駱駝刺膠囊制備工藝與質(zhì)量控制研究△

徐曉琴，夏提古麗·阿不利孜，馬曉玲，魏鴻雁*，賈曉光，胡志林

(1.新疆維吾爾自治區(qū)中藥民族藥研究所，新疆 烏魯木齊 830002； 2.新疆華世丹藥業(yè)有限公司，新疆 烏魯木齊 830011)

·中藥工業(yè)·

駱駝刺膠囊制備工藝與質(zhì)量控制研究△

徐曉琴1，夏提古麗·阿不利孜1，馬曉玲1，魏鴻雁1*，賈曉光1，胡志林2

(1.新疆維吾爾自治區(qū)中藥民族藥研究所，新疆 烏魯木齊 830002； 2.新疆華世丹藥業(yè)有限公司，新疆 烏魯木齊 830011)

目的：優(yōu)選駱駝刺膠囊的制備工藝并建立其質(zhì)量控制方法。方法：以顆粒的成型率和吸濕率的綜合評分為指標(biāo)，采用正交試驗設(shè)計優(yōu)選駱駝刺膠囊制備工藝條件，并對其進(jìn)行質(zhì)量評價。結(jié)果：優(yōu)選出的工藝條件為駱駝刺浸膏粉與混合輔料(淀粉∶糊精=1∶2)按1∶3比例混勻，以濃度為70%(v/v)的乙醇制粒，用量為總質(zhì)量的12%。驗證試驗表明，優(yōu)化工藝所制備膠囊內(nèi)容物的成型率為78.47%，水分、崩解時限、微生物限度符合中華人民共和國藥典規(guī)定。結(jié)論：該制備工藝操作簡便，穩(wěn)定合理，建立的質(zhì)量控制方法可行。

駱駝刺；膠囊劑；制備工藝；質(zhì)量控制

駱駝刺Alhagipseudalhagi(M.B.)Desv為駱駝刺屬多年生豆科植物，耐干旱、耐鹽堿，具有很強的再生性和生態(tài)適應(yīng)性，是干旱沙漠地區(qū)特有的植物資源[1-2]。它不僅是固沙植物、優(yōu)質(zhì)牧草、改良鹽堿土壤的先鋒植物，還是維吾爾醫(yī)民間常用藥材。駱駝刺植物各部位分別具有不同的藥用價值，全草具有清熱解毒的作用，用于感冒發(fā)燒、胃腹?jié)駸?、腸炎痢疾，刺糖收斂消炎、滋補強壯，主要用于腹痛泄瀉、腸炎痢疾、體虛頭暈等[3]。前期課題組以藥效活性跟蹤對駱駝刺提取物不同極性部位進(jìn)行化學(xué)成分分離解析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，駱駝刺含有大量黃酮類成分[5-6]，并且藥理學(xué)實驗發(fā)現(xiàn)，此提取物對豚鼠離體腸管收縮運動有顯著的抑制作用，對腸炎的治療有一定影響[8]。因此，課題組選擇黃酮類組分含量較高的吐魯番地區(qū)的駱駝刺[9]為藥材來源，在前期研究的基礎(chǔ)上將其研發(fā)成膠囊劑，以方便臨床用藥及優(yōu)勢資源的高效利用。

1 儀器與材料

1.1 儀器

電子分析天平(Metter AE163，瑞士梅特勒-托利多公司)；電熱鼓風(fēng)干燥箱烘箱(DHG9140B，上海安亭科學(xué)儀器有限公司)；紫外可見分光光度計(BeckmanDU-7，美國貝克曼庫爾特有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(EYELA OSB-2100，上海愛朗儀器有限公司)；優(yōu)普超純水儀(UPT-I-5T，成都純化科技有限公司)；高速中藥粉碎機(DFT-50，浙江溫嶺市林大機械有限公司)；三用紫外儀(ZF-2型，上海安亭電子儀器廠)。

