血清抗CCP抗體和抗AKA抗體聯(lián)合檢測(cè)對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷價(jià)值

陶鵬輝

(河南省信陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科　464000)

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血清抗CCP抗體和抗AKA抗體聯(lián)合檢測(cè)對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷價(jià)值

陶鵬輝

(河南省信陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科464000)

目的探討抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體)、抗角蛋白抗體(抗AKA抗體)檢測(cè)對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)診斷的敏感度和特異性，以及二者聯(lián)合檢測(cè)在RA診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法分別采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)法、間接免疫熒光法檢測(cè)抗CCP抗體、抗AKA抗體，共檢測(cè)80例RA患者，40例其他自身免疫性疾病患者和30例健康體檢者。結(jié)果RA組抗CCP抗體和抗AKA抗體的陽(yáng)性率明顯高于非RA組和對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。單獨(dú)檢測(cè)抗CCP抗體的靈敏度為73.8%高于抗AKA抗體(41.3%),特異性為86.2%低于抗AKA抗體(95.7%),二者聯(lián)合檢測(cè)時(shí)敏感度和特異性均有所增高。結(jié)論抗CCP抗體對(duì)RA患者有很高的敏感度和特異性,并且與抗AKA抗體聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于RA的臨床診斷和預(yù)后判斷具有很高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；抗環(huán)瓜氨酸肽抗體；抗角蛋白抗體；間接免疫熒光法

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身免疫性疾病，我國(guó)患病率為0.41%[1]。其特征是以手和足小關(guān)節(jié)為主的多關(guān)節(jié)、對(duì)稱性、侵襲性關(guān)節(jié)炎癥，患者最終出現(xiàn)不可逆的骨關(guān)節(jié)破壞而導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸變和喪失勞動(dòng)力[2]。本病多為一種反復(fù)發(fā)作性疾病，致殘率較高，預(yù)后不良，目前還沒(méi)有很好的根治方法。目前國(guó)內(nèi)對(duì)于RA的血清學(xué)診斷指標(biāo)僅限于類風(fēng)濕因子(RF)的檢測(cè)，RF的敏感度雖然相對(duì)較高，但其特異性較低，對(duì)于RA早期診斷效果不夠理想。近年文獻(xiàn)報(bào)道一組以瓜氨酸化的聚絲蛋白或前聚絲蛋白衍生物為底物的抗體對(duì)RA診斷有較高特異性，抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體)、抗角蛋白抗體(抗AKA抗體)在診斷RA中具有關(guān)鍵作用。本研究通過(guò)回顧性分析抗CCP抗體及抗AKA抗體在RA診斷中的敏感度和特異性，并進(jìn)一步分析比較，以探討兩者在RA診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1　資料與方法

1.1一般資料選取本院2014年1～12月風(fēng)濕免疫科門診及住院RA患者80例，符合2010年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)(ACR)和歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(EULAR)重新修訂的RA診斷標(biāo)準(zhǔn)。非RA組：其他自身免疫病組為同期風(fēng)濕免疫科門診及住院患者40例，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡、混合性結(jié)締組織病等患者，均符合國(guó)內(nèi)或國(guó)際相應(yīng)的診斷標(biāo)準(zhǔn)。健康對(duì)照組：同期在本院體檢中心健康體檢者30例。

1.2方法采集所有受試者晨起空腹靜脈血3 mL,以4 000 r/min離心5 min后分離血清，4 h內(nèi)需要完成檢測(cè)；抗CCP抗體檢測(cè)采用羅氏公司Cobas e 601免疫化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑?？笴CP抗體臨界值為17 U/mL?？笰KA抗體檢測(cè)采用間接免疫熒光法，試劑由德國(guó)EUROIMMUN 醫(yī)學(xué)試驗(yàn)診斷有限公司提供。血清做1∶10稀釋，抗AKA抗體與大鼠食管冰凍切片反應(yīng)，形成圍繞角質(zhì)層細(xì)胞的線狀、板層狀的典型熒光，熒光模式與陽(yáng)性對(duì)照所顯示的一致即判為陽(yáng)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)以率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1各指標(biāo)檢測(cè)的陽(yáng)性率比較見(jiàn)表1。

