食品微生物實(shí)驗(yàn)室試劑耗材的質(zhì)量控制

賀　燕 楊　滔 彭詩(shī)富

(湖南省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，湖南 長(zhǎng)沙　410000)

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食品微生物實(shí)驗(yàn)室試劑耗材的質(zhì)量控制

賀燕 楊滔 彭詩(shī)富

(湖南省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，湖南 長(zhǎng)沙410000)

試劑是食品微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作中必不可少的消耗品，其質(zhì)量直接影響到檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。文章從采購(gòu)、外觀質(zhì)量檢驗(yàn)驗(yàn)收和內(nèi)在質(zhì)量檢驗(yàn)驗(yàn)收，以及貯存和使用等方面全面分析了食品微生物實(shí)驗(yàn)室試劑耗材的質(zhì)量控制，其中重點(diǎn)分類(lèi)講述如何進(jìn)行商品化培養(yǎng)基和試劑的內(nèi)在質(zhì)量驗(yàn)收，以對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室的試劑耗材質(zhì)量控制提供技術(shù)指導(dǎo)和參考。

微生物實(shí)驗(yàn)室；試劑；實(shí)驗(yàn)耗材；質(zhì)量控制

食品微生物檢驗(yàn)是評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量、保證食品安全、預(yù)防和控制食源性疾病的重要手段和防護(hù)線。為確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確，應(yīng)對(duì)影響檢驗(yàn)結(jié)果各方面進(jìn)行嚴(yán)格質(zhì)量控制，才能保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤。食品微生物試驗(yàn)的質(zhì)量控制包括實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制和實(shí)驗(yàn)室間的質(zhì)量控制。而實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制則主要是從人、機(jī)、料、方、環(huán)、測(cè)六方面著手進(jìn)行控制。為保證質(zhì)量，依據(jù)《檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》2015版[1]和CNAS-CL09:2013《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明》[2]的要求，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持對(duì)重要服務(wù)、供應(yīng)品、試劑、消耗材料供應(yīng)商的進(jìn)行選擇和評(píng)價(jià)。食品微生物檢測(cè)中必不可少的試劑耗材主要包含一次性耗材、培養(yǎng)基、生化試劑、玻璃器皿等，其質(zhì)量直接決定了檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。如果在采購(gòu)、驗(yàn)收、存貯、使用過(guò)程中忽視了任何一個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制，都將影響到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，食品微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該要加強(qiáng)“料”環(huán)節(jié)中的試劑耗材的控制把關(guān)，確保檢測(cè)過(guò)程中檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確無(wú)誤。本文主要講述試劑耗材從采購(gòu)、驗(yàn)收、貯存、使用等方面進(jìn)行質(zhì)量控制。

1　一次性耗材的質(zhì)量控制

食品微生物實(shí)驗(yàn)室常用的一次性耗材主要有無(wú)菌培養(yǎng)皿、無(wú)菌吸管、無(wú)菌涂布棒、一次性接種環(huán)等。對(duì)其質(zhì)量控制，實(shí)驗(yàn)室首先應(yīng)盡量選擇大企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品，嚴(yán)格杜絕三無(wú)廠家供應(yīng)的產(chǎn)品，其次要嚴(yán)格做好驗(yàn)收過(guò)程的質(zhì)量控制。

1.1一次性耗材的外觀質(zhì)量檢驗(yàn)

每個(gè)批次的一次性消耗材料，按照包裝物或產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上的方法開(kāi)啟和使用。開(kāi)啟前先觀察內(nèi)包裝完整與否，開(kāi)啟后，對(duì)該批次一次性消耗材料進(jìn)行感官檢查，觀察是否存在異常情況，任何污染、受潮或物理性狀發(fā)生改變者不得通過(guò)檢查。

1.2一次性耗材內(nèi)在質(zhì)量檢驗(yàn)

按照該批次的一次性消耗材料的交貨數(shù)量，至少抽取一個(gè)最小單個(gè)包裝作為測(cè)試抽樣樣品。對(duì)于無(wú)菌型的一次性耗材，在無(wú)菌條件下開(kāi)啟內(nèi)包裝物，按照產(chǎn)品分類(lèi)分別取樣檢查：

