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    缺血性心功能不全家兔心肌ACE2/Ang-(1-9)/Ang-(1-7)軸的變化及培哚普利的治療作用

    2016-09-15 14:37:01郝瀟李樹仁孟田田高青黨懿荀麗穎苑可心張倩輝郝清卿齊曉勇
    中國(guó)心血管病研究 2016年7期
    關(guān)鍵詞:培哚全家家兔

    郝瀟 李樹仁 孟田田 高青 黨懿 荀麗穎 苑可心 張倩輝 郝清卿 齊曉勇

    基礎(chǔ)研究

    缺血性心功能不全家兔心肌ACE2/Ang-(1-9)/Ang-(1-7)軸的變化及培哚普利的治療作用

    郝瀟 李樹仁 孟田田 高青 黨懿 荀麗穎 苑可心 張倩輝 郝清卿 齊曉勇

    目的 探討培哚普利對(duì)缺血性心功能不全家兔新型RAAS系統(tǒng)的影響。方法 利用隨機(jī)數(shù)字表法將30只家兔隨機(jī)分為培哚普利組、心功能不全組和假手術(shù)組。培哚普利組及心功能不全組通過(guò)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支的方法制作缺血性心功能不全家兔模型,假手術(shù)組僅開胸不結(jié)扎冠狀動(dòng)脈。模型制作成功后培哚普利組給予培哚普利生理鹽水溶液2 ml·kg-1·d-1灌胃(濃度為1 mg/ml),心功能不全組及假手術(shù)組給予等量生理鹽水灌胃。4周后心臟彩超測(cè)定心功能;Real-Time PCR檢測(cè)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(ACE2)mRNA表達(dá),ELISA檢測(cè)家兔血清Ang-(1-9)和Ang-(1-7)水平。結(jié)果 與心功能不全組相比,培哚普利可顯著改善心功能[(50.61±3.21)%比(46.44±1.66)%,P<0.01];與假手術(shù)組相比,心功能不全家兔血清 Ang-(1-9)[(3.86±0.49)ng/ml比 (3.03±0.29)ng/ml,P<0.01]和 Ang-(1-7)[(3.82±0.59)ng/ml比 (2.76±0.22)ng/ml,P<0.01]水平均增高,心肌 ACE2 mRNA 表達(dá)顯著增高(0.41±0.14 比 0.25±0.08,P<0.01);心功能不全家兔應(yīng)用培哚普利后,血清 Ang-(1-9)[(4.71±0.31)ng/ml比(3.86±0.49)ng/ml,P=0.001]和 Ang-(1-7)[(4.42±0.50)ng/ml比(3.82±0.59)ng/ml,P=0.039]水平均增高,ACE2 mRNA 表達(dá)增加(0.98±0.14 比 0.41±0.14,P<0.01)。相關(guān)性分析顯示,缺血性心功能不全家兔心功能與心肌ACE2 mRNA表達(dá)呈正性相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.770(P=0.003)。結(jié)論 心功能不全家兔RAAS系統(tǒng)激活的同時(shí)還伴有新型RAAS系統(tǒng)的抑制,而培哚普利可以通過(guò)ACE2/Ang-(1-9)/Ang-(1-7)這一新型RAAS通路發(fā)揮心臟保護(hù)性作用。

    缺血性心功能不全; 腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng); 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2; 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑

    心肌梗死(myocardial infarction,MI)是目前臨床最常見(jiàn)的危害人類健康的心血管病之一。MI后由于容量負(fù)荷和壓力負(fù)荷而導(dǎo)致心室重構(gòu),最終導(dǎo)致心功能不全的發(fā)生[1]。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)在心力衰竭的治療中起著基石的作用,受到各個(gè)心力衰竭管理指南的推薦[2-4]。然而ACEI類藥物在心力衰竭治療中的機(jī)制尚不完全明確。除了目前已知的抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)降低血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)的水平、減少緩激肽的降解或直接刺激激肽受體及其抑制交感神經(jīng)激活等作用,目前仍有其他機(jī)制可能影響心功能不全的進(jìn)程。2000年,Tipnis等[5]發(fā)現(xiàn)了血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2),其催化產(chǎn)物為血管緊張素-(1-9)和血管緊張素-(1-7)。后續(xù)研究顯示,Ang-(1-9) 和 Ang-(1-7) 均具有拮抗 AngⅡ的作用。但兩者在ACEI作用機(jī)制是否起作用尚不明確。本研究通過(guò)給予心肌梗死后心功能不全家兔ACEI類藥物培哚普利,觀察家兔心肌ACE2表達(dá)、血清 Ang-(1-9)及 Ang-(1-7)水平和心功能的變化,探討在ACEI類藥物治療心功能不全中對(duì)新型RAAS系統(tǒng)的作用。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 本實(shí)驗(yàn)選用健康3個(gè)月齡新西蘭雄性家兔共 30 只,體重(2.69±0.17)kg,由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

