食源性致病菌快速檢測的前增菌培養(yǎng)的研究進展

錢紅玫,胡文忠,馮　可,薩仁高娃,邵文俊

(1.大連工業(yè)大學食品學院,遼寧大連 116600;2.大連民族大學生命科學學院,遼寧大連 116600;3.大連理工大學生命科學與技術學院,遼寧大連 116024)

?

食源性致病菌快速檢測的前增菌培養(yǎng)的研究進展

錢紅玫1,胡文忠2,*,馮可3,薩仁高娃3,邵文俊2

(1.大連工業(yè)大學食品學院,遼寧大連 116600;2.大連民族大學生命科學學院,遼寧大連 116600;3.大連理工大學生命科學與技術學院,遼寧大連 116024)

近年來,由食源性致病菌污染食物導致中毒或死亡事件在全球頻發(fā),嚴重危害人類健康,食源性微生物引起的疾病已成為危害人類健康的頭號殺手。目前,食源性致病菌快速檢測技術研究已成為國際學者關注的熱點,研究的焦點主要集中在快速檢測技術。但是,在快速檢測中,尤其是分子生物學檢測技術需要增菌過程,如何縮短前增菌時間和提高增菌效果,是快速檢測研發(fā)解決的難題。本文對沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、單增李斯特菌、副溶血性弧菌和志賀氏菌的爆發(fā)案例進行了簡述,重點綜述了前四種菌的前增菌的研究現(xiàn)狀,以便了解到現(xiàn)有的快速檢測的前增菌培養(yǎng)的研究情況,在更短時間檢測出食源性致病菌。

食源性致病菌,增菌培養(yǎng),快速檢測

食源性致病,是食品安全性問題重要的關注點,也是食品安全研究的一個重要方向。據(jù)統(tǒng)計,世界因食品污染而致病的人數(shù)已達數(shù)億人,其中由生物性污染造成的人數(shù)占首位[1],是一個十分嚴重的安全問題。近幾年來,隨著科技的發(fā)展,工業(yè)食品也隨之增加,伴隨著對工業(yè)食品的大量食用,食源性致病菌污染食品而引起的中毒爆發(fā)事件在全球時有發(fā)生,據(jù)統(tǒng)計,40%的中毒爆發(fā)事件是因為餐館或生產(chǎn)機構生產(chǎn)時食物被污染[2]。食源性感染往往會大量的感染人群,會在學校,工廠、餐廳等許多機構迅速的發(fā)生,病原體的快速檢測和鑒定是控制食源性疾病爆發(fā)的關鍵問題[3]。面對如此大的致病率,食源性致病菌的快速檢測問題也得到了普遍的關注。在致病微生物中,沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、單增李斯特菌、大腸桿菌O157∶H7、副溶血性弧菌等幾種菌是常見的因污染果蔬、肉類、海產(chǎn)品而引發(fā)致病的菌種。目前,利用傳統(tǒng)的檢測方法檢測食源性致病菌仍存在著檢測時間長、操作方法復雜、檢驗結(jié)果不準確等問題,因此,如何能快速增菌,是實現(xiàn)快速檢測的前提。雖然現(xiàn)有的分子生物學檢測技術已經(jīng)相對成熟,但將前增菌與檢測技術相結(jié)合的研究仍然是一個盲點,有待進一步的改進。本文對近幾年食源性致病菌的爆發(fā)情況和現(xiàn)有的前增菌培養(yǎng)的研究進展進行了綜述,以期對未來的快速檢測研究有一定的參考價值。

1　常見的食源性致病菌的爆發(fā)

食源性致病菌一直是食品安全問題的一個隱患,在全球,每年都會有大量的人群被食源性致病菌威脅到生命安全,表1對近幾年來幾種常見的食源性致病菌的爆發(fā)案例進行了列舉。

表1　幾種常見的食源性致病菌的爆發(fā)案例

從上表1可以看出,近3年來,在世界各地,因餐廳或工廠的衛(wèi)生問題而導致食物被食源性致病菌感染,進而引發(fā)的食源性疾病的爆發(fā)情況仍然存在,其爆發(fā)情況一般是小面積大量爆發(fā),因沒有及時的應對措施,常常會引起人群的恐慌,并讓大家對食品安全性問題產(chǎn)生質(zhì)疑。面對如此嚴峻的形勢,食源性致病菌快速檢測的問題也隨之變得尤為重要。

