不穩(wěn)定型心絞痛患者血清親環(huán)素A的水平及臨床意義

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·論著·

不穩(wěn)定型心絞痛患者血清親環(huán)素A的水平及臨床意義

蔡連鎖劉長江張?jiān)丽幖?/p>

目的探討不穩(wěn)定型心絞痛患者血清親環(huán)素A(CypA)、白介素-6(IL-6)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)水平變化間的關(guān)系及臨床意義。 方法選取冠心病心絞痛患者82例，包括穩(wěn)定型心絞痛(SAP)40例，不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)42例；同時(shí)取無血管病變的30例健康體檢者作為對照組。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測定血清CypA、IL-6、MMP-9的水平，并對結(jié)果進(jìn)行分析。 結(jié)果冠心病組血清CypA含量為(8.68±3.29)ng/ml、IL-6為(17.35±3.57)ng/L、MMP-9為(44.96±11.25)ng/ml；對照組3個(gè)指標(biāo)的含量依次為(3.51±0.57)ng/ml、(6.16±1.87)ng/L、(26.87±5.21)ng/ml。冠心病組患者血清CypA、IL-6、MMP-9水平與對照組比較顯著增高(P<0.05)。UAP組血清CypA、IL-6、MMP-9水平分別為(13.45±4.51)ng/ml、(21.37±5.86)ng/L、(63.22±10.31)ng/ml；SAP組3個(gè)指標(biāo)的含量分別為(5.62±1.09)ng/ml、(12.12±2.14)ng/L、(30.43±7.24)ng/ml。UAP組血清CypA、IL-6、MMP-9水平與SAP組和對照組比較均顯著增高(P<0.05)；SAP組血清IL-6水平與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 通過相關(guān)性分析UAP患者血清CypA水平與IL-6、MMP-9水平均呈正相關(guān)性(r=0.361、0.428，P<0.05)。結(jié)論不穩(wěn)定型心絞痛患者血清CypA升高，其可能參與了不穩(wěn)定型心絞痛的發(fā)生發(fā)展，且冠脈粥樣斑塊的不穩(wěn)定性可能是CypA與IL-6、MMP-9協(xié)同作用相關(guān)。

不穩(wěn)定心絞痛；親環(huán)素A；白介素-6；基質(zhì)金屬蛋白酶-9

不穩(wěn)定型心絞痛(unstable angina pectoris,UAP)屬于急性冠脈綜合征冠心病類型，主要是由于冠脈不穩(wěn)定的粥樣斑塊破裂出血，導(dǎo)致動(dòng)脈管腔閉塞或狹窄，而出現(xiàn)急性心肌缺血的臨床表現(xiàn)。目前認(rèn)為，UAP的發(fā)生和進(jìn)展與炎性反應(yīng)關(guān)系密切，因而確定新炎性因子、明確其作用機(jī)制有重要意義。親環(huán)素A(Cyclophilin A,CypA)是一種廣泛存在且高度保守的蛋白質(zhì)，可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子的表達(dá)及增加炎性細(xì)胞的趨化活性，研究發(fā)現(xiàn)其與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[1，2]。白介素細(xì)胞-6(IL-6)是炎性反應(yīng)的調(diào)節(jié)者，在血管損傷和急性心肌缺血中起主要作用；基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)可破壞粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性，促進(jìn)斑塊破裂[3]。本研究通過檢測冠心病患者血清CypA、IL-6、MMP-9水平及其相關(guān)性，以探討CypA在UAP患者中的臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2013年11月至2014年4月我院住院且經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影檢查確診為冠心病的患者82例為CHD組，男49例，女33例；平均年齡(61.7±11.2)歲；其中包括穩(wěn)定型心絞痛(SAP)40例為SAP組，男23例，女17例；平均年齡(59.8±11.6)歲；合并高血壓病14例, 腦血管病7 例，糖尿病9例；UAP患者42例為UAP組，男26例，女16例；平均年齡(61.6±11.7)歲；合并高血壓病15例，腦血管病9例，糖尿病11 例。選取同期30例健康體檢者為對照組，男31例，女19例；年齡49～80歲，平均年齡(61.2±10.5)歲；經(jīng)詢問病史、體格檢查、心電圖及其他實(shí)驗(yàn)室檢查無異常。3組患者間年齡、性別比、吸煙史、飲酒史及血脂、血糖、高血壓等并發(fā)疾病情況比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2診斷冠心病心絞痛患者診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]：經(jīng)冠脈造影確診，左主干、左前降支、左回旋支或右冠狀動(dòng)脈至少一支心外膜下冠狀動(dòng)脈管腔直徑狹窄超過50%。心電圖檢查符合：心絞痛發(fā)作時(shí)心電圖出現(xiàn)缺血性變化；靜息時(shí)心電圖出現(xiàn)明顯缺血變化；運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)時(shí)心電圖出現(xiàn)明顯缺血變化。