    1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及儀器 培哚普利片(雅施達(dá)制藥有限公司);注射用青霉素鈉(華北制藥);反轉(zhuǎn)錄試劑盒(Promega);熒光定量 PCR 試劑盒(BBI);隨即引物(Promega);PCR引物(上海生工生物工程有限公司);Ang-(1-9)試劑盒(上海藍(lán)基生物科技有限公司);Ang-(1-7)試劑盒(上海藍(lán)基生物科技有限公司)。

    心臟超聲儀(TOSHIBA);7300實(shí)時(shí)定量PCR儀(ABI);紫外可見(jiàn)分光光度儀(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 動(dòng)物分組及處理 將30只健康新西蘭雄性家兔按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為培哚普利組、心功能不全組及假手術(shù)組。家兔心肌梗死后2周通過(guò)心臟彩超檢測(cè)家兔心功能,左室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction,LVEF)低于50%即為心功能不全。心功能不全模型制作成功后,培哚普利組以培哚普利生理鹽水溶液2 ml·kg-1·d-1灌胃(濃度為1 mg/ml),心功能不全組及假手術(shù)組給予等量生理鹽水灌胃。

    1.3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制備 采用開胸結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支的方法制作急性心肌梗死后心功能不全模型。將家兔麻醉后仰臥位固定于兔臺(tái),記錄術(shù)前心電圖。消毒鋪巾后沿胸骨左緣逐層切開皮膚及皮下組織,剪斷第4、5肋軟骨,打開心包,暴露左冠狀動(dòng)脈前降支,于肺動(dòng)脈圓錐與左心耳交點(diǎn)下方3 mm處用0號(hào)絲線結(jié)扎前降支(模型制備成功標(biāo)準(zhǔn)為心尖部及部分左室前壁心肌由紅色變?yōu)榘底仙?,局部心肌收縮減弱或異常運(yùn)動(dòng),心電圖示胸前導(dǎo)聯(lián)ST段持續(xù)弓背向上抬高[6]),后逐層關(guān)胸。術(shù)后3 d每天給予青霉素80萬(wàn)U肌注。假手術(shù)組開胸后將絲線穿過(guò)前降支下方,但不結(jié)扎。

    1.3.3 超聲心動(dòng)圖檢測(cè)心功能 采用Toshiba超聲儀在術(shù)前、術(shù)后2周及給藥后4周由同一專科醫(yī)生行超聲心動(dòng)圖檢查,測(cè)量各組左室舒張末期容積(end-diastolic volume,EDV) 左室射血分?jǐn)?shù)(left ventricle ejection fraction,LVEF)及左室短軸縮短率(left ventricle fractional shortening,LVFS)。所有測(cè)量值均取3次測(cè)量的平均值。

    1.3.4 Real-time PCR法檢測(cè)心肌組織ACE2基因mRNA的表達(dá) 給藥4周后,取50 mg心肌梗死區(qū)域心肌組織進(jìn)行研磨,提取總RNA,瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其完整性;按照反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。反應(yīng)條件為:42℃ 50 min,95℃ 5 min。引物序列:GAPDH的上游引物為 5′-CGCCTGGAGAAAGCTGCTAA-3′,下游引物為 5′-CGACCTGGTCCTCGGTGTAG-3′, 擴(kuò) 增 產(chǎn) 物 為 103 bp[6];ACE2 上游引物為 5′-CAACACTTGAACCCCCTTATGA-3′, 下 游 引 物 為 5′-TGCTTTTGCTTCCTTCGGTC-3′,擴(kuò)增產(chǎn)物為 133 bp。將獲得的cDNA按照熒光定量PCR試劑盒操作說(shuō)明書方法擴(kuò)增目的基因,PCR熱循環(huán)參數(shù)為96℃ 4 min,然后 3步反應(yīng),即 94 ℃ 30 s,58 ℃ 30 s,72 ℃ 30 s,40個(gè)循環(huán)。以GAPDH為內(nèi)參照,將目的基因表達(dá)的相對(duì)定量值用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。Real-time PCR采用 2-ΔΔCt(ΔCt=目的基因 Ct值-GAPDH Ct值,ΔΔCt=目的基因ΔCt值-內(nèi)參照基因ΔCt值)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果[7]。將所得的AT2R mRNA的表達(dá)量與LVEF進(jìn)行相關(guān)性分析。

