地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵、微生物區(qū)系及血液生化指標(biāo)影響

張永根，王一臻，李　洋，張幸怡，林　聰，張廣寧

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱　150030）

地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵、微生物區(qū)系及血液生化指標(biāo)影響

張永根，王一臻，李洋，張幸怡，林聰，張廣寧

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱150030）

選擇四頭體重600 kg裝有永久性瘤胃瘺管荷斯坦奶牛，試驗(yàn)分為4組，分別為基礎(chǔ)日糧組及基礎(chǔ)日糧+10、20和30 g地頂孢霉培養(yǎng)物組（干物質(zhì)基礎(chǔ)）。采用4×4拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)，共4期，每期15 d。日糧中添加地頂孢霉培養(yǎng)物可降低瘤胃液pH，提高瘤胃中NH3-N、TVFA、乙酸和丙酸濃度并調(diào)節(jié)瘤胃部分微生物相對(duì)菌群數(shù)量，同時(shí)增加血液中血糖和球蛋白濃度，降低β-羥丁酸、非酯化脂肪酸和谷丙轉(zhuǎn)氨酶濃度。地頂孢霉培養(yǎng)物可改善瘤胃發(fā)酵環(huán)境，維持瘤胃代謝穩(wěn)定，對(duì)奶牛機(jī)體無(wú)不良影響。結(jié)果表明，30 g·頭-1·d-1為最適添加量。

地頂孢霉培養(yǎng)物；奶牛；瘤胃發(fā)酵；微生物區(qū)系；血液生化參數(shù)

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間2016-8-24 15:04:00[URL]http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20160824.1504.018.html

張永根,王一臻,李洋,等.地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵和微生物區(qū)系及血液生化指標(biāo)影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2016,47 (8):60-66.

Zhang Yonggen,Wang Yizhen,Li Yang,et al.Effect ofAcremonium terricolaculture on ruminal fermentation,microflora and blood biochemical parameters in dairy cows[J].Journal of Northeast Agricultural University,2016,47(8):60-66.(in Chinese with English abstract)

補(bǔ)充外源添加劑可調(diào)控瘤胃微生物區(qū)系生長(zhǎng)，改善瘤胃發(fā)酵功能[1]?？股仡?lèi)添加劑應(yīng)用受限，非抗生素飼料添加劑開(kāi)發(fā)受關(guān)注[2]。因此，找到一種改善瘤胃發(fā)酵功能、調(diào)控瘤胃微生物作用的新型非抗生素飼料添加劑具有重要意義。

古尼蟲(chóng)草是寄生于土中的蝙蝠蛾科昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)復(fù)合體[3]。其藥理成分與冬蟲(chóng)夏草相似，包括蟲(chóng)草多糖、蛋白質(zhì)和氨基酸、D-甘露醇、蟲(chóng)草素、生物堿、抗菌活性物質(zhì)、免疫抑制劑等[4]。但價(jià)格昂貴限制其在動(dòng)物生產(chǎn)中應(yīng)用。地頂孢霉培養(yǎng)物是由古尼蟲(chóng)草提取的地頂孢霉菌SDAY培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)后，經(jīng)察氏培養(yǎng)基液體擴(kuò)大培養(yǎng)和固體發(fā)酵室培養(yǎng)得到滅活的真菌飼料添加劑，由于功能性成分相似，可作為天然古尼蟲(chóng)草替代物質(zhì)。魏建忠等研究表明，地頂孢霉培養(yǎng)物能加快仔豬生長(zhǎng)速率并提高仔豬免疫能力[5]。蟲(chóng)草素能促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體，加強(qiáng)體液免疫應(yīng)答，具有很強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)功能[6]。地頂孢霉培養(yǎng)物能提高蛋鴨體重、產(chǎn)蛋率、改善鴨蛋品質(zhì)，顯著增加蛋殼厚度[7-8]。Joonmo等指出，蟲(chóng)草菌絲體（與地頂孢霉培養(yǎng)物成分相似）可改善奶牛瘤胃微生物發(fā)酵功能，提高產(chǎn)氣量和瘤胃中揮發(fā)性脂肪酸（VFA）濃度，促進(jìn)纖維素濾紙消化[9]，增加瘤胃微生物纖維分解菌和纖維素酶活性[10]。國(guó)內(nèi)研究多針對(duì)地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)仔豬及蛋鴨影響，反芻動(dòng)物方面，特別是有關(guān)地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)瘤胃發(fā)酵和微生物區(qū)系影響研究相對(duì)較少。本試驗(yàn)旨在研究地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵、瘤胃微生物區(qū)系和血液生化指標(biāo)影響，確定地頂孢霉培養(yǎng)物調(diào)控效果與適宜劑量，為地頂孢霉培養(yǎng)物在奶牛業(yè)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物和日糧組成

