2種方法在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的價(jià)值

向燕群,范漢恭,袁春雷

(廣東省中山市博愛醫(yī)院檢驗(yàn)科　528400)

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·臨床研究·

2種方法在孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的價(jià)值

向燕群,范漢恭,袁春雷

(廣東省中山市博愛醫(yī)院檢驗(yàn)科528400)

目的研究分析熒光PCR及細(xì)菌培養(yǎng)法應(yīng)用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的價(jià)值。方法隨機(jī)選取該院2015年1～12月收治的孕婦126例，同時(shí)采集2份生殖道-直腸分泌物，分別為對照組和試驗(yàn)組，對照組選用細(xì)菌培養(yǎng)法，試驗(yàn)組選用熒光PCR技術(shù)，對比記錄2組的陽性準(zhǔn)確率，并分析B族鏈球菌對孕婦妊娠結(jié)局的作用。結(jié)果試驗(yàn)組準(zhǔn)確率為97.4%(38/39)，對照組準(zhǔn)確率為76.9%(30/39)，表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢，并且陽性組胎膜早破、宮內(nèi)感染、胎兒窘迫、產(chǎn)后出血、新生兒感染等不良妊娠結(jié)局發(fā)生率均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論對于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測而言，熒光PCR技術(shù)快速、準(zhǔn)確，陽性檢出率高，對預(yù)防產(chǎn)婦發(fā)生不良妊娠結(jié)局有積極作用。

B族鏈球菌；熒光PCR；細(xì)菌培養(yǎng)法

B族鏈球菌即無乳鏈球菌，是1種常見的革蘭陽性鏈球菌，常存在于直腸與陰道，可引起產(chǎn)婦羊膜腔感染、胎膜早破、胎兒早產(chǎn)、流產(chǎn)等情況。據(jù)統(tǒng)計(jì)，約10%～30%的孕婦感染B族鏈球菌，其中40%～70%在分娩過程中會(huì)傳遞給新生兒[1]。如果新生兒帶了這種菌，大約有1%～3%會(huì)出現(xiàn)早期侵入性感染，發(fā)生腦膜炎、肺炎、敗血癥，其中有5%會(huì)導(dǎo)致死亡[2]。相關(guān)研究表明，抗菌藥物的針對使用可有效地預(yù)防產(chǎn)婦胎膜早破等不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。本文圍繞熒光PCR及細(xì)菌培養(yǎng)法應(yīng)用于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測中的價(jià)值展開討論，檢測孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌的陽性率，取得了較為滿意的結(jié)果，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料隨機(jī)選取本院2015年1～12月收治的孕婦126例；年齡22～43歲，平均年齡(28.9±2.4)歲；孕周均大于35周。其中包括96例初產(chǎn)婦，30例經(jīng)產(chǎn)婦。所有產(chǎn)婦年齡、孕周等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2儀器與試劑本次研究所用儀器為Light Cycler480ll PCR擴(kuò)增儀，熒光PCR(B族鏈球菌核酸檢測)試劑盒(廈門泰普生物科技有限公司)，VITEK2-Compact全自動(dòng)細(xì)菌分析儀，CO2培養(yǎng)箱。

1.3方法

1.3.1分組方法由本院產(chǎn)科門診醫(yī)生對每例產(chǎn)婦同時(shí)采集2份生殖道-直腸分泌物，分別為對照組和試驗(yàn)組，進(jìn)行B族鏈球菌的情況排查，對照組選用細(xì)菌培養(yǎng)法，試驗(yàn)組選用PCR熒光技術(shù)。對存在爭議的結(jié)果需對該產(chǎn)婦進(jìn)行復(fù)測，并與其具體臨床癥狀相結(jié)合。通過最終確診結(jié)果評定2組的準(zhǔn)確率，并將產(chǎn)婦分為B族鏈球菌陰性組與B族鏈球菌陽性組，對比2組產(chǎn)婦妊娠結(jié)果，統(tǒng)計(jì)其胎膜早破發(fā)生情況。具體采集方法如下：首先對產(chǎn)婦生殖道內(nèi)的分泌物進(jìn)行適當(dāng)擦拭，再將無菌滌綸拭子放置于生殖道低位1/3處，沿生殖道壁輕輕旋轉(zhuǎn)取得分泌物標(biāo)本，在肛門括約肌以上約2～5 cm處沿腸壁輕輕旋轉(zhuǎn)取得直腸樣本[3-4]。得到標(biāo)本后，轉(zhuǎn)移至無菌試管中并即刻送檢。