1.2 材料

實驗所用駱駝刺藥材采集于新疆吐魯番地區(qū)鄯善縣，經(jīng)新疆維吾爾自治區(qū)中藥民族藥研究所藥材室鑒定，符合《維吾爾藥志》標(biāo)準(zhǔn)；蘆丁(C27H30O16，中國食品藥品檢定研究院，批號：100080-200707)；薄層層析硅膠G(AR，青島海洋化工有限公司)；羧甲基纖維素鈉(AR，天津市恒興化學(xué)試劑有限公司)；無水乙醇、石油醚、氫氧化鈉、亞硝酸鈉和硝酸鋁均為分析純；大孔吸附樹脂(HPD100，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所)；淀粉(陜西奧克藥用輔料有限公司)；糊精(安徽山河藥用輔料股份有限公司)；硬脂酸鎂(浙江湖州展望藥業(yè)有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 駱駝刺膠囊工藝的優(yōu)選

2.1.1 工藝優(yōu)選指標(biāo) 成型率測定及其評分：稱取適量的樣品顆粒(W1)，依次過20目、60目篩，稱定通過20目篩而不能通過60目篩的顆粒重量(W2)，據(jù)(1)式計算成型率。以成型率100%為50分，據(jù)(2)式計算成型率評分。

(1)

(2)

(3)

(4)

2.1.2 正交試驗優(yōu)選工藝 根據(jù)單因素試驗結(jié)果確定影響膠囊內(nèi)容物質(zhì)量的因素：浸膏粉與輔料的比例(A)、乙醇濃度(B)、乙醇用量(C)，以膠囊內(nèi)容物成型率與吸濕率分值總和為評價指標(biāo)，采用L9(34)正交表安排試驗[10]，試驗設(shè)計及結(jié)果見表1，直觀分析見表2，方差分析見表3。

表1 正交試驗因素水平表

表2 L9(34)正交試驗設(shè)計與結(jié)果(n=9)

表3 以總分為指標(biāo)方差分析結(jié)果

注：F0.05(2，2)=19.00；F0.01(2，2)=99.00。

從表2直觀分析可知，各因素對綜合評分的影響順序為C>B>A，優(yōu)選的工藝條件為A1B1C3。乙醇用量是影響制粒工藝的主要因素，且方差分析結(jié)果表明,C對總評分差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，A、B對總分差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)合直觀分析與方差分析結(jié)果,初步確定優(yōu)選工藝條件為A1B1C3，即浸膏粉與混合輔料比例為1∶2，乙醇濃度為65%，用量為物料總質(zhì)量的12%。結(jié)合實際大生產(chǎn)中制軟材的難易度及其性狀，將浸膏粉與混合輔料的比例調(diào)整為1∶3，乙醇濃度為70%較為合適，因此最終的工藝確定為駱駝刺浸膏粉與混合輔料(淀粉∶糊精=1∶2)按1∶3比例混勻，乙醇濃度為70%，用量為物料重量的12%進(jìn)行制粒。

2.1.3 驗證試驗 取駱駝刺提取物適量，按優(yōu)選工藝進(jìn)行驗證，3批膠囊內(nèi)容物的平均成型率為78.47%，RSD為0.15%；平均吸濕率為11.16%，RSD值為0.59%。說明優(yōu)選的工藝條件穩(wěn)定、合理可行。

2.2 駱駝刺膠囊質(zhì)量控制研究

2.2.1 處方與制備方法 處方：駱駝刺浸膏粉100 mg。

制備方法：取駱駝刺藥材適量，粉碎過8號篩，用45%的乙醇(料液比為1∶15)80 ℃回流提取2次，每次3 h，合并提取液，室溫過濾，濾液濃縮至每毫升含生藥0.1～0.5 g。取上述濃縮液4 BV經(jīng)HPD100大孔吸附樹脂柱進(jìn)行純化，上樣流速2 BV·h-1(1 BV=130～150 L)，上樣后靜置30 min，用5 BV純化水洗脫，再用6 BV 95%乙醇洗脫，接收乙醇洗脫液，減壓干燥(0.08 MPa、60 ℃、4 h)，粉碎即得駱駝刺提取物。稱取駱駝刺提取物適量，與混合輔料(淀粉∶糊精=1∶2)按1∶3混勻，以70%乙醇作為潤濕劑制粒，60 ℃以下干燥，過篩，加0.2%硬脂酸鎂混勻，灌裝膠囊，制成1000粒。