    1.3.5 Elisa法檢測(cè)血清中 Ang-(1-9)和 Ang-(1-7)的含量 用藥4周后,將三組家兔麻醉后經(jīng)腹主動(dòng)脈取血,抗凝后離心,3000 r/min,15 min后取上清,超低溫冰箱存放。

    以標(biāo)準(zhǔn)品次序加入標(biāo)準(zhǔn)品,再在空白孔中加入等量樣品和PBS;各孔中加入酶標(biāo)記溶液,封板后37℃孵育1 h;清洗后拍干;各孔按順序加入顯色劑A和B;37℃避光反應(yīng)10~15 min后加入終止液;于紫外可見(jiàn)分光光度儀測(cè)量各孔OD值;依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度及其OD值計(jì)算相應(yīng)公式,依據(jù)公式和樣品OD值計(jì)算樣品 Ang-(1-9)和Ang-(1-7)的濃度。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。正態(tài)性數(shù)據(jù)以±s表示,非正態(tài)數(shù)據(jù)以中位數(shù)(四分位數(shù))表示,采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)單因素方差分析(one-way ANOVA),多個(gè)樣本間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn),相關(guān)變量間采用直線相關(guān)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 心肌梗死后心功能不全模型結(jié)果 30只新西蘭雄性家兔接受模型手術(shù),術(shù)后共有25只存活,其中培哚普利組9只,死亡1只;HF組8只,死亡2只;假手術(shù)組8只,死亡2只。共死亡5只,2只于手術(shù)過(guò)程中大量出血死亡,1只于結(jié)扎前降支過(guò)程中誘發(fā)室顫死亡,1只開胸后氣胸死亡,1只于給藥灌胃時(shí)誤入氣管窒息死亡。

    2.2 心臟超聲檢查結(jié)果 造模前將各組新西蘭雄性家兔行心臟彩超檢查,各組家兔心功能指標(biāo)均正常,并于造模后2周(即給藥前)及給藥4周后再次行超聲檢查。

    經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理發(fā)現(xiàn),心肌梗死后2周心臟彩超顯示,三組EF、FS及EDV無(wú)明顯區(qū)別(P=0.693,P=0.664,P=0.493)。給藥4周后,培哚普利組及心功能不全組LVEF及LVFS較假手術(shù)組均顯著降低(P均<0.01),EDV 顯著增大(P<0.01);培哚普利組心功能與心功能不全組相比,LVEF及LVFS均明顯改善(P=0.041,P=0.047),EDV 顯著縮?。≒<0.01)。見(jiàn)表 1。

    表1 各組間給藥4周后心功能的比較(±s)

    表1 各組間給藥4周后心功能的比較(±s)

    注:LVEF:左室射血分?jǐn)?shù);LVFS:左室短軸縮短率;EDV:左室舒張末期容積。與假手術(shù)組比較,aP<0.05;與心功能不全組比較,bP<0.05

    組別 LVEF(%) LVFS(%) EDV(ml)假手術(shù)組 41.56±4.27 18.35±2.34 0.48±0.45心功能不全組 46.44±1.66a21.00±0.97a4.45±0.24a培哚普利組 50.61±3.21b23.28±1.88b3.88±0.28b

    2.3 心肌梗死區(qū)域組織ACE2 mRNA表達(dá)及其與心功能的相關(guān)關(guān)系 給藥4周后,三組間通過(guò)Real-Time PCR檢測(cè)ACE2 mRNA表達(dá)水平有顯著差異(P<0.01);與假手術(shù)組相比,心功能不全組ACE2 mRNA表達(dá)明顯增高(P=0.036);與心功能不全組相比,培哚普利組ACE2 mRNA表達(dá)明顯增高(P<0.01)。相關(guān)性分析顯示,缺血性心功能不全家兔心肌ACE2 mRNA表達(dá)水平與心功能呈正相關(guān)(P=0.003),相關(guān)系數(shù)為0.770。見(jiàn)表2。

