綠茶茶湯對(duì)肥胖相關(guān)腸道菌群的影響

郭虹雯，許翔雨，陳瑩婕，倪莉，劉志彬

福州大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)研究所，福建省食品生物技術(shù)創(chuàng)新技術(shù)研究中心，福建 福州 350108

綠茶茶湯對(duì)肥胖相關(guān)腸道菌群的影響

郭虹雯，許翔雨，陳瑩婕，倪莉，劉志彬*

福州大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)研究所，福建省食品生物技術(shù)創(chuàng)新技術(shù)研究中心，福建 福州 350108

近年來(lái)，飲茶調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)的效果受到廣泛關(guān)注。本研究通過(guò)將綠茶茶湯與志愿者新鮮糞樣混合培養(yǎng)，使用熒光原位雜交技術(shù)考察不同發(fā)酵時(shí)間點(diǎn)（0、6、12、24 h）綠茶茶湯對(duì)與肥胖密切相關(guān)的腸道菌群（包括總菌、擬桿菌門微生物和厚壁菌門微生物）的影響，從而評(píng)估綠茶茶湯調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)作用的效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，綠茶茶湯在體外糞樣混合培養(yǎng)體系中發(fā)酵 24 h時(shí)，對(duì)于腸道中總菌、擬桿菌門微生物以及厚壁菌門微生物的數(shù)量減少有抑制效果（P<0.05），并可以改善腸道中擬桿菌門與厚壁菌門的相對(duì)豐度，降低厚壁菌門與擬桿菌門比例（F/B），這為飲茶對(duì)改善腸道健康、減肥降脂作用提供了一定的理論參考。

綠茶茶湯；腸道菌群；肥胖；擬桿菌門微生物；厚壁菌門微生物

據(jù)《經(jīng)濟(jì)學(xué)人》的數(shù)據(jù)顯示，中國(guó)超過(guò)四分之一的成年人處于超重或肥胖的狀態(tài)［1］，最新數(shù)據(jù)表明中國(guó)已超過(guò)美國(guó)成為全球第一肥胖國(guó)［2］，肥胖正成為我國(guó)最為嚴(yán)重而緊迫的公共衛(wèi)生問(wèn)題。目前，眾多學(xué)者認(rèn)為肥胖與腸道菌之間存在著一定的聯(lián)系。2004年，美國(guó)華盛頓大學(xué)Gordon實(shí)驗(yàn)室首次報(bào)道了腸道菌群與肥胖相關(guān)［3］，之后他們?cè)谛∈蠛腿梭w腸道菌群中發(fā)現(xiàn)與肥胖相關(guān)的菌群特征，研究指出在肥胖小鼠和人群腸道的厚壁菌門（Firmicutes）和擬桿菌門（Bacteroidetes）微生物的比例（F/B）相對(duì)于清瘦個(gè)體而言更高［4］。還有研究報(bào)道腸道中厚壁菌門微生物每增加20%，擬桿菌門微生物每減少20%，宿主的能量攝入就增加約 150 kcal［5］，大量研究認(rèn)為 F/B是衡量肥胖的一個(gè)指標(biāo)［6-7］。

茶葉含有豐富的多酚類化合物且本身不含熱量，其抗肥胖及體重控制效果得到廣泛的認(rèn)可，早在《本草拾遺》中就有“茶，去人脂，久食令人瘦”的記載［8］。目前也有大量文獻(xiàn)報(bào)道了茶葉，尤其是綠茶，具有減肥、降脂等功效［9-13］。但茶葉的抗肥胖機(jī)理多從脂肪組織、肝臟等作為靶標(biāo)進(jìn)行研究，還鮮有以腸道菌群為靶標(biāo)所開展的研究。本研究以采集的人體新鮮糞便中的腸道菌群為研究對(duì)象，通過(guò)熒光原位雜交技術(shù)（FISH），考察綠茶茶湯對(duì)肥胖相關(guān)的腸道菌群的影響，從調(diào)控腸道菌群的角度初步探索綠茶茶湯的抗肥胖機(jī)理。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