2.2.2 質(zhì)量控制 性狀：本品為硬膠囊，內(nèi)容物為棕黃色的顆粒和粉末，味咸澀。

薄層色譜鑒別[4]：取本品粉末0.3 g，加40%的乙醇10 mL，密塞，超聲處理5.0 min，濾過，取濾液作為供試品溶液。另取駱駝刺原藥材0.4 g、駱駝刺提取物0.1 g同法制備；取蘆丁對照品，加甲醇制成質(zhì)量濃度為0.2 mg·mL-1的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗，吸取上述溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶1)為展開劑展開，取出晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外燈(365 nm)下檢視。結(jié)果顯示，供試品與對照品在相應(yīng)的色譜位置上顯相同的黃色熒光斑點，見圖1。

注：1～3.3批膠囊內(nèi)容物；4.駱駝刺藥材；5.駱駝刺提取物；6.蘆丁對照品。圖1 駱駝刺膠囊劑內(nèi)容物TLC色譜圖

檢查[4]：按《中華人民共和國藥典》2015年版一部膠囊劑項下有關(guān)規(guī)定進(jìn)行檢測，3批膠囊內(nèi)容物水分含量、裝量差異、崩解時限、微生物限量檢查結(jié)果均符合規(guī)定。

總黃酮的含量測定：1)對照品溶液的制備，精密稱取干燥至恒重的蘆丁對照品適量，置50 mL容量瓶中，用60%乙醇溶解并定容，得到質(zhì)量濃度為0.1 mg·mL-1的蘆丁對照品溶液。2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制，分別精密量取對照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL，置于25 mL容量瓶中，加60%乙醇溶液至10 mL，依次加入1 mL 5%亞硝酸鈉溶液，搖勻，放置6 min后，再加入1 mL 10%硝酸鋁溶液，搖勻，放置6 min后，再加入4%氫氧化鈉溶液4 mL，再加60%乙醇，定容，搖勻，放置15 min后在510 nm處測定吸光度值。以吸光度值為縱坐標(biāo)，蘆丁濃度(mg·mL-1)為橫坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到回歸方程Y= 12.502X-0.006 2(r=0.999 3)，結(jié)果蘆丁在0.004 8～0.058 mg·mL-1呈良好的線形關(guān)系。3)供試品溶液的制備及測定，準(zhǔn)確稱取駱駝刺膠囊內(nèi)容物0.5 g，用60%濃度的乙醇溶解，并定容至25 mL，再精密吸取1 mL，用60%乙醇稀釋至50 mL容量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的方法，自加“60%乙醇溶液至10 mL”起，依法測定吸光度值，計算總黃酮的含量?？傸S酮含量(%)=C×V×D/W×100%[式中C為總黃酮顯色稀釋后的濃度(mg·mL-1)，V為稀釋后的體積，D為樣品的稀釋倍數(shù)，W為樣品的質(zhì)量]。4)樣品測定，取三批駱駝刺膠囊，按供試品制備方法制備供試品，并測定總黃酮的含量，結(jié)果見表4。

表4 駱駝刺膠囊中總黃酮含量測定結(jié)果(n=3)

3 討論

課題組前期針對駱駝刺藥材的化學(xué)成分及抗炎、抑菌等藥理活性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，駱駝刺藥材含黃酮類、生物堿類、脂肪族類、甾醇類、氨基酸類、多糖類等多種化學(xué)成分[5-6]。而藥理學(xué)實驗表明，駱駝刺提取物對豚鼠離體腸管收縮運動有顯著的抑制作用，提示駱駝刺藥材對腸炎痢疾等癥的治療有一定影響。因此，課題組在前期研究的基礎(chǔ)上，采用乙醇提取、大孔樹脂柱精制技術(shù)對駱駝刺藥材中總黃酮物質(zhì)群進(jìn)行富集制備，將其開發(fā)成膠囊劑以滿足維吾爾醫(yī)臨床需求。

