不同土壤條件下懷牛膝質量評價△

杜真輝，董誠明，2*，夏偉，魏碩

(1.河南中醫(yī)學院藥學院，河南 鄭州 450000；2.呼吸疾病河南省協(xié)同創(chuàng)新中心，河南 鄭州 450000)

不同土壤條件下懷牛膝質量評價△

杜真輝1，董誠明1，2*，夏偉1，魏碩1

(1.河南中醫(yī)學院藥學院，河南 鄭州450000；2.呼吸疾病河南省協(xié)同創(chuàng)新中心，河南 鄭州450000)

目的：評價3種不同土壤條件下懷牛膝的質量。方法：對壚土地、沙土地、黏土地栽培的牛膝，進行水分、灰分、外觀性狀、醇溶性浸出物、β-蛻皮甾酮和牛膝多糖的比較分析。結果：3種不同土壤條件下牛膝的水分、灰分、醇溶性浸出物均符合藥典規(guī)定；經變異系數(shù)權重法分析，品質為壚土地>沙土地>黏土地。結論：懷牛膝栽培以壚土地為宜。

懷牛膝；變異系數(shù)權重法；不同土壤條件；質量評價

牛膝即莧科牛膝屬植物牛膝AchyeanthesbidentataBI.的干燥根，為著名的四大懷藥之一，具有逐瘀通經、補肝腎、強筋骨、利尿通淋等功效，臨床用于經閉、痛經、腰膝酸痛等癥[1]?，F(xiàn)代研究表明，牛膝根含有二萜皂苷、甾體類、糖類等化合物，并含有鉀鹽及多種微量元素[2]，其中，研究較多的生理活性物質為牛膝甾酮和牛膝多糖，牛膝甾酮具有促進蛋白質的合成、抑制由藥物引起的血糖升高、降低膽固醇以及使受損的細胞再生等作用[3]；牛膝多糖具有提高肌體免疫功能、抑制腫瘤生長及抗衰老等多種生理活性[4]。

河南焦作的武陟、溫縣、沁陽等地位于太行山腳下，南臨黃河，北依沁河，為懷牛膝的主產地，由于其地理位置的特殊性，土地可以分為臨近黃河的沙土地和臨近太行山的壚土地[5]，兩者均為懷牛膝的主要栽培土壤。

有研究表明，近幾年山東、江蘇、遼寧、安徽、山西、河北等省引種栽培懷牛膝，但蛻皮甾酮含量較低[6]，河南省內也有部分市區(qū)嘗試引種栽培懷牛膝。河南禹州為禹白芷、南星、漏蘆等藥材的道地產區(qū)，氣溫溫和，土層深厚，多屬黏土[7]，近年有懷牛膝的引種栽培，但未見有相關質量研究。本實驗就上述三種不同土壤條件下懷牛膝的質量進行科學評價，以指導懷牛膝的規(guī)范化生產。

1 材料與方法

1.1試驗材料

采自河南溫縣的壚土地栽培牛膝(編號1)、沙土地栽培牛膝(編號2)、采自河南禹州的黏土地栽培牛膝(編號3)。以上樣品經河南中醫(yī)學院董誠明教授鑒別為牛膝AchyeanthesbidentataBI.。

1.2方法

1.2.1外觀性狀檢測 使用直尺測定根長，使用游標卡尺測定根粗。

1.2.2水分、灰分、醇溶性浸出物、β-蛻皮甾酮測定 按照《中華人民共和國藥典》2010版規(guī)定方法進行檢測。

β-蛻皮甾酮標準曲線的繪制：分別吸取濃度為32μg·mL-1的β-蛻皮甾酮的對照品溶液2.5、5、7.5、10、12.5μL，注入高效液相，以峰面積對進樣量進行線性回歸，得到回歸方為：Y=2.6E+5X-92769；r=0.9996。

1.2.3多糖的提取及測定 牛膝多糖標曲的繪制：標準葡萄糖溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mL，分別加水補足2mL，加入6%苯酚溶液1mL，迅速加入5mL濃硫酸混勻，靜置10min，在490nm條件下進行測量，以葡萄糖濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，做標準曲線，得出回歸方程為：Y=2.7315X；r=0.9997。

樣品的制備及測定：取干燥的牛膝粉末10g，按照1∶10的比列加入80%乙醇，采用加熱回流法提取2次，每次1h，濾渣加熱揮干乙醇后，用40倍水分三次(20倍+10倍+10倍)回流提取，分別提取1.5h、0.5h、0.5h，合并濾液，濃縮。濃縮液中加入95%乙醇至含醇量達到80%，邊加邊攪拌，得灰白色沉淀。靜置12h后離心分離沉淀，取固體部分再重復溶解、沉淀、離心分離操作至乙醇液澄清無色為止。沉淀以少許蒸餾水溶解，使用Sevag法除蛋白3次。收集清液，再加入4倍乙醇醇析，至4℃條件下靜置12h，沉淀加95%洗滌兩次，得牛膝粗多糖[8]。牛膝多糖的測定，采用硫酸-苯酚比色法測定[9]。

