• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    西瓜重要種傳病害研究進展

    2016-09-14 06:14:16徐秀蘭宋順華張志勇吳學宏耿麗華
    植物保護 2016年1期
    關鍵詞:花葉病毒細菌性病菌

    徐秀蘭, 宋順華, 張志勇, 吳學宏, 耿麗華*

    (1. 北京市農(nóng)林科學院蔬菜研究中心, 農(nóng)業(yè)部華北地區(qū)園藝作物生物學與種質(zhì)創(chuàng)制重點試驗室,農(nóng)業(yè)部都市農(nóng)業(yè)(北方)重點試驗室, 北京 100097; 2. 北京農(nóng)學院植物科學技術學院,北京 102206; 3. 中國農(nóng)業(yè)大學植物病理學系, 北京 100193)

    ?

    西瓜重要種傳病害研究進展

    徐秀蘭1,宋順華1,張志勇2,吳學宏3,耿麗華1*

    (1. 北京市農(nóng)林科學院蔬菜研究中心, 農(nóng)業(yè)部華北地區(qū)園藝作物生物學與種質(zhì)創(chuàng)制重點試驗室,農(nóng)業(yè)部都市農(nóng)業(yè)(北方)重點試驗室, 北京100097; 2. 北京農(nóng)學院植物科學技術學院,北京102206; 3. 中國農(nóng)業(yè)大學植物病理學系, 北京100193)

    本文圍繞目前我國西瓜生產(chǎn)中西瓜蔓枯病、細菌性果斑病、黃瓜綠斑駁病毒病等重要的種傳病害,闡述了其發(fā)生與危害;討論了國內(nèi)外在病原物種子傳帶機制方面的研究進展;分析比較種子健康傳統(tǒng)檢測技術與現(xiàn)代分子檢測技術的優(yōu)點與局限性;總結現(xiàn)有的種子處理方法,最后提出了尚未明確和亟須研究的問題,為西瓜種傳病害的防控提供參考。

    種傳病害;種子健康檢測;種子處理;西瓜

    西瓜是深受人們喜愛的夏季消暑水果。我國是世界上最大的西瓜生產(chǎn)和消費國,2011年的西瓜產(chǎn)量已占到全球總量的66.9%,遠超排在第二位的土耳其(占3.7%)。隨著我國西瓜生產(chǎn)種植面積不斷增加,西瓜種子產(chǎn)業(yè)也逐漸發(fā)展壯大。目前西瓜生產(chǎn)上有一定影響和實力的育種經(jīng)營單位有20~30家,全國年生產(chǎn)西瓜種子約1 500 t[1]。西瓜種子生產(chǎn)的專業(yè)化和區(qū)域化初步形成,制種產(chǎn)區(qū)主要集中在我國西北地區(qū)。由于西瓜種子可攜帶多種病原微生物,近年來隨著西瓜種子調(diào)運和貿(mào)易引起的病害傳播和經(jīng)濟糾紛等問題越來越引起人們的關注?,F(xiàn)今的西瓜種植中普遍采用工廠化嫁接育苗,由于種植密度高、溫濕度大、嫁接造成傷口等因素都利于種傳病害的傳播流行,如何在西瓜制種和生產(chǎn)過程中防止西瓜種傳病害的傳播和危害,對于西瓜產(chǎn)業(yè)的良性發(fā)展顯得尤為重要。本文圍繞當前西瓜種傳重要病原真菌、細菌和病毒類微生物總結討論了病害的種傳機制、檢測技術以及種子處理技術的研究進展,提出了仍需加強研究的問題以及種傳病害防治的建議。

    1 西瓜生產(chǎn)中重要的種傳病害及其危害

    1.1西瓜種子攜帶真菌

    已報道西瓜種子攜帶的真菌有10個屬(表1),其中重要的致病菌有鐮刀菌屬(Fusarium)真菌和瓜類黑腐球殼菌(Didymellabryoniae)。雖然Fusarium和Didymella是典型的土傳真菌,但種子傳帶仍是病菌遠距離傳播的主要途徑。尖孢鐮刀菌西瓜專化型(F.oxysporumf.sp.niveum)引起西瓜枯萎病[2],腐皮鐮刀菌葫蘆?;?F.solanif.sp.cucurbitae)可導致西瓜幼苗根腐爛,帶菌量高的種子可引起50%以上的發(fā)病率[3]。此外,研究表明鐮刀菌還大幅度降低種子發(fā)芽活力[4]。瓜類黑腐球殼菌能侵染西瓜植株各個部位,它引起的蔓枯病在西瓜整個生育期均可發(fā)病,病株率一般為15%~25%,嚴重時達60%~80%,病害流行可使瓜田出現(xiàn)大量死藤,減產(chǎn)80%以上,嚴重影響西瓜的產(chǎn)量和品質(zhì)[5-6]。

    1.2西瓜種子攜帶細菌

    由西瓜嗜酸菌(Acidovoraxcitrulli)引起的西瓜細菌性果斑病(又稱果腐病)是目前最為重要的檢疫性種傳細菌病害。果斑病不僅危害果實,也在西瓜幼苗期引起腐爛枯死的癥狀。在適宜的環(huán)境條件下,果斑病造成西瓜田塊毀滅性的損失。自20世紀60年代在美國佐治亞州發(fā)現(xiàn),由于種子傳帶西瓜嗜酸菌和日益頻繁的國際種子貿(mào)易,90年代細菌性果斑病在美國的西瓜種植田大暴發(fā)并迅速在全球多個國家傳播[7]。果斑病的嚴重危害迫使種子公司轉移繁種基地、采取種子處理措施,然而果斑病的發(fā)生和流行還是沒有得到控制。由于西瓜的工廠化育苗嫁接的高溫高濕環(huán)境很適宜西瓜嗜酸病菌的快速傳播,一粒帶菌量為10 cfu的種子足以引起苗期果斑病的發(fā)生[8]。另2種瓜類種傳細菌性病害分別是假單胞菌屬Pseudomonassyringaepv.lachrymans引起的角斑病,和黃單胞屬Xanthomonascampestrispv.cucurbitae引起的葉斑病[9-10]。相對果斑病而言,這2種病害在西瓜上造成的危害較小,我國尚無這2種病害由種子傳播造成大面積暴發(fā)的報道。

    1.3西瓜種子攜帶病毒

    西瓜種子可以傳帶多種病毒,包括南瓜花葉病毒(Squashmosaicvirus)、煙草環(huán)斑病毒(Tobaccoringspotvirus)、黃瓜綠斑駁花葉病毒(Cucumbergreenmottlemosaicvirus)、小西葫蘆綠斑駁病毒(Zucchinigreenmottlemosaicvirus)等;其中黃瓜綠斑駁花葉病毒CGMMV是目前我國西瓜上最為重要的檢疫性種傳病毒,感病的西瓜果實空洞呈絲瓜瓤狀,味苦不能食用,嚴重減產(chǎn)。2002年我國從入境的植物種子中檢測到該病毒,2005年遼寧的大棚西瓜大面積暴發(fā)CGMMV,危害面積333 hm2,其中13 hm2絕收[11]。近年來,CGMMV的發(fā)生呈上升蔓延趨勢,2011年浙江溫嶺地區(qū)危害面積100 hm2[12],至今全國至少已有12個省市有該病害發(fā)生。吳元華等[13]對黃瓜綠斑駁花葉病毒在中國定殖和擴散的風險性進行了分析,認為CGMMV在中國的風險值(R)已達2.39,屬高度危險性有害生物,需要加強對該病的檢疫管理。

