霧化吸入對小兒哮喘調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及氣道炎癥的治療效果

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霧化吸入對小兒哮喘調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及氣道炎癥的治療效果

張?jiān)茝垥渣S治華

目的觀察并探討布地奈德(BUD)、沙丁胺醇(SAL)和異丙托溴銨(ipratropium bromide，IB)三聯(lián)霧化吸入治療對小兒支氣管哮喘調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及氣道炎癥的影響。方法分析兒童支氣管哮喘患者40例，隨機(jī)平均分為2組，哮喘組采用BUD、SAL聯(lián)合IB三聯(lián)霧化吸入治療，對照組口服維生素B1(安慰劑)，10 mg/d。收集外周血樣，測定IFN-γ和IL-4的水平。哮喘嚴(yán)重度由哮喘癥狀評分評估，肺功能比較用FEV1比較。觀察2組患者治療前及藥物治療后1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月的肺功能各項(xiàng)指標(biāo)的情況，2組治療后檢測胸膜厚度及胸膜滑動(dòng)度。結(jié)果哮喘組FEV1顯著改善，Th2細(xì)胞百分比顯著降低(P<0.05)。哮喘組Th1細(xì)胞與Treg細(xì)胞略有變化，從而減輕Th1/Th2細(xì)胞和Treg/Th17細(xì)胞的失衡，對照組無明顯變化(P>0.05)；2組治療前及治療后1個(gè)月、3個(gè)月肺功能差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；6個(gè)月肺功能哮喘組優(yōu)于對照組，2組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；哮喘組術(shù)后CT測量胸膜厚度要厚于對照組，胸膜滑動(dòng)度優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論霧化吸入重新平衡細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞和Treg/Th17細(xì)胞平衡，改善患者肺功能，從而緩解哮喘患者癥狀。

小兒哮喘；霧化吸入；T細(xì)胞；氣道炎癥；細(xì)胞因子

哮喘代表氣道的慢性炎癥性疾病，并與氣道高反應(yīng)性相關(guān)，導(dǎo)致經(jīng)常反復(fù)發(fā)作和肺內(nèi)氣流阻塞[1]。哮喘一度被認(rèn)為是一個(gè)典型的Th2細(xì)胞介導(dǎo)的疾病。新的證據(jù)表明哮喘不僅僅是Th2型疾病。Th1和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)也參與了哮喘的發(fā)展。Th1細(xì)胞釋放干擾素(IFN)-γ，抑制Th2細(xì)胞的發(fā)展，因此，Th1/Th2細(xì)胞的失衡可能是導(dǎo)致哮喘嚴(yán)重程度的一個(gè)關(guān)鍵因素[2]。臨床上普遍采用支氣管擴(kuò)張劑來解除氣道平滑肌痙攣和緩解喘憋，如茶堿類、酚妥拉明、阿托品等，但是其緩解癥狀、改善體征方面療效不一，且各有其不良反應(yīng)[3]。我院對小兒毛細(xì)支氣管炎患兒給予布地奈德(BUD)、沙丁胺醇(SAL)和異丙托溴銨(IB)的三聯(lián)吸入治療，取得了理想的效果，有效控制哮喘癥狀[3]。本文旨在研究小兒哮喘霧化吸入治療對患兒肺功能及Th1、Treg平衡的調(diào)節(jié)作用，報(bào)告如下。

1　資料與方法

1.1一般資料回顧性分析2012年8月至2015年11月在我院兒科住院的40例兒童支氣管哮喘患者，所有患者符合全球哮喘防治倡議和2008年我國兒童支氣管哮喘診斷與防治指南中有關(guān)小兒支氣管哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)，入組患者均為特應(yīng)性輕中度持續(xù)性哮喘患者。將患者隨機(jī)分為2組，哮喘組20例，男11例，女9例；年齡4～16歲，平均年齡(10.4±1.3)歲；對照組20例，男9例，女11例；年齡5～16歲，平均年齡(10.7±2.9)歲。所有納入病例測試前未使用激素、茶堿類、支氣管擴(kuò)張劑等。2組一般資料具有均衡性。