市售綠茶（特級(jí)碧螺春），由福建公泰茶葉有限公司提供。Merck Millipore Ltd GTTP02500 0.2 μm聚碳酸酯濾膜，上海碧云天熒光淬滅封片液，MITSUBISHI GAS CHEMICAL CO.，INC.厭氧袋、厭氧產(chǎn)氣袋，磷酸鹽緩沖液（0.01 mol·L-1，pH 7.2～7.4），4%多聚甲醛固定液，5×雜交液；FISH使用的專用 16 S rRNA寡合苷酸單鏈探針由生工生物工程（上海）有限公司合成，在探針的5′端上標(biāo)記Alexa Fluor 488染料，使用時(shí)用去離子水稀釋至 50 ng·μL-1，染料在藍(lán)色激發(fā)波長(zhǎng)下發(fā)出綠光，可以清晰的分辨出菌體細(xì)胞形態(tài)，探針詳細(xì)信息見表1。

1.2儀器與設(shè)備

上海精宏TSQ-280型生化培養(yǎng)箱，上海智誠(chéng)ZWY-2102C型雙層恒溫培養(yǎng)振蕩器，日本尼康公司TE2000S尼康倒置熒光顯微鏡。

表1　熒光探針合成報(bào)告Table 1 Information of fluorescent probes

1.3方法

1.3.1綠茶茶湯制備

根據(jù)福建省當(dāng)?shù)鼐用竦娘嫴枇?xí)慣和方式制備綠茶茶湯。稱取5.0 g綠茶樣品置于燒杯中，加入 100 mL煮沸蒸餾水（90～95℃），浸泡1 min，用濾紙過(guò)濾，保留濾液，冷卻至室溫待用。

1.3.2糞便樣品采集培養(yǎng)

征集1名健康志愿者（男，21周歲，采樣前3個(gè)月未使用抗生素，也沒(méi)有腸道傳染性疾病或進(jìn)行過(guò)胃腸道手術(shù)）提供糞便樣品。在獲得其同意并簽署知情同意書后，收集其新鮮全便，迅速挖取中段糞便樣品約5 g，置于150 mL無(wú)菌三角燒瓶中，加入100 mL綠茶茶湯（對(duì)照組加入相應(yīng)的無(wú)菌水），漩渦振蕩混勻后分裝于10 mL離心管中，置于厭氧袋中37℃培養(yǎng)。

1.3.3樣品處理

培養(yǎng)0、6、12、24 h后取出相應(yīng)的樣品，震蕩漩渦均勻后置于研缽中充分研磨1 min，取1 mL于離心管中，2 700 r·min-1離心2 min后取上清液于10 mL離心管中，沉淀用1 mL生理鹽水重懸離心2次，將最終上清液統(tǒng)一定容到 3 mL；從中取 1mL菌液 10 000 r·min-1離心3 min去上清液得菌體沉淀；加入磷酸鹽緩沖液和固定液（1︰3），于4℃冰箱中固定1 h后加入等體積的無(wú)水乙醇置于-20℃下保存。每組3個(gè)平行樣。

1.3.4FISH定量分析

取1.3.3中的樣品20 μL加入雜交液300 μL，混勻后 10 000 r·min-1離心 3 min，去上清液后加入45 μL 5×雜交液懸浮，于暗室中加入5 μL對(duì)應(yīng)的探針（探針信息見表1），輕輕重懸，在避光條件下水浴加熱 1.5 h（總菌、厚壁菌門雜交溫度：50℃，擬桿菌門雜交溫度46℃）；雜交結(jié)束后，補(bǔ)充0.01 mol·L-1PBS緩沖液至200 μL，取40～200 μL通過(guò)真空抽濾裝置過(guò)濾到 0.2 μm孔徑聚碳酸酯濾膜上，滴加抗熒光猝滅劑后封片；熒光顯微鏡鏡檢時(shí)使用藍(lán)色激發(fā)光進(jìn)行鏡檢并拍攝熒光圖片；隨機(jī)選取熒光顯微鏡內(nèi)觀察的視野10個(gè)，取其細(xì)菌平均數(shù)，按照下列公式計(jì)算，并取其以 10為底的對(duì)數(shù)：

