豬瘟免疫程序優(yōu)化及免疫效果評價

南文金，黃健強，吳靜波，胡鴻惠，彭國良

（1.韶關學院 動物疫病實驗室，韶關 512005；2.韶關學院 英東農(nóng)業(yè)科學與工程學院，韶關 512005；3.粵北生豬生產(chǎn)及疫病防控協(xié)同創(chuàng)新發(fā)展中心，韶關 512005）

豬場獸醫(yī)

豬瘟免疫程序優(yōu)化及免疫效果評價

南文金1，3，黃健強1，3，吳靜波1，3，胡鴻惠1，3，彭國良2，3

（1.韶關學院 動物疫病實驗室，韶關 512005；2.韶關學院 英東農(nóng)業(yè)科學與工程學院，韶關 512005；3.粵北生豬生產(chǎn)及疫病防控協(xié)同創(chuàng)新發(fā)展中心，韶關 512005）

為了提高豬瘟疫苗免疫效果，增強豬群抵抗豬瘟病毒感染能力，采用ELISA方法對某豬場仔豬母源抗體消長情況進行監(jiān)測，根據(jù)母源抗體消長規(guī)律對豬瘟疫苗首免日齡由原來的20日齡調(diào)整為35日齡，二免日齡由60日齡調(diào)整為65日齡。連續(xù)兩批商品豬的豬瘟抗體監(jiān)測數(shù)據(jù)表明，免疫程序調(diào)整后豬群的豬瘟抗體合格率上升，變異系數(shù)下降，疫苗免疫效果提高明顯。

豬瘟；母源抗體；免疫程序；免疫效果

豬瘟（Classical Swine Fever， CSF）是一種高度接觸性傳染病，被世界動物衛(wèi)生組織（OIE）列為必須上報的傳染?。?］，是目前危害養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要傳染病之一。我國對豬瘟采取強制免疫措施，有效防控了豬瘟的暴發(fā)和流行，但非典型豬瘟在部分豬場存在，一旦發(fā)生，影響豬場整體健康和生產(chǎn)成績，造成較大的經(jīng)濟損失。非典型豬瘟的發(fā)生和豬瘟疫苗免疫程序和免疫效果關系密切，本研究通過對某規(guī)?；i場豬瘟抗體水平進行監(jiān)測，通過抗體水平變化規(guī)律，對該豬場豬瘟免疫程序進行優(yōu)化，調(diào)整后的豬瘟疫苗免疫效果提高明顯，增強了豬群對豬瘟病毒侵襲的抵抗力。該研究以期為規(guī)?；i場如何進行豬瘟疫苗的科學免疫提供了參考。

1　材料與方法

1.1 試驗豬場基本情況

試驗于廣東某豬場進行，存欄基礎母豬900多頭，分區(qū)飼養(yǎng)，全進全出。種豬每年豬瘟疫苗普免3次，每次4頭份，商品豬豬瘟免疫程序為20日齡首免豬瘟疫苗1頭份，60日齡二免豬瘟疫苗2頭份，豬瘟疫苗為某公司生產(chǎn)的豬瘟ST傳代細胞苗。

1.2 檢測試劑盒與判定標準

豬瘟病毒抗體檢測試劑盒（阻斷ELSIA），美國IDEXX公司產(chǎn)品，批號：D361，按試劑盒說明書進行操作，所有孵育反應都在23 ℃恒溫箱中進行，在陰性和陽性對照成立，檢測結果有效時通過計算樣本阻斷率來判定抗體水平，具體判斷標見表1。

表1　豬瘟抗體檢測結果判定標準

1.3 第1次豬瘟免疫抗體監(jiān)測

為評價該豬場現(xiàn)行的豬瘟免疫程序免疫效果，隨機選擇20頭母豬、豬瘟疫苗首免1個月的保育豬20頭和二免后1個月的生長育肥20頭，前腔靜脈采集血液樣本3～5 mL，實驗室離心分離血清，使用豬瘟病毒抗體檢測試劑盒對樣本抗體水平進行檢測，對檢測數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。

1.4 仔豬母源抗體監(jiān)測及首免日齡確定

為科學地確定該豬場豬瘟免疫程序，選擇分娩時間相差1 d的10窩仔豬進行母源抗體監(jiān)測，每窩仔豬隨機選擇2頭仔豬，打好耳號，分別于出生7、14、21、28、35和42日齡前腔靜脈采血，實驗室檢測豬瘟母源抗體水平，根據(jù)母源抗體變化規(guī)律和該場仔豬斷奶日齡，對該場仔豬豬瘟首免時間調(diào)整為35日齡，二免時間為65日齡。

1.5 免疫程序優(yōu)化后的豬瘟免疫效果監(jiān)測

連續(xù)監(jiān)測了2批豬瘟免疫程序優(yōu)化后的商品豬群抗體水平，分別在豬瘟疫苗首免和二免后1個月，每批豬每次隨機選擇20頭前腔靜脈采血分離血清進行豬瘟抗體水平檢測。