(1) 短棒狀一次性無(wú)菌消耗材料(包括無(wú)菌采樣棉簽、接種環(huán)、接種針等)，直接將正常使用端插入10 mL溴甲酚紫葡萄糖肉湯大試管中，滅菌剪刀剪去手接觸過(guò)的部分，塞緊試管塞。

(2) 長(zhǎng)棒狀一次性無(wú)菌消耗材料(包括移液管等)，直接將正常使用端插入10 mL溴甲酚紫葡萄糖肉湯大試管中，在漩渦混合儀上振蕩1 min或乳膠洗耳球吹吸10次，棄去測(cè)試材料，塞緊試管塞。

(3) 容器型一次性無(wú)菌消耗材料(包括菌種保存管、拍擊式均質(zhì)袋等)，直接將溴甲酚紫葡萄糖肉湯注入待測(cè)試的容器中，液面高度不低于容器高度的2/3，無(wú)菌材料封閉容器口。

(4) 扁平型一次性無(wú)菌消耗材料(包括塑料平皿)，在無(wú)菌條件下直接將待測(cè)試材料放入適當(dāng)?shù)臒o(wú)菌容器(如拍擊式均質(zhì)袋)中，注入適量溴甲酚紫葡萄糖肉湯，液面高度應(yīng)保證將全部待測(cè)試物淹沒(méi)，折疊塑料袋口或包扎瓶口。

將上述處理后的檢樣置生化培養(yǎng)箱，(36±1) ℃培養(yǎng)5 d，觀察和結(jié)果判定。逐一觀察溴甲酚紫葡萄糖肉湯是否出現(xiàn)變色、渾濁、沉淀、絮狀、菌膜、產(chǎn)氣等情況，有時(shí)微生物增殖后可聚集成團(tuán)，沉積在容器底部，發(fā)生這種情況時(shí)，小心振蕩容器后再進(jìn)行觀察。如溴甲酚紫葡萄糖肉湯保持紫色清亮透明狀態(tài)，則判定為無(wú)菌試驗(yàn)符合，方可投入使用，否則就按各自實(shí)驗(yàn)室的規(guī)定進(jìn)行處置。

1.3一次性耗材貯存和使用中的質(zhì)量控制

微生物使用的一次性耗材如一次性培養(yǎng)皿、一次性吸管、槍頭等多為無(wú)菌產(chǎn)品，經(jīng)驗(yàn)收合格的產(chǎn)品應(yīng)貯存在陰涼干燥處，以不利于滋生細(xì)菌和真菌。購(gòu)買(mǎi)的一次性產(chǎn)品盡量不要放置時(shí)間太長(zhǎng)，為確保不影響檢驗(yàn)結(jié)果，在較長(zhǎng)時(shí)間未使用產(chǎn)品時(shí)，無(wú)菌系類(lèi)產(chǎn)品應(yīng)對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)，非無(wú)菌系類(lèi)產(chǎn)品在用于微生物檢測(cè)時(shí)應(yīng)進(jìn)行滅菌處理。

2　培養(yǎng)基和生化試劑的質(zhì)量控制

培養(yǎng)基和生化試劑是用來(lái)培養(yǎng)和鑒定微生物的主要耗材，其質(zhì)量的好壞直接決定著檢測(cè)結(jié)果，下面主要從采購(gòu)、驗(yàn)收、使用、貯存等方面介紹如何對(duì)培養(yǎng)基和生化試劑進(jìn)行質(zhì)量把關(guān)。

2.1培養(yǎng)基和生化試劑的供方評(píng)價(jià)