表1　　各指標(biāo)檢測(cè)的陽(yáng)性率比較[n(%)]

注：與其他兩組比較，*P<0.05。

2.2各指標(biāo)單項(xiàng)檢測(cè)與聯(lián)合檢診斷價(jià)值比較見(jiàn)表2。

表2　　各指標(biāo)單項(xiàng)檢測(cè)與聯(lián)合檢診斷價(jià)值比較(%)

3　討　　論

RA是一種病因尚未闡明的由自身免疫系統(tǒng)功能障礙引起免疫系統(tǒng)攻擊關(guān)節(jié)的長(zhǎng)期慢性炎癥，女性好發(fā)，發(fā)病率為男性的2～3倍，可發(fā)生于任何年齡階段，高發(fā)年齡層為40～60歲。主要臨床表現(xiàn)為受累關(guān)節(jié)腫脹、疼痛、功能下降、病變持續(xù)反復(fù)發(fā)作的過(guò)程。RA疾病表現(xiàn)在關(guān)節(jié)部位，問(wèn)題出在免疫系統(tǒng)，致病根源是在免疫系統(tǒng)的T淋巴細(xì)胞，表現(xiàn)主要為Th1/Th2的失衡，導(dǎo)致免疫功能的紊亂，進(jìn)而產(chǎn)生慢性無(wú)菌性滑膜炎癥，隨著無(wú)菌性炎癥刺激骨質(zhì)和增生增厚則會(huì)出現(xiàn)關(guān)節(jié)受累，以致累及到心臟、呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)以及腎臟，甚至致殘致死。RA是一種以慢性進(jìn)行性關(guān)節(jié)病變?yōu)橹鞯娜硇悦庖咝约膊?，也是“不死的癌癥”風(fēng)濕病中最常見(jiàn)的一種類型，癥狀主要為關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、活動(dòng)困難及發(fā)僵，長(zhǎng)期不愈的晚期癥狀則為關(guān)節(jié)畸形和強(qiáng)直，或?qū)е陆K身殘疾。一旦出現(xiàn)早期癥狀，應(yīng)盡早接受專業(yè)化治療，并定期做相關(guān)檢測(cè)，以便及時(shí)確診和了解病情進(jìn)展，調(diào)整用藥，延緩病情進(jìn)展，改善關(guān)節(jié)功能，提高患者的生存質(zhì)量。大多數(shù)RA的病情可得到很好的控制，甚至完全緩解。研究發(fā)現(xiàn)，根據(jù)RA發(fā)病早期的臨床特點(diǎn)可大致判斷其預(yù)后，某些臨床及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)對(duì)病情估計(jì)及指導(dǎo)用藥很有意義。

在2000年，Schellekens 等[3]將1條由19個(gè)氨基酸殘基組成的瓜氨酸肽鏈中的2個(gè)絲氨酸替換為半胱氨酸，形成與β-轉(zhuǎn)角具有相似結(jié)構(gòu)的二硫健，合成環(huán)瓜氨酸肽(CCP)，并建立以人工合成CCP為抗原的檢測(cè)方法?？笴CP抗體不僅是RA早期診斷項(xiàng)目，而且是鑒別侵蝕性或者非侵蝕性RA的靈敏指標(biāo)，抗CCP抗體陽(yáng)性患者一般出現(xiàn)或容易演變成較陰性者更嚴(yán)重的關(guān)節(jié)骨質(zhì)損壞?？笴CP抗體與RA的骨侵蝕、關(guān)節(jié)功能障礙密切相關(guān)[4]。還有臨床研究顯示，抗CCP抗體可以作為評(píng)價(jià)疾病活動(dòng)度及預(yù)示骨質(zhì)侵蝕的指標(biāo)[5-6]。本研究表明抗CCP抗體在RA組的陽(yáng)性率明顯高于非RA組和對(duì)照組，在RA診斷中敏感性為73.8%,而特異性為86.2%,在非RA組的陽(yáng)性檢出率只有5%，健康者中沒(méi)有查出,說(shuō)明抗CCP抗體是診斷RA特異性較高的血清學(xué)指標(biāo)。2010年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)(ACR)和歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(EULAR)重新修訂了診斷標(biāo)準(zhǔn)中，把抗CCP抗體納入RA血清學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]。抗CCP抗體的臨床意義不僅是早期RA的預(yù)測(cè)指標(biāo)，其出現(xiàn)往往早于RA典型臨床癥狀,也是RA的臨床監(jiān)測(cè)指標(biāo)，用于判斷RA的活動(dòng)情況，更是RA的預(yù)后指標(biāo)，抗CCP抗體陽(yáng)性的患者其影像學(xué)破壞的程度較抗體陰性者嚴(yán)重。