菌體細(xì)胞數(shù)目=視野平均細(xì)菌數(shù)×（過(guò)濾面積/視野面積）×稀釋倍數(shù)

其中：選用過(guò)濾半徑為8.4 mm的聚碳酸酯濾膜，其過(guò)濾面積S（S/μm2=π×84002≈2.22 ×108）；觀察的視野面積為 118×89.2=1.05 ×104μm2。

1.3.5擬桿菌門和厚壁菌門相對(duì)豐度

由FISH計(jì)數(shù)結(jié)果計(jì)算擬桿菌門和厚壁菌門數(shù)量，再由擬桿菌門和厚壁菌門與總菌的比值計(jì)算得豐度。

1.3.6數(shù)據(jù)分析

使用 SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)分析軟件中的Duncan's ANOVE（P<0.05）對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析。

2　結(jié)果與分析

2.1綠茶茶湯對(duì)腸道總菌的影響

使用細(xì)菌通用探針EUB338雜交，并使用熒光顯微鏡觀察綠茶茶湯對(duì)腸道總菌的影響，并以蒸餾水作為對(duì)照，鏡檢結(jié)果見圖1。

從圖中可以看出，EUB338探針對(duì)人腸道總菌雜交效果良好，細(xì)胞形態(tài)明顯，可以準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。經(jīng) 24 h培養(yǎng)發(fā)酵后，可粗略判斷糞便總菌數(shù)明顯下降（圖1-B，圖1-C），但添加綠茶茶湯的樣品總菌數(shù)明顯更多（圖1-C）。經(jīng)鏡檢計(jì)數(shù)獲得對(duì)照組和綠茶茶湯組在不同發(fā)酵時(shí)間總菌的變化情況（圖2）。由圖可知，隨著發(fā)酵時(shí)間的推移對(duì)照組總菌數(shù)量呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，對(duì)照組在6 h時(shí)與起始數(shù)量相比變化不大，但在12 h和24 h時(shí)對(duì)照組明顯少于起始數(shù)量（P<0.05）。而綠茶茶湯組的糞便總菌數(shù)也呈總體呈下降趨勢(shì)，但在加入綠茶茶湯24 h后，糞便總菌數(shù)顯著高于同時(shí)間的對(duì)照組。

注：A、B、C分別是對(duì)照組0 h、24 h以及實(shí)驗(yàn)組24 h發(fā)酵樣液EUB338檢測(cè)結(jié)果。Note：A，B，C were the detection results of probe Eub338 in control group 0 h，24 h and treatment group 24 h respectively.圖1 采用EUB338探針對(duì)體外厭氧發(fā)酵樣液FISH處理后熒光顯微鏡下觀察結(jié)果Fig.1 FISH results of anaerobic fermentation broth with water or infusion of green tea observed by epifluorescence microscope

圖2　體外培養(yǎng)后腸道總菌的數(shù)量Fig.2 The change of total gut bacteria in anaerobic fermentation broth

2.2綠茶茶湯對(duì)腸道擬桿菌門微生物的影響

擬桿菌門是人體腸道內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌群，屬于革蘭氏陰性嚴(yán)格厭氧菌，可分?jǐn)M桿菌（Bacteroides）、普雷沃氏菌（Prevotella）和卟啉單胞菌（Porphyromonas）三大類［14］。擬桿菌具有發(fā)酵碳水化合物、參與膽汁酸和類固醇代謝、多糖代謝、維持腸道正常等諸多生理功能，對(duì)人體健康影響重大［15］。使用擬桿菌門特異性探針 Bac1080雜交，并使用熒光顯微鏡觀察綠茶茶湯對(duì)后腸道擬桿菌門微生物的影響，并以蒸餾水作為對(duì)照，鏡檢結(jié)果見圖3。