從試劑耗材的質(zhì)量來(lái)看，不同的生產(chǎn)商家的產(chǎn)品，甚至同一廠家不同批號(hào)的產(chǎn)品都會(huì)存在差異[3]。合格供應(yīng)商和廠家的選擇非常重要，應(yīng)選擇產(chǎn)品市場(chǎng)信譽(yù)度高，有質(zhì)量保證能力和服務(wù)能力的企業(yè)；企業(yè)是否通過(guò)質(zhì)量管理體系的認(rèn)證，企業(yè)的供貨能力，以及企業(yè)是否有保證試劑耗材質(zhì)量的相應(yīng)保證設(shè)備[4]，例如微生物檢測(cè)很多生化試劑都是有保存要求，供應(yīng)商或企業(yè)應(yīng)該至少應(yīng)該有相應(yīng)配套的低溫保藏設(shè)備，此外，供應(yīng)商或企業(yè)應(yīng)該要有良好的保存試劑耗材的場(chǎng)所。確定了合格的供應(yīng)商和企業(yè)的話，試劑耗材的第一步質(zhì)量關(guān)得到了保證。

2.2培養(yǎng)基和生化試劑的驗(yàn)收檢驗(yàn)

培養(yǎng)基和生化試劑采購(gòu)回來(lái)之后，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行入庫(kù)登記，并進(jìn)行驗(yàn)收。為確保質(zhì)量，多數(shù)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室在驗(yàn)收時(shí)，會(huì)從外觀質(zhì)量和內(nèi)在質(zhì)量?jī)煞矫嬷帧?/p>

2.2.1培養(yǎng)基和生化試劑的外觀質(zhì)量檢驗(yàn)對(duì)需要驗(yàn)收的培養(yǎng)基和試劑(包括試劑盒)首先檢查該批次的供應(yīng)商是否屬于本實(shí)驗(yàn)室評(píng)定的合格供應(yīng)商，以確保源頭可靠。對(duì)于商品化的培養(yǎng)基和試劑最好看是否有廠家的質(zhì)控報(bào)告，目前中國(guó)的規(guī)模成型的培養(yǎng)基廠家都有對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行出廠前的檢測(cè)和控制。在進(jìn)行外觀驗(yàn)收時(shí)，要核查該批次培養(yǎng)基和試劑的包裝物或產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上是否包括各種成分、添加成分名稱(chēng)及產(chǎn)品編號(hào)、批號(hào)、最終pH(僅適用于大部分培養(yǎng)基)、存儲(chǔ)信息和有效期等基本信息。若不能滿足上述條件，可以不接受該批次培養(yǎng)基和試劑。對(duì)培養(yǎng)基和試劑(包括試劑盒)的內(nèi)容物進(jìn)行感官檢查，觀察其流動(dòng)性、均勻性、結(jié)塊情況和色澤變化等[5]。任何受潮或物理性狀發(fā)生明顯改變的脫水培養(yǎng)基不得通過(guò)驗(yàn)收，對(duì)于即用型培養(yǎng)基或試劑，出現(xiàn)污染、變質(zhì)、明顯脫水或分層析出的，不得通過(guò)驗(yàn)收。

2.2.2培養(yǎng)基和生化試劑的內(nèi)在質(zhì)量檢驗(yàn)對(duì)培養(yǎng)基內(nèi)在質(zhì)量的驗(yàn)收目的是確定培養(yǎng)基的質(zhì)量性能是否能夠保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。它主要利用已知的標(biāo)準(zhǔn)菌株按照標(biāo)準(zhǔn)的要求測(cè)定培養(yǎng)基和試劑的性能，可參考ISO/TS 11133—2003或SN/T 1538—2007以及GB 4789.28—2013，目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)室采用GB 4789.28—2013進(jìn)行培養(yǎng)基和試劑的驗(yàn)收[6]。針對(duì)不同類(lèi)型的培養(yǎng)基和試劑可以采用定量、半定量和定性的測(cè)試方法，對(duì)于商品化的培養(yǎng)基和試劑多采用半定量和定性的測(cè)試方法。

對(duì)于選擇性的培養(yǎng)基采用目標(biāo)菌和非目標(biāo)菌的半定量方法，對(duì)于非選擇性的培養(yǎng)基僅采用目標(biāo)菌的半定量方法，檢驗(yàn)步驟為：