    表1 西瓜種子攜帶微生物種類Table 1 Watermelon seed-associated microorganisms

    續(xù)表1Table 1(Continued)

    病原微生物Pathogen學名Latinname所致種傳(種子)病害名稱Seed-transmitted(seed)disease簡稱Abbreviation參考文獻Reference細菌西瓜嗜酸菌Acidovoraxcitrulli西瓜細菌性果斑病Ac22丁香假單胞菌黃瓜致病變種Pseudomonassyringaepv.lachrymans西瓜細菌性角斑病Psl9甘藍黑腐黃單胞瓜葉斑致病亞種Xanthomonascampestrispv.cucurbitae西瓜細菌性葉斑病-23病毒南瓜花葉病毒SquashmosaicvirusSqMV24煙草環(huán)斑病毒Tobaccoringspotvirus西瓜病毒病TRSV25黃瓜綠斑駁花葉病毒CucumbergreenmottlemosaicvirusCGMMV26小西葫蘆綠斑駁病毒ZucchinigreenmottlemosaicvirusZGMMV27

    2 病害的種傳機制

    種子傳帶病害機制的研究主要關注以下4個方面:1)種子如何受到病原微生物感染;2)種子受到感染的組織部位;3)病菌的傳帶率;4)病菌在種子內(nèi)存活和保持侵染的能力。

    通常病原真菌主要是在種子采收過程中附著在種子表面,但是有些病菌也能夠通過種臍侵入造成種子內(nèi)部帶菌。西瓜種子攜帶的鐮刀菌主要寄藏在種子外部,種子內(nèi)部帶菌率要低于外部[8,28]。引起西瓜蔓枯病的瓜類黑腐球殼菌以分生孢子和菌絲形態(tài)寄藏在西瓜種子的表皮、子葉和胚[18],在室溫條件下種子表面的分生孢子可存活18個月,而寄藏在種子內(nèi)部的菌絲體可存活24個月以上,仍保持侵染能力[29]。

    西瓜細菌性果斑病的種子傳帶機制是目前國內(nèi)外研究的熱點。對于西瓜嗜酸菌如何感染西瓜種子有2種理論:1)病菌通過侵染果皮,在采種過程中附著感染種子。Rane和Latin[30]發(fā)現(xiàn)從田間自然發(fā)病表現(xiàn)癥狀的果實中采收的種子,種皮和內(nèi)部胚可攜帶病菌,而無癥狀表現(xiàn)的果實中的種子則沒有攜帶西瓜嗜酸菌。2)病菌通過感染花,導致發(fā)育中的種子感染,雖然果實不表現(xiàn)癥狀,但果瓤和種子均帶菌[31];而且相比果皮接種的方法,雌蕊接種的西瓜嗜酸菌感染種胚的概率更高(高達90%),而子房接種后發(fā)病果實種子病菌寄藏在外胚乳的概率為80%[32]。Walcott研究組對西瓜種子傳帶西瓜嗜酸菌的分子機制研究發(fā)現(xiàn),用西瓜嗜酸菌群體感應突變體(aacI-/aacR-)菌株接種的種子與野生型相比,其幼苗感染率降低了50%,由此推斷群體感應(quorum sensing)直接調(diào)控了與病菌種子傳播相關基因的表達[33]。Block和Shepherd[34]從5℃冷庫保存了35年的西瓜種子上仍檢測到西瓜嗜酸菌,且病菌依然保持致病能力,這是細菌在種子上存活時間最長的報道。筆者推測細菌能保持如此高度的存活能力與其侵染種子的部位和寄藏方式有關,西瓜嗜酸菌能夠侵染種胚,可能在種子成熟過程中與種胚組織結合從而抗逆存活,然而病原細菌在種子的存活機制還有待進一步研究揭示。

    黃瓜綠斑駁病毒CGMMV是正鏈RNA病毒,屬于煙草花葉病毒屬(Tobamovirus)。CGMMV侵染多種葫蘆科作物,Shim等[26]檢測到西瓜受到CGMMV感染后種子平均帶毒率為24%,然而李立梅等[35]和吳會杰等[36]分別通過人工接種試驗證明植株感病后西瓜種子的帶毒率可高達64%~100%。采用不同的病毒株系、接種方法、培養(yǎng)環(huán)境等都可能造成種子帶毒率差異較大。相比較高的帶毒率,CGMMV的傳毒率較低,為2.25%[36],這可能是由于病毒主要寄藏在種胚外,不能有效地進行種子到幼苗的侵染[37]。病毒通常是通過侵染母體植株而使種子帶毒。這也是進行種子傳帶CGMMV研究的接種方式。此外病毒也可通過花粉傳播,最新的研究證實CGMMV能夠通過花粉感染黃瓜的果實和種子,感染果實的幾率為17%~51%,收獲種子的傳毒率為12%~76%[38],但是保存7個月后的黃瓜種子傳毒率下降很快[39]。至于西瓜花粉是否能傳帶病毒從而感染種子,以及病毒在西瓜種子的存活時間都有待進一步的研究。

    綜上所述,不同的病原真菌、細菌、病毒在西瓜種子寄藏部位、種子傳帶率和存活時間等方面有很大的差異。病菌的寄藏部位直接影響了病菌從種子到幼苗的傳帶能力和在種子表面或內(nèi)部的存活時間,特別是病菌在種子內(nèi)部的寄藏對檢測和滅菌處理都造成一定難度。

    3 西瓜種傳病害的檢測技術

    種子健康檢驗是提高種子生產(chǎn)潛力的重要措施。在種子健康檢驗中,難以實現(xiàn)對所有的種子進行檢測,只能檢測種子樣品,因此要求檢驗技術可行、準確和快速。在過去的幾十年,種子健康檢驗技術發(fā)展迅速,取得了多方面進展。

    3.1育秧檢測(growing-out test)

    對于西瓜種傳病害最傳統(tǒng)也是最直接的檢測方法是出苗檢測,即種子播種在滅菌的基質(zhì)中,保持在適宜發(fā)病的環(huán)境條件下對幼苗進行發(fā)病評估、病原菌分離和鑒定。例如美國農(nóng)業(yè)部推薦對細菌性果斑病進行出苗檢測[40],播種至少10 000粒種子或檢測該批樣品10%的種子,出苗后每天觀察西瓜幼苗子葉是否有水浸狀斑點,而后對可疑癥狀的病株進行分離鑒定。出苗檢測不僅能判定靶標病原菌是否存在,同時也能鑒定出病菌的致病力和種傳能力,是目前被廣泛接受的方法,但是該方法需要耗費很大的溫室空間和人力,并且得到檢測結果需要至少3周。

    3.2培養(yǎng)檢測(culture test)

    培養(yǎng)檢測也是一種能檢測病原菌死活的方法,與出苗檢測相比,培養(yǎng)檢測大大節(jié)省了檢測所需的空間和時間。此方法又分為吸水紙檢測和培養(yǎng)基平板分離培養(yǎng)檢測。吸水紙檢測法可以分析活體內(nèi)外的帶菌情況。如按照國際種子健康系統(tǒng)(ISHS)的檢測方法和規(guī)程,檢測西瓜蔓枯病1 000粒,需將種子擺放在保濕的濾紙片上,25℃黑暗培養(yǎng)10 d,觀察是否產(chǎn)生分生孢子器或假囊殼,并進行形態(tài)鑒定[41]。培養(yǎng)基平板分離培養(yǎng)檢測是將種子浸提液涂在培養(yǎng)基平板上鑒定是否有目標菌生長,為了抑制其他腐生細菌的生長或是使目標菌形成獨特的菌落形態(tài),加入特定化合物的半選擇性培養(yǎng)基能夠提高檢測靈敏度,如EBB、EBBA培養(yǎng)基是針對西瓜細菌性果斑病種子帶菌檢測的半選擇培養(yǎng)基[42-43]。對于種子攜帶鐮刀菌的檢測是將種子洗滌液涂在PDA平板,同時解剖種子擺放在平板上直接培養(yǎng),這種方法適用于種子外部和內(nèi)部寄藏的多種真菌檢測[8]。