地頂孢霉培養(yǎng)物（Acremonium terricola culture，ATC）購(gòu)自合肥邁可羅生物工程有限公司，是由古尼蟲(chóng)草中提取地頂孢霉菌經(jīng)人工發(fā)酵得到滅活的真菌類(lèi)添加劑，含有26.84%粗蛋白（CP），5.00%粗纖維（CF），3.06%粗脂肪（EE），4.04%粗灰分（Ash）和61.06%無(wú)氮浸出物（NFE），干物質(zhì)基礎(chǔ)。其中功能性成分含量為：蟲(chóng)草酸84.50 g·kg-1，蟲(chóng)草多糖44.60 g·kg-1，蟲(chóng)草素0.432 g·kg-1，甾醇0.597 g·kg-1，總氨基酸218.1 g·kg-1。

試驗(yàn)選用4頭裝有永久性瘤胃瘺管的健康荷斯坦奶牛，體重均在600 kg，拴飼。預(yù)試期與正式期日糧一致，玉米青貯，羊草及苜蓿作粗飼料。先粗后精，于每日早晚6:00準(zhǔn)確飼喂日糧，全天自由飲水，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1　基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平Table 1　Ingredient and chemical composition of the diet

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用4×4拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分為A組、B組、C組和D組。A組：基礎(chǔ)日糧；B組：基礎(chǔ)日糧+10 g地頂孢霉培養(yǎng)物（干物質(zhì)基礎(chǔ)）/天；C組：基礎(chǔ)日糧+20 g地頂孢霉培養(yǎng)物/天；D組：基礎(chǔ)日糧+30 g地頂孢霉培養(yǎng)物/天。預(yù)飼期晨飼前，將地頂孢霉培養(yǎng)物與100 g基礎(chǔ)日糧混合，預(yù)飼奶牛，完全采食后繼續(xù)飼喂其他基礎(chǔ)日糧[11]，試驗(yàn)分4期，每期預(yù)飼期15 d，正式期3 d。

1.3樣品采集和指標(biāo)測(cè)定

1.3.1樣品采集與保存

分別于正式期3 d內(nèi)，晨飼后0、2、4、6、8、10和12 h對(duì)試驗(yàn)牛取瘤胃液50 mL，4層紗布過(guò)濾并當(dāng)場(chǎng)測(cè)定瘤胃液pH，離心后采集上清液存放于10 mL離心管，加入25%偏磷酸1 mL固氮，于-20℃冰箱保存，待測(cè)瘤胃液VFA和NH3-N濃度。

于正式期3 d內(nèi)，對(duì)所有牛頸靜脈采血10 mL，1次性真空采血管（規(guī)格：無(wú)添加劑管）收集，離心制得血漿，5 mL離心管收集，-20℃冷凍保存，待測(cè)血液生化指標(biāo)。

1.3.2瘤胃液pH測(cè)定

采樣后立即測(cè)定pH，儀器采用Sartorius Basic pH Meter PB-20型酸度計(jì)。

1.3.3瘤胃液NH3-N測(cè)定

瘤胃液NH3-N采用馮宗慈等比色法測(cè)定[12]。

1.3.4瘤胃液VFA濃度測(cè)定

氣相色譜儀(島津GC-2010，日本)測(cè)定瘤胃液中TVFA、乙酸、丙酸和丁酸含量[13]。

1.3.5血液生化指標(biāo)測(cè)定

采用意大利Fully全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清生化指標(biāo)：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT），谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST），甘油三酯（TG），膽固醇（CHOL），高密度脂蛋白（HDL），低密度脂蛋白（LDL），血清尿素氮（BUN）和血糖（GLU），總蛋白（TP），白蛋白（ALB），球蛋白（GLB），堿性磷酸酶（ALP），β-羥丁酸（BH?BA），非酯化脂肪酸（NEFA）。試劑盒均購(gòu)自北京中生北控生物科技股份有限公司，具體方法參見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.3.6瘤胃原蟲(chóng)數(shù)量和菌群測(cè)定

