一次性使用無菌注射器中抗氧劑1010的遷移研究

李永貴，張錫霞，王晶△，王勤

(1.山東省藥學科學院，山東省化學藥物重點實驗室 山東 濟南 250101；2.山東福瑞達醫(yī)藥集團公司，山東省黏膜與皮膚給藥技術重點實驗室 山東 濟南 250101；3.山東省藥學科學院，山東省醫(yī)用高分子材料重點實驗室 山東 濟南 250101)

1 引 言

抗氧劑1010是一種大分子多功能受阻酚類抗氧劑，對聚丙烯、聚乙烯、聚環(huán)烯等有卓越的抗氧化性能，可以有效的延長制品的使用期限[1]。本研究中的一次性使用無菌注射器[2](COP)，以聚環(huán)烯為主要材質，添加抗氧劑1010、穩(wěn)定劑等添加劑加工而成。在注射器使用過程中，上述添加劑可能會遷移至藥品中，隨藥品進入人體內(nèi)，對人體產(chǎn)生危害，因此，需要對添加劑進行相關遷移研究。我們主要對一次性使用無菌注射器添加劑中的抗氧劑1010進行了遷移研究，建立了抗氧劑1010的HPLC測定方法，并對一次性使用無菌注射器遷移溶液進行測定，從而對一次性使用無菌注射器進行安全性評價，為該注射器的安全使用提供實驗依據(jù)[3-4]。

2 分析方法確定

2.1 儀器與試藥

島津高效液相色譜儀LC-20AT泵，PDA檢測器。

抗氧劑1010：四[β-(3，5-二叔丁基-4-羥基苯基)丙酸]季戊四醇酯，CAS#6683-19-8。一次性使用無菌注射器 (規(guī)格：5 ml)。乙腈、四氫呋喃為色譜純。無水乙醇、丙二醇為分析純。

2.2 色譜條件[5-6]

以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，以乙腈：四氫呋喃：水(63∶31∶6)為流動相，檢測波長280 nm，流速1.0 ml/min，進樣體積20 μl，柱溫30 ℃。

2.3 對照品溶液

2.3.1抗氧劑1010對照品溶液 精密稱取抗氧劑1010約10 mg置100 ml量瓶中，加入稀釋劑適量使完全溶解，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻；精密量取5 ml置50 ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻。

2.3.2稀釋劑 乙腈：四氫呋喃(50∶50)

2.4 專屬性

精密量取稀釋劑、去離子水、0.1 M鹽酸溶液、0.1 M氫氧化鈉溶液、無水乙醇、丙二醇、乙腈及抗氧劑1010溶液各20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果表明抗氧劑1010保留時間為6.959 min，稀釋劑、去離子水、0.1 M鹽酸溶液、0.1 M氫氧化鈉溶液、無水乙醇、丙二醇、乙腈在抗氧劑1010出峰位置均無干擾。說明本色譜條件專屬性良好。

圖1 抗氧劑1010對照品溶液圖譜

2.5 檢測限及定量限測定

精密量取對照品溶液用稀釋劑進行一系列稀釋，精密量取各稀釋溶液20 μl，分別注入液相色譜儀，測得定量限為4.00 ng(S/N≈10)，檢測限為1.20 ng(S/N≈3)。

2.6 線性試驗

精密稱取抗氧劑1010約10 mg置100 ml量瓶中，加入稀釋劑適量使完全溶解，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻；精密量取0.1、1、2、4、5、10 ml分別置50 ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液各20 μl注入液相色譜儀，進行測定，以濃度C為橫坐標，峰面積A為縱坐標做線性回歸，求得回歸方程A=5953.9C+411.67，R2=0.9999，說明抗氧劑1010在0.2002 μg/ml～20.02 μg/ml濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關系，結果見表1。

表1 抗氧劑1010線性關系測定結果

圖2 抗氧劑1010線性回歸圖

2.7 精密度試驗

精密量取抗氧劑1010對照品溶液20 μl注入液相色譜儀，連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖及峰面積，平均峰面積為60657.5，RSD為0.19%，結果見表2。

表2 抗氧劑1010重復性試驗結果

2.8 溶液穩(wěn)定性試驗

分別精密量取抗氧劑1010對照品溶液于0、2、4、6、8、24 h各進樣20 μl，記錄色譜圖及峰面積，平均峰面積為61894.83，RSD為0.36%，結果見表3。

表3 抗氧劑1010溶液穩(wěn)定性試驗結果

2.9 回收率試驗

精密稱取抗氧劑1010適量，配制成濃度為對照品溶液80%、100%、120%的溶液各3份，分別取20 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積按外標法計算，平均回收率為99.97%，RSD為0.14%，結果見表4。

2.10 結論

對擬定的檢測方法進行了專屬性、定量限及檢測限、線性、精密度、溶液穩(wěn)定性、回收率等方法學驗證，試驗結果良好，說明此方法可以用于抗氧劑1010的檢測。

表4 抗氧劑1010回收率試驗結果

3 遷移試驗[7-9]

取一次性無菌注射器，分別抽取去離子水、0.1 M鹽酸溶液、0.1 M氫氧化鈉溶液、無水乙醇、丙二醇及乙腈至滿刻度(5 ml)，豎直放置8 h后，取上述遷移溶液各20 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積。按上述色譜條件對各溶液進行檢測，按照以下公式計算，遷移結果見表5。

m對照：為對照品稱樣量

系數(shù)7.5：為依據(jù)FDA毒理學數(shù)據(jù)計算出得出的抗氧劑1010的每天攝入最大量(mg)。

表5 抗氧劑1010遷移試驗結果

去離子水、0.1 M鹽酸溶液、0.1 M氫氧化鈉溶液、無水乙醇、丙二醇至滿刻度(5 ml)，室溫放置8 h，均未檢出抗氧劑1010；乙腈室溫放置8 h有少量遷移，遷移量為0.0732 mg，每支遷移量與最大攝入量比值為 0.98%。

4 結果與討論

4.1本研究建立了抗氧劑1010含量測定的HPLC方法，方法簡單、重現(xiàn)性好、回收率高，可以較好的用于抗氧劑1010的檢測。

4.2一次性使用無菌注射器，抽取去離子水、0.1 M鹽酸溶液、0.1 M氫氧化鈉溶液、無水乙醇、丙二醇至滿刻度(5 ml)，室溫放置8 h，均未檢出抗氧劑1010，在乙腈中有少量遷移。由于臨床中使用的藥物，其極性不會超過上述溶劑，在使用中也不會出現(xiàn)上述劇烈的破壞條件，因此，在臨床使用中，在吸注酸性藥物、堿性藥物及醇溶藥物時不會有抗氧劑的遷移到藥液中的情況，所以，在臨床中使用一次性使用無菌注射器是安全的。