電位滴定法測定山楂及其炮制品總有機酸的含量

張慧，夏厚林，楊孟妮，鄧放

電位滴定法測定山楂及其炮制品總有機酸的含量

張慧，夏厚林，楊孟妮，鄧放

目的：采用電位滴定法測定山楂及其炮制品總有機酸的含量。方法：采用pH計進行電位滴定，記錄V值及對應(yīng)的pH值，繪制ΔpH/ΔV～V曲線，確定滴定終點。結(jié)果：滴定終點突躍明顯，精密度、重復(fù)性及穩(wěn)定性良好；山楂回收率為97.8％、RSD為0.68％，炒山楂回收率為97.93％、RSD為0.95％，焦山楂回收率為96.56％、RSD為1.45％，山楂炭回收率為95.93％、RSD為1.65％。5批樣品及其對應(yīng)炮制品的總有機酸含量為山楂6.95％～7.04％，炒山楂7.01％～7.17％，焦山楂5.27％～5.31％，山楂炭3.16％～3.24％。結(jié)論：電位滴定法能較好的表達山楂及其炮制品總有機酸的含量，各樣品總有機酸含量高低各異，表明山楂受熱程度不同其有機酸含量不同。

山楂；總有機酸；電位滴定；含量測定

山楂為薔薇科植物山里紅Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果實，其味酸、甘，微溫，具有消食健胃，行氣散瘀之功效［1］，臨床上山楂除生用外還有炮制品炒山楂、焦山楂和山楂炭等［2］?，F(xiàn)代藥理研究表明山楂中有機酸具有消食開胃的作用，且三萜酸另有降血脂和降壓作用，有機酸含量較高時對胃腸刺激作用大，炮制后則一定程度上降低了有機酸的含量［3］。

中國藥典2010版山楂含量測定項下方法為以酚酞作指示劑，用標準NaOH進行滴定，以枸櫞酸計算總有機酸含量。試驗中發(fā)現(xiàn)總有機酸提取液顏色過深（黃棕色-紅棕色），對滴定終點（微紅色）干擾嚴重。依據(jù)電位滴定法原理，滴定終點可根據(jù)ΔpH/ ΔV～V的相關(guān)曲線來確定，具有客觀可靠、易于自動操作、不受溶液顏色干擾等優(yōu)點［4］。故本實驗采用電位滴定法開展了山楂及其炮制品總有機酸含量測定的相關(guān)研究。

1 儀器與材料

1.1儀器

DF-101S恒溫加熱磁力攪拌器，PHS-25雷磁pH計（依法分別用pH=6.86、pH=4.00的緩沖液進行校正），BS124S電子分析天平，25 mL堿式滴定管。

1.2材料

實驗用山楂購自成都市荷花池藥材市場（批號分別為：20140405、20140406、20140407、20140408、20140409），經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)盧先明教授鑒定為薔薇科植物山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果實，經(jīng)檢驗符合中國藥典2010版要求。參照中國藥典2010版山楂項下依法炮制得炒山楂、焦山楂，參照文獻［5］炮制得山楂炭。各樣品粉碎，過四號篩備用。

2 方法與結(jié)果

2.1對照品溶液的制備

稱取枸櫞酸適量，加水溶解并稀釋配成0.917 mg·mL-1，即得。

2.2供試品溶液的制備

照中國藥典2010版山楂含量測定項下方法，取本品細粉約1 g，精密稱定，精密加入蒸餾水100 mL，室溫浸泡4小時，時時振搖，濾過，收集續(xù)濾液，即得。

2.3NaOH滴定液配制及標定

參照中國藥典2010版依法配制標定其濃度為0.044 mol·L-1。

2.4測定方法

精密量取供試品溶液25.00 mL，置于200 mL燒杯中，精密加入50.00 mL蒸餾水，放入恒溫磁力攪拌器中于25℃攪拌使混合均勻，用標準NaOH滴定液滴定，用pH計測定，記錄消耗NaOH的量及相應(yīng)的pH值，繪制△pH/△V～V的滴定曲線，結(jié)果見圖1～圖5。由圖可見山楂及其炮制品的電位滴定突躍明顯。

圖1　枸櫞酸滴定圖

圖2山楂滴定圖

圖3　炒山楂滴定圖

圖4　焦山楂滴定圖

圖5　山楂炭滴定圖

圖6　V～△V關(guān)系圖

2.5方法學(xué)考察

取同一批次藥材依法考察，精密度試驗RSD為0.17％；重復(fù)性試驗RSD分別為山楂0.56％、炒山楂0.67％、焦山楂0.81％、山楂炭1.13％；穩(wěn)定性試驗RSD分別為山楂0.61％、炒山楂0.68％、焦山楂0.93％、山楂炭1.05％；加樣回收率試驗平行五份，山楂回收率為97.8％、RSD為0.68％，炒山楂回收率為97.93％、RSD為0.95％，焦山楂回收率為96.56％、RSD為1.45％，山楂炭回收率為95.93％、RSD為1.65％。表明該法可靠性良好。