    表2 各組間給藥4周后ACE2 mRNA表達(dá)水平比較(±s)

    表2 各組間給藥4周后ACE2 mRNA表達(dá)水平比較(±s)

    注:與假手術(shù)組比較,aP<0.05;與心功能不全組比較,bP<0.05

    組別 ACE2 mRNA假手術(shù)組 0.25±0.08心功能不全組 0.41±0.14a培哚普利組 0.98±0.14b

    2.4 血清Ang-(1-9)與 Ang-(1-7)水平 標(biāo)準(zhǔn)品計(jì)算公式為,Ang-(1-9):OD值和濃度分別取10的對(duì)數(shù)記為 x和 y,y=0.12190-1.41505x;Ang-(1-7):OD值和濃度分別取10的對(duì)數(shù)記為x和y,y=0.17799-1.53809x。通過(guò)公式及樣品OD值計(jì)算樣品濃度。見(jiàn)表3。

    給藥4周后,三組間通過(guò)ELISA檢測(cè)血清Ang-(1-9)水平有顯著差異(P<0.01);與假手術(shù)組相比,心功能不全組血清Ang-(1-9)水平明顯增高(P=0.002);與心功能不全組相比,培哚普利組血清Ang-(1-9)水平明顯增高(P=0.001)。

    表3 各組間給藥4周后Ang-(1-9)及Ang-(1-7)的比較(±s)

    表3 各組間給藥4周后Ang-(1-9)及Ang-(1-7)的比較(±s)

    注:與假手術(shù)組比較,aP<0.05;與心功能不全組比較,bP<0.05

    組別 Ang-(1-9)(ng/ml) Ang-(1-7)(ng/ml)假手術(shù)組 3.03±0.29 2.76±0.22心功能不全組 3.86±0.49a3.82±0.59a培哚普利組 4.71±0.31b4.42±0.50b

    給藥4周后,三組血清Ang-(1-7)水平有顯著差異(P<0.01);與假手術(shù)組相比,心功能不全組血清 Ang-(1-7)水平明顯增高(P=0.001);與心功能不全組相比,培哚普利組血清Ang-(1-7)水平明顯增高(P=0.039)。

    3 討論

    心肌梗死后,由于壓力負(fù)荷和容量負(fù)荷的變化,導(dǎo)致腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(renin-angiotensin-aldosterone system,RAAS) 激活,AngⅡ及醛固酮水平增高,作用于相應(yīng)受體,導(dǎo)致血管收縮、鈉水潴留、細(xì)胞增殖,以及促炎癥的作用,最終導(dǎo)致心功能不全的發(fā)生和進(jìn)展。Tipnis等[5]發(fā)現(xiàn)了ACE2,這種酶可以催化生成 Ang-(1-9)和 Ang-(1-7)。隨著 ACE2/Ang-(1-9)/Ang-(1-7) 的發(fā)現(xiàn),新型的RAAS系統(tǒng)也逐漸被人們所認(rèn)知。在這一新型RAAS發(fā)現(xiàn)后,關(guān)于Ang-(1-7)的研究發(fā)現(xiàn)Ang-(1-7)具有抗增殖和擴(kuò)血管作用[8],并有研究顯示其生理作用與AngⅡ相拮抗[9]。近年來(lái)Ang-(1-9)相關(guān)研究也逐漸增多,顯示Ang-(1-9)在高血壓或心力衰竭進(jìn)程中通過(guò)拮抗傳統(tǒng)的RAAS系統(tǒng)發(fā)揮降血壓及心臟、血管和腎臟的保護(hù)作用[10]。

    作為心功能不全治療的基石藥物,ACEI類藥物的作用機(jī)制尚不完全明確。ACEI類藥物可以抑制AngⅡ的形成,從而減少醛固酮的合成和釋放以及抑制交感神經(jīng)的激活,并使AngⅡ刺激心肌細(xì)胞增生、促進(jìn)心肌肥厚等作用受到抑制[11]。另外,作為ACE的抑制劑,還可以抑制緩激肽的降解,使緩激肽蓄積,從而發(fā)揮擴(kuò)血管作用[12]。