駱駝刺藥材中黃酮成分主要有蘆丁、槲皮素、山柰酚等。本實驗選取蘆丁為對照品，對該制劑進(jìn)行TLC定性鑒別及UV定量檢測[11]，結(jié)果顯示，所建立的定性鑒別方法斑點清晰、無陰性干擾、專屬性強；以蘆丁為對照品的UV法進(jìn)行總黃酮含量的測定，可以有效控制制劑的質(zhì)量。

[1] 李君山，劉勇民，蔡少青.維吾爾醫(yī)用駱駝刺類藥材的資源、商品流通及民間應(yīng)用研究[J].中國民族醫(yī)藥雜志，1996，2(2)：39.

[2] 劉瑛心.中國沙漠植物志[M].北京：科學(xué)出版社，1985.

[3] 劉勇民.維吾爾藥志：上冊[M].新疆：科技衛(wèi)生出版社，1999.

[4] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[5] 艾來提·蘇力坦，迪麗努爾·塔力甫，阿布力米提·阿布卡德爾，等.新疆駱駝刺(Alhagipseudoalhagi)黃酮類化合物的研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2005，17(5)：1-2.

[6] 張貴杰，李寧，熊元君，等.駱駝刺地上部分化學(xué)成分的分離與鑒定[J].中國現(xiàn)代中藥，2010，12(5)：16-18.

[7] 熊元君，賈曉光，等.維吾爾藥駱駝刺提取物的抑菌試驗研究[J].新疆中醫(yī)藥，2009，27(6)：29-31.

[8] 賈曉光，張雪梅，熊元君，等.維藥駱駝刺提取物藥理活性研究[J].新疆中醫(yī)藥，2009，27(5)：18-20.

[9] 石磊嶺，魏鴻雁，徐曉琴，等.新疆不同產(chǎn)地駱駝刺中總黃酮的含量比較[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2014，37(1)：51-53.

[10] 張亞輝，顧政一，邢建國，等.蒿藍(lán)無糖感冒顆粒成型工藝研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2010，21(10)：561-563.

[11] 徐曉琴，魏鴻雁，石磊嶺，等.維藥駱駝刺質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐，2012，26(6)：68-71.

PreparationProcessandQualityControlofAlhagiCapsule

XU Xiaoqin1，Xiatiguli·A BUlIZI1，MA Xiaoling1，WEI Hongyan1*，JIA Xiaoguang1，HU Zhilin2

(1.XinJiangInstituteofChineseTraditionalMedicaandEthicalMateriaMedica，Urumqi830002，China；2.XinJiangHuaShiDanPharmaceuticalCompany，Urumqi830011，China)

Objective：To optimize Alhagi capsule preparation process and establish its quality control method.Methods：The comprehensive score of particles forming rate and moisture absorption rate were selected as indexes，the preparation process conditions of Alhagi capsule were optimized using orthogonal test design，and its quality was evaluated.Results：The optimized the process conditions were as follows：the mixed ratio of Alhagi extract powder and mixed materials (starch，dextrin = 1：2) was 1：3，the dosage of 70% ethanol was 12% and.The verification test showed that the particle forming rate was 78.47%.The moisture，disintegration time limit，microbial limit conformed to the requirements of the Chinese pharmacopoeia.Conclusion：The preparation technology is simple，stable and reasonable，the quality control method is feasible.

Alhagi pseudoalhagi；capsule；preparation process；quality control

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.10.020

2016-01-15)

2015兵團科技計劃社會發(fā)展科技攻關(guān)與成果轉(zhuǎn)化計劃(2015AD005)

*

魏鴻雁，研究員，研究方向：中藥質(zhì)量控制與藥效機制；Tel：(0991)2662160，E-mail：whywlmq@sina.com