2 結果與分析

2.1牛膝外觀性狀及水分、灰分

經測定3種不同土壤條件下牛膝的根長、根粗、水分、灰分及醇溶性浸出物結果如下：

表1 不同土壤條件下牛膝的根長、根粗、水分、灰分及醇溶性浸出物

3種不同土壤條件下的牛膝，根呈細長圓柱形，多彎曲，上端較粗，下端較細，溫縣牛膝多呈現(xiàn)灰黃色，少見淡棕色，禹州牛膝多呈現(xiàn)淡棕色，均有稀疏的側根痕，橫長皮孔突起，質堅硬，易折斷，斷面平坦，淡棕色或黃棕色，微呈角質樣，中心木質部黃白色，外周散在黃白色點狀維管束，排列為輪狀，多為3輪，偶見2輪或4輪，由表1可知，引種禹州栽培牛膝的根長與根粗均顯著低于原產地。

根據(jù)《中華人民共和國藥典》2010版規(guī)定，牛膝藥材的水分不超過15.0%，總灰分不超過9.0%，浸出物不少于6.5%。由表1可知，3種不同土壤條件下的牛膝均符合藥典規(guī)定。

2.2變異系數(shù)權重法評定牛膝質量

2.2.1指標成分的測定結果β-蛻皮甾酮含量與多糖含量的結果如表2所示，以兩者為指標性成分，運用變異系數(shù)權重法對3種不同土壤條件下懷牛膝質量進行評價[10]。

表2 β-蛻皮甾酮、多糖含量 (%)

2.2.2 變異系數(shù)權重法評價 變異系數(shù)法能夠避免因單位不同或者均數(shù)不同對評價指標變異程度的影響，在不同的土壤條件中，某指標Xi取值差異越大，則該指標的可變性較大，較難實現(xiàn)，從而更能反映被評價對象的水準。

權重是指各個評價指標在整個指標體系中的權數(shù)，直接影響最終的評價結果，目前很多的指標權重是依靠專家的主觀判斷，結果不能得到客觀的反映。本文使用變異系數(shù)權重法，能夠直接利用指標信息求得權重，盡可能消除人為主觀影響，使權重更加切合實際情況，更加準確地評價3種不同栽培模式牛膝的質量。

變異系數(shù)權重法的具體步驟如下：

②計算第i項評價指標的標準差

③計算第i項評價指標的均值

④權重的確定

⑤綜合得分Wi=Xi×Ai

按照以上公式，計算可得結果如表3所示。

表3 指標計算結果

根據(jù)表3計算出的權重Ai，帶入⑤項下的公式可以計算出不同土壤條件下的綜合得分：

表4 綜合得分及排名

由表4可以看出，壚土地栽培下的牛膝質量較優(yōu)，黏土地栽培牛膝質量較差。

3 討論

溫縣懷牛膝生長土壤主要為黃河、沁河沖積沉積物，其特殊的氣候條件與地貌組合等生態(tài)環(huán)境，使其成為懷牛膝的道地產區(qū)之一。壚土地養(yǎng)分與水分適中，適合懷牛膝的生長，與朱魯?shù)热搜芯肯嘁恢耓11]。沙土地土質輕，沙性重，養(yǎng)分缺乏，水分保留時間短，其品質次于壚土地栽培；黏土地質地較重，養(yǎng)分含量高，但土壤通透性較差，水分不易流失，不利于牛膝的生長，所得牛膝品質較差。綜上所述，牛膝栽培土壤以壚土地為佳。

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[5] 張慶嶺.壚土鐵棍山藥與沙土鐵棍山藥的性狀比較[J].中醫(yī)臨床研究，2012，4(21)：34.

[6] 張翠英，梁生旺，張廣強.不同產地牛膝中蛻皮甾酮的含量[J].中國藥學雜志，2001，36(10)：399-700.

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[10] 侯小龍，熊苗苗，朱紅蓮，等.不同品系子蓮荷葉中荷葉堿和槲皮素的含量測定及品質評價[J].中國醫(yī)院藥學雜志，2013，33(8)：666-668.

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QualityAssessmentforAchyrantheswithDifferentSoilCondition

DUZhenhui1，DONGChengmin1，2*，XIAWei1，WEIShuo1

(1.HenanUniversityofTCMCollegeofMedicine，Zhengzhou450000；2.RespiratorydiseasesinHenanprovinceCollaborativeInnovationCenter，Zhengzhou450000，China)

Objective：To evaluate the quality ofAchyranthesbidentatain3different soil condition.Methods：The comparative analysis of moisture，ash，content ethanol-soluble extractives，β-ecdysone andpolysaccharides ofA.bidentatawere carried out in different soil condition，including loessial soil cultivation，sand land cultivation，viscosity land cultivation.Results：The moisture and ash content ofA.bidentata，from3different cultivation models，were up to specification of the Chinese pharmacopoeia.The artificial loessial soil cultivation was proved to bebetter andmechanical loessial soil cultivationwas proved to be worse according to the method of weighted mean and the principal component analysis.Conclusion：In the progress of cultivation ofA.bidentata，selecting the artificial loessial soil cultivation is appropriate and the artificial loessial soil cultivation ofA.bidentatestill needs further standardized research.

Achyranthesbidentata；weighted mean and the principal component analysis；different soil condition；quality evaluation

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.9.017

2015-12-23)

河南省科技廳(14204428)

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董誠明，教授，研究方向：主要從事中藥資源的開發(fā)利用；Tel：(0371)65680041，Email：dcm371@hactcm.edu.cn