    3.3酶聯(lián)免疫吸附檢測(ELISA test)

    分離培養(yǎng)檢測只適用于可培養(yǎng)的真菌和細菌檢測,不能用于不可體外培養(yǎng)微生物,例如病毒。病毒最常用的檢測方法是酶聯(lián)免疫吸附檢測(enzyme linked immunosorbent assay,簡稱ELISA),利用抗原與抗體的特異性結合,以及酶標記反應顯色不僅可以檢測是否存在目標,還可以進行量化分析。改良的ELISA方法可檢測到黃瓜種子800粒中1粒帶毒種子[44]。國際種子檢測協(xié)會(ISTA,2010)發(fā)布的最新檢測規(guī)程中,對瓜類種子攜帶CGMMV的檢測細則是:以不多于100粒的種子為小樣研磨,對種子提取液采用ELISA檢測,一共檢測至少2 000粒種子。對于西瓜細菌性果斑病也有不同的單克隆及多克隆抗體雙抗夾心(DAS-ELISA)檢測方法,檢測靈敏度一般可達到104cfu/mL[45-46]。

    3.4分子生物學檢測(molecular test)

    以聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,簡稱PCR)為基礎的分子生物學檢測技術為種傳病害檢測提供了一個更迅速、有效、靈敏的方法,被廣泛運用于各類病害的檢測。Zhang等[47]設計了用于檢測枯萎病菌(Fusariumoxysporumf.sp.niveum)的引物Fn-l/Fn-2和檢測蔓枯病菌的引物Mn-l/Mn-2,利用傳統(tǒng)PCR和實時熒光定量real-time PCR,用這兩種引物同時檢測植物發(fā)病組織和土壤。李麗[48]采用以上引物從西瓜種子DNA中成功檢測到種子傳帶的枯萎病菌。對于RNA病毒CGMMV的檢測需要通過反轉錄PCR(reverse-transcript PCR),程兆榜等[49]根據(jù)病毒的外殼蛋白基因序列設計引物對江蘇地區(qū)CGMMV株系進行了同源性比較。檢測西瓜嗜酸菌的傳統(tǒng)PCR引物已報道至少有5對,其中最初根據(jù)16S rDNA設計的引物WFB1/WFB2檢測靈敏度最高,但是該對引物的專一性不強,同時擴增A.avenae及其他幾個亞種[50-51]。以PCR為基礎的檢測西瓜嗜酸菌的方法還有實時熒光定量PCR[52-53],環(huán)介導等溫擴增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)[54],和Padlock-Probe Assay[55]。

    雖然以PCR為基礎的檢測方法有諸多的優(yōu)點,但是也存在以下技術問題:由于種子本身帶有的化學物質(zhì)對PCR反應有抑制效應,有時可引起假陰性結果;此外PCR檢測目標實為目標菌的核酸片段,不能排除檢測到已失活目標菌,而引起假陽性結果[42]。研究者將不同的檢測方法結合使用來減少和避免假陽性或假陰性的出現(xiàn)。如目前使用較多的是將培養(yǎng)檢測和PCR技術結合的BIO-PCR,即先將種子浸提液在液體或固體培養(yǎng)基培養(yǎng)使檢測目標增殖,同時稀釋了抑制因子,從而提高檢測的準確性。結合檢測西瓜嗜酸菌的選擇性培養(yǎng)基EBBA和real-time PCR甚至可以檢測到1 mL種子提取液中的單個目標菌[43]。將免疫學和核酸檢測相結合的免疫捕捉PCR(immno-capture PCR)也較多地應用在種子檢測上,其原理是先通過抗原抗體特異結合的免疫學原理對檢測目標進行富集,然后進行PCR檢測,從而提升檢測靈敏度[50]。國內(nèi)外研究者已建立了針對西瓜嗜酸菌和CGMMV的免疫吸附PCR方法,可分別檢測到102cfu/mL的西瓜嗜酸菌[56]和8 ng/mL的CGMMV[57]。利用染料EMA處理細菌,由于EMA能滲透到細胞膜不完整的死細胞內(nèi)并與DNA共價結合,因而可避免檢測到死菌的DNA片段,確保隨后的PCR檢測到的為活菌細胞[58]。

    隨著檢測技術的不斷發(fā)展,建立同時檢測幾種病原菌的方法成為新的研究方向。采用磁力捕捉雜交和不同熒光信號標記探針的real-time PCR,Ha等[52]建立了一種可同時檢測西瓜種子攜帶的真菌瓜類黑腐球殼菌和細菌西瓜嗜酸菌的方法;在此基礎上,Ling等[59]加入RT-PCR技術可同時檢測西瓜種子攜帶的南瓜花葉病毒(Squashmosaicvirus, SqMV)。Charlermroj等[60]也創(chuàng)建了可同時檢測西瓜嗜酸菌、辣椒脈斑駁病毒(Chillivein-bandingmottlevirus,CVbMV)、西瓜銀色斑駁病毒(Watermelonsilvermottlevirus,WSMoV)和瓜黃色斑病毒(Melonyellowspotvirus,MYSV)的檢測技術;張靚等[61]通過多重PCR和可視基因芯片技術可以同時篩查瓜類種子攜帶的6種細菌病害??傊?先進的檢測技術可以提高結果的準確性和檢測效率,同時也需要配備相應的儀器設備和高素質(zhì)的檢測人員,才能充分發(fā)揮其在種傳病害檢測中的優(yōu)勢。

    4 西瓜種子處理技術

    目前西瓜設施栽培面積和嫁接育苗規(guī)模不斷擴大。種植者采用穴盤或小缽播種,在幼苗子葉展開后進行嫁接的工廠化育苗,由于苗床密度大,嫁接苗造成的傷口及傷口愈合所需的避光高濕環(huán)境均有助于種傳病害的傳播流行。因此在制種和采收后如何進行有效的種子處理是防治種傳病害發(fā)生傳播的關鍵環(huán)節(jié)。西瓜種子的采收一般要經(jīng)過發(fā)酵、清洗和干燥的過程,發(fā)酵的過程使pH下降,能夠殺死一部分種子表面的病原微生物[62-63]。但無籽瓜不能進行發(fā)酵處理,以免降低種子的發(fā)芽率。在清洗種子后,可用physan200、Tsunami100、鹽酸等浸種處理,采用這些化學藥劑浸種主要是針對細菌性果斑病菌[64],也可以同時去除蔓枯病和枯萎病的病原真菌[65]。此外,種子的干燥條件也是影響種子攜帶病菌的重要因素。宋順華等[62]對比不同西瓜種子干燥處理的研究發(fā)現(xiàn):隨著干燥時間的延長,接種等量果斑病菌的種子,其幼苗發(fā)病率呈上升趨勢;快速干燥處理可以避免病原菌在種子表面大量繁殖的可能性,從而降低種子的帶菌量。