1.3排除標(biāo)準(zhǔn)既往有心肌梗死病史、冠狀動(dòng)脈介入治療病史、外周血管疾病、慢性心力衰竭、腎臟及肝臟疾病、血液病、甲狀腺疾病、惡性腫瘤、自身免疫性疾病以及近期發(fā)熱、感染性疾病、血栓、結(jié)締組織性疾病等病史。

1.4標(biāo)本采集及檢測方法所有受試對象于清晨空腹采集肘靜脈血4 ml注入一次性真空潔凈玻璃管內(nèi)，靜置1 h左右后，以3 000 r/min離心10 min分離血清，取上清液，置于-20℃冰箱待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清CypA、IL-6、MMP-9；試劑盒為美國R&D公司產(chǎn)品，按照試劑盒說明步驟進(jìn)行操作。

2　結(jié)果

2.1CHD組與對照組血清CypA、IL-6、MMP-9水平比較CHD組血清CypA含量為(8.68±3.29)ng/ml、IL-6為(17.35±3.57)ng/L、MMP-9為(44.96±11.25)ng/ml；對照組3個(gè)指標(biāo)含量依次為(3.51±0.57)ng/ml、(6.16±1.87)ng/L、(26.87±5.21)ng/ml。CHD組血清CypA、IL-6、MMP-9水平與對照組比較，CHD組患者血清CypA、IL-6、MMP-9水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

組別CypA(ng/ml)IL-6(ng/L)MMP-9(ng/ml)對照組(n=30)3.51±0.576.16±1.8726.87±5.21CHD組(n=82)8.68±3.29*17.35±3.57*44.96±11.25*

注:與對照組比較，*P<0.05

2.2UAP組和SAP組與對照組血清CypA、IL-6、MMP-9水平比較UAP組血清CypA、IL-6、MMP-9水平分別為(13.45±4.51)ng/ml、(21.37±5.86)ng/L、(63.22±10.31)ng/ml；SAP組3個(gè)指標(biāo)的含量分別為(5.62±1.09)ng/ml、(12.12±2.14)ng/L、(30.43±7.24)ng/ml。UAP組血清CypA、IL-6、MMP-9水平較SAP組及對照組血清水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；SAP組血清IL-6水平與較對照組比較明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。SAP組血清CypA、MMP-9水平較對照組升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

組別CypA(ng/ml)IL-6(ng/L)MMP-9(ng/ml)對照組(n=30)3.51±0.576.16±1.8726.87±5.21UAP組(n=42)13.45±4.51*#21.37±5.86*#63.22±10.31*#SAP組(n=40)5.62±1.0912.12±2.14*30.43±7.24

注:與對照組比較，*P<0.05；與SAP組比較，#P<0.05

2.3UAP組和SAP組患者血清CypA、IL-6、MMP-9相關(guān)性分析UAP組患者血清CypA與IL-6、MMP-9水平經(jīng)Pearson相關(guān)分析，呈正相關(guān)性(r=0.361、0.428,P<0.05)，但SAP組患者血清CypA與IL-6、MMP-9水平經(jīng)相關(guān)性分析，均無相關(guān)性(r=0.042、0.117，P>0.05)。

3　討論

UAP是常見的冠心病類型，主要是由冠狀動(dòng)脈粥樣硬化所致，其有較高病死率。由于UAP的發(fā)病率、死亡率在我國均不斷上升，近年來關(guān)于UAP的發(fā)病機(jī)制、病情評估及治療途徑選擇已成為研究的熱點(diǎn)。關(guān)于UAP的發(fā)病機(jī)制，一直以來認(rèn)為脂質(zhì)斑塊沉積于血管壁是致病的主要因素，因此治療一直在降脂、增加斑塊穩(wěn)定性方面進(jìn)行研究。但目前治療結(jié)果并不能令人滿意。因此，學(xué)者們認(rèn)為其他機(jī)制在UAP的發(fā)生進(jìn)展中發(fā)揮了重要作用。近期炎性反應(yīng)在冠心病中的作用越來越受到關(guān)注，對炎性因子等標(biāo)志物的研究也已成為研究熱點(diǎn)。動(dòng)脈粥樣硬化的病理特征是血管壁的慢性炎性過程，使血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子，大量炎性細(xì)胞進(jìn)入內(nèi)皮層下，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞活化，從而使血小板聚集，在斑塊形成過程和破裂中發(fā)揮主要作用[5，6]。尋找新的血清標(biāo)志物進(jìn)行UAP病情分析、預(yù)后評價(jià)、治療效果評估具有重要意義，本研究在這一領(lǐng)域進(jìn)行了探討。

