抗-M抗體對ABO血型鑒定的影響

涂業(yè)桃

(西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院輸血科，四川瀘州 646000)

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·臨床研究·

抗-M抗體對ABO血型鑒定的影響

涂業(yè)桃

(西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院輸血科，四川瀘州 646000)

目的探討抗-M抗體對血型鑒定正反定型不符的影響及臨床意義。方法收集2014年10月至2015年9月在該院進(jìn)行血型鑒定的27 620例標(biāo)本，其中26例標(biāo)本ABO血型正反定型不符。經(jīng)鹽水介質(zhì)法復(fù)查，仍有8例標(biāo)本正反定型不符。對這8例標(biāo)本進(jìn)行抗體篩查和鑒定。結(jié)果經(jīng)鑒定，8例標(biāo)本的血清中檢出5例抗-M抗體(62.5%)，2例抗-I抗體(25%)，1例抗-Lua抗體(12.5%)。經(jīng)卡方檢驗，抗-M抗體的百分比明顯高于其他兩種抗體，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論抗-M抗體干擾ABO血型鑒定，容易引起血型鑒定錯誤，有重要的臨床意義。

抗-M抗體;ABO血型;血清學(xué)試驗;不規(guī)則抗體

MNS血型系統(tǒng)是繼ABO血型之后第二個被發(fā)現(xiàn)的血型系統(tǒng)，其復(fù)雜性僅次于Rh系統(tǒng)[1]。目前已經(jīng)確定的抗原有46個，中國漢族人群中M抗原頻率為45%～50%[2]。MNS血型抗體有抗-M抗體、抗-N抗體和抗-S抗體，其中抗-M抗體在人體血液中比較常見，多為自然產(chǎn)生，也有報道因輸血或細(xì)菌感染而產(chǎn)生的抗體。其以IgM類抗體為主，少部分是IgG類抗體[3]。近年來由抗-M抗體引起ABO血型正反定型不符的個案報道較多[4-6]，引起輸血科醫(yī)師的廣泛重視。血型鑒定是保證臨床安全輸血的重要步驟，血型鑒定錯誤將導(dǎo)致嚴(yán)重的輸血事故。因此，本科從2014年10月起，嚴(yán)格記錄和分析血型正反定型不一致的標(biāo)本。截止2015年9月30日，累計鑒定血型27 620例，發(fā)現(xiàn)26例標(biāo)本ABO血型正反定型不一致。本研究主要分析抗-M抗體對血型鑒定的影響，以期為疑難血型鑒定提供參考依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2014年10月1日至2015年9月30日本院住院患者常規(guī)血型標(biāo)本共27 620例，發(fā)現(xiàn)26例正反定型不符標(biāo)本。經(jīng)鹽水法復(fù)查，仍然發(fā)現(xiàn)8例正反定型不符標(biāo)本。

1.2儀器與試劑血型鑒定卡，0.8%A1、B反定型紅細(xì)胞(長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司)，4%A1、B、O反定型紅細(xì)胞(長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司)，抗A、抗B單克隆抗血清(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)，亞洲人抗體篩查細(xì)胞(Diamed AG)，低離子抗人球蛋白卡(達(dá)亞美有限責(zé)任公司)，Baso凝聚胺溶液(珠海貝索生物技術(shù)有限公司)，Thermo移液器(50、10 μL)，Baso 2005-1離心機(jī)(臺灣貝索企業(yè)有限公司)，長春博訊TD-3A型離心機(jī)，37 ℃電熱恒溫水溫箱，80-1型電動離心機(jī)，AnkeTDL80-2B離心機(jī)。所有試劑和儀器均批檢合格并在有效期內(nèi)使用。

1.3檢測方法分離血漿和紅細(xì)胞后，取微柱凝膠卡進(jìn)行ABO、RhD血型鑒定，具體操作步驟按操作說明書進(jìn)行，血型結(jié)果均由人工判讀，判斷標(biāo)準(zhǔn)見文獻(xiàn)[3]。因 ABO血型正反定型結(jié)果不符，進(jìn)一步采用鹽水介質(zhì)法進(jìn)行復(fù)檢，同時做不規(guī)則抗體篩查及直接抗人球蛋白試驗，并送至成都市血液中心參比實驗室進(jìn)一步確診。玻片法按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進(jìn)行操作和判讀結(jié)果[4]。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析，計量資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1血型鑒定結(jié)果采用微柱凝膠法對8例標(biāo)本進(jìn)行ABO、RhD血型鑒定，并用鹽水介質(zhì)法進(jìn)行復(fù)檢，發(fā)現(xiàn)除4號標(biāo)本外，其余7例標(biāo)本的ABO血型鑒定為正反定型不符，RhD血型鑒定未受影響。4號標(biāo)本鹽水法正反定型相符，可能原因為血漿中不規(guī)則抗體效價低或者室溫反應(yīng)時間不夠，或是血漿中僅存在IgG性質(zhì)的抗體，所以鹽水介質(zhì)法未發(fā)生凝集?？紤]患者血漿中含有ABO以外的不規(guī)則抗體干擾血型鑒定結(jié)果。在37 ℃溫育30 min，結(jié)果顯示除4號標(biāo)本外其他7例患者血漿與反定型細(xì)胞不規(guī)則凝集端凝集強(qiáng)度有所減弱，但無法通過改變反應(yīng)溫度完全消除，正反定型仍然不合，需進(jìn)一步做抗體篩選、抗體鑒定和血型鑒定。見表1。