于正式期最后2 d，晨飼后0、2、4、6、8、10和12 h采集瘤胃液，檢測(cè)瘤胃細(xì)菌數(shù)量。采用珠磨-十六烷基三甲基溴化銨（CTAB）法提取瘤胃液總DNA[14]。風(fēng)干后DNA溶于TE緩沖液，于-20℃待測(cè)。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定所提取總DNA濃度和純度，確保OD260與OD280比值在1.6～1.8。通過(guò)熒光定量PCR方法檢測(cè)瘤胃液總菌，普雷沃氏菌（Prevotella），黃色瘤胃球菌（Ruminococcus flavefa?ciens），白色瘤胃球菌（Ruminococcus albus），產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌（Fibrobacter succinogenes），牛鏈球菌（Streptococcus bovis），溶纖維丁酸弧菌（Butyrivibrio fibrisolvens）和原蟲(chóng)（Protozoal population）相對(duì)含量，引物參考文獻(xiàn)[15]，全序列引物見(jiàn)表2。熒光定量所用儀器為ABI 7500型熒光定量PCR儀，Realtime PCR SYBR Green I RT-PCR試劑盒購(gòu)自大連寶生物公司。Real-time PCR擴(kuò)增反應(yīng)參數(shù)包括95℃變性7 min，55℃1 min，72℃3 min，35個(gè)循環(huán)；72℃延伸7 min。

根據(jù)測(cè)得閾值循環(huán)（Ct），計(jì)算目標(biāo)菌的相對(duì)菌群數(shù)量（Relative population size，RPS）[16]。

表2　熒光定量PCR引物Table 2　Primers used for RT-PCR detection of microbial species

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

按照4×4拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)，采用SAS 9.1.2軟件包中PROC MIXED程序作數(shù)據(jù)分析。

模型如下：

其中，Yijk為因變量值，μ為總體平均值，Ti為處理（i=1-3），Pj為試驗(yàn)期（j=1-3），Ck為試驗(yàn)牛（k=1-3），Eijk為殘差值。

P<0.05代表差異顯著，結(jié)果用平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2　結(jié)果與分析

2.1地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵影響

地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵影響見(jiàn)表3，與A組相比，B、C、D組極顯著提高瘤胃中NH3-N濃度，C組和D組提高瘤胃液中總揮發(fā)酸（TVFA）和乙酸濃度且差異極顯著（P<0.01），其中D組極顯著提高瘤胃液中丙酸濃度（P<0.01）并顯著降低瘤胃pH（P< 0.05）。丁酸濃度各組間無(wú)顯著差異（P>0.05）。

2.2地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛瘤胃菌群影響

由表4可知，與A組相比，D組可顯著提高瘤胃中原蟲(chóng)相對(duì)菌群數(shù)量（P<0.05），其他各組差異不顯著（P>0.05）。試驗(yàn)組黃色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌和溶纖維丁酸弧菌相對(duì)菌群數(shù)量極顯著高于A組（P<0.01），其中D組黃色瘤胃球菌相對(duì)數(shù)量極顯著高于B組（P<0.01），白色瘤胃球菌和溶纖維丁酸弧菌各試驗(yàn)組間差異不顯著（P>0.05）。C組和D組普雷沃氏菌和牛鏈球菌相對(duì)數(shù)量極顯著高于A組（P<0.01）。但與A組相比，試驗(yàn)組產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌相對(duì)數(shù)量極顯著降低（P<0.01）。

2.3地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)影響

由表5可知，地頂孢霉培養(yǎng)物可極顯著提高奶牛血液中血糖濃度（P<0.01）。B組、C組和D組血糖濃度極顯著高于A組（P<0.01），其中C組和D組血液中球蛋白濃度極顯著高于A組（P<0.01），但B組和A組相比無(wú)顯著差異。C組和D組顯著降低血液中β-羥丁酸濃度（P<0.05），其中D組顯著降低血液中非酯化脂肪酸和谷丙轉(zhuǎn)氨酶濃度（P<0.05）。此外，添加地頂孢霉培養(yǎng)物可提高血液中堿性磷酸酶濃度，但各組間差異不顯著（P>0.05）。

綜合以上分析可知，地頂孢霉培養(yǎng)物最佳添加量為30 g·頭-1·d-1。

表3　地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵影響Table 3　Effects of Acrermonium terricola culture on ruminal fermentation in dairy cows

表4　地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)瘤胃微生物影響Table 4　Effects of Acremonium terricola culture on ruminal microflora

表5　地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)影響Table 5　Effects of Acrermonium terricola culture on the blood biochemical parameters of dairy cows