1.2觀察指標(biāo)哮喘患者記錄患者社會人口特征包括年齡，性別。應(yīng)用6-域哮喘癥狀評分評估并記錄哮喘程度[4]。血清IL-4、IFN-γ和IgE水平進(jìn)行了測定。樣品收集的當(dāng)天，還測定1 s用力呼氣容積(FEV1)。

1.3治療方法所有患兒均按照小兒毛細(xì)支氣管炎的綜合治療方案，包括抗感染、吸氧、鎮(zhèn)靜和支氣管解痙藥等常規(guī)治療方式。哮喘組在西醫(yī)治療的基礎(chǔ)上給予布地奈德(阿斯利康制藥有限公司)1 ml，0.5 mg劑量、0.5%沙丁胺醇(北京海德潤制藥有限公司)0.25 ml 和異丙托溴銨(華潤雙鶴藥業(yè)股份有限公司)1 ml，0.125 mg劑量加入0.9%氯化鈉溶液1 ml吸入治療，經(jīng)氧氣驅(qū)動(dòng)噴射霧化吸入。對照組口服維生素B1(安慰劑)，10 mg/d。2組服用對應(yīng)制劑12周后，判斷2組療效。 判斷標(biāo)準(zhǔn):按照哮喘癥狀評分系統(tǒng)評估哮喘癥狀。該項(xiàng)目包括呼吸困難、胸悶、白天喘息，夜間喘息和日常表現(xiàn)，分?jǐn)?shù)范圍0～3分。根據(jù)歐洲呼吸協(xié)會標(biāo)準(zhǔn)測定FEV1%。測定3次，最高FEV1值用于數(shù)據(jù)分析。

1.4測定方法患者空腹過夜，次日上午9∶00，靜脈血液樣本(2 ml)測定IL-4和IFN-γ水平。血樣室溫下凝結(jié)60 min。1 200 r離心分離10 min得血清，-80℃儲存至測量之前。血清LL-4和IFN-γ水平，以及總IgE水平，用ELISA法測定。(1)胸膜厚度測量:分別在治療后予64排胸部 CT 復(fù)查，采用薄層(3 mm)掃描。取術(shù)側(cè)前正中線，在縱隔窗圖像片上選擇，后正中線、側(cè)正中線測量胸膜最大厚度的數(shù)值，記錄每例胸膜最大厚度的CT片層為中心所測量值的平均值；(2)胸膜滑動(dòng)度的測量：治療后予CT片彩超胸部復(fù)查。采用7 MHz 線性探頭測量患者胸膜滑動(dòng)征，在腋中線第 2、4、6 肋間、脊柱旁線第 2、5、7、9 肋間、胸壁鎖骨中線第 2、4 肋間檢測胸膜滑動(dòng)征。記錄吸氣末、呼氣末胸膜移動(dòng)距離(mm)。胸膜滑動(dòng)度值是以上測量數(shù)值取平均值；分別于治療前及治療后1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月觀察患者肺功能的變化情況，肺功能的檢測，記錄1 s用力呼氣容積占預(yù)測值FEV1% pred、1s用力呼氣容積占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、FEV1。

2　結(jié)果

2.1人口學(xué)和臨床特征數(shù)據(jù)比較哮喘組和對照組平均年齡分別為(10.4±1.3)歲和(10.7±2.9)歲(P=0.06)。男性比例分別為55%和45%(P=0.66)。哮喘組平均哮喘癥狀評分高于對照組[(10.9±2.8)分和(8.1±2.4)分;P<0.01]。哮喘組平均FEV1%顯著低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1　人口學(xué)和臨床特征數(shù)據(jù)　n=20