    研究發(fā)現(xiàn),ACE2 催化 AngⅠ形成 Ang-(1-9),而后者通過(guò)ACE、脯氨酰內(nèi)肽酶(POP)、中性肽鏈內(nèi)切酶(NEP)以及巰基和金屬依賴性寡肽酶(TOP)催化形成 Ang-(1-7)[13]。因此可以推測(cè),ACEI類藥物可以通過(guò)新型RAAS系統(tǒng)發(fā)揮心臟保護(hù)作用。

    本研究通過(guò)制作心肌梗死后心功能不全模型,并給予ACEI類代表藥物培哚普利灌胃,探討該藥物對(duì)新型RAAS系統(tǒng)三種重要因子的影響。研究發(fā)現(xiàn),心肌梗死后心功能不全家兔心肌內(nèi)ACE2、血清Ang-(1-9)及 Ang-(1-7)均明顯增高。應(yīng)用培哚普利后ACE2 mRNA表達(dá)明顯增高,血清Ang-(1-9)及Ang-(1-7)明顯增高,心功能不全家兔心功能顯著改善。提示培哚普利可能在新型RAAS系統(tǒng)中主要通過(guò)增加ACE2表達(dá)增加Ang-(1-9)及Ang-(1-7)水平發(fā)揮心臟保護(hù)作用。ACE2的表達(dá)與家兔心功能的改善呈正相關(guān)關(guān)系,提示在新型RAAS系統(tǒng)中,ACE2可以發(fā)揮核心作用。Ang-(1-9)及Ang-(1-7)作為新型RAAS系統(tǒng)的作用因子發(fā)揮心臟保護(hù)作用。

    心肌梗死后RAAS系統(tǒng)激活,ACE表達(dá)明顯增高,導(dǎo)致血和組織中AngⅡ水平顯著增高,促進(jìn)心臟重構(gòu),最終導(dǎo)致心功能不全的發(fā)生和進(jìn)展。另外,由于 RAAS 系統(tǒng)激活,Ang-(1-9) 及 Ang-(1-7)隨著其底物AngⅠ和AngⅡ水平增高而增高;這兩種因子可能具有拮抗AngⅠ和AngⅡ的作用。這一結(jié)論與本研究結(jié)果相符。

    在培哚普利組ACE2 mRNA表達(dá)以及血清Ang-(1-9)和 Ang-(1-7)水平較心功能不全及假手術(shù)組均顯著增高,提示培哚普利在拮抗傳統(tǒng)RAAS系統(tǒng)的同時(shí),還可以通過(guò)提高新型RAAS系統(tǒng)的水平發(fā)揮心臟保護(hù)作用。有研究發(fā)現(xiàn)Ang-(1-9)的水解較 AngⅠ速度慢 18 倍,較 Ang-(1-7)慢30%[14]。由此可見(jiàn),在應(yīng)用培哚普利抑制ACE后由于Ang-(1-9)代謝較慢也是引起其蓄積的因素之一,并且由此可以推測(cè),在應(yīng)用ACEI類藥物的情況下,主要通過(guò) Ang-(1-9)而不是 Ang-(1-7)發(fā)揮其心臟保護(hù)作用。

    有研究發(fā)現(xiàn),心肌梗死的大鼠以及假手術(shù)組的大鼠在應(yīng)用了依那普利8周后,其血清Ang-(1-9)水平明顯升高,但循環(huán)血中Ang-(1-7)的水平則不受依那普利影響[15]。這與我們的發(fā)現(xiàn)是不同的。我們的研究發(fā)現(xiàn),應(yīng)用了培哚普利組較心功能不全組血清Ang-(1-7)水平明顯升高。這可能由于尚有其他酶可以催化這一反應(yīng),同時(shí)底物Ang-(1-9)增加,因此Ang-(1-7)水平仍可以升高。不論血清Ang-(1-7)水平是否受到影響,都說(shuō)明在拮抗AngⅡ的作用方面主要是Ang-(1-9)在發(fā)揮作用。