1979年Young等發(fā)現(xiàn)RA患者血清中有一種能與鼠食管角質(zhì)層反應(yīng)的抗體，并對(duì)RA具有特異性，命名為AKA。1989年Vincent等提出應(yīng)把AKA更名為抗角質(zhì)層抗體(抗AKA抗體)更為恰切。由于AKA在疾病臨床癥狀出現(xiàn)之前就可以在血清中被檢測(cè)到，提示了AKA在RA進(jìn)程中扮演者重要的角色[8]。因此,該抗體的檢測(cè)可對(duì)RF陰性的RA患者提供檢查指標(biāo)?？笰KA抗體與RA病情嚴(yán)重性和活動(dòng)性有關(guān),在RA早期甚至臨床癥狀出來(lái)前即可檢出,所以，抗AKA抗體檢測(cè)對(duì)RA早期診斷和預(yù)后判斷很有意義。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)抗AKA抗體雖然敏感度不高(41.3%)，但具有較高的特異度(95.7%)，抗AKA抗體是RA較理想的臨床實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。由于RA的發(fā)病機(jī)制至今不明，臨床診斷方法采用多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合測(cè)定。本研究發(fā)現(xiàn)抗CCP抗體與抗AKA抗體聯(lián)合測(cè)定，不僅提高了敏感度，特異度也提高到100%，能避免單項(xiàng)檢測(cè)的局限性，減少漏診，可當(dāng)做RA確診的重要依據(jù)，特別適用于RF陰性或癥狀不明顯的RA。在檢測(cè)中，發(fā)現(xiàn)對(duì)于疑似早期RA患者進(jìn)行抗CCP抗體與抗AKA抗體聯(lián)合檢測(cè)，對(duì)RA的早期診斷、病情監(jiān)測(cè)、療效觀察和預(yù)后判斷等均有十分重要的臨床意義。

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Clinical application value of combination detection of serum anti-CCP antibody and anti-AKA antibody for rheumatoid arthritis

TAOPenghui

(DepartmentofClinicalLaboratory,XinyangMunicipalCentralHospital,Xinyang,Henan464000,China)

ObjectiveTo explore the sensitivity and specificity of anti-cyclic citrullinated peptide antibody (anti-CCP antibody) and anti-keratin antibody (anti-AKA antibody) detection for diagnosing rheumatoid arthritis (RA) and the application value of their combination detection in the diagnosis and treatment of RA.MethodsThe chemiluminescent microparticle immunoassay and indirect immunofluorescence analysis were adopted to detect anti-CCP antibody and anti-AKA antibody in 80 cases of RA,40 cases of other auto-immune diseases(AID) and 30 people undergoing the physical examination.ResultsThe positive rates of anti-CCP antibody and anti-AKA antibody in the RA group were significantly higher than those in the non-RA group and control group,the differences were statistically significant (P<0.05).The sensitivity of single anti-CCP antibody detection in the RA group was 73.8%,which was higher than 41.3% of anti-AKA antibody,while the specificity of single anti-CCP antibody detection was 86.2%,which was lower than 95.7% of anti-AKA antibody detection.In their combined detection,the sensitivity and specificity were increased.ConclusionThe anti-CCP antibody detection has higher sensitivity and specificity for diagnosing RA.Its combined detection with anti-AKA antibody can avoid the missed diagnosis of atypical clinical early stage RA,which has a higher clinical value in the diagnosis and prognosis of RA.

rheumatoid arthritis;anti-cyclic citrullinated peptide antibody;anti-keratin antibody;indirect immunofluorescence

陶鵬輝，男，副主任技師，主要從事臨床免疫、生化與微生物學(xué)檢驗(yàn)與研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.16.031

A

1673-4130(2016)16-2285-02

2015-12-10)