從圖3鏡檢結(jié)果可以看出，Bac1080探針對(duì)人腸道擬桿菌門細(xì)菌雜交效果良好，細(xì)胞形態(tài)明顯，可以準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。經(jīng)24 h培養(yǎng)發(fā)酵后，可粗略判斷糞便擬桿菌門微生物的數(shù)量明細(xì)下降（圖3-B，圖3-C），但添加綠茶茶湯的樣品總菌數(shù)明顯更多（圖3-C）。經(jīng)鏡檢計(jì)數(shù)獲得對(duì)照組和綠茶茶湯組在不同發(fā)酵時(shí)間擬桿菌門的變化情況（圖4）。由圖可知，隨著發(fā)酵時(shí)間的推移對(duì)照組擬桿菌門微生物數(shù)量呈下降趨勢(shì)，對(duì)照組在6 h時(shí)與起始數(shù)量相比變化不大，但在12 h和24 h時(shí)明顯少于起始數(shù)量（P<0.05），這與總菌對(duì)照組變化趨勢(shì)相一致。而綠茶茶湯組的糞便擬桿菌微生物數(shù)量也是總體呈下降趨勢(shì)，但下降程度不大，在加入綠茶茶湯24 h后只下降0.15個(gè)拷貝數(shù)，糞便擬桿菌微生物數(shù)量顯著高于同時(shí)間的對(duì)照組。圖5是經(jīng)培養(yǎng)后擬桿菌門微生物數(shù)量的相對(duì)豐度，從圖中可以看出相比于對(duì)照組，綠茶茶湯組擬桿菌門微生物數(shù)量的相對(duì)豐度均更高，這充分說(shuō)明在體外發(fā)酵培養(yǎng)后，腸道中的擬桿菌門利用了茶湯中的物質(zhì)，促進(jìn)其自身生長(zhǎng)。另外可以發(fā)現(xiàn)在6 h時(shí)兩組的相對(duì)豐度差距最大，這有可能是因?yàn)閿M桿菌門在發(fā)酵過(guò)程中的前6 h內(nèi)更容易利用茶湯中的物質(zhì)。

2.3綠茶茶湯對(duì)腸道厚壁菌門的影響

厚壁菌門是人體及高等哺乳動(dòng)物腸道內(nèi)一大類細(xì)菌，絕大多數(shù)是梭菌綱（Clostridia）。這一類細(xì)菌屬于低 G+C含量的革蘭陽(yáng)性厭氧菌［16］。根據(jù)細(xì)菌16 S rRNA基因系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，Clostridia綱分為18個(gè)cluster（Ⅰ-Ⅸ），其中球形梭菌亞群（Clostridium coccoides group，clusterⅩⅣa）和柔嫩梭菌亞群（Clostridium leptum subgroup，cluster Ⅳ）是腸道內(nèi)最為常見的兩個(gè)類群［17］。通過(guò)添加綠茶茶湯培養(yǎng)后測(cè)定厚壁菌門的變化情況并與對(duì)照組進(jìn)行比較。

圖3　采用Bac1080探針對(duì)體外厭氧發(fā)酵樣液FISH處理后熒光顯微鏡下觀察結(jié)果Fig.3 FISH results of anaerobic fermentation broth with water and infusion of green tea observed by epifluorescence microscope注：A、B、C分別是對(duì)照組0 h、24 h以及實(shí)驗(yàn)組24 h發(fā)酵樣液Bac1080檢測(cè)結(jié)果。Note：A，B，C were the detection results of probe Bac1080 in control group 0 h，24 h and treatment group 24 h.

