SYSMEX CA-510全自動血凝分析儀性能驗(yàn)證及評價(jià)

盧　昊，樊　軍，王　慶，吳芳潔，楊文祥△

(1.湖北省疾病預(yù)防控制中心，武漢 430079；2.湖北省應(yīng)用毒理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢 430074)

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·臨床研究·

SYSMEX CA-510全自動血凝分析儀性能驗(yàn)證及評價(jià)

盧昊1,2，樊軍1,2，王慶1,2，吳芳潔1,2，楊文祥1,2△

(1.湖北省疾病預(yù)防控制中心，武漢 430079；2.湖北省應(yīng)用毒理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢 430074)

目的對日本SYSMEX公司CA-510型全自動凝血分析儀進(jìn)行性能評價(jià)。方法按照臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會的文件，對該儀器的凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原及凝血活酶時(shí)間正確度、精密度、線性及攜帶污染率等項(xiàng)目進(jìn)行性能驗(yàn)證。結(jié)果該儀器的準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍、攜帶污染率等性能指標(biāo)評價(jià)良好。結(jié)論CA-510分析儀性能良好，可用于標(biāo)本的檢測。

CA-510；全自動凝血分析儀；性能驗(yàn)證

CA-510 全自動凝血分析儀是由日本SYSMEX公司推出的1款血凝分析儀器，它的檢測原理是散射光比濁法和百分比終點(diǎn)法，可以測定凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原、凝血酶時(shí)間等多項(xiàng)凝血相關(guān)指標(biāo)，具有高效率、大樣本分析能力，可為臨床提供凝血、抗凝、纖溶系統(tǒng)各項(xiàng)指標(biāo)的分析檢測，測試結(jié)果可用于出血與血栓性疾病的診斷、抗凝藥劑量監(jiān)測及預(yù)后分析[1]。

根據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)方案(CLIA′88)和我國國家食品藥品監(jiān)督管理總局(CFDA)對GLP實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)要求，實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)新的儀器設(shè)備時(shí)，必須遵循標(biāo)準(zhǔn)化程序和質(zhì)量管理的要求建立新的分析系統(tǒng)并定期進(jìn)行性能評價(jià)，以確保儀器的功能良好或產(chǎn)生的試驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠[2-3]。為了保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床提供準(zhǔn)確、可靠的檢測結(jié)果，按照CNAS制訂的《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室——質(zhì)量和能力的專用要求》和衛(wèi)計(jì)委《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》對醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的要求，本研究對CA-510 全自動凝血分析儀的準(zhǔn)確性驗(yàn)證、精密度驗(yàn)證、項(xiàng)目定標(biāo)、線性驗(yàn)證以及血漿樣本攜帶污染率驗(yàn)證進(jìn)行了評價(jià)，現(xiàn)將評價(jià)結(jié)果報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑儀器：采用SYSMEX CA-510全自動血凝分析儀。試劑：凝血酶原時(shí)間(Thromborel-S，批號545354)；活化部分凝血活酶時(shí)間(Actin-APTT，批號537487)；Calcium Chloride Solution(批號536898)；Thrombin Reagent(批號537985)；Owren′s Veronal Buffer pH7.35(批號527699)；Test Thrombin Reagent(批號525478)；Standard Human Plasma(批號503219A)；Clean I(批號A108A)；Ci-Trol 1(批號548116)；Ci-Trol 1(批號528223A)。

1.2方法

1.2.1檢測項(xiàng)目及方法凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、凝血酶時(shí)間均采用凝固法；纖維蛋白原采用Clauss法。

1.2.3精密度驗(yàn)證[6](1)批內(nèi)精密度：選取正常參考值范圍內(nèi)(西門子定值質(zhì)控血漿1)、異常血漿(西門子定值質(zhì)控血漿2)各1份，用自動進(jìn)樣方式分別連續(xù)檢測各20次，計(jì)算各組數(shù)據(jù)的均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)(CV%)。其中，凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原、凝血酶時(shí)間的CV%必須符合CLIA′88規(guī)定的允許誤差的1/4。(2)日間精密度：選取正常參考值內(nèi)(西門子定植質(zhì)控血漿1)、異常血漿(西門子定植質(zhì)控血漿2)各1份，分別分裝成6份，凍存于-80 ℃冰箱內(nèi)。每天取出2個(gè)水平的標(biāo)本各1份，分別測試2次，每天測定2次，共3 d。計(jì)算出CV%，其中凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原、凝血酶時(shí)間的CV%，必須符合CLIA′88規(guī)定允許誤差的1/3。

1.2.4線性驗(yàn)證[7]選取1份接近預(yù)期上限的高值全血樣本(H)，分別按100%、80%、60%、40%、20%、10%的比例進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度重復(fù)測定2次，計(jì)算均值。將實(shí)測值與理論值作比較(偏離應(yīng)小于10%)，計(jì)算Y=aX+b，驗(yàn)證線性范圍。其中a值應(yīng)在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975，認(rèn)為符合要求。