3　討論與結(jié)論

3.1地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)瘤胃發(fā)酵影響

評(píng)價(jià)瘤胃發(fā)酵效率一般采用瘤胃pH、VFA和NH3-N濃度及瘤胃菌群數(shù)量等指標(biāo)[17]。瘤胃微生物結(jié)構(gòu)與數(shù)量是決定瘤胃發(fā)酵功能重要因素，瘤胃微生物對(duì)日糧蛋白質(zhì)降解與自身合成速度直接影響NH3-N濃度[18]。研究表明，瘤胃微生物活性較強(qiáng)時(shí)產(chǎn)生相對(duì)較多VFA[17]。揮發(fā)酸產(chǎn)量則直接決定pH。

pH是評(píng)價(jià)瘤胃發(fā)酵狀況綜合性指標(biāo)，主要受唾液、日糧組成、瘤胃中揮發(fā)性脂肪酸和可消化碳水化合物等因素影響。本試驗(yàn)中，乙酸濃度、黃色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌與原蟲(chóng)相對(duì)菌群數(shù)量均顯著升高，最大劑量組pH降低可能由于地頂孢霉培養(yǎng)物促進(jìn)原蟲(chóng)和部分纖維分解菌增殖，提高日糧中纖維降解產(chǎn)生大量揮發(fā)酸所致。Krause等指出，瘤胃中VFA濃度增加也可導(dǎo)致瘤胃pH下降[19-20]。Yeo等研究表明，具有與地頂孢霉培養(yǎng)物相同功能性成分的蛹蟲(chóng)草菌絲能增加瘤胃體外產(chǎn)氣量和揮發(fā)酸產(chǎn)量，降低瘤胃pH[10]，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

NH3-N是瘤胃微生物生長(zhǎng)繁殖所需主要氮源之一，濃度反映瘤胃細(xì)菌微生物對(duì)NH3-N利用速度和日糧中氮降解速度平衡關(guān)系[21]。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)組普雷沃氏菌和原蟲(chóng)數(shù)量高于對(duì)照組，NH3-N濃度提高由于地頂孢霉培養(yǎng)物促進(jìn)普雷沃氏菌和原蟲(chóng)增殖。研究表明，普雷沃氏菌在蛋白降解菌中數(shù)量最多[22]。原蟲(chóng)也參與蛋白降解過(guò)程[23]。因此，地頂孢霉培養(yǎng)物調(diào)節(jié)部分瘤胃微生物菌群數(shù)量改善日糧中蛋白質(zhì)降解程度。另一方面，地頂孢霉培養(yǎng)物含有豐富蛋白質(zhì)、氨基酸等重要功能性成分[6]，日糧中添加地頂孢霉培養(yǎng)物可提高瘤胃中微生物可利用蛋白濃度，使更多蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為NH3-N，提高瘤胃內(nèi)NH3-N濃度。

瘤胃發(fā)酵是反芻動(dòng)物獨(dú)特的營(yíng)養(yǎng)生理功能，VFA可直接評(píng)價(jià)瘤胃發(fā)酵功能[17]。瘤胃內(nèi)VFA產(chǎn)生菌代謝能力增強(qiáng)或數(shù)量增加可提高瘤胃VFA濃度，增加碳水化合物降解速率[22]，改善瘤胃內(nèi)環(huán)境。因此，本試驗(yàn)中，瘤胃TVFA、乙酸和丙酸濃度提高可能與地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)原蟲(chóng)和部分纖維分解菌和非纖維分解菌相對(duì)數(shù)量增殖作用有關(guān)。黃色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌、普雷沃氏菌和原蟲(chóng)在改善瘤胃發(fā)酵功能方面發(fā)揮重要作用，以上菌種相對(duì)數(shù)量顯著提高改善瘤胃發(fā)酵功能，提高飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)瘤胃降解速率[22]，產(chǎn)生大量乙酸、丙酸。Yeo等通過(guò)體外發(fā)酵試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)蛹蟲(chóng)草菌絲能顯著提高體外產(chǎn)氣量和揮發(fā)酸產(chǎn)量[10]，這與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

3.2地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛瘤胃菌群影響

瘤胃內(nèi)微生物主要包括原蟲(chóng)和瘤胃細(xì)菌、真菌等。對(duì)反芻動(dòng)物而言，瘤胃微生物數(shù)量和結(jié)構(gòu)與粗飼料消化利用關(guān)系密切。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加地頂孢霉培養(yǎng)物提高部分纖維分解菌和非纖維分解菌數(shù)量，但產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌數(shù)量卻有所降低。Ahn等指出，蟲(chóng)草素和蟲(chóng)草菌絲與某些次級(jí)代謝產(chǎn)物具有抑制產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌生長(zhǎng)作用[24-25]，證明地頂孢霉培養(yǎng)物可調(diào)節(jié)瘤胃菌群結(jié)構(gòu)，改善瘤胃內(nèi)環(huán)境。Yeo等通過(guò)體外發(fā)酵試驗(yàn)證明蛹蟲(chóng)草菌絲能增加瘤胃內(nèi)總微生物數(shù)量，提高纖維分解菌數(shù)量和纖維酶活性[10]。蟲(chóng)草類(lèi)物質(zhì)及功能性成分具有增加益生菌數(shù)量潛力[26]。通過(guò)上述分析，可推斷日糧中添加地頂孢霉培養(yǎng)物能提高奶牛瘤胃中部分纖維分解菌和非纖維分解菌數(shù)量，促進(jìn)日糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分解，提高日糧在瘤胃中發(fā)酵潛力，但作用機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。