圖4　體外培養(yǎng)腸道擬桿菌門微生物的數(shù)量變化Fig.4 The change of bacteroidetes in anaerobic fermentation broth

圖5　綠茶茶湯體外培養(yǎng)腸道擬桿菌門微生物的相對(duì)豐度Fig.5 The relative abundance of bacteroidetes in anaerobic fermentation broth

注：A、B、C分別是對(duì)照組0 h、24 h以及實(shí)驗(yàn)組24 h發(fā)酵樣液LGC354檢測(cè)結(jié)果。Note：A，B，C were the detection results of probe LGC354 in control group 0 h，24 h and treatment group 24 h.圖6 采用LGC354探針對(duì)體外厭氧發(fā)酵樣液FISH處理后熒光顯微鏡下觀察結(jié)果Fig.6 FISH results of anaerobic fermentation broth with water and infusion of green tea observed by epifluorescence microscope

從圖6中可以看出，使用LGC345探針可以檢測(cè)腸道菌群中的厚壁菌門微生物，也可以直觀地看出其數(shù)量明顯少于總菌和擬桿菌門微生物，并且數(shù)量變化不明顯，24 h對(duì)照組（圖6-B）與綠茶茶湯組（圖 6-C）相差不多。經(jīng)鏡檢計(jì)數(shù)獲得對(duì)照組和綠茶茶湯組在不同發(fā)酵時(shí)間厚壁菌門微生物數(shù)量的變化情況，結(jié)果見圖7。由圖可知，隨著發(fā)酵時(shí)間的推移對(duì)照組厚壁菌門微生物數(shù)量呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，對(duì)照組在6 h時(shí)與起始數(shù)量相比變化不大，但在12 h時(shí)及12 h后明顯少于0、6 h（P<0.05）。而綠茶茶湯組的糞便厚壁菌門微生物數(shù)量也總體呈下降趨勢(shì)，在 0～12 h變化趨勢(shì)不明顯，但在24 h明顯少于前3個(gè)時(shí)間段，在加入綠茶茶湯 24 h后糞便厚壁菌門微生物數(shù)量顯著高于同時(shí)間的對(duì)照組，比對(duì)照組 24 h的高32.39%。圖8是不同發(fā)酵時(shí)間厚壁菌門微生物數(shù)量的相對(duì)豐度。從圖中可以發(fā)現(xiàn)隨著發(fā)酵時(shí)間推移，對(duì)照組厚壁菌門微生物數(shù)量的相對(duì)豐度逐漸變高，12 h、24 h時(shí)間段與0 h均有顯著性差異（P<0.05），而綠茶茶湯組在發(fā)酵24 h后其相對(duì)豐度要顯著小于對(duì)照組，這可能是因?yàn)樵诎l(fā)酵過(guò)程中茶湯中的物質(zhì)能夠促進(jìn)擬桿菌門微生物的生長(zhǎng)，從而在一定程度上抑制厚壁菌門微生物的優(yōu)勢(shì)。這一結(jié)果也說(shuō)明加入綠茶茶湯培養(yǎng)后可以有效改變厚壁菌門微生物數(shù)量的相對(duì)豐度，從而調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu)。