(1) 平板制作：將融化后的培養(yǎng)基傾注到培養(yǎng)皿中，并確保每個(gè)平皿中至少有3 mm厚的瓊脂層，如需要添加抗生素、維生素等附加試劑的培養(yǎng)基，應(yīng)使培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右后方可添加。傾注培養(yǎng)基的平板經(jīng)冷卻凝固后應(yīng)立即使用或于2～8 ℃冰箱的密封保存待用。

(2) 工作液制作：將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株接種到非選擇性肉湯(例如BHI肉湯)培養(yǎng)過(guò)夜。各種商品化的培養(yǎng)基和試劑需要的目標(biāo)菌和非目標(biāo)菌的測(cè)試菌株按照GB 4789.28—2013附錄E的來(lái)選定。

(3) 接種：目標(biāo)菌的半定量方法：用1 μL接種環(huán)按圖1進(jìn)行平板劃線。具體操作：將平板分為A、B、C、D四區(qū)，其中A、B、C三區(qū)用接種環(huán)按0.5 cm的間隔劃4條平行線，D區(qū)內(nèi)劃一條連續(xù)的“Z”字型曲線。非目標(biāo)菌的半定量方法：用1 μL接種環(huán)按圖2在待測(cè)培養(yǎng)基表面劃6條平行直線。目標(biāo)菌和非目標(biāo)菌的半定量方法均要求接種兩個(gè)待測(cè)平板。

劃線時(shí)可在培養(yǎng)基下面放一個(gè)模板圖，并按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的培養(yǎng)條件培養(yǎng)平板。操作時(shí)接種環(huán)應(yīng)取一滿環(huán)接種物，為去除多余的液體，可將接種環(huán)在平邊緣輕觸3次。接種環(huán)與瓊脂平面以20°～30°的角度為適宜，劃線速度前后一致并快速連續(xù)。移取液體培養(yǎng)物時(shí)為防止環(huán)上產(chǎn)生氣泡或泡沫，應(yīng)將接種環(huán)伸入培養(yǎng)液下部分。 通常用同一個(gè)接種環(huán)對(duì)同一個(gè)待測(cè)平板進(jìn)行劃線時(shí)，操作過(guò)程不需要對(duì)接種環(huán)滅菌。

圖1　目標(biāo)菌的半定量劃線

圖2　非目標(biāo)菌的半定量劃線

(4) 結(jié)果判定：培養(yǎng)后，評(píng)價(jià)菌落的形狀、大小和生長(zhǎng)密度，并計(jì)算生長(zhǎng)指數(shù)G。每條有比較稠密菌落生長(zhǎng)的劃線則G為1，每個(gè)培養(yǎng)皿上G最大為16。如果僅一半的線有稠密菌落生長(zhǎng)，則G為0.5。如果劃線上沒(méi)有菌落生長(zhǎng)、生長(zhǎng)量少于劃線的一半或菌落生長(zhǎng)微弱，則G為0。記錄每個(gè)平板的得分總和便得到G。如菌落在A區(qū)和B區(qū)全部生長(zhǎng)，而在C區(qū)有一半線生長(zhǎng)，則G為10[7]。

目標(biāo)菌在培養(yǎng)基上應(yīng)呈現(xiàn)典型的生長(zhǎng)。目標(biāo)菌的生長(zhǎng)指數(shù)G≥6時(shí)，培養(yǎng)基可以接受。一般非目標(biāo)菌的生長(zhǎng)指數(shù)G≤1，至少應(yīng)小于5。選擇性分離和計(jì)數(shù)固體瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)滿足目標(biāo)菌和非目標(biāo)菌半定量G的參考范圍，非選擇培養(yǎng)基滿足目標(biāo)菌的G值要求，因而一般較高。圖3為目標(biāo)菌大腸艾希氏菌在非選擇性固體計(jì)數(shù)瓊脂平板PCA上G值生長(zhǎng)情況(G=11)，圖4為目標(biāo)菌在選擇性固體分離瓊脂平板EMB上G值生長(zhǎng)情況(G=16)，圖5為非目標(biāo)菌金黃色葡萄球菌在選擇性固體分離瓊脂平板EMB上G值生長(zhǎng)情況(G=0)。