    西瓜種子的采后處理可劃分為化學處理、物理處理和生物處理。傳統(tǒng)化學殺菌劑如福美雙、代森錳鋅、多菌靈的種子包衣或拌種處理可以消除種子攜帶的病原真菌,如鐮刀菌和瓜類黑腐球殼菌[8,66]。次氯酸鈉或磷酸三鈉溶液浸種是用于防治西瓜種子攜帶的黃瓜綠斑駁花葉病毒的化學處理方法[67]。化學藥劑處理面臨的挑戰(zhàn)是病菌抗藥性的發(fā)展及農(nóng)藥所產(chǎn)生的環(huán)境污染及農(nóng)藥殘留給人畜安全帶來的隱患。研究發(fā)現(xiàn),商業(yè)西瓜種子攜帶的瓜類黑腐球殼菌對甲基硫菌靈類殺菌劑具有抗藥性[68]。物理處理主要是熱處理,包括溫湯浸種和干熱處理。用55℃的溫湯浸種2 h能夠有效殺死種子攜帶的西瓜嗜酸菌[63],75℃干熱處理3 d能夠鈍化種子傳帶的黃瓜綠斑駁病毒[69]。但是熱處理需要精確的溫度和時間掌控,否則引起種子活力的下降、出苗延遲、或?qū)е轮参锸艿讲煌潭鹊膫?而且熱處理后種子貯存期變短也制約了其在商業(yè)種子上的應用[63,70]。生物處理是用一些抑制病菌生長或刺激植物產(chǎn)生抗病性的微生物處理種子以減少種傳病害發(fā)生,例如利用熒光假單胞菌(Pseudomonasfluorescens)和哈茨木霉(Trichodermaharzianum)處理甜瓜種子可以降低蔓枯病發(fā)病率,提高產(chǎn)量[66],與對照比較,用非致病性的西瓜嗜酸菌處理自然感染西瓜嗜酸菌的種子能降低細菌性果斑病的種傳率[33]。生物處理對環(huán)境友好,對植物生長有益,但是生防微生物需要在種子發(fā)芽和幼苗生長過程中成功定殖,容易受到環(huán)境溫濕度和土壤微生物群落結構的影響,因此目前在商業(yè)化種子的處理中應用并不廣泛。

    5 西瓜種傳病害研究展望

    西瓜產(chǎn)業(yè)在我國農(nóng)業(yè)結構調(diào)整、增加農(nóng)民收入和提高人民生活水平等方面占據(jù)重要位置,保障西瓜種子健康對西瓜產(chǎn)業(yè)的良性發(fā)展起著至關重要的作用。在西瓜生產(chǎn)中發(fā)生的種傳病害數(shù)量繁多,危害嚴重。目前一些可以通過種子傳帶的重要病害,如列為檢疫對象的細菌性果斑病,在我國的主要西瓜繁種地區(qū)已有發(fā)生[71],防止種傳病害的繼續(xù)擴散和危害迫在眉睫。面臨這樣嚴峻的局面,我國尚缺乏對細菌性果斑病等重要種傳病害的統(tǒng)一檢測手段,缺乏種子健康生產(chǎn)規(guī)程,西瓜種子處理方法不一,技術水平參差不齊,缺乏種子處理技術。因此,為了保障我國西瓜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,亟須加快西瓜種子健康生產(chǎn)、種子健康檢測和種子處理技術的研究和相關法規(guī)的制定。

    現(xiàn)有的研究在西瓜種傳病原菌的種傳機制、檢測技術和種子保健處理等方面進行了大量的工作,但還缺乏十分有效的病害管理規(guī)程,僅僅提供了大量的試驗方法和結果。今后針對西瓜重要種傳病害研究的發(fā)展方向可能集中在以下幾個方面:(1)深入了解種子如何受到病菌的感染、病菌的種子傳帶和存活機制,將有助于完善種子檢測規(guī)程和提高種子處理技術;(2)目前的檢測方法在應用中各有優(yōu)勢和劣勢,發(fā)展快速、精確、能確認病菌活力的高通量檢測方法、病原菌的多重復合檢測技術或許是未來種傳病害的檢測方向;(3)在種子處理方面,亟須開發(fā)能夠有效去除西瓜種子內(nèi)部寄藏病菌,同時提高種子活力,且易于操作和推廣的方法;(4)建立完善的種子采后保健處理規(guī)程。

    [1]戴思慧,熊興耀, 孫小武, 等. 我國西瓜種子生產(chǎn)加工處理現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J]. 中國瓜菜, 2012, 25(2): 39-42.

    [2]紀莉景, 王連生, 粟秋生, 等. 西瓜枯萎病菌分離及致病力測定[J]. 河北農(nóng)業(yè)科學, 2010, 14(8): 137-138.

    [3]Boughalleb N, El-Mahjoub M. Frequency ofFusariumoxysporumf.sp.niveumandF.solanif.sp.cucurbitaefrom watermelon seeds and their effect on disease incidence [J]. Research Journal of Parasitology, 2010, 5(4): 267-273.

    [4]吳學宏, 劉西莉, 劉鵬飛, 等. 西瓜種子帶菌檢測及殺菌劑消毒處理效果[J]. 農(nóng)藥學學報, 2003, 5(3): 39-44.

    [5]劉書林, 顧興芳, 石延霞, 等. 瓜類蔬菜蔓枯病研究概況[J]. 中國蔬菜, 2013(18): 1-10.

    [6]胡鳳云, 莫賤友, 韋繼光, 等. 西瓜甜瓜蔓枯病防治研究進展[J]. 中國瓜菜, 2011, 24(6):40-44.

    [7]Burdman S, Walcott R.Acidovoraxcitrulli: generating basic and applied knowledge to tackle a global threat to the cucurbit industry[J].Molecular Plant Pathology,2012,13(8):805-815.

    [8]Dutta B, Scherm H, Gitaitis R D, et al.Acidovoraxcitrulliseed inoculum load affects seedling transmission and spread of bacterial fruit blotch of watermelon under greenhouse conditions [J]. Plant Disease,2012, 96(5): 705-711.

    [9]Kritzman G, Zutra D. Systemic movement ofPseudomonassyringaepv.lachrymansin the stem, leaves, fruit, and seed of cucumber [J]. Canadian Journal of Plant Pathology,1983,5(4):273-278.

    [10]Ozdemir Z, Zitter T A.Bacterial leaf spot (Xanthomonascampestrispv.cucurbitae) as a factor in cucurbit production and evaluation of seed treatments for control in naturally infested seeds [C]∥Cucurbitaceae 2006, Asheville, North Carolina, 2006: 498-506.

    [11]王榮洲. 黃瓜綠斑駁花葉病毒病的發(fā)生、危害癥狀與防控對策[J]. 新農(nóng)村, 2013(2):23-24.

    [12]李云明, 顧云琴, 施海萍, 等. 黃瓜綠斑駁花葉病毒病危害西瓜空間分布型研究[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2012(22):121.

    [13]吳元華, 李立梅, 趙秀香, 等. 黃瓜綠斑駁花葉病毒在我國定殖和擴散的風險性分析[J]. 植物保護, 2010, 36(1):33-36.

    [14]張屹, 魏林, 許勇, 等. 西瓜枯萎病的研究進展[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學, 2013(3):67-70.

    [15]吳學宏,韓魯明,陳倩,等.西瓜種傳鐮刀菌形態(tài)和分子鑒定及其對種子發(fā)芽的影響[J].植物病理學報,2009,39(2):118-124.