2.22組細(xì)胞因子數(shù)據(jù)2組平均IFN-γ水平、血清IL-4水平，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，哮喘組IFN-γ水平與哮喘癥狀評分呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.61)，并與FEV1%呈負(fù)相關(guān)(r=-0.59)。IFN-γ和IL-4之間無顯著相關(guān)性。見表2。

變量哮喘組對照組P值IgE(U/ml)244.0±29.955.0±8.5<0.05IL-4(pg/ml)89.0±20.910.0±2.2<0.05IFN-γ(pg/ml)40.8±11.320.0±9.5<0.05

2.3治療效果比較哮喘組炎癥細(xì)胞，包括嗜酸性粒細(xì)胞，中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，下降顯著。哮喘組Th2細(xì)胞百分比顯著降低。哮喘組Th1細(xì)胞與Treg細(xì)胞略有變化，從而減輕Th1/Th2細(xì)胞和Treg/Th17細(xì)胞的失衡。對照組無明顯變化(P>0.05)。見表3。

表3　IFN-γ水平與其他哮喘參數(shù)相關(guān)性

2.42組患者肺功能指標(biāo)比較2組治療前及治療后1個(gè)月、3個(gè)月肺功能差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后6個(gè)月肺功能哮喘組優(yōu)于對照組，2組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

組別FEV1pred(%)FEV1(L)FEV1/FVC(%)哮喘組 治療前42.87±1.381.25±0.2554.32±5.34 治療后 1個(gè)月42.86±1.091.26±0.2354.29±5.53 3個(gè)月44.45±6.761.32±0.3256.45±8.12 6個(gè)月48.34±7.89*#1.39±0.56*#59.23±9.23*#對照組 治療前42.56±1.341.24±0.2354.34±5.34 治療后 1個(gè)月42.67±1.451.25±0.2254.56±5.67 3個(gè)月43.34±6.231.30±0.2555.34±6.78 6個(gè)月44.34±6.451.32±0.3256.34±6.77

注：與治療前比較，*P<0.05；與對照組比較，#P<0.05

2.52組患者胸膜厚度和胸膜滑動(dòng)度比較哮喘組治療后CT測量胸膜厚度厚于對照組，胸膜滑動(dòng)度優(yōu)于對照組(P<0.05)。見表5。

表5　2組患者胸膜厚度和胸膜滑動(dòng)度比較　±s

3　討論

臨床上普遍采用支氣管擴(kuò)張劑來解除氣道平滑肌痙攣和緩解喘憋，如茶堿類、酚妥拉明、阿托品等，但是其緩解癥狀、改善體征方面療效不一，且各有其副作用[5,6]。

本次研究對20例小兒毛細(xì)支氣管炎患兒給予BUD、SAL和IB的三聯(lián)吸入治療，對另20例患兒在常規(guī)治療基礎(chǔ)上采用BUD、SA霧化吸入治療。霧化吸入將藥物形成霧狀顆粒送入氣道，直接與呼吸道黏膜接觸，不經(jīng)過全身血液循環(huán)的稀釋，因此局部藥物濃度較高，可迅速發(fā)揮其抗感染、消除炎癥以及稀釋痰液等作用，已經(jīng)成為呼吸系統(tǒng)疾病治療的重要手段[7]。國外研究顯示，RSV毛細(xì)支氣管炎后吸入糖皮質(zhì)激素可以減少2年內(nèi)喘息癥狀的發(fā)生，持續(xù)2月的吸入治療可以減少此后2年內(nèi)哮喘的發(fā)病率[8]。IB是目前臨床上使用最為廣泛的短效抗膽堿藥[9]，在吸入后5 min 開始起效，30～60 min達(dá)峰值，持續(xù)4～6 h，因而適應(yīng)對于需要立即緩解癥狀的患者。我們本次研究發(fā)現(xiàn)，三聯(lián)霧化吸入治療與二聯(lián)霧化吸入治療相比，能明顯改善小兒毛細(xì)支氣管炎患兒的肺功能和臨床癥狀[10-12]。與上述理論一致。

