載脂蛋白E基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死關(guān)系的Meta分析

謝愛(ài)玲張玉榮劉小慶

載脂蛋白E基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死關(guān)系的Meta分析

謝愛(ài)玲①?gòu)堄駱s①劉小慶①

目的：采用Meta分析的方法探討載脂蛋白E（ApoE）基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的關(guān)系。方法：雙人獨(dú)立全面檢索在中國(guó)人群中開(kāi)展的載脂蛋白E基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死關(guān)系的文獻(xiàn)，采用固定或隨機(jī)效應(yīng)模型合并效應(yīng)值計(jì)算95%置信區(qū)間，繪制森林圖并進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)。結(jié)果：共納入12篇符合要求文獻(xiàn)，研究發(fā)現(xiàn)與攜帶ε3/ε3野生基因型的個(gè)體相比，攜帶ε4基因型的個(gè)體動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的風(fēng)險(xiǎn)顯著增加（OR=3.06，95%CI：1.66，5.64），并未發(fā)現(xiàn)攜帶ε2基因型會(huì)降低動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)（OR=1.20，95%CI：0.89，1.64）。結(jié)論：攜帶ApoE ε4基因型的個(gè)體是動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的高危人群。

載脂蛋白E； 動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死； Meta分析

First-author’s address：The Third People’s Hospital of J i’nan，J i’nan 250101，China

動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死又稱缺血性腦卒中，是一種嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命及生存質(zhì)量的疾病之一，它是在腦動(dòng)脈粥樣硬化的基礎(chǔ)上，腦血管發(fā)生閉塞或血栓，導(dǎo)致腦組織血供不足引發(fā)缺血、缺氧性壞死，并出現(xiàn)相應(yīng)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和體的急性腦血管?。?］，約占整個(gè)腦梗死患者的40%～60%［2］。近年來(lái)的流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)病具有年輕化趨勢(shì)［3］。脂質(zhì)代謝異常是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化并進(jìn)而引發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的重要途徑［4］。載脂蛋白E（ApoE）是人體內(nèi)參與脂蛋白代謝，維持膽固醇平衡的重要酶類(lèi)，其活性受基因多態(tài)性的影響［5］。載脂蛋白E基因位于人體19號(hào)染色體上，具有ε2、ε3、ε4三種等位基因型，導(dǎo)致人群中出現(xiàn)六種ApoE表型（ε2/ε2、ε2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε3，ε3/ε4，ε4/ε4）［6］。雖然多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)攜帶ε4等位基因型的個(gè)體罹患動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的危險(xiǎn)增加，但是少數(shù)研究并未發(fā)現(xiàn)相關(guān)關(guān)系，且以往研究的樣本量較小，缺乏統(tǒng)計(jì)把握度。本次研究擬通過(guò)Meta分析的方法系統(tǒng)梳理以往開(kāi)展的ApoE基因型與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死關(guān)系的研究，以期在更大樣本量的基礎(chǔ)上了解ApoE基因型與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系提供依據(jù)。

1　資料與方法

1.1文獻(xiàn)檢索方法 本次研究共檢索了3個(gè)期刊數(shù)據(jù)庫(kù)，分別為一個(gè)外文數(shù)據(jù)庫(kù)Medline和兩個(gè)中文數(shù)據(jù)庫(kù)萬(wàn)方和CNKI。其中在Medline的檢索方式為基本檢索檢索式如下：（"atherosclerotic cerebral infarction"［All Fields］ OR "stroke"［All Fields］） AND （"Apolipoprotein E"［All Fields］ OR "ApoE"［All Fields］）AND （"Chinese"［All Fields］ OR "China"［All Fields］），在CNKI及萬(wàn)方的檢索方式為高級(jí)檢索，檢索式為“腦梗死”和“載脂蛋白E”。檢索過(guò)程由雙人獨(dú)立檢索完成，對(duì)于存在歧義的文獻(xiàn)經(jīng)小組討論后決定是否為符合要求文獻(xiàn)，待納入所有符合要求的文獻(xiàn)完后，研究者對(duì)納入文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)進(jìn)行了二級(jí)檢索，以保證查全率。文獻(xiàn)檢索的截止日期為2015 年10月8日。

