可吸收骨釘、骨板（聚乳酸）浸提液對(duì)家兔的皮膚刺激性試驗(yàn)研究

李會(huì)影 劉建璇 毋英杰（吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 130012）

可吸收骨釘、骨板（聚乳酸）浸提液對(duì)家兔的皮膚刺激性試驗(yàn)研究

李會(huì)影 劉建璇 毋英杰
（吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 130012）

目的 觀察可吸收骨釘、骨板（聚乳酸）浸提液經(jīng)家兔皮膚敷貼片給樣后，所產(chǎn)生的皮膚刺激反應(yīng)情況。方法 可吸收骨釘、骨板（聚乳酸）浸提液經(jīng)家兔皮膚刺激性試驗(yàn)，分別在1、24、48、72 h密切觀察，并記錄動(dòng)物一般狀態(tài)和刺激部位，在自然光下，用肉眼觀察并記錄皮內(nèi)注射部位有無紅斑和水腫情況后，正常飼養(yǎng)，每天觀察直至到21 d。結(jié)果 可吸收骨釘、骨板（聚乳酸）浸提液對(duì)家兔的皮膚刺激試驗(yàn)無皮膚刺激性反應(yīng)，與對(duì)照組比較無明顯變化。結(jié)論 可吸收骨釘、骨板（聚乳酸）浸提液對(duì)家兔的皮膚刺激試驗(yàn)無皮膚刺激性反應(yīng)。

可吸收骨釘；骨板（聚乳酸）浸提液；試驗(yàn)

1　資料與方法

1.1受試樣品。①浸提材料：可吸收骨釘、骨板（聚乳酸）浸提液，樣品批號(hào)：0903，滅菌批號(hào)：M090201，規(guī)格：φ2.0 mm×10 mm，溶劑：0.9%生理鹽水；保存條件：2～8 ℃冷藏保存；本品為無菌液體，樣品由長(zhǎng)春圣博瑪生物材料有限公司提供，浸提液由吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院制備。②浸提液制備：用無菌鑷子取出骨釘放入0.9%氯化鈉溶液中，按浸提比例，（表面積或質(zhì)量/體積）±10%，0.2 g/mL重復(fù)操作把比例骨釘都放入生理鹽水中，每日無菌攪拌3次，每次2 h。24小時(shí)1天，72小時(shí)3天。并將密封好的生理鹽水豎直立在37 ℃水浴鍋中固定好，計(jì)時(shí)。

1.2器材：70%（V/V）乙醇，剪毛剪、脫毛劑（冰王靚膚脫毛膏，平輿冰王生物工程有限公司，國妝特字G20090683）棉簽，注射器。0.9%氯化鈉注射液，批號(hào)：S09011301，內(nèi)蒙古康源藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。

1.3動(dòng)物：健康大耳白兔6只，雌雄不拘，體質(zhì)量2～4 kg，由長(zhǎng)春高新醫(yī)學(xué)動(dòng)物試驗(yàn)研究中心提供。合格證號(hào)：SCXK-（吉）-2007-0002。

1.4飼養(yǎng)條件：動(dòng)物室為普通級(jí)，室溫：18～22 ℃，相對(duì)溫度：40%～60%。通風(fēng)換氣次數(shù)≥14次/小時(shí)，光照良好，采用標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)?；\具50 cm×30 cm×30 cm，雌雄分籠飼養(yǎng)，每籠1只動(dòng)物（標(biāo)記級(jí)別及每只動(dòng)物編號(hào)）。

1.5試驗(yàn)方法［1］

1.5.1浸提液的制備：試驗(yàn)人員在萬級(jí)工作室取樣品和浸提溶劑在百級(jí)潔凈工作臺(tái)按無菌操作：用無菌鑷子取出骨釘放入0.9%氯化鈉溶液中，按浸提比例，（表面積或質(zhì)量/體積）±10%，0.2 g/mL重復(fù)操作把比例骨釘都放入生理鹽水中，每日無菌攪拌3次，每次2 h。24小時(shí)1天，72小時(shí)3天。并將密封好的生理鹽水豎直立在37 ℃水浴鍋中固定好（保證瓶口不沾水），計(jì)時(shí)。