在本研究中，哮喘組的平均哮喘癥狀評分高于對照組，平均FEV1%顯著低于對照組。哮喘組血清IFN-γ、IL-4水平高于對照組，且IFN-γ水平與哮喘癥狀評分呈正相關(guān)，與FEV1%負(fù)相關(guān)。IFN-γ和IL-4之間無顯著相關(guān)性。在治療效果的比較上，哮喘組的炎癥細(xì)胞，包括嗜酸性粒細(xì)胞，中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，下降顯著。此外，霧化吸入給藥增加了經(jīng)典的Th1細(xì)胞因子IFN-γ，從而改變Th1/Th2平衡。相比對照組，霧化吸入不僅減少炎性細(xì)胞因子Th2，而且如果施用較高劑量，抑制Th17細(xì)胞因子IL-17，霧化吸入可能調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡和Th17/Treg的平衡。哮喘組的Th2細(xì)胞百分比顯著降低。哮喘組Th1細(xì)胞與Treg細(xì)胞略有變化，從而減輕Th1/Th2細(xì)胞和Treg/Th17細(xì)胞的失衡。對照組無明顯變化。治療后哮喘組CT測量胸膜厚度要厚于對照組，哮喘組胸膜滑動(dòng)度優(yōu)于對照組；6個(gè)月的時(shí)候肺功能哮喘組要優(yōu)于對照組。

綜上所述，BUD、SAL聯(lián)合IB三聯(lián)霧化吸入治療能明顯改善小兒毛細(xì)支氣管炎患兒的肺功能，重新平衡細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞和Treg/Th17細(xì)胞平衡，從而緩解小兒哮喘患者癥狀。

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Therapeutic effects of atomization inhalation on bronchial asthma in children and its effects on regulatory T cells and airway inflammation

ZHANGYun,ZHANGXiao,HUANGZhihua.

DepartmentofPediatrics,NanhaiHospitalofGynecologyandObstetricsandChildren’sHealthCareAffiliatedtoGuangzhouTCMUnivertsity,Guangdong,Foshan528200,China

ObjectiveTo observe the therapeutic effects of combination trigeminy atomization inhalation of budesonide (BUD), salbutamol (SAL) and ipratropium bromide (IB) on bronchial asthma in children and its effects on regulatory T cells and airway inflammation.MethodsForty children patients with bronchial asthma were randomly divided into two groups,with 20 patients in each group.The patients in observation group were treated by triple atomization inhalation of BUD,SAL and IB,however,the patients in control group were treated by oral Vitamin B1 (placebo),10mg/d. The srum levels of IFN-γ and IL-4 in peripheral blood of patients were detected,the severity of bronchial asthma was evaluated according to asthma symptom scoring,and lung function was compared between two groups by FEV1 comparison method. The parameters about lung function were observed before treatment and on 1m,3m,6m after treatment for both groups. Moreover the pleural thickness and pleural sliding degree were detected after treatment.ResultsAs compared with those in control group,the FEV1 was obviously improved,and the percentage of Th2 was significantly decreased in observation group (P<0.05). Moreover the disbalance of Th1/Th2 and Treg/Th17 was significantly improved in observation group (P<0.05). There were no significant differences in lung functions before treatment and on 1m,3m after treatment between two groups (P>0.05). However the lung functions on 6m after treatment in observation group were superior to those in control group (P<0.05). CT examination results showed that pleural thickness in observation group was thicker than that in control group,and pleural sliding degree in observation group was superior to that in control group (P<0.05).ConclusionThe atomization inhalation can balance cytokines again, regulate the balance of Th1/Th2 and Treg/Th17,improve lung function of patients,thus, which can relieve the symptoms of asthma.

asthma in children; atomization inhalation; T cells; airway inflammation; cytokines

10.3969/j.issn.1002-7386.2016.19.016

528200廣東省佛山市，廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬南海婦產(chǎn)兒童醫(yī)院兒內(nèi)科

R 256.12

A

1002-7386(2016)19-2942-03

2016-03-17)