雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液研制及比較

薛佳，　嚴萬春，　薛仲華

1．上海天壇助劑有限公司，上海 201419；2．上海桑迪精細化工研究所有限公司，上海 200025；3．華東理工大學化學與分子工程學院，上海 200237

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雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液研制及比較

1．上海天壇助劑有限公司，上海 201419；2．上海桑迪精細化工研究所有限公司，上海 200025；3．華東理工大學化學與分子工程學院，上海 200237

通過將鄰苯二甲醛、雙鏈季銨鹽與相應(yīng)助劑進行復(fù)配，制備一種新型的復(fù)合消毒劑，并進行滅菌消毒試驗、清洗效果及穩(wěn)定性試驗。實驗證明鄰苯二甲醛復(fù)合消毒劑濃度在2 000 mg/L時對白色念珠菌的殺滅效果達100%。該復(fù)合消毒劑原液經(jīng)45 ℃恒溫放置15 d，鄰苯二甲醛的下降率為2.26%左右，穩(wěn)定性和殺菌能力有明顯提高。對油脂清洗率達98%以上，具有消毒清洗雙功能。因此鄰苯二甲醛復(fù)合消毒劑對消化內(nèi)鏡消毒滅菌效果高，耗時短，用法簡便，并可降低對醫(yī)務(wù)人員健康的危害性，是值得在醫(yī)院臨床推廣使用的高效消毒劑。

鄰苯二甲醛； 雙鏈季銨鹽； 戊二醛； 消化內(nèi)鏡； 白色念珠菌； 消毒效果

隨著醫(yī)療水平的提高和醫(yī)用器材的發(fā)展，以消化內(nèi)鏡為主的儀器以其操作簡便、使用靈活、效果直觀、創(chuàng)傷性小等優(yōu)點被廣泛用于臨床檢查和治療。

新型消化道內(nèi)窺鏡、超細胃鏡等，作為一種插入人體重復(fù)使用的精密診治器，其材質(zhì)特殊，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，給清洗消毒帶來一定難度，這些儀器如果清洗消毒不徹底，會使醫(yī)院感染風險提高。由于常用的戊二醛在內(nèi)鏡消毒中存在使用前要活化、使用濃度相對高等多種不便，近年來國內(nèi)外學者均提出用鄰苯二甲醛消毒劑替代戊二醛用于內(nèi)鏡消毒[1,2,3]。

為了進一步加強內(nèi)鏡消毒滅菌工作，尋找安全有效的內(nèi)鏡消毒方式，降低醫(yī)院感染風險，已成為醫(yī)療領(lǐng)域重要的研究課題。本文由上海天壇助劑廠、上海桑迪精細化工研究所有限公司和華東理工大學三方共同合作，將鄰苯二甲醛(Ortho-phthalaldehyde，簡稱OPA。1999年已通過了美國FDA認證)、雙鏈陽離子季銨鹽表面活性劑等助劑進行復(fù)配，制備一種新型的季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑，進行滅菌消毒、穩(wěn)定性及清洗效果試驗。并對同樣用于內(nèi)窺鏡消毒的戊二醛在使用量、滅菌效果、安全性等方面進行比較總結(jié)[4,5]。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑

儀器：紫外可見分光光度計，帶溫控攪拌反應(yīng)釜，恒溫箱,電子天平等。

試劑：鄰苯二甲醛(CP)，國藥集團化學試劑有限公司；雙烷基甲基季銨鹽(CP)，上海山浦化工有限公司；實驗菌種和測試由上海資質(zhì)實驗室提供完成。

鄰苯二甲醛(簡稱OPA)試劑是一種淡黃色針狀結(jié)晶．能溶于水，也可溶解于醇和醚等有機溶劑，是一種廣譜、高效、低腐蝕性的新型消毒劑。雙烷基甲基氯化銨化學穩(wěn)定性好，耐熱、耐光、耐強酸強堿，可溶于水，具有優(yōu)良的滲透、乳化、抗靜電、生物降解性及殺菌等性能。

1.2試驗方法

1.2.1 外觀指標應(yīng)符合表1規(guī)定。

1.2.2 理化指標應(yīng)符合表2規(guī)定。

1.2.3 鄰苯二甲醛含量按企標附錄A方法檢測。

1.2.4 消毒效果試驗方法：按《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002版)中的有關(guān)方法進行，應(yīng)符合表3規(guī)定。

1.3雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液復(fù)合配方：

鄰苯二甲醛：0.55 %～0.65%

雙鏈季銨鹽表面活性劑：0.2%～0.4%

助溶劑：0.1%～0.2%

pH調(diào)節(jié)劑：適量

去離子水：平衡至100%

(初始配方不加季銨鹽表面活性劑和助溶劑)