2　結果

2.1 第1次豬瘟免疫抗體監(jiān)測結果

檢測結果顯示，該場母豬豬瘟免疫效果較好，抗體合格率達到95%，抗體平均阻斷率85.65%，抗體變異系數(shù)為24.47%。但商品豬采用的豬瘟20日齡首免，60日齡二免的免疫程序免疫效果較差，首免和二免后30天豬瘟抗體合格率分別為35%和60%，抗體水平不均勻，變異系數(shù)較高（表2）。

2.2 仔豬母源抗體消長規(guī)律監(jiān)測結果

母源抗體監(jiān)測結果表明，14日齡前仔豬母源抗體都維持較高水平，抗體合格率為100%，平均阻斷率在80%以上，變異系數(shù)小于10%；14日齡到28日齡抗體水平隨日齡增長逐步下降，28日齡時母源抗體合格率還能達到70%；28日齡后母源抗體迅速下降，35日齡母源抗體合格率為40%，平均阻斷率為48.17%，42日齡時母源抗體合格率僅20%，平均阻斷率下降到32.29%，變異系數(shù)升高到33.66%（見表3）。

2.3 優(yōu)化后的豬瘟免疫抗體監(jiān)測結果

對免疫程序優(yōu)化后的兩批豬首免和二免后1個月豬瘟抗體水平檢測結果表明，豬瘟抗體合格率和平均阻斷率都有較大幅度提升，抗體水平更加均勻，變異系數(shù)明顯下降（表4）。

表2　第1次豬瘟免疫抗體檢測結果

表3　仔豬豬瘟母源抗體檢測結果

表4　豬瘟免疫程序優(yōu)化后商品豬群抗體水平

3　討論

抗體合格率、平均阻斷率和變異系數(shù)是評價豬瘟疫苗免疫效果幾個重要參數(shù)，杜希珍等的研究報道［2］，豬瘟控制較好，沒有隱性感染的豬場，豬群抗體合格率可以達到90%以上，抗體變異系數(shù)小于25%。在對該豬場第1次豬瘟抗體檢測中，所檢測的母豬樣品豬瘟抗體較為理想，抗體合格率達到95%，變異系數(shù)低于25%，平均阻斷率高于80%，但商品代豬群豬瘟抗體水平較差，豬瘟疫苗首免和二免后1個月抗體率僅為35%和60%，且抗體變異系數(shù)較高，說明該豬場采用的20日齡首免豬瘟疫苗，60日齡加強免疫的商品代豬瘟免疫程序沒有達到免疫效果，尚未達到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的豬瘟抗體合格率70%最低要求，免疫失敗。

豬瘟疫苗是我國獸用疫苗中為數(shù)不多的僅有一個疫苗毒株的商品疫苗，雖然豬瘟病毒流行毒株呈現(xiàn)多樣性，基因亞型也不斷復雜［3，4］，但研究表明［5］用于生產(chǎn)疫苗的“C”株仍然可以對現(xiàn)在流行的豬瘟野毒有很好的保護作用。仔豬可以通過吮吸免疫母豬初乳獲得對豬瘟的被動免疫保護，但母源抗體隨著仔豬日齡增長而降低［6］，因此需要通過接種疫苗產(chǎn)生主動免疫來增加豬群對豬瘟野毒感染抵抗力。養(yǎng)豬生產(chǎn)實踐中，豬瘟免疫失敗時有發(fā)生，影響豬瘟免疫效果有多種因素，但學者［7］普遍認為，豬瘟疫苗首免日齡不當是造成豬瘟免疫失敗的主要原因之一。表3對仔豬母源抗體檢測數(shù)據(jù)可知，21日齡和28日齡仔豬母源抗體合格率分別為85%和70%，而研究表明首免后豬瘟抗體上升率和上升幅度和母源抗體水平呈負相關［8-9］，母豬母源抗體對疫苗接種仔豬的主動免疫有明顯抑制作用［10］，而該場采用的20日齡首免豬瘟疫苗時間過早，母源抗體和疫苗抗原形成抗原抗體復合物被機體免疫系統(tǒng)清除，首免沒有形成記憶細胞從而導致二免后豬瘟抗體水平上升緩慢，是導致商品豬群免疫失敗主要原因。

通過對母源抗體消長規(guī)律研究，將該豬場商品代豬群的豬瘟免疫程序調(diào)整為35日齡首免，65日齡二免，免疫劑量為2頭份，通過對調(diào)整后兩批商品代豬群抗體水平檢測，抗體合格率大幅度提高，變異系數(shù)降低，整體抗體水平顯著提高，但同時也發(fā)現(xiàn)，首免后的抗體合格率還沒有超過70%，因為條件所限，試驗只采取了一種免疫程序和免疫劑量，免疫程序是否還有進一步優(yōu)化空間還需增加免疫程序試驗進行比較。

通過仔豬豬瘟母源抗體消長規(guī)律來選擇合適的免疫程序可以發(fā)揮豬瘟疫苗免疫最大效果，提高豬場疫病防控能力。

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2016-04-12）

韶關市科技計劃項目（2013CX/N09，2014CX/N319）。

南文金（1981-），男，河南靈寶人，助理研究員，碩士，主要從事動物疫病防控技術研究