影響全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀BC-5380檢測結(jié)果的原因分析

樊祖茜，孫　雷，張　葉

(廣西壯族自治區(qū)欽州市婦幼保健院　535099)

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影響全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀BC-5380檢測結(jié)果的原因分析

樊祖茜，孫雷，張葉

(廣西壯族自治區(qū)欽州市婦幼保健院535099)

血細(xì)胞分析；BC-5380；影響因素

血常規(guī)是臨床三大常規(guī)之一，在臨床上有著重要的地位，對于疾病的診斷、治療方案的制訂以及療效的判斷都有很大幫助。本科室自2009年開始使用BC-5380全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀。BC-5380是采用半導(dǎo)體激光散射技術(shù)和細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)，配合改良的流式分析裝置對白細(xì)胞進(jìn)行精確的五分類分析，具有雙通道白細(xì)胞五分類及異常細(xì)胞篩選功能，可提供27項(xiàng)參數(shù)、2個(gè)散點(diǎn)圖、2個(gè)直方圖以及異常報(bào)警等參數(shù)和信息。但是，在日常的工作中，血常規(guī)的檢測結(jié)果可能會(huì)因?yàn)橐恍┥?、病理或操作等方面的因素，直接或間接影響到結(jié)果的準(zhǔn)確性。為了避免檢測結(jié)果與臨床不符的情況，現(xiàn)將多年臨床工作中所了解到的影響B(tài)C-5380檢測結(jié)果的因素總結(jié)如下。

1　白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類的影響因素

白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類采用的方法學(xué)是激光散射法和電阻抗法，影響其檢測結(jié)果的因素有以下幾個(gè)方面：

1.1生理因素白細(xì)胞計(jì)數(shù)存在著日間差異，一天之內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量最高值與最低值可相差一倍，午后較高，清晨較低[1]。

1.2靜脈血與末梢血差異末梢血WBC計(jì)數(shù)結(jié)果稍高于靜脈血[2]。

1.3有核紅細(xì)胞的干擾有核紅細(xì)胞是未成熟的紅細(xì)胞，在健康人外周血中一般不會(huì)出現(xiàn)[3]。外周血中出現(xiàn)有核紅細(xì)胞，可能與貧血、缺氧等情況有關(guān)，并有報(bào)道稱有核紅細(xì)胞數(shù)量可作為新生兒窒息、新生兒呼吸窘迫綜合征的判斷指標(biāo)[4]。當(dāng)外周血出現(xiàn)有核紅細(xì)胞時(shí)，由于BC-5380方法學(xué)的缺陷，儀器會(huì)按照細(xì)胞體積的大小把有核紅細(xì)胞誤歸入到白細(xì)胞總數(shù)內(nèi)，造成白細(xì)胞總數(shù)的假性增高，甚至?xí)哌_(dá)(50～100)×109/L，分類中以淋巴細(xì)胞為主。遇到這種情況可進(jìn)行外周血白細(xì)胞糾正，公式為：校正后白細(xì)胞數(shù)=100/(100+有核紅細(xì)胞數(shù))×校正前白細(xì)胞總數(shù)，公式中的有核紅細(xì)胞數(shù)為分類100個(gè)白細(xì)胞時(shí)所遇到的有核紅細(xì)胞總數(shù)。

1.4原始幼稚細(xì)胞當(dāng)外周血出現(xiàn)原始幼稚細(xì)胞時(shí)，白細(xì)胞總數(shù)通常會(huì)異常增高，分類會(huì)出現(xiàn)“*”或者分類不準(zhǔn)確，這時(shí)，需要用顯微鏡進(jìn)行復(fù)檢以估算白細(xì)胞總數(shù)，白細(xì)胞總數(shù)=一個(gè)高倍鏡視野的白細(xì)胞平均個(gè)數(shù)×2×109/L[5]，并在油鏡下分類200個(gè)白細(xì)胞，與儀器進(jìn)行比較，給臨床正確的提示。