1.2文獻(xiàn)的篩選過(guò)程及質(zhì)量評(píng)價(jià)

1.2.1文獻(xiàn)的納入及排除標(biāo)準(zhǔn) （1）納入標(biāo)準(zhǔn)：公開(kāi)發(fā)表在國(guó)內(nèi)外期刊，語(yǔ)言為中文或者英文；探討了載脂蛋白E基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的關(guān)系；載脂蛋白E的基因型頻率達(dá)到Hardy-Weinberg平衡；能夠得到載脂蛋白E基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的OR值及其95%CI，或者通過(guò)計(jì)算能得到OR及其95%CI。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：學(xué)位論文；病例組為非動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死或未明確定義腦梗死的類(lèi)型；未提供載脂蛋白E基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的OR值及其95%CI，或者通過(guò)計(jì)算也不能得到OR及其95%CI；動(dòng)物試驗(yàn)性文獻(xiàn)；重復(fù)文獻(xiàn)。

1.2.2文獻(xiàn)的質(zhì)量評(píng)價(jià) 采用Newcastle-Ottawa Scale（NOS）對(duì)所有的納入文獻(xiàn)從以下3個(gè)方面進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)：（1）研究對(duì)象的選擇（病例與對(duì)照、暴露組與非暴露組的選擇）；（2）研究對(duì)象的可比性（病例與對(duì)照的可比性、暴露組與非暴露組的可比性）；（3）結(jié)局與暴露的確定性（病例是否診斷明確、暴露是否明確）。NOS量表總分為9分，其中研究對(duì)象的選擇部分占4分，研究對(duì)象的可比性占1分，結(jié)局與暴露的確定性占3分。文獻(xiàn)質(zhì)量的詳細(xì)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)詳見(jiàn)以下網(wǎng)站：http：//www.ohri.ca/ programs/clinical_epidemiology/oxford.asp。本文將文獻(xiàn)質(zhì)量得分大于7分者視為高質(zhì)量文獻(xiàn)。

1.3資料的提取 對(duì)所有符合納入要求的文獻(xiàn)均提取研究者姓名、開(kāi)展研究的時(shí)間、研究的設(shè)計(jì)類(lèi)型、病例組及對(duì)照組人數(shù)（樣本量）、病例組及對(duì)照組ApoE各基因型頻率、研究的效應(yīng)強(qiáng)度OR值或者RR值及其95%CI。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 為了增加統(tǒng)計(jì)把握度本次研究在分析前先對(duì)各類(lèi)基因型進(jìn)行了合并，具體分為三類(lèi)：第一類(lèi)為ε3/ε3野生型，作為參照類(lèi)；第二類(lèi)為攜帶ε2基因型但未攜帶ε4基因型的個(gè)體包括ε2/ε2、ε2/ε3兩種類(lèi)型；第三類(lèi)為攜帶ε4基因型的個(gè)體包括ε2/ε4、ε3/ε4、ε4/ε4三種類(lèi)型。納入分析的研究中有些并未直接提供效應(yīng)值，因此在合并前先通過(guò)非條件Logistic回歸計(jì)算ApoE基因型與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的效應(yīng)強(qiáng)度（OR值或者RR值）。待得到所有的OR值及其95%CI后對(duì)所有文獻(xiàn)的效應(yīng)值進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，若異質(zhì)性檢驗(yàn)P值小于0.01且I2≥50%則提示各個(gè)研究間存在異質(zhì)性，宜采用隨機(jī)效應(yīng)模型合并OR、RR值及其95%CI，反之則采用固定效用模型合并OR、RR值及其95%CI。通過(guò)Egger檢驗(yàn)檢查有無(wú)發(fā)表偏倚，若Egger檢驗(yàn)P＜0.05則提示存在發(fā)表偏倚，反之則判定為不存在發(fā)表偏倚。本次研究的所有統(tǒng)計(jì)分析由Stata 11.0統(tǒng)計(jì)分析軟件完成。