1.4配制工藝

按比例將去離子水加入到釜內(nèi)，加入計量好的鄰苯二甲醛攪拌溶解后，再繼續(xù)攪拌15 min后加其它助劑，全溶過濾后即可灌裝。

1.5質(zhì)量標準

本產(chǎn)品質(zhì)量標準需符合《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002版)，企業(yè)標準。

1.6感官標準

應(yīng)符合表1規(guī)定。

表1　雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液感官指標

1.7理化指標

應(yīng)符合表2規(guī)定。

表2　雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液理化指標

1.8微生物滅活指標

應(yīng)符合表3規(guī)定。

表3　雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液滅活指標

2　結(jié)果與討論

2.1雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液原料配比與消毒效果

據(jù)醫(yī)院臨床研究表明，實驗規(guī)定數(shù)量的內(nèi)窺鏡在5 000 mg/L OPA消毒5 min后，使得細菌量下降5 log以上，水溶液浸泡20 min以上，使病人用后的氣管鏡、胃鏡、結(jié)腸鏡上的革蘭陽性菌、陰性菌、腸道致病源細菌全部轉(zhuǎn)陰。按照內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范(2004年版)中的操作規(guī)定，本試驗對OPA原料配比與殺菌效果之間的影響進行考察。設(shè)定有效殺菌成分OPA含量分別為0.2%、0.4%和0.6%，其他輔料成分不變，作用于白色念珠菌2 min，檢驗其殺菌效果。

2.1.1器材

1、實驗菌株：白色念珠菌(ATCC10231)

2、稀釋液：(PBS)

3、培養(yǎng)基：沙氏瓊脂培養(yǎng)基

2.1.2方法

檢驗依據(jù)：《日化產(chǎn)品抗菌抑菌效果的評價方法》QB/T2738—2005

作用濃度：原液

2.1.3中和劑鑒定實驗

結(jié)果表明：1%甘氨酸+1%吐溫-80+0.3%卵磷脂的緩沖液作為中和劑能有效的中和樣品，且不影響大腸桿菌生長。

抗菌效果評價結(jié)果見下表4。

表4　雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液不同含量殺菌效果

由上表可以看出，復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑即使在2 000 mg/L(0.2%)時對白色念珠菌的殺滅效果也達100%，考慮到鄰苯二甲醛的成本、溶解性、pH值因素等，為了保證在一定存放期內(nèi)的殺菌效果，本產(chǎn)品選用5 000 mg/L鄰苯二甲醛的含量通規(guī)。

2.2雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液穩(wěn)定性試驗與結(jié)果

本實驗對鄰苯二甲醛消毒劑的初始配方(不加季銨鹽表面活性劑和助劑)與雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑，依據(jù)《消毒技術(shù)規(guī)范))(2002版)采用加速法進行觀察，將上述兩種消毒劑原液分別置45 ℃恒溫箱內(nèi)14 d，放置前后分別取樣測定其穩(wěn)定性。

表5　雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液含量測定結(jié)果

溫度對OPA含量的影響由表5可知，開始階段OPA含量影響不大，隨著時間的延長，影響效果越加明顯，從上面數(shù)據(jù)可知復(fù)合配方在45 ℃下存放10 d OPA含量下降了1.84%左右，30 d后為30.1%左右。另外從穩(wěn)定性試驗得出樣品的密封條件對OPA含量變化影響較大，所以建議提高OPA溶液的包裝密封性。

2.3雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛清洗效果

雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑加入了對常見醫(yī)療器械污垢具有良好清洗效果的陽離子表面活性劑。經(jīng)過實驗室清洗試驗，其清洗效果如下：

表6　雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液洗滌效果

油污成分：花生油25%+芝麻油25%+淀粉15%+水35%

洗滌介質(zhì)：玻璃試管內(nèi)壁

油污成分：花生油30%+芝麻油30%+淀粉20%+水20%

洗滌介質(zhì)：陶瓷盤內(nèi)壁

實驗針對不同介質(zhì)表面的污垢進行洗滌效果測試，由表7看出，復(fù)合型鄰苯二甲醛的洗滌效果良好，具有洗滌、消毒雙效果。同時，加入微量的消泡劑，可以有效的改善其起泡的不足，滿足醫(yī)院實際使用需求。

表7　雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液洗滌效果

2.4雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒液與戊二醛消毒等性能比較

戊二醛是一種具有揮發(fā)性和刺激性的化學品，在使用過程中，對人體眼睛、皮膚和黏膜有強烈的刺激作用，可引起喉、支氣管的炎癥、化學性肺炎等，對醫(yī)務(wù)人員有一定危害，其中長期的吸入毒性更應(yīng)進一步研究[6,7]。