1.2.5血漿樣本攜帶污染率[8-9](1)高值標(biāo)本對低值標(biāo)本的污染：將低值標(biāo)本(L)置標(biāo)本架1、3位置，高值標(biāo)本(H)置2位置，每例標(biāo)本分別測定3次，記錄結(jié)果：L1、L2、L3、H1、H2、H3、L4、L5、L6。計(jì)算：K1%=[L4-Mean(L1、L2、L3)]/Mean(L1、L2、L3)×100%，K1%≤10%判為符合要求。(2)低值標(biāo)本對高值標(biāo)本的污染：將高值標(biāo)本(H)置標(biāo)本架1、3位置，低值標(biāo)本(L)置2位置，每例標(biāo)本分別測定3次，記錄結(jié)果：H1、H2、H3、L1、L2、L3、H4、H5、H6。計(jì)算：K1%=[H4-Mean(H1、H2、H3)]/Mean(H1、H2、H3)×100%，K1%≤10%判為符合要求。

2　結(jié)　　果

2.1準(zhǔn)確性凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原和凝血酶時(shí)間的檢測數(shù)據(jù)結(jié)果均在質(zhì)控說明書給定的范圍內(nèi)，均符合準(zhǔn)確性試驗(yàn)要求。結(jié)果見表1。

2.2精密度

2.2.1批內(nèi)精密度根據(jù)NCCLS EP-15A文件，凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原、凝血酶時(shí)間的CV%必須符合CLIA′88規(guī)定的允許誤差的1/4，即分別為≤3.75%、≤3.75%、≤5.00%、≤6.62%。批內(nèi)精密度測定結(jié)果見表2。

注：-表示無數(shù)據(jù)。

表2　　CA-510全自動血凝分析儀批內(nèi)精密度測定結(jié)果

2.2.2日間精密度根據(jù)NCCLS EP-5A文件，凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原、凝血酶時(shí)間的CV%必須符合CLIA′88規(guī)定的允許誤差的1/3，即分別為≤5.00%、≤5.00%、≤6.67%、≤8.83%。日間精密度測定結(jié)果見表3。

表3　　CA-510全自動血凝分析儀日間精密度測定結(jié)果

2.3線性范圍5份不同比例濃度梯度的纖維蛋白原樣本，每份樣本檢測2次，計(jì)算均值。檢測結(jié)果均值與理論值之間的線性回歸方程為Y=0.954 6X+0.176 8，r=0.993 3。測定結(jié)果表明，纖維蛋白原的線性范圍為0.5～4.48 g/L，其中a=0.954 6，r=0.993 3，符合要求。纖維蛋白原線性范圍見圖1。

圖1　　纖維蛋白原線性范圍結(jié)果

2.4攜帶污染率選取部分代表項(xiàng)目凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原等指標(biāo)進(jìn)行攜帶污染率評價(jià)，其中高值對低值的攜帶污染率K1分別為0.00%、4.45%、-3.05%；低值對高值的攜帶污染率K2分別為0.00%、2.13%、-8.49%。結(jié)果均低于標(biāo)準(zhǔn)值±10%，符合儀器性能要求。

3　討　　論

在準(zhǔn)確性驗(yàn)證中，本研究采用了西門子公司提供的質(zhì)控血漿作為標(biāo)本進(jìn)行檢測，與給定的靶值進(jìn)行比較。結(jié)果表明，把凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原、凝血酶時(shí)間等4項(xiàng)指標(biāo)的測定值與靶值比較，偏倚均在允許范圍內(nèi)，表明儀器測定的準(zhǔn)確性良好。

在精密度試驗(yàn)中，為了減少基質(zhì)效應(yīng)和標(biāo)本種類所導(dǎo)致的檢測結(jié)果差異，本研究在批內(nèi)精密度試驗(yàn)中采用了臨床收集的新鮮血漿作為檢測樣本，而在日間精密度試驗(yàn)中由于新鮮血漿的穩(wěn)定性及保存期過短等原因，采用了試劑配套的質(zhì)控品。研究結(jié)果表明，凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原、凝血酶時(shí)間等4項(xiàng)指標(biāo)的批內(nèi)和日間精密度的變異系數(shù)均符合CLIA′88提出的指標(biāo)質(zhì)量分析要求，表明儀器具有良好的重復(fù)性和穩(wěn)定性，精密度較小，可以滿足實(shí)驗(yàn)室檢測要求。

在線性范圍試驗(yàn)中，本研究對纖維蛋白原的線性范圍進(jìn)行了評價(jià)。結(jié)果表明，測試項(xiàng)目的線性范圍達(dá)到了試劑說明書標(biāo)示的線性范圍，各濃度的纖維蛋白原測定值和標(biāo)準(zhǔn)值之間有良好的線性關(guān)系，且涵蓋了研究對象的測試范圍，證明儀器的線性范圍能夠滿足試驗(yàn)的需要。

在攜帶污染率試驗(yàn)中，本研究選取了凝

血酶原時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間及纖維蛋白原3項(xiàng)指標(biāo)作為評價(jià)儀器攜帶污染的代表項(xiàng)目。結(jié)果表明，上述3項(xiàng)指標(biāo)的高濃度樣本對低濃度樣本檢測結(jié)果的影響均小于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，證明儀器的自潔系統(tǒng)良好。

本研究通過對CA-510全自動凝血分析儀檢測系統(tǒng)的各項(xiàng)性能的驗(yàn)證，初步建立了優(yōu)化適用的CA-510全自動血凝分析系統(tǒng)，該系統(tǒng)具有快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定的檢測特點(diǎn)，儀器性能驗(yàn)證過程按照CNAS相關(guān)文件要求及本實(shí)驗(yàn)室相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行，符合標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理要求。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.18.057

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1673-4130(2016)18-2642-03

2016-03-14

2016-05-25)