ELISA方法檢測　MP-IgM與冷凝集試驗(yàn)對小兒肺炎支原體感染診斷價(jià)值的比較

韓紅星

（深圳市第三人民醫(yī)院，廣東　深圳　518112）

ELISA方法檢測MP-IgM與冷凝集試驗(yàn)對小兒肺炎支原體感染診斷價(jià)值的比較

韓紅星

（深圳市第三人民醫(yī)院，廣東深圳518112）

目的 通過ELISA法與冷凝集試驗(yàn)兩種方法檢測小兒肺炎支原體肺炎（MPP）患者的血清，分析兩種檢驗(yàn)方法在小兒肺炎支原體感染的診斷的價(jià)值。方法 選擇本院兒科收治確診的157例肺炎支原體感染患兒，分別采用血清ELISA和冷凝集兩種檢測方法，分析探討兩組陽性率。結(jié)果 ELISA法檢測MP-IgM陽性有142例，陽性檢出率為90.4%；冷凝集試驗(yàn)方法檢測陽性為126例，陽性檢出率為80.3%，各年齡段陽性檢出率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩種檢測方法學(xué)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 ELISA法與冷凝集試驗(yàn)相比，敏感性更高，具有良好的實(shí)驗(yàn)室診斷價(jià)值。

ELISA法； 冷凝集法； 肺炎支原體

肺炎支原體（mycoplasma pneumaniae，MP）是急性呼吸道感染、支氣管炎、哮喘等的常見病原體之一，近年來呈明顯上升的趨勢［1-3］。任何年齡段均可以發(fā)生MP感染，多見于兒童和嬰幼兒。值得注意的是，肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumaniae pneumania，MPP）與其他肺部感染的臨床癥狀和特征較為相似，因此在臨床上容易出現(xiàn)誤診或漏診［5］。研究顯示，MP主要通過氣溶膠形式傳播，大約每隔3年即出現(xiàn)局部地區(qū)大范圍流行，其不僅能引起呼吸道疾病，還能引發(fā)其他系統(tǒng)多種并發(fā)癥［6］。大多數(shù)情況下，僅僅依據(jù)臨床癥狀難以與病毒、細(xì)菌及結(jié)核感染相互區(qū)別，因此醫(yī)生需要通過臨床檢驗(yàn)分析，才能準(zhǔn)確迅速的診斷MP感染，及時(shí)進(jìn)行治療，避免發(fā)生嚴(yán)重的并發(fā)癥［7］。本次研究將對患兒血清進(jìn)行ELISA法與冷凝集試驗(yàn)兩種方法比較，探討其在肺炎支原體感染的診斷過程中的價(jià)值?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

資料與方法

1 臨床資料

選取本院兒科2014年3月至2015年3月收治確診的201例MP感染患兒為研究對象?；純耗挲g范圍為1～12歲，根據(jù)已有的文獻(xiàn)，將其分為1～2歲54例、3～5歲65例以及6～12歲以上82例，其中男性為100例，女性為101例［8］。所有患兒臨床上均表現(xiàn)出有呼吸道感染的癥狀，包括持續(xù)發(fā)熱并伴有刺激性咳嗽、呼吸困難、腹瀉和食欲減退?；純阂话闩R床資料見表1。

DOI：10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.04.026

收稿日期：2015-10-11；修回日期：2015-11-15

作者簡介：韓紅星（1970—），男，本科，副主任技師。研究方向：臨床免疫檢驗(yàn)。Tel：18102786250；E-mall：lqlqianl1626@163.com

表1　患兒基本臨床資料統(tǒng)計(jì)

2 方法

患者靜脈血采集后3000 rpm離心15 min，分離獲得血清標(biāo)本，采用德國歐蒙EIISA試劑盒進(jìn)行血清MP-IgM檢測，操作方法嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。另外，通過日本富士肺炎支原體檢測凝集試驗(yàn)試劑盒，按照《中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)全書》中的要求標(biāo)準(zhǔn)化操作，當(dāng)檢測滴度大于1∶64時(shí)判定該標(biāo)本為MP陽性［2］。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

運(yùn)用SPSS17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 兩種MP檢測方法陽性率對比

兩種小兒MP檢測結(jié)果顯示，ELISA檢測的MPIgM陽性有179例，冷凝集試驗(yàn)方法檢測陽性為159例。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，ELISA方法的陽性檢出率高于冷凝集試驗(yàn)（P＜0.05）。結(jié)果見表2。

表　2 兩種小兒　MP檢測方法陽性率對比

2 兩種MP檢測方法陽性數(shù)對比

經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，ELISA法和冷凝集法檢測均為陽性的為150例；ELISA法陽性而冷凝集為陰性的有29例；ELISA法陰性冷凝集陽性的有9例；兩種方法均為陰性的共有13例。經(jīng)配對χ2檢驗(yàn)分析，兩種檢測方法差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)果見表3。