研究結(jié)果表明，含5 000 mg/L復(fù)方鄰苯二甲醛作用5 min即可完全滅活龜分枝桿菌，而戊二醛則需20 g/L作用10 min。與戊二醛相比，復(fù)方鄰苯二甲醛具有使用濃度低、作用時間短的優(yōu)點[8,9]。

雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑是一個高水平消毒劑(HLD)用于消毒處理熱敏感的醫(yī)療設(shè)備。鄰苯二甲醛溶液可隨時“準備使用”，無需激活和具有較小的氣味。而戊二醛使用前需活化，比較麻煩[10]。

雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑毒性測試結(jié)果：

1.原發(fā)性皮膚刺激為弱刺激性。

2.初級眼刺激為溫和刺激性。

3.急性口服毒性(大鼠)LD50>5 000 mg/kg，屬微毒。

4.急性皮膚毒性(兔子)LD50>2 000 mg/kg，屬微毒。

季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑的毒理學特性有了廣泛的研究，測試結(jié)果證明是可安全使用[11，12]。

雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑在pH 為3～9的范圍內(nèi)都有很好的穩(wěn)定性， 其溶液可以連續(xù)使用14 d。美國Cidex公司已經(jīng)研制出精確監(jiān)測濃度的試紙。有資料顯示，如果使用自動內(nèi)鏡清洗程序，在雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑達到最小有效濃度0.3%前可以反復(fù)使用40次，并對許多金屬、塑料等物質(zhì)都沒有腐蝕損害。

3　結(jié)論

本文制備了一種在低濃度下快速殺菌，性能穩(wěn)定，使用安全的新型復(fù)合消毒劑。雙鏈季銨鹽作為一種陽離子表面活性劑，其表面張力、CMC值、親水親油平衡值等因素在分子水平上影響了醛類對菌體的作用，提高了其穿透細菌的細胞膜和多層殼的能力，起到協(xié)同增效作用。有關(guān)鄰苯二甲醛與不同表面活性劑的協(xié)同機理及其影響因素有待進一步研究[13]。

雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑作為一種新型的高效消毒劑，與戊二醛相比，不僅具有廣譜、高效和低腐蝕性的優(yōu)點，還具有刺激性小、穩(wěn)定性好等自身特點。此外，雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑對近年來分離出的耐戊二醛的龜分枝桿菌也具有良好的殺滅作用[14]。

鄰苯二甲醛復(fù)合消毒劑濃度在2 000 mg/L時對白色念珠菌的殺滅效果達100%。該復(fù)合消毒劑原液經(jīng)45 ℃恒溫放置15 d，鄰苯二甲醛的下降率為2.26%左右，穩(wěn)定性和殺菌能力有明顯提高。本品對油脂清洗率達98%以上，具有消毒清洗雙功能。

毒理學評價結(jié)果說明，復(fù)方鄰苯二甲醛急性經(jīng)口毒性屬于無毒級物質(zhì)，無染色體損害作用。但有關(guān)復(fù)方鄰苯二甲醛的致畸變等毒理學試驗還需進行系統(tǒng)研究與評價。

本次試驗結(jié)果表明，在消化內(nèi)鏡的消毒中選用雙鏈季銨鹽復(fù)合鄰苯二甲醛消毒劑消毒效果高，消毒時間短，殺菌廣譜，用法簡便，安全環(huán)保，因此戊二醛會逐步被實用、安全、高效的鄰苯二甲醛所取代，值得醫(yī)療機構(gòu)臨床推廣應(yīng)用。

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Development and comparison of ortho-phthalaldehyde disinfectant by compounded double chain quaternary ammonium salts

XUE Jia-lu1, YAN Wan-chun2, XUE Zhong-hua3

1. Shanghai TianTan Auxiliaries Co., LTD 2. Shanghai S&D Fine Chemical Institute Co., Ltd 3. School of Chemistry and Engineering, East China University of Science and Technology

A new compound disinfectant was prepared by combining o-phthalaldehyde, double chain quaternary ammonium salt and auxiliary chemicals．The experiments showed that the germicidal efficacy of the compound disinfectant onCandidaalbicanswas 100% at the concentration of 2 000 mg/L. Under the conditions of at 45 ℃ for 15 days, the ortho-phthalaldehyde decline rate of compound disinfectant was about 2.26%, stability and sterilization ability was obviously improved. Fats cleaning rate exceeded 98%. So it had a dual function of disinfection and cleaning. The use of the compound disinfectant of ortho-phthalaldehyde had high efficiency，shorter germicidal time and convenient usage, and less harm to medical personnel. Therefore, it is worth to use in the hospital clinical operations.

ortho-phthalaldehyde; double chain quaternary ammonium salt; glutaraldehyde; digestive endoscope;Candidaalbicans; germicidal efficacy

10.3969/j.issn.1001-6678.2016.04.006