1.3.2細(xì)菌培養(yǎng)法在《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中的臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)方法的指導(dǎo)下進(jìn)行[5]。具體方法如下：將對照組無菌試管中的分泌物接種于血平板表面，并分區(qū)劃線，隨后將其培養(yǎng)在35 ℃，濃度5%～10%的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，時(shí)間為24 h，通過鏡檢對血平板上的菌群情況與β溶血狀況進(jìn)行檢測，進(jìn)行可疑菌落CAMP初篩試驗(yàn)，初篩陽性的細(xì)菌用VITEK2-Compact全自動(dòng)細(xì)菌分析/藥敏作確證試驗(yàn)。

1.3.3熒光PCR法根據(jù)試劑盒規(guī)定提取試驗(yàn)組分泌物標(biāo)本中的細(xì)菌DNA，在稀釋50倍后制成PCR檢測模板。

2　結(jié)　果

2.1對照組與試驗(yàn)組檢測結(jié)果對126例產(chǎn)前孕婦B族鏈球菌陽性率進(jìn)行檢測，試驗(yàn)組準(zhǔn)確率97.4%(38/39)，對照組準(zhǔn)確率76.9%(30/39)，表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，具體見表1。

表1　　2組檢測結(jié)果對比(n)

2.2陰性組與陽性組不良妊娠結(jié)局陽性組胎膜早破、宮內(nèi)感染、胎兒窘迫、產(chǎn)后出血、新生兒感染等不良妊娠結(jié)局發(fā)生率均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，具體見表2。

表2　　2組不良妊娠結(jié)局對比[n(%)]

3　討　　論

B族鏈球菌常寄存于人體下消化道與泌尿生殖道內(nèi)，通常情況下健康人群感染此菌種沒有致病性。而孕婦作為特殊人群，B族鏈球菌感染會(huì)導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。因不同產(chǎn)婦的孕周、分泌物采集方法以及檢測方法的不同，國內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)研究妊娠婦女B族鏈球菌的帶菌率存在較大差別，在2.4%～37.5%[6-7]。本研究126例產(chǎn)婦確診B族鏈球菌陽性率30.95%(39/126)，在上述范圍內(nèi)，通常認(rèn)為B族鏈球菌感染會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)婦出現(xiàn)胎膜早破現(xiàn)象，B族鏈球菌因此對羊水造成污染，而此時(shí)新生兒并沒有娩出，因此，B族鏈球菌可能會(huì)通過新生兒的呼吸道侵入體內(nèi)，從而導(dǎo)致新生兒感染，引發(fā)敗血癥。本次研究結(jié)果顯示，陽性組胎膜早破、宮內(nèi)感染、胎兒窘迫、產(chǎn)后出血、新生兒感染等不良妊娠結(jié)局發(fā)生率均高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，驗(yàn)證了B族鏈球菌感染會(huì)引發(fā)孕婦尤其是產(chǎn)前孕婦的不良妊娠結(jié)局。

由于產(chǎn)婦B族鏈球菌感染無明顯的臨床癥狀從而易被忽略，但其不良影響卻需引起注意[8]。因此，對于產(chǎn)前孕婦進(jìn)行B族鏈球菌感染的檢測至關(guān)重要，可通過相關(guān)藥物預(yù)防與治療改善妊娠結(jié)局，使新生兒的健康水平得以提高。細(xì)菌培養(yǎng)法陰性預(yù)測值和準(zhǔn)確度較高，是國內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院首選的檢測方法[9-10]。但細(xì)菌培養(yǎng)陽性率受標(biāo)本采集、運(yùn)送、保存和培養(yǎng)等條件影響，會(huì)使陽性率有一定變化，加之所需時(shí)間較長，難以滿足臨床檢測準(zhǔn)確、快速的要求[11]。熒光PCR技術(shù)是1種通過體外擴(kuò)增獲得特定的DNA片段，其優(yōu)點(diǎn)在于能將極少的DNA片段大幅度增多，且快速、準(zhǔn)確，靈敏度較高[12]。本次研究結(jié)果顯示，對126例產(chǎn)前孕婦B族鏈球菌陽性率進(jìn)行檢測，PCR組準(zhǔn)確率為97.4%(38/39)，細(xì)菌培養(yǎng)組準(zhǔn)確率為76.9%(30/39)，表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，對降低產(chǎn)前孕婦的不良妊娠發(fā)生率有重要意義。同時(shí)，因細(xì)菌培養(yǎng)法需在恒溫條件下培養(yǎng)24 h，而PCR的檢出時(shí)間控制在6 h左右，檢測時(shí)間的明顯縮短可為治療爭取時(shí)間。

綜上所述，對于孕婦產(chǎn)前B族鏈球菌感染檢測而言，熒光PCR技術(shù)快速、準(zhǔn)確，陽性檢出率高，對預(yù)防產(chǎn)婦發(fā)生不良妊娠結(jié)局有積極作用。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.18.042

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