2.6含量測定

依法測定五批山楂及其炮制品總有機酸含量（按干燥品以枸櫞酸C6H8O7計，每1 mLNaOH滴定液相當(dāng)于2.818 mg的枸櫞酸），結(jié)果見表1。

表1　山楂總有機酸含量測定結(jié)果（n=3）

3 討論

3.1本實驗采用電位滴定法測定山楂及其炮制品的總有機酸含量，不同炮制品總有機酸含量不同，山楂為6.95％～7.04％，炒山楂為7.01％～7.17％，焦山楂為5.27％～5.31％，山楂炭為3.16％～3.24％，與文獻［6-7］采用藥典法測定結(jié)果基本相符，表明該法有較好的適用性。

3.2本課題組前期對電位滴定法和指示劑法測定山楂總有機酸含量的方法做了比較，結(jié)果表明電位滴定法滴定過程突躍明顯，準確可靠，且易于自動化，不因顏色干擾影響終點判斷，尤其適用于提取液顏色深的山楂炮制品總有機酸的含量測定。

3.3文獻研究有采用高效液相色譜法測定山楂中枸櫞酸單體的含量［8-9］，而電位滴定法測定的是總有機酸的含量，因此在今后的研究中可考慮將高效液相色譜法與電位滴定法聯(lián)合使用，提高表達的準確性。

3.4本實驗考察并繪制了V～△V關(guān)系圖如圖6，由圖可知當(dāng)?shù)味w積在V=7.7～8.6 mL之間時，滴定變化明顯，提示需要控制好滴定速度。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［S］.一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

［2］ 中華人民共和國衛(wèi)生部藥政管理局全國中藥炮制規(guī)范［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1988：115.

［3］ 原思通.醫(yī)用中藥飲片學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001.226.

［4］ 孫毓慶，胡育筑主編.分析化學(xué)［M］.第2版.北京：科學(xué)出版社，2006：207.

［5］ 毛淑杰，李鐵林.炮制對山楂中總黃酮及總有機酸含量的影響［J］.中國中藥雜志，1989，（14）9：20.

［6］ 黃顯芬.炮制對山楂有機酸含量影響的探討［J］.廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2000，17（1）：591.

［7］ 王蘋，謝婉蘭.山楂不同炮制品中枸櫞酸含量考察［J］.中成藥，1993，15（5）：211.

［8］ 楊濱，李化，趙宇新，等.山楂炮制前后有機酸含量的變化［J］.中國中藥雜志，2004：（29）11：1057.

［9］ 楊濱，李化，湯樹良，等.高效液相色譜法測定山碴中枸椽酸的含量［J］.中國藥學(xué)雜志，2004：（39）9：697.

（責(zé)任編輯：李蕓霞）

Determination of total organic acids content in Shanzha and processed products by potentiometric titration method/

ZHANG Hui， XIA Hou-lin， YANG Meng-ni， DENG-Fang//（School of Pharmacy， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine； Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine， Ministry of Education； National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research， Development and Utilization of Chinese Medicine Resources， Chengdu 611137， Sichuan）

Objective: To detect total organic acids content in Shanzha and processed products using potentiometric titration method. Method: pH meter was used in potentiometric titration. V values and corresponding pH were recorded to draw Δ pH/ Δ V - V curve， and then the titration end point was determined. Result: Titration end point was clear. Precision， repeatability and stability were good. Recovery of Shanzha was 97.8％ with RSD of 0.68％. Recovery of Chao Shanzha was 97.93％ with RSD of 0.95％. Recovery of Jiao Shanzha was 96.56％ with RSD of 1.45％. Recovery of Shanzha Tan was 95.93％ with RSD of 1.65％. Total organic acids content in 5 batch samples and the corresponding processed products were 6.95％ ～ 7.04％ for Shanzha， 7.01％ ～ 7.17％ for Chao Shanzha， 5.27％ ～ 5.31％ for Jiao Shanzha， and 3.16％ ～ 3.24％ for Shanzha Tan， respectively. Conclusion: Potentiometric titration method can detect the content of total organic acids in Shanzha and its processed products. Total organic acids content varies in accordance with different height degree.

Shanzha； total organic acids； potentiometric titration； content determination

·炮制制劑·

·炮制制劑·

R 284.1

A

1674-926X（2016）03-009-02

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標準化教育部重點實驗室 四川省中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用重點實驗室省部共建國家重點實驗室培育基地，成都 611137

張慧（1991-），女，碩士，主要從事中藥質(zhì)量控制方向研究Tel：13880459062 Email：zhanghui9101@163.com

鄧放（1971-），男，博士，副教授，主要從事中藥及其復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)和質(zhì)量控制方向研究Tel：13684090383 Email：dengf99@163.com

2015-07-17