10-15]，但將其用于定性分析馬甲子果脂溶性成分的研究鮮見報(bào)道，本研究采用GC-MS定性測(cè)定馬甲子果脂溶性組分，為馬甲子果的開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Thermo氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（ISQLT Single Quadrupole Mass Sepectrometer，TRACE 1310 Gas Chromatograph，STriplus RSH）；ZN-400A型高速萬能粉碎機(jī)（吉首市中誠制藥機(jī)械廠）；RE52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；SHZ-III循環(huán)水真空泵（上海亞榮生化儀器廠）；KQ3200E型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；0.20 μm希波氏一次性針式過濾器。

馬甲子果：2014年10月采自四川省樂山市土主鎮(zhèn)果園圍墻馬甲子的果實(shí)，除去樹葉殘枝等雜物，自然陰干后，用粉碎機(jī)粉碎成粉，待用。

95%乙醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇，正己烷，所用試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 樣品溶液的處理 馬甲子果5 kg，粉碎，用95%乙醇1∶3（m∶V）浸提取3次，浸泡24 h/次，提取液濃縮后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，取少量石油醚萃取液濃縮至近干，用正己烷溶解，用0.20 μm希波氏一次性針式過濾器過濾供GC-MS分析。

1.2.2 GC-MS分析條件 GC條件：進(jìn)樣口溫度320 ℃；載氣為高純He，恒流模式，流速1 mL/min；不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1 μL；色譜柱為TG-SQC （15 m × 0.25 mm × 0.25 μm，Thermo PN 26070-1300）；升溫程序：初始溫度60 ℃，保持1 min，以6 ℃/min升溫至180 ℃，保持12 min，以20 ℃/min升溫至230 ℃，保持1min，再以2.5 ℃/min升溫至300 ℃，保持10 min。 MS條件：電子轟擊電離（EI）源，電子能量70 eV；離子源溫度280 ℃，質(zhì)譜傳輸線溫度280 ℃，溶劑延遲時(shí)間3 min，掃描質(zhì)量范圍為40～650。數(shù)據(jù)庫使用NIST 2015標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫。

2 結(jié)果與分析

按“1.2.1”處理馬甲子果的脂溶性成分，按“1.2.2”分析條件進(jìn)行GC-MS分析。從GC-MS圖譜中得到51個(gè)化學(xué)組分峰，經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫NIST 2015和人工譜圖解析，確定化學(xué)成分28種，用峰面積歸一化法測(cè)出它們的相對(duì)含量為84.71%。總離子流圖見圖1，分析結(jié)果見表1。

3 結(jié)論

確認(rèn)的28種化合物占總成分的84.71%，含量居前三位的是γ-谷甾酮、羽扇豆醇和γ-谷甾醇，含量分別為26.49%、11.97%和7.11%。其中甾類化合物10種占總成分的65.13%，酯類化合物9種占總成分的11.38%，剩余的9種包括有機(jī)酸1種、飽和醇1種、不飽和醇1種、烯烴2種、酮2種、烯醛2種，9種占總成分的8.20%。在馬甲子果脂溶性成分中甾類化合物是主要的，占總成分的近2/3；其次是酯類化合物。

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