2　血紅蛋白的影響因素

血紅蛋白檢測用的是比濁法，利用濁度的改變來判斷血紅蛋白量的多少，因此，能引起血漿顏色改變的都會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性(比如脂血)。脂血標(biāo)本血漿顏色呈乳白色或者渾濁狀，需通過離心或者自然沉降后觀察血漿顏色才可發(fā)現(xiàn)是否為脂血標(biāo)本，但是，在日常工作中血常規(guī)標(biāo)本量大，且檢驗(yàn)結(jié)果回報(bào)時(shí)間(TAT)為30 min，檢驗(yàn)人員沒有足夠的時(shí)間去處理每一個(gè)標(biāo)本，但是可以通過紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)這個(gè)指標(biāo)來判斷。MCHC的正常范圍是320 ～360 g/L，MCHC增高常見于遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥，但是一般不會(huì)超過380 g/L，當(dāng)MCHC超過380 g/L時(shí)，可以離心觀察標(biāo)本是否有脂血的現(xiàn)象，如果有，可以采用生理鹽水等比例置換血漿的方式，混勻后重新上機(jī)檢測就可以去除脂血的干擾。只有合格的標(biāo)本才可以反映患者的真實(shí)情況，因此在做血常規(guī)檢查時(shí)要排除脂血的干擾。

3　血小板計(jì)數(shù)(PLT)的影響因素

血小板的檢測采用的是電阻抗法，根據(jù)體積的大小來識別血小板，影響因素有以下幾個(gè)方面：

3.1抽血因素的影響當(dāng)抽血不順，標(biāo)本中出現(xiàn)凝塊時(shí)，檢測結(jié)果會(huì)出現(xiàn)三系減少，或者出現(xiàn)“*”，血小板直方圖呈現(xiàn)尾部抬高(圖1)，或橫向波浪線的現(xiàn)象(圖2)，此時(shí)可用竹簽挑取或觀察標(biāo)本的流動(dòng)性來判斷是否有凝塊，當(dāng)標(biāo)本有凝塊時(shí)，凝塊處往往顏色比較深，流動(dòng)速度不均勻，呈區(qū)域性的流動(dòng)，比較緩慢，此時(shí)只有重新采樣復(fù)查才可以得到比較準(zhǔn)確的結(jié)果。標(biāo)本有凝塊，也容易造成儀器管道阻塞，對后期的維護(hù)和保養(yǎng)造成很大的不便，因此建議上機(jī)前先觀察標(biāo)本是否有凝塊。在日常工作中，有時(shí)候也會(huì)出現(xiàn)肉眼看不見的微小凝集，這種情況也會(huì)造成PLT的假性減低，而對白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白影響不大，PLT減低的程度與凝集的程度及標(biāo)本PLT的基礎(chǔ)量有關(guān)。當(dāng)初次檢測PLT<100×109/L時(shí)，或者與臨床疾病不符時(shí)，可以通過外周血涂片觀察片尾或片中是否有血小板成群聚集現(xiàn)象(圖3)，正常的血小板在EDTA-抗凝劑的作用下呈散在分布(圖4)。遇到微小凝集的標(biāo)本需重新采血復(fù)查，才可以得到準(zhǔn)確的結(jié)果。

3.2乙二胺四乙酸二鉀依賴性假性血小板減少癥(EDTA-PTCP)EDTA-PTCP會(huì)造成PLT的假性減低，原因是用EDTA鹽作為抗凝劑時(shí)，出現(xiàn)免疫介導(dǎo)的冷抗血小板自身抗體，這可能與血小板表面存在某種隱匿性抗原有關(guān)[6]。這是一種體外現(xiàn)象，并非疾病，在健康人群和各種疾病患者中都可以發(fā)生，暫時(shí)或者長時(shí)間伴隨都有可能。這種情況只能通過外周血涂片發(fā)現(xiàn)，在涂片中，血小板量不少，但是呈一小堆一小堆的聚集分布(圖5)，或出現(xiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象，用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管重抽還是如此。對于EDTA-PTCP，目前國內(nèi)還沒有統(tǒng)一的方法，但可以通過以下方法進(jìn)行糾正：(1)抽血后立即檢測；(2)通過采集末梢血用儀器稀釋模式立即檢測；(3)更換抗凝劑，目前大多選用的是枸櫞酸鈉，但是也必須在短時(shí)間內(nèi)檢測完畢；(4)除此之外有文獻(xiàn)報(bào)道，在EDTA抗凝血中加入氨基糖苷類抗生素、磷酸吡哆醛、氨茶堿等可能防止血小板凝集[7]。在用以上方法檢測的同時(shí)必須用PLT手工計(jì)數(shù)進(jìn)行比對。

圖1　　血小板聚集直方圖

圖2　　血小板聚集直方圖

圖3　　血涂片片尾血小板凝集

圖4　　正常EDTA-K2抗凝血中的血小板

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.16.070

C

1673-4130(2016)16-2359-03