2.4綠茶茶湯對(duì)腸道厚壁菌門和擬桿菌門比值的影響

擬桿菌門和厚壁菌門是對(duì)肥胖易感的兩類細(xì)菌，在眾多的文獻(xiàn)中報(bào)道，其組成和比值在一定程度上可以反映人體肥胖情況。圖 9是體外共培養(yǎng)體系中不同發(fā)酵時(shí)間綠茶茶湯組厚壁菌門與擬桿菌門微生物的比值與對(duì)照組的比較。圖中可以看出對(duì)照組的F/B值隨發(fā)酵時(shí)間增加而緩慢增加，在24 h驟增（P<0.05），而綠茶茶茶湯組該值則緩慢降低，在24 h時(shí)顯著低于對(duì)照組（P<0.05），說(shuō)明加入茶湯培養(yǎng)一定時(shí)間后可以降低腸道中厚壁菌門和擬桿菌微生物數(shù)量的比例，這與許多研究結(jié)果相一致。張?chǎng)蔚龋?8］研究茶葉兒茶素對(duì)腸道微生態(tài)的調(diào)節(jié)作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，兒茶素可以顯著促進(jìn)有益菌的生長(zhǎng)并且抑制有害菌的增殖，茶多酚對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌（C.perfringens）、金黃色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）以及副溶血弧菌（Vibrioparahaemolyticus）都有抑制作用［19］，綠茶提取物可以增強(qiáng)雙歧桿菌（Bifidobacterium spp.）的生長(zhǎng)［20］。

圖7　綠茶茶湯體外培養(yǎng)腸道厚壁菌門微生物的數(shù)量Fig.7 The number of Firmicutes in anaerobic fermentation broth

圖8　綠茶茶湯體外培養(yǎng)腸道厚壁菌門微生物的相對(duì)豐度Fig.8 The relative abundance of Firmicutes in anaerobic fermentation broth

圖9　體外厭氧共培養(yǎng)體系中厚壁菌門與擬桿菌門微生物的比值（F/B）Fig.9 The ratio of Firmicutes and bacteroidetes in anaerobic fermentation broth

3　結(jié)論

由于難以直接獲取志愿者腸道內(nèi)容物，因此目前體外評(píng)估食物成分對(duì)人體腸道菌群的影響多采用接近人結(jié)腸內(nèi)菌群結(jié)構(gòu)的糞便作為體外發(fā)酵模型的起始菌群，并通過(guò)環(huán)境控制（如調(diào)節(jié) pH、添加培養(yǎng)基等）來(lái)模擬腸道環(huán)境。張寧等［21］通過(guò)加入酵母浸膏、蛋白胨、血清素、多種離子等作為培養(yǎng)基模擬人體腸道的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，并調(diào)節(jié)通用培養(yǎng)基的pH至6.7，37℃培養(yǎng)，充入氮?dú)庠O(shè)置厭氧環(huán)境，接種人體新鮮糞便懸浮液進(jìn)行探究大蒜果聚糖是否有益生功能，Anna Pompei等［22］通過(guò)在通用培養(yǎng)基中加入兩種不同類型的果聚糖間歇式靜態(tài)厭氧培養(yǎng)，探究其調(diào)節(jié)腸道菌群的作用。但在糞便中額外添加營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)而探討研究對(duì)象的腸道菌群調(diào)節(jié)作用這種模式可能會(huì)掩蓋研究對(duì)象對(duì)腸道微生物的較為微弱的作用。如營(yíng)養(yǎng)豐富的酵母浸膏、蛋白胨、血清素、多種離子等培養(yǎng)基成分或通用培養(yǎng)基對(duì)腸道菌群的作用可能高于本研究所探討的茶葉成分的作用。且這些額外營(yíng)養(yǎng)成分的添加也不符合實(shí)際的生理過(guò)程，因?yàn)榕囵B(yǎng)基中的蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉、小分子糖等成分基本會(huì)被小腸吸收，到達(dá)大腸的主要物質(zhì)為纖維等無(wú)法消化吸收的成分，即糞便殘?jiān)?。因此，本研究以新鮮糞便作為腸道菌的主要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，并構(gòu)建厭氧環(huán)境，模擬實(shí)際腸道菌群的生存環(huán)境，在此基礎(chǔ)上考察綠茶茶湯的腸道菌群調(diào)節(jié)功能。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng) 24 h共培養(yǎng)后，糞便總菌和擬桿菌門、厚壁菌門微生物數(shù)量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，這與 Guergoletto K B 等［23］研究Euterpe edulis在體外發(fā)酵后其總菌數(shù)量降低結(jié)論一致；Fernando Sánchez-Patán等［24］探究蔓越莓和葡萄籽多酚提取物對(duì)調(diào)節(jié)腸道菌群作用時(shí)也發(fā)現(xiàn)隨著發(fā)酵時(shí)間的推移，大腸中總菌、擬桿菌的數(shù)量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。主要原因可能是體外腸道環(huán)境難以完美模擬。但即使在這一簡(jiǎn)單模式下，相比于對(duì)照組，綠茶茶湯可以抑制腸道總菌、擬桿菌門微生物、厚壁菌門微生物的下降趨勢(shì)，說(shuō)明腸道中擬桿菌及厚壁菌可能可利用茶多酚增殖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，糞便中的擬桿菌門和厚壁菌門微生物對(duì)綠茶茶湯的利用效率不同，厚壁菌門微生物的綠茶利用效率更低，反映在綠茶組在24 h后 F/B值顯著低于對(duì)照。該結(jié)果與 QIAO等［25］所開展的研究結(jié)果相一致，其動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，白藜蘆醇可以恢復(fù)高脂飲食導(dǎo)致的腸道菌群失調(diào)，并降低厚壁菌門-擬桿菌門微生物的比值，Cowan T E等［26］研究了咖啡、多酚可恢復(fù)肥胖小鼠腸道菌失調(diào)，包括降低F/B，抑制肥胖相關(guān)梭菌屬的生長(zhǎng)。厚壁菌門與擬桿菌門微生物數(shù)量比例的改變會(huì)帶來(lái)腸道菌群結(jié)構(gòu)的改變，這種改變可能會(huì)進(jìn)一步引起機(jī)體肥胖狀況的變化。Turnbaugh PJ等［27］給予肥胖志愿者低脂飲食1年后，其體重出現(xiàn)下降，而體內(nèi)的革蘭氏陽(yáng)性厚壁菌門比例下降，革蘭氏陰性擬桿菌門微生物比例上升這一結(jié)果證明了這種猜想；動(dòng)物模型中腸道無(wú)菌小鼠給予高脂飲食并不引起肥胖，而接種肥胖小鼠盲腸細(xì)菌后顯示出明顯的體重增加［28］，這同樣也說(shuō)明了腸道菌群的改變會(huì)影響肥胖狀況。可見，綠茶茶湯可以在體外改變與肥胖相關(guān)的腸道菌群，進(jìn)而可能影響體重下降。本研究的結(jié)果對(duì)進(jìn)一步了解茶葉的抗肥胖功效提供了一個(gè)新的思維角度。