3.3地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)影響

GLU和NEFA、BHBA是衡量反芻動(dòng)物能量狀態(tài)重要指標(biāo)。研究表明，血液中高濃度NEFA和BHBA屬于酮病病理學(xué)特征[27-28]。血液中NEFA和BHBA濃度升高是能量負(fù)平衡主要特征，同時(shí)血糖濃度降低，使奶牛免疫力下降，影響奶牛生產(chǎn)性能。李國(guó)鵬指出，低GLU會(huì)導(dǎo)致血液中NEFA和BHBA升高[29]。遲景波發(fā)現(xiàn)，奶牛血液中GLU濃度與NE?FA和BHBA濃度呈負(fù)相關(guān)[30]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，地頂孢霉培養(yǎng)物可顯著降低血液中NEFA和BHBA濃度，可能是由于地頂孢霉培養(yǎng)物可改善奶牛機(jī)體能量負(fù)平衡狀態(tài)。因此推測(cè)GLU升高是NEFA和BHBA濃度降低關(guān)鍵。NEFA為T(mén)G分解產(chǎn)物，蟲(chóng)草多糖能保持TG較低水平，并預(yù)防肝臟疾病和心血管疾病[31]。本試驗(yàn)中，B、C、D 3組TG含量降低，也可能由于地頂孢霉培養(yǎng)物對(duì)TG低水平維持作用導(dǎo)致其分解產(chǎn)物NEFA濃度相對(duì)降低。

正常情況下，血液中ALT和AST含量較低。血液中ALT和AST含量升高一般緣于貯藏于肝臟中ALT和AST釋放作用[32]。地頂孢霉培養(yǎng)物中蟲(chóng)草多糖等功能性成分是D組血漿中ALT濃度顯著降低主要原因。余伯成等發(fā)現(xiàn)，蟲(chóng)草多糖能抑制ALT和AST釋放，顯著降低ALT和AST活力水平，使肝細(xì)胞存活率上升[31]，與本試驗(yàn)結(jié)果相似。

動(dòng)物機(jī)體肝臟合成是血清中蛋白主要來(lái)源，肝臟受損可能導(dǎo)致血清中蛋白含量降低，注射免疫抑制劑(環(huán)磷酰胺)會(huì)致使小鼠總蛋白、球蛋白、白蛋白降低[33]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，地頂孢霉培養(yǎng)物可提高奶牛血漿中球蛋白含量。余伯成等指出，蛹蟲(chóng)草多糖能顯著降低環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠免疫抑制作用，提高環(huán)磷酰胺所致免疫損傷小鼠血清蛋白含量，保護(hù)肝臟[31]，與本試驗(yàn)結(jié)果相似。

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EffectofAcremoniumterricolacultureonruminalfermentation, microflora and blood biochemical parameters in dairy cows/ZHANG

Yonggen,WANG Yizhen,LI Yang,ZHANG Xingyi,LIN Cong,ZHANG Guangning(School of Animal Science and Technology,NortheastAgricultural University,Harbin 150030,China)

Four ruminally cannulated multiparous Holstein cows averaging 600 kg of body weight were used in a 4×4 latin square design.Trials were basal diet group and basal diet+10,20 and 30 g ACT (dry matter basis),each lasting 15 d,a total of four supplementation of ATC could reduce the rumen pH, improve concentration of NH3-N,TVFA,acetate and propionate,and regulate relative population size of ruminal microorganism.Supplementation of ATC could improve the concentration of blood glucose and globulin,and reduce the concentration of beta hydroxybutyric acid,non-esterified fatty acid and alanine aminotransferase.The ATC could improve rumen fermentation and maintain stabilization of rumen metabolism,without adverse effects to dairy cow.In the present study,the optimal dose was 30 g·cow-1·d-1.

Acremonium terricolaculture;dairy cow;ruminal fermentation;microflora;blood biochemical parameters

S816

A

1005-9369（2016）08-0060-07

2016-06-07

國(guó)家奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目（CARS-37）

張永根（1962-），男，教授，博士，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)榉雌c動(dòng)物生產(chǎn)。E-mail:zhangyonggen@sina.com