    有研究通過(guò)受體阻斷的方法發(fā)現(xiàn),Ang-(1-7)和Ang-(1-9)分別通過(guò)激活Mas受體和血管緊張素 2 型受體(angiotensin type 2 receptor,AT2R)發(fā)揮各自的保護(hù)性作用,并且上游的Ang-(1-9)并不完全通過(guò)降解為Ang-(1-7)才發(fā)揮保護(hù)作用[16]。心功能不全家兔血清 Ang-(1-9)和 Ang-(1-7)均明顯高于假手術(shù)組,但仍出現(xiàn)心功能不全的進(jìn)展,可能是由于AngⅡ?qū)T2R的結(jié)合能力較Ang-(1-9)高100倍[17]。因此,在心功能不全RAAS過(guò)度激活的情況下,盡管Ang-(1-9)水平會(huì)升高,這可能會(huì)有一定的改善作用,但仍不能拮抗傳統(tǒng)RAAS激活引起的心功能不全的進(jìn)展和惡化。在心功能不全家兔應(yīng)用了培哚普利后血清Ang-(1-9)水平明顯升高,同時(shí)由于競(jìng)爭(zhēng)物質(zhì)AngⅡ的降低,使Ang-(1-9)對(duì)AT2R激活增強(qiáng),從而發(fā)揮心臟保護(hù)作用。

    本研究通過(guò)給予心肌梗死后心功能不全家兔培哚普利藥物治療,改善心功能不全家兔的心功能,驗(yàn)證了培哚普利在心功能不全治療中的肯定作用,同時(shí)為RAAS系統(tǒng)的完整描述提供了一定的依據(jù)。但由于受體拮抗劑研究Ang-(1-9)相關(guān)受體的研究中[16],應(yīng)用的受體阻滯劑不能特異性阻斷AT2R,因此關(guān)于Ang-(1-9)下游的作用機(jī)制尚不能完全確定,仍需要更多的分子水平的研究。

    (本文圖片第670頁(yè))

    [1]王亞靜,吳新華.心肌梗死后心力衰竭發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展.疑難病雜志,2012,11:726.

    [2]McMurray JJ,Adamopoulos S,Anker SD,et al.ESC guidelines for the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failure 2012:The Task Force for the Diagnosis and Treatment of Acute and Chronic Heart Failure 2012 of the European Society of Cardiology.Developed in collaboration with the Heart Failure Association(HFA)of the ESC.Eur Heart J,2012,33:1787-1847.

    [3]Yancy CW,Jessup M,Bozkurt B,et al.2013 ACCF/AHA Guideline for the Management of Heart Failure:A Report of the American College of Cardiology Foundation/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines. Circulation,2013,128:1810-1852.

    [4]中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病分會(huì),中華心血管病雜志編輯委員會(huì).中國(guó)心力衰竭診斷和治療指南2014.中華心血管病雜志,2012,42:449-461.

    [5]Tipnis SR,Hooper NM,Hyde R,et al.A human homolog of angiotensin-converting enzyme cloning and functional expression captoprilin sensitive earboxypeptidase.J Biol Chem,2000,275:33238-33243.

    [6]高青,李樹仁,荀麗穎,等.經(jīng)bcl-2基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)缺血性心功能不全兔心功能及血管新生的影響.中國(guó)病理生理雜志,2015,31:640-646.

    [7]Schmittgen TD,Livak KJ.Analyzing real-time PCT data by the comparative C(T)meathod.Nat Protoc,2008,3:1101-1108.

    [8]Zhong J,Jin H,Oudit G,et al.Loss of ACE2 augments angiotensinⅡ-induced myocardial hypertrophy and remodeling with increased Profilin-1 expression.Heart,2011,97:A31-32.

    [9]Grobe JL,Mecca AP,Lingis M,et al.Prevention of angiotensinⅡ -induced cardiac remodeling by angiotensin-(1-7).Am J Physiol Heart Circ Physiol,2007,292:H736-742.

    [10]Ocaranza MP,Mova J,Barrientos V,et al.Angiotensin-(1-9)reverses experimental hypertension and cardiovascular damage by inhibition of the ACE/AngⅡ Axis.J Hypertens,2014,32:771-783.

    [11]朱明燕,柳景景,石雷.血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑研究進(jìn)展與臨床應(yīng)用.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2011,8:9-10.

    [12]Manning J,Vehaskari VM.Postnatal modulation of prenatally programmed hypertension by dietary Na and ACE inhibition.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol,2005,288:R80.