2　結(jié)果

2.1文獻(xiàn)納入情況 在Medline共檢索到44篇相關(guān)文獻(xiàn)，經(jīng)閱讀題目及摘要排除主題不相關(guān)文獻(xiàn)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)31篇，剩余13篇確定為待讀文獻(xiàn)，經(jīng)全文閱讀后發(fā)現(xiàn)所有13篇文獻(xiàn)均為明確定義腦梗死類(lèi)型，予以排除。在萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)共檢索到128篇相關(guān)文獻(xiàn)，其中學(xué)位論文及會(huì)議論文27篇予以排除，在剩下的101篇期刊文獻(xiàn)中經(jīng)閱讀題目及摘要排除動(dòng)物試驗(yàn)、綜述性文獻(xiàn)、主題不相關(guān)文獻(xiàn)30篇，剩余71篇文獻(xiàn)確定為待讀文獻(xiàn)，經(jīng)全文閱讀后最終納入11篇文獻(xiàn)為待合并文獻(xiàn)。在CNKI共檢索到118篇相關(guān)文獻(xiàn)，經(jīng)過(guò)檢查全部文獻(xiàn)均與萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)重復(fù)。通過(guò)查閱納入文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)，補(bǔ)充納入1篇符合要求文獻(xiàn)。最終本次Meta分析共納入12篇文獻(xiàn)，納入文獻(xiàn)的基本特征見(jiàn)表1。

2.2文獻(xiàn)合并情況

2.2.1攜帶ε2基因型的合并結(jié)果 納入研究的12篇文獻(xiàn)均探討了病例組相比對(duì)照組攜帶ε2基因型的優(yōu)勢(shì)比，12篇均未發(fā)現(xiàn)攜帶ε2基因型會(huì)增加腦動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。異質(zhì)性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)I2=0，P=0.564，可以認(rèn)為12項(xiàng)研究之間不存在異質(zhì)性，宜采用固定效應(yīng)模型合并OR值及其95%CI。文獻(xiàn)合并后提示與ε3/ε3野生型的個(gè)體相比，攜帶ε2基因型的突變個(gè)體其腦動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)并未顯著增加（OR=1.20，95%CI：0.89，1.64），具體合并結(jié)果見(jiàn)圖1。Egger檢驗(yàn)P=0.239，提示不存在發(fā)表偏倚。

表1　納入文獻(xiàn)的基本特征

圖1　ApoE ε 2基因型與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死關(guān)系的森林圖

2.2.2攜帶ε4基因型的合并結(jié)果 納入研究的12篇文獻(xiàn)均探討了病例組相比對(duì)照組攜帶ε4基因型的優(yōu)勢(shì)比，12篇文獻(xiàn)中有9片發(fā)現(xiàn)攜帶ε4基因型會(huì)顯著增加個(gè)體腦動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，另外3篇文獻(xiàn)雖然提示攜帶ε4基因型可能是腦動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的危險(xiǎn)因素，但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。異質(zhì)性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)I2=81.2%，P＜0.001，認(rèn)為12項(xiàng)研究之間存在較大的異質(zhì)性，宜采用隨機(jī)效應(yīng)模型合并OR值及其95%CI。文獻(xiàn)合并后提示與ε3/ε3野生型的個(gè)體相比，攜帶ε4基因型的突變個(gè)體其腦動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著增加（OR=3.06，95%CI：1.66，5.64），具體合并結(jié)果見(jiàn)圖2。Egger檢驗(yàn)P=0.682，提示不存在發(fā)表偏倚。

圖2　ApoE ε 4基因型與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死關(guān)系的森林圖