    [16]Mclaughlin R J, Martyn R D. Identification and pathogenicity ofFusariumspecies isolated from surfaced disinfested watermelon seed [J]. Journal of Seed Technology, 1982, 7(1): 97-107.

    [17]Gargouri S, Hajlaoui M R, Abdennadher M. Isolation and morphological and molecular identification ofFusariumspp. transmitted by watermelon seeds [J]. Bulletin OEPP, 2000, 30(2): 217-222.

    [18]Lee D H, Mathur S B, Neergard P. Detection and location of seed-borne inoculum ofDidymellabryoniaeand its transmission in seedlings of cucumber and pumpkin [J]. Journal of Phytopathology, 1984, 109(4): 301-308.

    [19]Cozmei E, Drobota I. The micromycetes presented on different vegetables seeds, stored in various atmospheric conditions [J]. Seria Horticultura, 2008, 51: 1027-1032.

    [20]Pushpa K, Borkar G M, Patil D V. Studies on seed borne pathogens of pumpkin, cucumber, watermelon and muskmelon [J]. Journal of Soils and Crops, 1999, 9(2): 234-238.

    [21]Bharath B G, Lokesh S, Prakash H S, et al. Evaluation of different plant protectants against seed mycoflora of watermelon[Citrulluslanatus(Thunb.) Matsum and Nakai] [J]. Research Journal of Botany, 2006, 1(1): 1-5.

    [22]Hopkins D L, Thompson C M. Seed transmission ofAcidovoraxavenaesubsp.citrulliin cucurbits [J]. HortScience, 2002, 37(6): 924-926.

    [23]Vincent S L, Brathwaite C W D. Bacterial leaf spot of cucumber in Trinidad [J]. Tropical Agriculture, 1982, 59(4): 287-288.

    [24]Lockhart B E L, Jebbour F, Lennon A M. Seed transmission ofSquashmosaicvirusinChenopodiumspp.[J]. Plant Disease, 1985, 69: 946-947.

    [25]Sammons B, Barnett O W.Tobaccoringspotvirusfrom squash grown in South Carolina and transmission of the virus through seed of smooth pigweed [J]. Plant Disease, 1987, 71:530-532.

    [26]Shim C K, Lee J H, Hong S M, et al. Construction of antibodies for detection and diagnosis ofCucumbergreenmottlemosaicvirusfrom watermelon plants [J]. The Plant Pathology Journal, 2006, 22(1):21-27.

    [27]Choi G S.Occurrence of two tobamovirus diseases in cucurbits and control measures in Korea [J]. The Plant Pathology Journal, 2001, 17(5): 243-248.

    [28]Boughalleb N, El-Mahjoub M. Frequency ofFusariumoxysporumf.sp.niveumandF.solanif.sp.cucurbitaefrom watermelon seeds and their effect on disease incidence [J]. Journal of Parasitology, 2007, 2(1): 32-38.

    [29]陳熙, 鐘慧敏, 陳恩茂, 等. 西瓜蔓枯病的發(fā)生與防治[J]. 農(nóng)業(yè)科技通訊, 1992(6): 26-27.

    [30]Rane K K, Latin R X. Bacterial fruit blotch of watermelon: Association of the pathogen with seed [J]. The American Phytopathological Society, 1992: 509-512.

    [31]Walcott R R, Gitaitis R D, Castro A C.Role of blossoms in watermelon seed infestation byAcidovoraxavenaesubsp.citrulli[J]. Phytopathology, 2003, 93: 528-534.

    [32]Lessl J T, Fessehaie A, Walcott R R. Colonization of female watermelon blossoms byAcidovoraxavenaessp.citrulliand the relationship between blossom inoculum dosage and seed infestation [J]. Phytopathology, 2007, 155(2): 114-121.

    [33]Johnson K L, Walcott R R. Quorum sensing contributes to seed-to-seedling transmission ofAcidovoraxcitrullion watermelon [J]. Journal of Phytopathology, 2013,161: 562-573.

    [34]Block C, Shepherd L. Long-term survival and seed transmission ofAcidovoraxavenaesubsp.citrulliin melon and watermelon seed [J/OL]. Plant Health Progress, 2008, PHP-2008-1219-01-BR. http:∥www. plantmanagementnetwork.org/pub/php/brief/2008/melon/.

    [35]李立梅, 吳元華, 趙秀香, 等. 黃瓜綠斑駁花葉病毒對西瓜產(chǎn)量、品質(zhì)及種子帶毒的影響[J]. 植物保護, 2010(6):82-86.

    [36]吳會杰,秦碧霞,陳紅運,等.黃瓜綠斑駁花葉病毒西瓜、甜瓜種子的帶毒率和傳毒率[J].中國農(nóng)業(yè)科學,2011,44(7):1527-1532.

    [37]Albrechtsen S E. Testing methods for seed-transmitted viruses: principles and protocols[M]. Wallingford, UK: CABI Publishing Press, 2005: 13-23.

    [38]Liu H W, Luo L X, Li J Q, et al. Pollen and seed transmission ofCucumbergreenmottlemosaicvirusin cucumber [J]. Plant Pathology, 2014, 63: 72-77.

    [39]Bos L. Seed-borne viruses [M]. Boca Raton Florida: CRC Press, 1977: 39-69.

    [40]Gitaitis R, Walcott R. The epidemiology and management of seedborne bacterial diseases [J]. The Annual Review of Phytopathology, 2007, 45: 371-397.

    [41]Anonymous. Seed health methods, vegetable crop methods. Published online by the NSHS-USDA-APHIS [J/OL]. National Seed Health System,2014.http:∥www. seedhealth. org.

    [42]Schaad W, Sechler A. An improved semiselective agar medium forAcidovoraxavenaesubsp.citrulli[J]. Phytopathology, 1999, 89(6S):68-69.

    [43]Zhao T, Feng J, Sechler A, et al. An improved assay for detection ofAcidovoraxcitrulliin watermelon and melon seed[J]. Seed Science and Technology, 2009, 37: 337-349.

    [44]Kawai A, Kimura S, Nishio T. Detection forCucumbergreenmottlemosaicvirusin cucumber seeds using enzyme linked immunosorbent assay [J]. Research Bulletin of the Plant Protection Service, 1985(21): 47-53.

    [45]Himananto O, Thummabenjapone P, Luxananil P. Novel and highly specific monoclonal antibody toAcidovoraxcitrulliand development of ELISA-based detection in cucurbit leaves and seed [J]. Plant Disease, 2011, 95: 1172-1178.

    [46]Puttharugsa C, Wangkam T, Huangkamhang N. Development of surface plasmon resonance imaging for detection ofAcidovoraxavenaesubsp.citrulli(Aac) using specific monoclonal antibody[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2011, 26: 2341-2346.

    [47]Zhang Zhenggang, Zhang Jingyu, Wang Yuchao, et al. Molecular detection ofFusariumoxysporumf.sp.niveumandMycosphaerellamelon in infected plant tissues and soil[J]. FEMS Microbiology Letters, 2005(249): 39-47.

    [48]李麗. 西瓜和甜瓜蔓枯病的分子檢測研究[D]. 杭州: 浙江大學, 2013.

    [49]程兆榜, 任春梅, 繆倩. 江蘇黃瓜綠斑駁花葉病毒的鑒定[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學報, 2013(1): 65-70.

    [50]Feng J J, Li J Q, Walcott R R, et al. Advances in detection ofAcidovoraxcitrulli, the causal agent of bacterial fruit blotch of cucurbits [J]. Seed Science and Technology,2013,41(1):1-15.