圖3　大腸埃希氏菌在PCA上G值

圖4　大腸埃希氏菌在EMB上G值

對(duì)于非選擇性增菌培養(yǎng)基、選擇性增菌培養(yǎng)基和液體計(jì)數(shù)培養(yǎng)基采用定性測(cè)試方法，檢驗(yàn)步驟：首先將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株用非選擇性肉湯進(jìn)行活化，制備成105～107CFU/mL的工作懸液，然后采用1 μL接種環(huán)取一環(huán)工作菌懸液接入待測(cè)培養(yǎng)基，按標(biāo)準(zhǔn)方法中的培養(yǎng)時(shí)間和溫度進(jìn)行培養(yǎng)。最后采用目測(cè)濁度值進(jìn)行結(jié)果判讀：0表示無(wú)渾濁，1表示很輕微的渾濁，2表示嚴(yán)重的渾濁，目標(biāo)菌的濁度值應(yīng)為2，非目標(biāo)菌濁度應(yīng)為0或1[7]。

以GB 4789.30—2010單核增生利斯特氏菌的選擇性增菌液LB1為例說(shuō)明，分別接種ATCC19115單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、ATCC25922大腸埃希氏菌、ATCC29212糞腸球菌30 ℃培養(yǎng)24 h，結(jié)果觀察：?jiǎn)魏思?xì)胞增生李斯特氏菌渾濁生長(zhǎng)，濁度為2，大腸埃希氏菌和糞腸球菌培養(yǎng)基澄清透明，濁度為0。

對(duì)于鑒定培養(yǎng)基采用定性的方法，鑒定培養(yǎng)基分液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、高層斜面培養(yǎng)基、平板培養(yǎng)基。

(1) 液體培養(yǎng)基：首先將測(cè)試菌液經(jīng)過(guò)夜培養(yǎng)后，制成0.5個(gè)麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙?，再?～2滴到測(cè)試培養(yǎng)基中，按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行培養(yǎng)后觀察，是否與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的描述一致。圖6為單核增生李斯特氏菌鼠李糖和木糖試驗(yàn)圖，木糖陰性，鼠李糖陽(yáng)性。

(2) 半固體培養(yǎng)基：取質(zhì)控菌株的新鮮斜面培養(yǎng)物，穿刺接種于半固體培養(yǎng)基，按規(guī)定的溫度進(jìn)行培養(yǎng)觀察是否符合某類(lèi)菌特有的生長(zhǎng)特性。圖7為單核細(xì)胞增生李斯特氏菌在半固體上呈傘狀生長(zhǎng)特性。

(3) 高層斜面培養(yǎng)基：取質(zhì)控菌株的新鮮斜面培養(yǎng)物，穿刺接種于培養(yǎng)基底部，并在斜面劃“之”字形，經(jīng)培養(yǎng)后觀察結(jié)果。例如大腸埃希氏菌、沙門(mén)氏菌、志賀氏菌在TSI上就呈現(xiàn)出特有的生化現(xiàn)象：大腸埃希氏菌底層和斜面全部變黃，并產(chǎn)生大量氣體，培養(yǎng)基沖破；沙門(mén)氏菌斜面呈磚紅色，底層全部變黑；志賀氏菌斜面呈磚紅色，底層呈黃色，不產(chǎn)氣，圖8分別為對(duì)照、志賀氏菌、沙門(mén)氏菌、大腸埃希氏菌在TSI上呈現(xiàn)的生化特征。

圖6　木糖和鼠李糖反應(yīng)

圖7　半固體培養(yǎng)基上的動(dòng)力試驗(yàn)