CypA屬于親環(huán)素家族成員之一，又被稱為分泌氧化應(yīng)激誘導(dǎo)因子，可被單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌到細(xì)胞外發(fā)揮重要生物學(xué)功能。研究發(fā)現(xiàn)其可以刺激血管平滑肌細(xì)胞遷移，促使內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子的表達(dá)，導(dǎo)致炎性細(xì)胞的趨化活性增加[7]，在動(dòng)脈粥樣硬化、血管重構(gòu)等病理生理中起關(guān)鍵作用。因此認(rèn)為CypA在血管炎性反應(yīng)過程中對促進(jìn)炎性反應(yīng)的進(jìn)展發(fā)揮了重要作用，可能與冠心病的發(fā)生進(jìn)展有關(guān)。 Satoh等[8]研究發(fā)現(xiàn)在動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程中，CypA表達(dá)水平明顯增加，其斑塊中的產(chǎn)生大量的CypA，其壞死核心中死亡的細(xì)胞是CypA的主要的來源。CypA誘導(dǎo)單核細(xì)胞釋放IL-6，通過激活單核細(xì)胞參與動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展，還可通過調(diào)節(jié)泡沫細(xì)胞的細(xì)胞黏附、侵襲和MMP-9的表達(dá)，這些粥樣斑塊不穩(wěn)定性顯著相關(guān)[9]。本研究顯示，冠心病患者較對照組血清CypA水平明顯增高，SAP患者較對照組血清CypA水平增高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而UAP患者較對照組血清CypA水平增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明隨著冠心病心絞痛的嚴(yán)重程度不斷增加，而CypA血清水平明顯增高，提示CypA與UAP關(guān)系密切，CypA水平升高可能會導(dǎo)致其他炎性因子水平變化，從而使血管炎性反應(yīng)加重，引起相關(guān)疾病發(fā)生。

IL-6為前炎性細(xì)胞因子，在炎性反應(yīng)、血管損傷、急性心肌缺血中起重要作用。IL-6可導(dǎo)致心肌損傷及功能障礙，在心血管疾病病理生理過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用；IL-6可以促使單核細(xì)胞進(jìn)入血管內(nèi)皮下參與斑塊形成，導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈血栓形成[10]。Sadeghi等[11]研究發(fā)現(xiàn)UAP患者血清IL-6水平明顯升高，表明IL-6在UAP的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，研究還發(fā)現(xiàn)IL-6表達(dá)水平與冠心病的發(fā)生、發(fā)展及疾病的預(yù)后密切相關(guān)[12，13]。Wang等[14]研究認(rèn)為IL-6是粥樣硬化斑塊中的標(biāo)記物，與動(dòng)脈粥樣斑塊形成及破裂的發(fā)生密切相關(guān)，UAP血清中的IL-6表達(dá)水平顯著升高，IL-6的表達(dá)水平越高其斑塊的穩(wěn)定性越差。本研究發(fā)現(xiàn)SAP血清IL-6水平與對照組比較明顯升高，而UAP血清IL-6水平較SAP明顯增高，亦表明IL-6的表達(dá)水平越高其斑塊的穩(wěn)定性越差。

本研究發(fā)現(xiàn)MMP-9是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中的一員，亦稱明膠酶，對細(xì)胞外基質(zhì)具有降解作用，可以分解粥樣斑塊基底膜和纖維帽的血管內(nèi)皮基底膜Ⅳ型膠原，破壞其結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致斑塊的穩(wěn)定性降低，加速斑塊破裂。MMP-9降解破壞血管內(nèi)皮完整性，同時(shí)又為炎性細(xì)胞浸潤遷移提供條件，使炎性細(xì)胞向斑塊中聚集增加，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化斑塊[15]。Mishra等[16]研究表明，冠心病患者外周血中MMP-9水平與正常對照水平明顯增高。本研究發(fā)現(xiàn)SAP血清MMP-9水平較對照組升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而UAP血清MMP-9水平較SAP明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明MMP-9的表達(dá)粥樣斑塊的穩(wěn)定性具有相關(guān)性。

CypA促使單核細(xì)胞分泌炎性因子，誘導(dǎo)單核細(xì)胞遷移，袁偉等[17]通過對人類單核細(xì)胞系THP-1細(xì)胞體外培養(yǎng)研究發(fā)現(xiàn)，CypA可以促使單核細(xì)胞分泌IL-6，明顯增強(qiáng)MMP-9的活性。本研究通過相關(guān)性分析進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，UAP患者血清CypA水平與IL-6、MMP-9水平均具有正相關(guān)性，表明CypA可能通過促使IL-6、MMP-9的分泌，使粥樣斑塊不穩(wěn)定，導(dǎo)致UAP的發(fā)生。但本研究也發(fā)現(xiàn)，在SAP組患者中血清CypA與IL-6、MMP-9無明顯相關(guān)性，這一結(jié)果提示CypA在不同類型的心絞痛發(fā)病中可能發(fā)揮不同作用，具體情況尚待深入研究。

綜上所述，UAP患者血清CypA明顯升高，表明CypA參與其發(fā)生、發(fā)展，并且可能通過與IL-6、MMP-9協(xié)同作用導(dǎo)致粥樣斑塊穩(wěn)定性差，因此CypA血清水平可能有助于UAP患者的病情判斷及評估。

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劉長江，063600河北省樂亭縣醫(yī)院；

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2016-01-20)