    [51]Walcott R R, Gitaitis R D. Detection ofAcidovoraxavenaesubsp.citrulliin watermelon seed using immunomagnetic separation and the polymerase chain reaction [J]. Plant Disease, 2000, 84: 470-474.

    [52]Ha Y, Fessehaie A, Ling K S, et al. Simultaneous detection ofAcidovoraxavenaesubsp.citrulliandDidymellabryoniaein cucurbit seedlots using magnetic capture hybridization and real-time polymerase chain reaction [J]. Phytopathology, 2009, 99(6): 666-678.

    [53]Yang G, Erdman D D, Tondella M L, et al. Evaluation tetramethylrhodamine and black hole quencher 1 labeled probes and five commercial amplification mixes in TaqMan real-time RT-PCR assays for respiratory pathogens [J]. Journal of Virological Methods, 2009, 162:288-290.

    [54]Oya H, Nakagawa H, Saito N, et al. Detection ofAcidovoraxavenaesubsp.citrullifrom seed using LAMP method [J]. Japanese Journal of Plant Pathology, 2008, 74: 304-310.

    [55]Tian Yanli, Zhao Yuqiang, Bai Sa, et al. Reliable and sensitive detection ofAcidovoraxcitrulliin cucurbit seed using a Padlock-Probe-Based assay [J]. Plant Disease, 2013, 97(7): 961-966.

    [56]宋蕤, 劉箐, 劉雅莉, 等. 西瓜細菌性果斑病菌快速免疫PCR檢測[J]. 植物檢疫, 2009(2): 4-6.

    [57]闞春月,衣杰榮,王守法,等.免疫磁珠結合RT-PCR檢測黃瓜綠斑駁花葉病毒[J].上海農(nóng)業(yè)學報,2010,26(4):43-47.

    [58]馮建軍, 金志娟, 劉西莉, 等. 一種DNA染料結合聚合酶鏈反應檢測鑒別植物病原細菌死活細胞[J]. 高等學校化學學報, 2008(29): 944-948.

    [59]Ling Kaishu, Wechter W P, Walcott R R, et al. Development of a real-time RT-PCR assay forSquashmosaicvirususeful for broad spectrum detection of various serotypes and its incorporation into a multiplex seed health assay [J]. Journal of Phytopathology, 2011, 159(10): 649-656.

    [60]Charlermroj R, Himananto O, Seepiban C, et al. Multiplex detection of plant pathogens using a microsphere immunoassay technology [J]. PloS ONE, 2013(84): e62344.

    [61]張靚,田茜,劉風權,等.六種重要瓜類種傳細菌可視基因芯片篩查方法研究[J].農(nóng)業(yè)生物技術學報,2013,21(1):120-126.

    [62]宋順華, 吳萍, 孟淑春, 等. 種子處理對西瓜細菌性果斑病的防治效果[J]. 中國瓜菜, 2013, 26(3): 5-9.

    [63]Hopkins D L, Thompson C M. Treatments to prevent seed transmission of bacterial fruit blotch of watermelon [C]. Cucurbitaceae.2006,Asheville, North Carolina, USA, 2006:17-21.

    [64]許勇, 張興平, 宮國義, 等. 細菌性果腐病與瓜類作物健康種子生產(chǎn)及檢測技術(下)[J]. 中國西瓜甜瓜, 2004(1): 33-35.

    [65]Hopkins D L, Thompson C M, Hilgren J, et al. Wet seed treatment with peroxyacetic acid for the control of bacterial fruit blotch and other seedborne diseases of watermelon[J]. Plant Disease, 2003, 87: 1495-1499.

    [66]Sudisha J, Niranjana S R, Umesha S, et al. Transmission of seed-borne infection of muskmelon byDidymellabryoniaeand effect of seed treatments on disease incidence and fruit yield [J].Biological Control,2006,37:196-205.

    [67]周紅珍, 張志勇, 彭輝. 黃瓜綠斑駁花葉病毒病的發(fā)生癥狀及防控措施[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2013,18:138-138.

    [68]Thomas A, Langston J D, Walcott R R, et al. Evidence for fungicide-resistant seed-borne inoculum for gummy stem blight of watermelon [J]. Seed Science and Technology, 2014, 42: 92-96.

    [69]Kim D H, Lee J M. Effects of seed sterilization treatment on germination and seedling growth of bottle gourd (Lagenariasiceraria) [J]. Journal of the Korean Society for Horticultural Science, 2001, 42(2): 131-136.

    [70]張龑, 寇明明, 孫小武. 西瓜播種前種子處理概述[J]. 中國瓜菜, 2007(4): 29-31.

    [71]賈麗慧, 劉建華, 周勇.新疆西瓜甜瓜雜交制種細菌性果斑病的發(fā)生與防治[J]. 中國瓜菜, 2012, 25(4):63-64.

    (責任編輯:田喆)

    Research advances in important seed-transmitted diseases of watermelon

    Xu Xiulan1,Song Shunhua1,Zhang Zhiyong2,Wu Xuehong3,Geng Lihua1

    (1. Vegetable Research Center, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences; Key Laboratory of Biological and Genetic Improvement of Horticultural Crops (North China), Ministry of Agriculture, Beijing100097, China;2. Plant Science and Technology College, Beijing University of Agriculture, Beijing102206, China;3. Department of Plant Pathology, China Agricultural University, Beijing100193, China)

    This review focused on the research progress in the most important seed-transmitted diseases of watermelon in China, including gummy stem blight, bacterial fruit blotch andCucumbergreenmottlemosaicvirusdisease. The authors expounded the epidemics and damages caused by these seed-transmitted diseases, discussed the seed-transmission mechanisms, compared traditional and molecular techniques for seed health testing and summarized current seed treatments against the pathogens. At last, the authors pointed out the questions that are still unrevealed and the aspects requiring further research, provided helpful advice on disease management.

    seed-transmitted diseases;seed health detection;seed treatment;watermelon

    2014-12-18

    2015-05-11

    現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系北京西甜瓜創(chuàng)新團隊專項;北京市農(nóng)林科學院蔬菜種質(zhì)資源創(chuàng)新專項(KJCX20140111);國家自然科學基金(31401704)