圖8　不同菌在TSI上反應(yīng)特征

(4) 平板培養(yǎng)基：顯色培養(yǎng)基屬于最常用的平板鑒別培養(yǎng)基，通常來(lái)說(shuō)常見(jiàn)不同細(xì)菌在目標(biāo)菌顯色培養(yǎng)基會(huì)呈現(xiàn)不同的菌落和顏色特征，例如北京陸橋生產(chǎn)的沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基，目標(biāo)菌沙門(mén)氏菌在該培養(yǎng)基上呈現(xiàn)紫紅色菌落，非沙門(mén)氏菌在該顯色培養(yǎng)基形成藍(lán)綠色菌落、無(wú)色菌落或者是抑制不生長(zhǎng)。

對(duì)于生化試劑、診斷血清、微生物生化鑒定試劑盒等的驗(yàn)收可按照是否具有選擇性或指示性進(jìn)行區(qū)分，并參照GB 4789.28—2013中5.2.3.2和附錄E對(duì)于具體類(lèi)別的規(guī)定進(jìn)行技術(shù)性論證。如不能完全進(jìn)行區(qū)分的，可以直接用相應(yīng)的質(zhì)控菌進(jìn)行測(cè)試看是否符合要求。例如API20E試劑條，可以采用大腸埃希氏菌和沙門(mén)氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行測(cè)試，看是否相應(yīng)菌的特性。對(duì)于生物梅里埃的VITEK生化鑒定條，其使用說(shuō)明中就規(guī)定了各種類(lèi)別的鑒定條相應(yīng)的陰性和陽(yáng)性質(zhì)控菌，只要采用相應(yīng)的指控菌上機(jī)使用，看能否驗(yàn)證出檢出的菌與選用的指控菌相符。對(duì)于診斷血清的質(zhì)量控制，只能選用相應(yīng)血清型的菌逐一進(jìn)行驗(yàn)證。

對(duì)于經(jīng)驗(yàn)收合格的培養(yǎng)基和試劑方能投入使用，否則按照各自實(shí)驗(yàn)室的規(guī)定進(jìn)行處置。

2.3培養(yǎng)基和生化試劑在貯存過(guò)程中的質(zhì)量控制

交貨驗(yàn)收后的培養(yǎng)基和生化試劑(包括試劑盒)，應(yīng)嚴(yán)格按照包裝物或產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上提供的貯存條件、有效期進(jìn)行保存。

一般來(lái)說(shuō)，未開(kāi)封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲(chǔ)存于25 ℃下陰涼干燥處，開(kāi)過(guò)封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意防潮，并在6個(gè)月內(nèi)用完。應(yīng)定期對(duì)儲(chǔ)存中的培養(yǎng)基試劑耗材進(jìn)行常規(guī)檢查，如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基和試劑發(fā)生結(jié)塊，顏色異常以及其他變質(zhì)現(xiàn)象，則不能使用[8]。對(duì)于耗材在儲(chǔ)存過(guò)程中如出現(xiàn)長(zhǎng)霉或形狀因溫度等原因發(fā)生變化以及其他異?，F(xiàn)象，則不能使用。已配制好并經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基、應(yīng)置于冰箱中保存，使用最好不要超過(guò)14 d。對(duì)于制備的平板，應(yīng)置于4～8 ℃冰箱進(jìn)行保存，最好避光保存，有些培養(yǎng)基見(jiàn)光影響其性能，例如BS、CN平板，放置時(shí)間最好不要超過(guò)14 d。

2.4培養(yǎng)基和生化試劑在使用過(guò)程中的質(zhì)量控制

培養(yǎng)基和生化試劑應(yīng)按照說(shuō)明方法進(jìn)行配置和滅菌方可使用。為避免因微生物繁殖而引起營(yíng)養(yǎng)成分的消耗和pH值的改變，在培養(yǎng)基和試劑煮沸溶解后應(yīng)立即進(jìn)行配置，不可放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，也不可重復(fù)滅菌。每批培養(yǎng)基在初次使用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行pH值的測(cè)量，并按標(biāo)準(zhǔn)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行pH值調(diào)整。為確保培養(yǎng)基和試劑滅菌效果達(dá)標(biāo)，應(yīng)定期對(duì)高壓滅菌設(shè)備進(jìn)行化學(xué)和生物效果檢查。對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基和試劑添加劑應(yīng)按要求進(jìn)行添加[9]。