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Effect of Green Tea Infusions on Obesity-associated Gut Microbiota

GUO Hongwen，XU Xiangyu，CHEN Yingjie，NI Li，LIU Zhibin*

Institute of Food Science and Technology，F(xiàn)uzhou University，F(xiàn)ujian Center of Excellence for Food Biotechnology，F(xiàn)uzhou 350108，China

In recent years，the effect of tea on intestinal microflora attracted widespread attention.In this study，the green tea infusion with human fecal was mixed，the change of intestinal flora related to obesity in different fermentation time points（0，6，12，24 h）were measured and the role of tea regulated intestinal microflora was evaluated.The results showed that green tea infusion inhibited the reduction of total gut bacteria，Bacteroides and Firmicutes after fermentation for 24 h（P<0.05），improved the relative abundance of Bacteroides and Firmicutes，reduced the F/B ratio，which provides a reference to support the important role of green tea infusion in improving intestinal health，reducing weight and lowering blood lipid.

green tea infusion，intestinal bacteria，obesity，Bacteroides，F(xiàn)irmicutes

TS272.5+；R574

A

1000-369X（2016）04-354-09

2016-04-01

2016-05-08

國(guó)家自然科學(xué)基金資助（31501494）

郭虹雯，女，碩士研究生，主要從事茶葉生理功能方面的研究。*通訊作者：liuzhibin@fzu.edu.cn