表1　　8例患者血型鑒定結(jié)果

注：-為凝集反應(yīng)陰性；+～++++為凝集強(qiáng)度；mf為混合凝集；/表示未檢測。

表2　　抗體篩查及鑒定結(jié)果

注：-為凝集反應(yīng)陰性；+～++++為凝集強(qiáng)度。

2.2抗體篩查及抗體鑒定結(jié)果本實驗室對這8例標(biāo)本進(jìn)行抗體初篩試驗均為陽性。由于實驗室條件有限，將這8例標(biāo)本送成都市血液中心參比實驗室進(jìn)行血清學(xué)鑒定和血型確診，檢出5例抗-M抗體(62.5%)，2例抗-I抗體(25.0%)，1例抗-Lua抗體(12.5%)。其中，抗-M抗體占比明顯高于其他兩種抗體，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

3　討　　論

抗-M抗體是MNS血型系統(tǒng)的常見抗體，分為天然抗體和免疫性抗體，大多是IgM類性質(zhì)，偶見IgG類，多數(shù)由輸血或妊娠刺激產(chǎn)生，可產(chǎn)生較嚴(yán)重的輸血反應(yīng)。國內(nèi)外均有抗-M抗體引起溶血性輸血反應(yīng)的報道[5]。IgG類抗-M抗體亦可通過胎盤，引起新生兒溶血病的發(fā)生[6]。由于M抗原在紅細(xì)胞上有足夠的密度，因此即使是IgG型的抗-M抗體也可在鹽水介質(zhì)中產(chǎn)生凝集反應(yīng)[7]。抗-M抗體在4 ℃時活性最強(qiáng)，如果患者處于低溫麻醉狀態(tài)下手術(shù)時需注意，此類抗體可激活補(bǔ)體，在冷抗體最適反應(yīng)溫度范圍內(nèi)(4～20 ℃)，可發(fā)生溶血反應(yīng)[8]。由此可見，輸血前正確的血型鑒定和抗體篩查十分重要。

血型鑒定是輸血科的日常工作，遇到正反定型不符的情況較為多見，原因基本可分為抗原、抗體的減弱或血清中存在不規(guī)則抗體及亞型的影響等,尤其是有免疫史、肝腎功能障礙、惡病質(zhì)、血液病等人群出現(xiàn)正反定型不符的情況較為多見。特別是很多腫瘤患者，已經(jīng)接受過多次輸血以及其他藥物治療，因多次輸血可導(dǎo)致患者體內(nèi)免疫性IgG類抗體效價的增高，從而引起再次輸血時血型鑒定困難。在常規(guī)血型鑒定時，出現(xiàn)了較多的高效價抗-M抗體引起正反定型不符的情況。在血型鑒定時由于 A、B、O標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞由多人份紅細(xì)胞混合配制而成，紅細(xì)胞上除A、B抗原外還可能含有一些其他的低頻抗原，如M抗原、N抗原或P抗原等，如果患者血清中存在相應(yīng)低頻抗原的抗體時，反定型都呈現(xiàn)O型反應(yīng)模式，可以干擾血型鑒定結(jié)果[9-10]。

血型鑒定的準(zhǔn)確性是保證后續(xù)交叉配血的重要前提。在常規(guī)血型鑒定中務(wù)必要堅持做正反定型，正反定型結(jié)果相互印證，可顯著降低出現(xiàn)錯誤的概率，確保血型鑒定的準(zhǔn)確性。如有正反定型不符的情況要引起注意，應(yīng)進(jìn)一步做抗體篩查和血清學(xué)試驗查找原因，以發(fā)現(xiàn)具有臨床意義的不規(guī)則抗體，避免輸血不良反應(yīng)的發(fā)生。同時也要結(jié)合患者臨床情況排除疾病因素等對血型鑒定的影響。對于特殊血型的患者，輸血科應(yīng)建立疑難血型鑒定登記本，詳細(xì)記錄患者的檢測結(jié)果，盡量確保輸入同型或配合型血液成分，防止免疫性溶血反應(yīng)的發(fā)生，以提高輸血安全性和輸血療效。

綜上所述，對患者進(jìn)行正反定型以及不規(guī)則抗體篩查是非常重要的。嚴(yán)格掌握血型鑒定及交叉配血試驗的分析路線，并規(guī)范化操作，對于避免臨床輸血反應(yīng)的發(fā)生，確保輸血安全具有重要的意義。

[1]Khalid S,Dantes R,Varghese S,et al.Naturally occurring anti M complicating ABO grouping[J].Indian J Pathol Microbiol,2011,54(1):170-172.

[2]高峰．臨床輸血與檢驗[M]．2版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：72-73．

[3]蘭炯采，中橋，陳靜嫻．輸血免疫血液學(xué)試驗技術(shù)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：77-79．

[4]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜．全國臨床檢驗操作規(guī)程[M]．南京：東南大學(xué)出版社，1997：89-91．

[5]張進(jìn)，鄭月明．免疫性抗-M引起遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)一例[J]．中國輸血雜志，1992，5(3)：144-146．

[6]郭萍，楊通漢，姚富柱，等．IgG抗-M引起新生兒溶血病1例[J]．中國輸血雜志，2007，20(5)：418．

[7]牛天林．抗M導(dǎo)致ABO血型鑒定正反定型不符的原因分析[J]．吉林醫(yī)學(xué)，2012，33(14)：2992-2993．

[8]劉鳳霞，劉競，屈琳，等．抗-M引起血型鑒定困難、交叉配血不合1例[J]．中國輸血雜志，2011，24(8)：707-708．

[9]陽志勇，汪薇，陳玲英．抗-M抗體致血型鑒定困難1例[J]．中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志，2012，40(6)：630-631．

[10]楊君青，蘇英姿．含抗-M患者輸入M陽性紅細(xì)胞導(dǎo)致血型正定型困難1例[J]．中國輸血雜志，2012，25(7)：699-700．

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.17.044

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