    E-mail: genglihua@nercv.org

    S 436.5

    A

    10.3969/j.issn.0529-1542.2016.01.003

    猜你喜歡
    花葉病毒細菌性病菌
    細菌性食物中毒事件調(diào)查研究
    基于羊細菌性疾病的預防控制分析
    預防細菌性食物中毒的主要方法
    小病菌影響鴉片戰(zhàn)爭
    特別健康(2018年3期)2018-07-04 00:40:24
    藜草花葉病毒的研究概述
    中國蔬菜(2016年8期)2017-01-15 14:23:34
    頭狀莖點霉病菌的新寄主高粱及病菌的檢疫鑒定(內(nèi)文第98~101頁)圖版
    油茶炭疽病菌拮抗木霉菌的分離與篩選
    病菌來了 快穿好防菌衣
    學生天地(2016年14期)2016-05-17 05:45:46
    細菌性肝膿腫64例診治分析
    我國甜菜花葉病毒基因與馬鈴薯Y病毒屬其它家族序列的比較與分析
    中國糖料(2015年6期)2015-11-25 08:40:58
    激情 狠狠 欧美| av在线天堂中文字幕| 久久久久久久午夜电影| 久久6这里有精品| 成人国产麻豆网| av播播在线观看一区| tube8黄色片| 国产精品一及| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲,欧美,日韩| 黄色欧美视频在线观看| 久久久久九九精品影院| 少妇人妻 视频| av免费观看日本| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 中国美白少妇内射xxxbb| 新久久久久国产一级毛片| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲不卡免费看| 欧美成人精品欧美一级黄| 欧美成人午夜免费资源| 高清毛片免费看| 97精品久久久久久久久久精品| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲真实伦在线观看| 午夜福利在线观看免费完整高清在| av天堂中文字幕网| 亚洲成色77777| 免费黄频网站在线观看国产| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲成人久久爱视频| 性色avwww在线观看| 日韩精品有码人妻一区| 一二三四中文在线观看免费高清| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久久久久久久久人人人人人人| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产黄色视频一区二区在线观看| 人人妻人人看人人澡| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲自偷自拍三级| 国产精品一区www在线观看| 男女那种视频在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲伊人久久精品综合| 亚洲四区av| 国产综合懂色| 人妻夜夜爽99麻豆av| 各种免费的搞黄视频| 好男人视频免费观看在线| 国产成人91sexporn| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 青春草视频在线免费观看| 色综合色国产| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲av二区三区四区| 少妇的逼水好多| 伊人久久国产一区二区| 欧美3d第一页| 色视频www国产| 久久精品久久久久久久性| 国产精品蜜桃在线观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲人与动物交配视频| 少妇人妻精品综合一区二区| 好男人在线观看高清免费视频| 天天躁日日操中文字幕| 嫩草影院新地址| 六月丁香七月| 亚洲精品日本国产第一区| 美女高潮的动态| 国产久久久一区二区三区| 成年女人在线观看亚洲视频 | 一个人看的www免费观看视频| 欧美三级亚洲精品| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产美女午夜福利| 久久久久久久久久成人| 日本wwww免费看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲熟女精品中文字幕| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 丝瓜视频免费看黄片| 国产黄片美女视频| 黑人高潮一二区| 国产精品嫩草影院av在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 插逼视频在线观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 成人二区视频| 免费看光身美女| eeuss影院久久| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 欧美极品一区二区三区四区| 国产黄片美女视频| 国产av不卡久久| 亚洲国产精品成人久久小说| 高清视频免费观看一区二区| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲国产色片| 国产毛片在线视频| 99久久精品热视频| 乱系列少妇在线播放| 国产在线男女| 国产一区二区在线观看日韩| 精品久久久精品久久久| 久久久精品免费免费高清| 久久精品人妻少妇| 亚洲,一卡二卡三卡| 免费黄网站久久成人精品| 黄色日韩在线| 国产精品三级大全| 极品教师在线视频| av在线亚洲专区| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 最近的中文字幕免费完整| 男插女下体视频免费在线播放| 最后的刺客免费高清国语| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产淫片久久久久久久久| 久久精品夜色国产| 少妇 在线观看| 久久久久久久国产电影| 免费人成在线观看视频色| 久久久精品免费免费高清| 欧美潮喷喷水| 不卡视频在线观看欧美| av网站免费在线观看视频| 精品一区二区免费观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 一区二区三区免费毛片| 久久精品久久久久久久性| 天堂网av新在线| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 狠狠精品人妻久久久久久综合| kizo精华| av在线蜜桃| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 亚洲不卡免费看| av专区在线播放| 国产探花极品一区二区| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 高清午夜精品一区二区三区| 久久精品人妻少妇| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产男人的电影天堂91| 九色成人免费人妻av| 毛片一级片免费看久久久久| 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲精品日本国产第一区| 乱系列少妇在线播放| 欧美成人精品欧美一级黄| 夜夜爽夜夜爽视频| 国产探花极品一区二区| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 亚洲最大成人av| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产淫语在线视频| 黄色日韩在线| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产精品久久久久久精品电影| 精品国产三级普通话版| 国产成年人精品一区二区| 黑人高潮一二区| av国产精品久久久久影院| 国内精品宾馆在线| 久久久久国产精品人妻一区二区| 亚洲av在线观看美女高潮| 久久这里有精品视频免费| 九草在线视频观看| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 免费观看a级毛片全部| 亚洲美女视频黄频| 国产男女内射视频| 欧美少妇被猛烈插入视频| 中国国产av一级| 免费电影在线观看免费观看| 丰满乱子伦码专区| 亚洲欧美清纯卡通| 国产一级毛片在线| 国产午夜精品一二区理论片| 内射极品少妇av片p| 中文字幕av成人在线电影| 美女国产视频在线观看| 午夜福利视频精品| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 欧美国产精品一级二级三级 | 国产高潮美女av| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 欧美丝袜亚洲另类| 久久久精品免费免费高清| av网站免费在线观看视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 26uuu在线亚洲综合色| 男人和女人高潮做爰伦理| 在线播放无遮挡| 一区二区av电影网| 三级国产精品片| 国产老妇女一区| 中国国产av一级| 又爽又黄a免费视频| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 永久免费av网站大全| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲人成网站高清观看| 成人国产麻豆网| 国产成人aa在线观看| 看十八女毛片水多多多| 欧美一区二区亚洲| 久热这里只有精品99| 看非洲黑人一级黄片| 简卡轻食公司| 国产有黄有色有爽视频| 色视频在线一区二区三区| 老女人水多毛片| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 久久久久网色| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 亚洲综合色惰| 性色av一级| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 午夜免费鲁丝| 午夜视频国产福利| 色吧在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| av播播在线观看一区| 久久国内精品自在自线图片| 女人久久www免费人成看片| 国国产精品蜜臀av免费| 午夜精品一区二区三区免费看| 日韩欧美精品v在线| 亚洲精品国产av成人精品| 内射极品少妇av片p| 一级片'在线观看视频| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 欧美成人精品欧美一级黄| 中文天堂在线官网| 国产亚洲精品久久久com| 高清视频免费观看一区二区| 久久久精品94久久精品| 国产日韩欧美在线精品| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲精品乱久久久久久| 91久久精品国产一区二区三区| 美女内射精品一级片tv| 性色av一级| 亚洲性久久影院| 亚洲成人av在线免费| 免费观看a级毛片全部| 深爱激情五月婷婷| 性色av一级| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲av男天堂| 国产精品久久久久久av不卡| 成人二区视频| 久久久欧美国产精品| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 日韩伦理黄色片| 久久6这里有精品| 亚洲人成网站在线播| 看黄色毛片网站| 制服丝袜香蕉在线| 国产精品一及| 国产成人免费无遮挡视频| 国产精品蜜桃在线观看| 在线a可以看的网站| 精品一区二区免费观看| 日韩免费高清中文字幕av| 免费人成在线观看视频色| 久久99精品国语久久久| 欧美性感艳星| 又爽又黄a免费视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 大陆偷拍与自拍| 视频区图区小说| 男插女下体视频免费在线播放| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 