3　討論

本次研究通過(guò)Meta分析的方法系統(tǒng)梳理了ApoE基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)攜帶ε4基因型的個(gè)體動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著增加，而本次研究并未發(fā)現(xiàn)攜帶ε2基因型會(huì)降低動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。攜帶ε4基因型的個(gè)體動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著的原因如下：首先，在人體內(nèi)載脂蛋白E的是做為乳糜微粒（CM）殘粒、大顆粒極低密度脂蛋白（VLDL）受體的配體而發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)的。攜帶ε4基因型的個(gè)體其體內(nèi)載脂蛋白E的活性水平顯著增加，乳糜微粒（CM）殘粒、大顆粒極低密度脂蛋白（VLDL）在人體內(nèi)的代謝速率加快，大顆粒極低密度脂蛋白分解為低密度脂蛋白（LDL）的速率增加，相應(yīng)的LDL受體會(huì)出現(xiàn)反饋性合成降低，肝臟對(duì)LDL的內(nèi)吞速度下降，血漿中總膽固醇水平及低密度脂蛋白水平增高［7］。其次，以往研究發(fā)現(xiàn)攜帶ε4基因型的個(gè)體，其小腸吸收膽固醇的效率增加［8］。血漿中總膽固醇水平及低密度脂蛋白水平增加均為動(dòng)脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)因素。

以往雖然有Meta分析探討了載脂蛋白E基因多態(tài)性與腦梗死的關(guān)系，但是并未區(qū)分腦梗死的具體類(lèi)型。不同類(lèi)型的腦梗死具有不同的病因機(jī)制，如動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的病理基礎(chǔ)為腦動(dòng)脈出現(xiàn)的粥樣化病變；心源性腦梗死較多的為心臟內(nèi)血栓脫落后隨血液循環(huán)進(jìn)入腦動(dòng)脈導(dǎo)致腦動(dòng)脈阻塞；腔隙性腦梗死的病理基礎(chǔ)則為高血壓等疾病導(dǎo)致的腦動(dòng)脈血管發(fā)生閉塞性改變。因此理論上載脂蛋白E基因多態(tài)性與不同類(lèi)型的腦梗死之間的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度可能會(huì)存在較大差異。動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死是腦梗死的重要類(lèi)型，其病理基礎(chǔ)是腦動(dòng)脈出現(xiàn)的粥樣改變。由于載脂蛋白E與人體內(nèi)脂類(lèi)及膽固醇水平密切相關(guān)，而兩者又是動(dòng)脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)因素，因此探討載脂蛋白E基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的關(guān)系顯得尤為合理。本次研究首次在中國(guó)人群中采用Meta分析的方法探討了載脂蛋白E基因多態(tài)性與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)攜帶ε4基因型的個(gè)體動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著增加，提示對(duì)于攜帶ε4基因型的個(gè)體應(yīng)該注意控制飲食中的脂肪及膽固醇的攝入水平。

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Meta Analysis of Relationship between ApoE Gene Polymorphisms and Atherosclerotic Cerebral Infarction/

XIE Ai-ling，ZHANG Yu-rong，LIU Xiao-qing.//Medical Innovation of China，2016，13（26）：100-103

Objective：To examine the relationship between ApoE gene polymorphisms and risk of Atherosclerotic cerebral infarction （ACI） by Meta analysis.Method：Two researchers independently reviewed the literature which examined the relationship between ApoE gene polymorphisms and risk of ACI.We used fix or random effect models to combine the odds ratio and 95% confidence intervals.Forest plots were used to show each study’s effect and the combined effect while funnel plot and egger test were used to test the heterogeneity. Result：A total of 11 case-control studies were included into the final analysis.Compared with the ε3/ε3 wild genotype， individuals with ε4 genotype had significant higher risk of AIC （OR=3.06，95%CI：1.66，5.64）. However，we didn’t find individuals with ε2 genotype had reduced risk of ACI （OR=1.20，95%CI：0.89，1.64）. Conclusion：Individuals with ApoE ε4 genotype may at particularly high risk of ACI.

ApoE； Atherosclerotic cerebral infarction； Meta-analysis

10.3969/j.issn.1674-4985.2016.26.027

2016-03-10） （本文編輯：蔡元元）

①濟(jì)南市第三人民醫(yī)院 山東 濟(jì)南 250101

謝愛(ài)玲