    [13]Ocaranza MP,Michea L,Chiong M,et al.Recent insights and therapeutic perspectives of angiotensin-(1-9) in the cardiovascular system.Clinical Science,2014,127:549-557.

    [14]McKinney CA,F(xiàn)attah C,Loughrey CM,et al.Angiotensin-(1-7) and angiotensin-(1-9) function in cardiac and vascular remodeling.Clin Sci(Lond),2014,126:815-827.

    [15]Ocaranza MP,Godoy I,Jalil JE,et al.Enalapril attenuates downregulation of angiotensin-converting enzyme 2 in the late phase of ventricular dysfunction in myocardial infarcted rat.Hypertension,2006,48:572-578.

    [16]Ocaranza MP,Lavandero S,Jalil JE,et al.Angiotensin-(1-9)regulates cardiac hypertrophy in vivo and in vitro.J Hypertens,2010,28:1054-1064.

    [17]Flores-Munoz M,Work LM,Douglas K,et al.Angiotensin-(1-9) attenuates cardiac fibrosis in the stroke-prone spontaneously hypertensive ratvia the angiotensin type 2 receptor.Hypertension,2012,59:300-307.

    Changes of ACE2/Ang-(1-9)/Ang-(1-7)axis in ischemic cardiac dysfunction rabbits and the theraputic effects of Perindopril

    HAO Xiao,LI Shu-ren,MENG Tian-tian,et al.Cardiology Department,Hebei General Hospital,Shijiazhuang 050051,China

    Objective To investigate effects of Perindopril on ACE2/Ang-(1-9)/Ang-(1-7)axis in ischemic cardiac dysfunction rabbits.Methods 30 male rabbits were selected.The rabbits were randomly divided into 3 groups(n=10):Perindopril group,cardiac dysfunction group and control group.The left anterior descending coronary arteries of the rabbits were ligatured for model preparation.In the Perindopril group,rabbits were treated with Perindopril split normal saline solution 2 ml·kg-1·d-1(1 mg/ml).In cardiac dysfunction group and control group,rabbits were treated with normal saline solution 2 ml·kg-1·d-1(0.33 mg/ml).4 weeks after treatment,cardiac function was measured via echocardiography,angiotensin-converting enzyme 2 mRNA expression was analyzed by real-time PCR,serum Ang-(1-9)and Ang-(1-7)level ware detected by enzyme linked immunosorbent assay.Results Compared with control group,the cardiac function of the other two groups were significantly reduced[(50.61±3.21)%vs(46.44±1.66)%,P<0.01],but the serum Ang-(1-9)[(3.86±0.49)ng/ml vs (3.03±0.29)ng/ml,P<0.01]and Ang-(1-7)[(3.82±0.59)ng/ml vs (2.76±0.22)ng/ml,P<0.01]level and the ACE2(0.41±0.14 vs 0.25±0.08,P<0.01)mRNA expression of the other two groups were significantly improved.Compared with cardiac dysfunction group,Perindopril group got significant improvement in ACE2(0.41±0.14 vs 0.25±0.08,P<0.01)mRNA expression and the serum level of Ang-(1-9)[(4.71±0.31)ng/ml vs(3.86±0.49)ng/ml,P=0.001]and Ang-(1-7)[(4.42±0.50)ng/ml vs (3.82±0.59)ng/ml,P=0.039].Correlation analysis revealed that the improvement of the cardiac function was associated with ACE2 mRNA expression(R=0.770,P=0.003).Conclusion Accompanied by RAAS activated in ischemic cardiac dysfunction rabbits,the ACE2/Ang-(1-9)/Ang-(1-7)was also activated.Perindopril can improve cardiac function via ACE2/Ang-(1-9)/Ang-(1-7)axis.

    Ischemic cardiac dysfunction; Renin-angiotensin-aldosterone system; Angiotensin converting enzyme 2;Angiotensin converting enzyme inhibitor

    LI Shu-ren,E-mail:lsr64@126.com

    050051 河北省石家莊市,河北醫(yī)科大學(xué)附屬河北省人民醫(yī)院心臟一科

    李樹仁,E-mail:lsr64@126.com

    10.3969/j.issn.1672-5301.2016.07.022

    Q95-33;R542.2

    A

    1672-5301(2016)07-0658-05

    2015-12-24)

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