在线天堂最新版资源| 亚洲内射少妇av| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 只有这里有精品99| 最后的刺客免费高清国语| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 久久久久精品性色| av专区在线播放| av在线蜜桃| 色哟哟·www| 午夜老司机福利剧场| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 天天躁日日操中文字幕| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 只有这里有精品99| 天美传媒精品一区二区| 亚洲人成网站在线播| 免费观看在线日韩| 亚洲精品国产成人久久av| 欧美极品一区二区三区四区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| av在线老鸭窝| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产成人a∨麻豆精品| 国产免费又黄又爽又色| 精华霜和精华液先用哪个| 丝袜脚勾引网站| 搞女人的毛片| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 免费看av在线观看网站| 人体艺术视频欧美日本| av免费在线看不卡| 久久久久国产精品人妻一区二区| 十八禁网站网址无遮挡 | 国产美女午夜福利| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 男女啪啪激烈高潮av片| 免费av毛片视频| 精品久久久精品久久久| 夜夜爽夜夜爽视频| av在线观看视频网站免费| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 精品一区二区免费观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 少妇高潮的动态图| 亚洲欧洲日产国产| 久久久久久久大尺度免费视频| 中文字幕亚洲精品专区| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 看免费成人av毛片| 亚洲av福利一区| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲无线观看免费| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 禁无遮挡网站| 99久久精品一区二区三区| 黄片无遮挡物在线观看| 国产综合精华液| 午夜精品国产一区二区电影 | 午夜福利在线在线| xxx大片免费视频| 麻豆乱淫一区二区| 国产成人精品久久久久久| 天天躁日日操中文字幕| 不卡视频在线观看欧美| 一级毛片电影观看| 欧美97在线视频| 国产精品一及| 久久久久久久大尺度免费视频| 神马国产精品三级电影在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久久精品94久久精品| 成人综合一区亚洲| 成人国产麻豆网| av女优亚洲男人天堂| 亚洲无线观看免费| 少妇人妻 视频| 丝袜脚勾引网站| 一个人看视频在线观看www免费| 亚洲精品日韩av片在线观看| 激情 狠狠 欧美| 亚洲最大成人手机在线| 夜夜爽夜夜爽视频| 亚洲精品,欧美精品| 我要看日韩黄色一级片| 一级黄片播放器| 国产一区二区三区综合在线观看 | 天堂网av新在线| 久久99精品国语久久久| 在现免费观看毛片| 久热这里只有精品99| 日韩欧美精品v在线| 亚洲四区av| 黄色一级大片看看| 国国产精品蜜臀av免费| 日日啪夜夜爽| 亚洲成人精品中文字幕电影| 好男人在线观看高清免费视频| 看免费成人av毛片| 国国产精品蜜臀av免费| 国产乱人偷精品视频| 亚洲自拍偷在线| 久久久久精品性色| 插逼视频在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 夜夜爽夜夜爽视频| 99久久精品热视频| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 色播亚洲综合网| 色5月婷婷丁香| 日韩av免费高清视频| 国产精品一二三区在线看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲久久久久久中文字幕| 亚洲伊人久久精品综合| 国产色婷婷99| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲色图综合在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 久久国内精品自在自线图片| 日韩一本色道免费dvd| a级毛色黄片| av免费观看日本| 丝瓜视频免费看黄片| 免费电影在线观看免费观看| 可以在线观看毛片的网站| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲国产精品999| 日韩成人av中文字幕在线观看| 免费大片黄手机在线观看| 毛片一级片免费看久久久久| 午夜福利在线观看免费完整高清在| av女优亚洲男人天堂| 国产黄色免费在线视频| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲美女视频黄频| 黄色欧美视频在线观看| 久久久精品欧美日韩精品| 免费看光身美女| 嫩草影院入口| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 亚洲一区二区三区欧美精品 | 我的老师免费观看完整版| 舔av片在线| 一区二区三区免费毛片| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 一级爰片在线观看| 亚洲伊人久久精品综合| 久久久久久久久久久丰满| 99久久精品热视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 亚洲精品,欧美精品| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 亚洲综合精品二区| 人体艺术视频欧美日本| 日韩欧美精品免费久久| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产av国产精品国产| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 亚洲av一区综合| 欧美日本视频| 我要看日韩黄色一级片| 国产成人午夜福利电影在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 亚洲国产精品专区欧美| 丝瓜视频免费看黄片| 中文在线观看免费www的网站| 天堂中文最新版在线下载 | 免费少妇av软件| 精品人妻一区二区三区麻豆| xxx大片免费视频| 免费黄网站久久成人精品| 男人舔奶头视频| 国产黄色视频一区二区在线观看| 国产爱豆传媒在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 一级爰片在线观看| 亚洲欧洲国产日韩| 亚洲久久久久久中文字幕| 五月伊人婷婷丁香| 日韩一区二区三区影片| 欧美区成人在线视频| 欧美成人a在线观看| 少妇高潮的动态图| 国产av国产精品国产| 亚洲最大成人中文| 国产精品女同一区二区软件| 国产伦精品一区二区三区四那| 久久久国产一区二区| 国产色爽女视频免费观看| 少妇的逼好多水| 91精品一卡2卡3卡4卡| 一个人观看的视频www高清免费观看| 永久网站在线| 色视频www国产| 国产成人91sexporn| 国产伦精品一区二区三区四那| 天美传媒精品一区二区| 亚洲电影在线观看av| 99热6这里只有精品| 亚洲欧洲国产日韩| 99久久精品一区二区三区| av在线播放精品| 亚洲电影在线观看av| 国产乱来视频区| 日日啪夜夜撸| 亚洲图色成人| 日韩av免费高清视频| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲精品自拍成人| 久久精品国产a三级三级三级| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 久久精品国产亚洲av涩爱| 成人无遮挡网站| 久久久亚洲精品成人影院| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产免费视频播放在线视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 一级黄片播放器| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 女人被狂操c到高潮| 亚洲av.av天堂| 成人一区二区视频在线观看| 欧美zozozo另类| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲成人一二三区av| 日韩精品有码人妻一区| 国产在线一区二区三区精| 七月丁香在线播放| 精品视频人人做人人爽| av国产精品久久久久影院| 成年版毛片免费区| 好男人视频免费观看在线| 成人亚洲欧美一区二区av| 在线免费十八禁| 亚洲精品成人久久久久久| 欧美97在线视频| av在线播放精品| 边亲边吃奶的免费视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产男女内射视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 亚洲国产精品成人久久小说| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 成人欧美大片| 嫩草影院入口| 男人舔奶头视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 久久久久久国产a免费观看| 三级经典国产精品| 最近2019中文字幕mv第一页| 又大又黄又爽视频免费| 国产在线男女| 亚洲国产最新在线播放| 免费看a级黄色片| 国产 一区 欧美 日韩| 青青草视频在线视频观看| av.在线天堂| 婷婷色av中文字幕| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲欧美日韩东京热| 久久久久精品性色| 一区二区av电影网| 国产免费又黄又爽又色| 丝袜美腿在线中文| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 高清av免费在线| 国产毛片a区久久久久| 成年人午夜在线观看视频| 欧美bdsm另类| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产免费一区二区三区四区乱码| 一区二区三区精品91| 在线观看一区二区三区激情| 国产高清有码在线观看视频| 日韩欧美 国产精品| 中文字幕亚洲精品专区| 欧美国产精品一级二级三级 | 日韩国内少妇激情av| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲精品日韩av片在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 天天躁日日操中文字幕| 久久99精品国语久久久| 天堂网av新在线| 欧美激情在线99| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 亚洲精品国产色婷婷电影| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 免费看av在线观看网站| 国产成人精品婷婷| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 韩国av在线不卡| 精品午夜福利在线看| 成人免费观看视频高清| 免费在线观看成人毛片| 国产精品人妻久久久影院| 免费看不卡的av| 国产av国产精品国产| 国产精品久久久久久久电影| 亚洲国产色片| 黄片无遮挡物在线观看| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久99精品国语久久久| 天堂网av新在线| 久久韩国三级中文字幕| 2021天堂中文幕一二区在线观| 午夜精品一区二区三区免费看| 69av精品久久久久久| 免费看a级黄色片|