3　結(jié)論

(1) 一次性耗材在申購(gòu)時(shí)應(yīng)盡量選擇大企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品，采取外觀質(zhì)量檢驗(yàn)驗(yàn)收和內(nèi)在質(zhì)量驗(yàn)收，對(duì)于無(wú)菌型的一次性耗材主要進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證產(chǎn)品是否達(dá)到無(wú)菌效果。為控制一次性耗材質(zhì)量，應(yīng)在陰涼干燥處進(jìn)行貯存，如長(zhǎng)時(shí)間未使用無(wú)菌型的一次性產(chǎn)品應(yīng)對(duì)其進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)的監(jiān)控，以確保不影響檢測(cè)結(jié)果。

(2) 培養(yǎng)基和試劑是食品微生物實(shí)驗(yàn)室中用得最為廣泛的試劑耗材，直接決定了檢測(cè)結(jié)果，因而在申購(gòu)、驗(yàn)收、存貯、使用過(guò)程中要特別注意質(zhì)量把關(guān)。不同類(lèi)別培養(yǎng)基和試劑采用不同的方法進(jìn)行技術(shù)驗(yàn)收：對(duì)于選擇性的固體培養(yǎng)基采用目標(biāo)菌和非目標(biāo)菌的半定量方法，對(duì)于非選擇性的固體培養(yǎng)基僅采用目標(biāo)菌的半定量方法進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量驗(yàn)收；對(duì)于非選擇性增菌培養(yǎng)基、選擇性增菌培養(yǎng)基、鑒定培養(yǎng)基和選擇性液體計(jì)數(shù)培養(yǎng)基采用定性測(cè)試方法進(jìn)行驗(yàn)收。

(3) 對(duì)于商品化的成套生化試劑、染色液、血清等其它試劑可參照GB 4789.28—2013對(duì)于具體類(lèi)別的規(guī)定進(jìn)行技術(shù)性驗(yàn)收和驗(yàn)證。如不能進(jìn)行完全進(jìn)行區(qū)分的，可以直接用相應(yīng)的質(zhì)控菌進(jìn)行測(cè)試看是否符合要求。同時(shí)，各實(shí)驗(yàn)室可按照生化試劑的特征性反應(yīng)相應(yīng)的驗(yàn)收和質(zhì)控規(guī)定。

(4) 試劑耗材的質(zhì)量是食品微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的基礎(chǔ)，事關(guān)檢測(cè)工作的準(zhǔn)確性和可靠性，在檢測(cè)工作中舉足輕重。如果在申購(gòu)、驗(yàn)收、存貯、使用過(guò)程中忽視了任何一個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制，都將影響到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，食

品微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該要加強(qiáng)“料”環(huán)節(jié)中的試劑耗材的控制把關(guān)，確保檢測(cè)過(guò)程中檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確無(wú)誤。

[1] 檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2015.

[2] CNAS-CL09:2013檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明[S].北京: 中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì), 2014.

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[7] GB 4789.28—2013食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2013.

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Quality control of reagent in food microbiology laboratory

HE YanYANGTaoPENGShi-fu

(HunanInsituteofFoodQualitySupervisionandResereache,Changsha,Hunan410000,China)

As the indispensable supplies in food microbiology laboratory test, reagent supplies' quality directly affects the accuracy of the test results. To provide guidance for reagent supplies quality control, this article comprehensively analyzes the quality control of food microbiology laboratory from the respect of procurement, quality inspection & acceptance of appearance and immanency, storage, use, etc, and especially focus on internal quality acceptance of commercial medium and reagent.

microbiology laboratory; reagent; experiment supplies; quality control

賀燕(1982—)，女，湖南省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院工程師，碩士。E-mail: 45023091@qq.com

2016—04—20

10.13652/j.issn.1003-5788.2016.08.016