表3　兩種小兒　MP檢測方法陽性數(shù)對比

討 論

已有的臨床調(diào)研顯示，MP是引起小兒急性呼吸道感染的一種常見病原體。該病原體介于細(xì)菌和病毒之間，通過呼吸道傳染，容易引起呼吸道感染、咽炎、支氣管炎等疾病，對多系統(tǒng)器官造成損傷，嚴(yán)重者危及患者生命［9-11］。自MP被證實(shí)為小兒肺炎的病原體后，已逐漸受到人們的關(guān)注。目前，用于檢測MP感染的實(shí)驗(yàn)診斷方法有培養(yǎng)、冷凝集試驗(yàn)、ELISA法、免疫熒光法和PCR法等。培養(yǎng)分離MP雖然對診斷和鑒別有決定性意義，但其檢出時(shí)間較長（2～3周），實(shí)驗(yàn)操作繁瑣，難度大以及試劑不能保存導(dǎo)致其不能作為臨床快速診斷的方法，因而在臨床上推廣應(yīng)用有困難；冷凝集試驗(yàn)為非特異性方法，操作簡單易行，被視為診斷MP的傳統(tǒng)方法；MP-IgM在發(fā)病7天左右出現(xiàn)，21～28天達(dá)到最高，隨后開始下降。由于MP潛伏期為14～21天，因此當(dāng)患者就診時(shí)，大部分均已出現(xiàn)MP-IgM。由于其為MP感染早期出現(xiàn)的特異性抗體，因此檢測MP-IgM對于早期診斷MP感染有重要意義，可明顯縮短患兒MP感染病程；PCR通過檢測MP的DNA水平，雖然檢出率較高，檢測快速，但其費(fèi)用較高，需要具有PCR實(shí)驗(yàn)室已驗(yàn)收的醫(yī)院才能開展，且檢出假陽性率較高。因此臨床上常采用血清學(xué)方法即ELISA法和冷凝集方法 ［12-14］。

本次研究對本院兒科接治的201例MP感染患兒，經(jīng)ELISA和冷凝集試驗(yàn)進(jìn)行檢測后所得到的各年齡段患兒陽性標(biāo)本數(shù)，統(tǒng)計(jì)得出ELISA法陽性檢出率較冷凝集法高，其中1～2歲、3～5歲和6～12歲的小兒陽性率分別高了7.4%、10.8%和11.0%，表明各年齡段的MP患兒采用ELISA進(jìn)行檢測陽性率均高于冷凝集法。各年齡段的ELISA法和冷凝集法檢測的陽性率差異不大，表明兩種方法在不同年齡段患兒的檢測上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

值得注意的是，兩種檢測方法均出現(xiàn)假陰性，分析原因，可能與中后期重癥感染患兒不出現(xiàn)MP-IgM抗體以及免疫功能低下患兒僅產(chǎn)生少量血清抗體密切相關(guān)。所以，在臨床診斷中，檢驗(yàn)結(jié)果為陰性的要注意根據(jù)臨床患兒癥狀、發(fā)病時(shí)間和用藥狀況進(jìn)行再次診斷，從而確診是否為MP患兒。

總結(jié)相關(guān)結(jié)果得出，ELISA法與冷凝集方法相比，敏感性更高。因此臨床上可以考慮將其法用于初檢篩選或者檢測聯(lián)用的方法進(jìn)行推廣。

［1］許莉莉，程邦寧，劉慧娟，等.9693例呼吸道感染患兒非典型病原體感染病原學(xué)檢測結(jié)果分析.中華疾病控制雜志，2014，18 （2）：178-180.

［2］孫紅，孫紅妹.肺炎支原體直接損傷及其免疫學(xué)致病機(jī)制研究進(jìn)展.中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2015，35（1）：65-68.

［3］林俊宏，鄧力.難治性肺炎支原體肺炎纖維支氣管鏡介入治療.中國實(shí)用兒科雜志，2013，28（12）：886-888.

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（李 凌編輯）

Comparison of ELISA and Cold Agglutination Test in Detection of Anti-MP-IgM in Children with Mycoplasma Pneumoniae Infection

HAN Hong-xing
（Shenzhen Third People’s Hospital，Shenzhen 518112，China）

Objective To evaluate value of ELISA and cold agglutination test（CAT）in detection of serum MPIgM in children with infection of mycoplasma pneumoniae.Methods A total of 157 children with infection of mycoplasma pneumoniae were involved in this study.The serum samples were collected and detected by ELISA and CAT.The positive rates of MP-IgM by two methods were analyzed in different ages of children.Results The number of positive anti-MP-IgM antibody samples was 142 and the positive rate was 90.4%with ELISA.On the other hand，the number with CAT detection was 126 and the positive rate was 80.3%.The positive rates of MPIgM in different ages of children were significant difference detected by two methods（P＜0.05）.Conclusion ELISA could have higher sensitivity than cold agglutination test in the detection of serum MP-IgM，and it might be more suitable for clinical application.

ELISA； Cold agglutination test； Mycoplasma pneumoniae