1.5.2用量及試驗(yàn)方法：家兔在實(shí)驗(yàn)前24 h的脊柱兩側(cè)各剪剃10 cm ×15 cm區(qū)域兔毛，作為試驗(yàn)和觀察部位。用2.5 cm×2.5 cm透氣性好的敷料（吸收性紗布?jí)K）覆蓋接觸部位，然后用繃帶固定敷貼片至少4 h。接觸期結(jié)束后取下敷貼片，用持久性墨水對(duì)接觸部位進(jìn)行標(biāo)記。以動(dòng)物頭部方向?yàn)闇?zhǔn)，分別在脊柱一側(cè)選定為試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照組區(qū)，另一側(cè)為對(duì)照組區(qū)和試驗(yàn)區(qū)。將浸提液滴到2.5 cm×2.5 cm吸收性紗布?jí)K上，浸提液用量以能浸透紗布?jí)K為宜，一般每塊紗布滴0.5 mL。

1.5.3浸提液?jiǎn)未谓佑|試驗(yàn)：按上述方法將浸提液?jiǎn)未危?4 h）滴入試驗(yàn)區(qū)，生理鹽水滴入對(duì)照區(qū)，在敷貼24 h后，除去敷貼片，記錄1、24、48、72 h各接觸部位的皮膚刺激反應(yīng)情況。

1.5.4浸提液多次接觸試驗(yàn)：按上述方法將浸提液多次（24 h滴注4次）滴入試驗(yàn)區(qū)，生理鹽水滴入對(duì)照區(qū)，在敷貼24 h后，除去敷貼片，記錄1、24、48、72 h各接觸部位的皮膚刺激反應(yīng)情況。

1.6皮膚反應(yīng)記分標(biāo)準(zhǔn)及皮膚反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：見表1。

表1　皮膚反應(yīng)記分系統(tǒng)

按表1記分標(biāo)準(zhǔn)，分別計(jì)算每只動(dòng)物浸提液和同批次的陰性對(duì)照生理鹽水注射部位的紅斑、水腫刺激記分，用浸提液的記分減去同批次的陰性對(duì)照生理鹽水刺激記分，即為每只動(dòng)物原發(fā)性刺激記分；每只動(dòng)物原發(fā)性刺激記分相加，再除以動(dòng)物總數(shù)為原發(fā)性刺激指數(shù)（PII）。見表2。

表2　兔刺激反應(yīng)類型

按表2的皮膚反應(yīng)平均記分，來評(píng)價(jià)浸提液的皮膚反應(yīng)類型。見表3。

表3　人體皮膚刺激試驗(yàn)分級(jí)

按表3人體皮膚反應(yīng)分級(jí)，結(jié)合本試驗(yàn)對(duì)家兔的皮內(nèi)刺激所產(chǎn)生的皮膚記分系統(tǒng)和分型，均為無反應(yīng)，等級(jí)為0。

2　試驗(yàn)結(jié)果

按表1皮膚反應(yīng)記分系統(tǒng)，觀察有無紅斑和焦痂形成，并記錄相應(yīng)分值，見表4。

表4　浸提液?jiǎn)未谓佑|家兔紅斑反應(yīng)試驗(yàn)記分表

按表1皮膚反應(yīng)記分系統(tǒng)，觀察有無水腫形成，并記錄相應(yīng)分值，見表5。

表5　浸提液?jiǎn)未渭彝盟[反應(yīng)試驗(yàn)記分表

按表1皮膚反應(yīng)記分系統(tǒng)，觀察有無紅斑和焦痂形成，并記錄相應(yīng)分值，見表6。

表6　浸提液多次接觸家兔紅斑反應(yīng)試驗(yàn)記分表

按表1皮膚反應(yīng)記分系統(tǒng)，觀察有無水腫形成，并記錄相應(yīng)分值，見表7。

表7　浸提液多次家兔水腫反應(yīng)試驗(yàn)記分表

根據(jù)表4～7的浸提液?jiǎn)未?、多次敷貼片刺激家兔紅斑反應(yīng)試驗(yàn)記分和家兔水腫反應(yīng)試驗(yàn)記分情況，參照表2的皮膚反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，每只家兔原發(fā)性刺激記分為零，相加也為零，再除以所有試驗(yàn)的3只家兔的總數(shù)的原發(fā)性刺激指數(shù)（PII）也為零，所以判定可吸收骨釘、骨板（聚乳酸）浸提液對(duì)家兔的皮膚刺激性試驗(yàn)的皮膚反應(yīng)分級(jí)級(jí)別為“無”。

3　結(jié) 論

可吸收骨釘、骨板（聚乳酸）浸提液對(duì)家兔的皮膚刺激試驗(yàn)無皮膚刺激性反應(yīng)，與自身對(duì)照比較，無任何皮膚刺激反應(yīng)發(fā)生［2］。

［1］ 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn):GB/T 16886-2005/ISO10993-10:2002醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià) 第10部分［S］.

［2］ 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn):GB/T 16886.12-2005/ISO10993-12: 2002 醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià) 第12部分［S］.

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B

1671-8194（2016）22-0038-02