2　食源性致病菌單菌的增菌培養(yǎng)的研究

2.1沙門氏菌前增菌培養(yǎng)的研究

雖然分子生物學方法[14]和免疫學方法[15]能快速檢測沙門氏菌污染樣品的狀況,但通過前增菌培養(yǎng)使菌體達到檢測量也十分的重要。根據(jù)沙門氏菌的國家檢測標準[16],沙門氏菌的檢出時間大約在3～4 d,時間十分漫長。索標[17]等人結(jié)合熒光PCR檢測技術,對熱損傷沙門氏菌檢測前的選擇性增菌進行了研究,其對已有的SEL培養(yǎng)基進行了優(yōu)化,向其中添加了0.01 g/L的吖啶黃、0.05 g/L的環(huán)己酰亞胺、0.05 g/L的磷霉素以及0.002 g/L的萘啶酸,最終得到的培養(yǎng)基作為損傷沙門氏菌的修復劑以達到增菌的效果。實驗結(jié)果表明,SEL可以在20 h內(nèi)可以使各種接種量的菌體修復至109CUF/mL。郭闖[18]等人也結(jié)合了PCR技術對快速檢測的前增菌進行了研究,其選用了氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)和緩沖蛋白胨水(BPW)兩種增菌液進行了研究,并將兩種增菌液的增菌效果進行了比較,研究結(jié)果表明,短時間內(nèi),BPW的增菌效果明顯優(yōu)于MM,增菌24 h后兩種增菌液的增菌效果基本相同;對BPW不同增菌時間的增菌效果進行比較,發(fā)現(xiàn)8 h的增菌效果是最佳效果。范媛媛[19]等人對一種新推出的SX2液體培養(yǎng)基進行了驗證,SX2液體培養(yǎng)是應用于前增菌的一種新型培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基可以省去劃平板和觀察菌落特征的時間,且得出結(jié)果準確,是實驗室快速檢測沙門氏菌的一種選擇。

2.2金黃色葡萄球菌前增菌培養(yǎng)的研究

金黃色葡萄球菌廣泛存在于自然界中,到目前為止,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了20種以上的金黃色葡萄球菌和類似金黃色葡萄球菌[20]。我國每年由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒事件已居第4位[21]。由于金黃色葡萄球菌對人體健康有重大影響,各國均將該菌作為食品重點檢測和監(jiān)控的項目。目前我國的檢測方法主要是按照國家標準GB4789.10-2010[21]進行的,其檢出時間一般在36～72 h。為了找出一種更快捷的增菌方法用以檢驗,李曉琍[22]等人對2種增菌液的增菌效果進行了研究。其利用菌體在Baird-Parker瓊脂平板上的生長情況來比較驗證2種增菌培養(yǎng)基的增菌效果。實驗結(jié)果表明,在金黃色葡萄球菌含量比較高時,采用7.5%氯化鈉肉湯增菌,只需要6 h就可以使菌體濃度從100CUF/mL增加至105CUF/mL;而對于金黃色葡萄球菌含量比較低而雜菌含量高的情況,則采用10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的增菌效果更好,但在培養(yǎng)24 h后才能達到增菌的效果。為了更快的檢測出金黃色葡萄球菌,李瑩[22]以營養(yǎng)瓊脂為基礎,通過添加促進金黃色葡萄球菌生長的添加劑,最終得到配方:蛋白胨10 g/L、酵母粉5.0 g/L、丙酮酸鈉5.0 g/L、氯化鈉20 g/L、亞碲酸鉀20 mg/L、氯化鋰5 g/L、瓊脂15 g/L、5-溴·4-氯-3-吲哚基磷酸酯0.3 g/L。經(jīng)過實驗驗證,與傳統(tǒng)的Baird-Parker瓊脂平板相比,其在18 h就可以檢出菌體,與傳統(tǒng)方法相比,大大縮短了時間,檢出率達到(90.2±6.7)%,檢測結(jié)果與國標無明顯差異,證明了其有效性。張超楠[23]將計算機視覺技術與前增菌技術結(jié)合,通過對促進劑和抑制劑的選擇,得到配方:胰蛋白胨17.0 g/L,植物蛋白胨3.0 g/L,氯化鈉68 g/L,磷酸氫二鉀2.5 g/L,葡萄糖2.5 g/L,丙酮酸鈉5 g/L,甘氨酸9 g/L,亞碲酸鉀60 mg/L,苯乙醇3.8 mL/L。此增菌培養(yǎng)基在4 h內(nèi)可以抑制除金黃色葡萄球菌外的生長,并可以達到增菌的效果,其在10～107CFU/mL(g)的菌落數(shù)范圍內(nèi)都可以檢出,與傳統(tǒng)方法相比,不僅節(jié)省了時間,并且可以準確的檢出。

2.3單增李斯特菌前增菌培養(yǎng)的研究

該病原菌廣泛分布于自然界,有較強的生存能力,但一般情況下,食品中單增李斯特菌含量較低,且往往在加工中受到損傷[26-28]。因此,分離單增李斯特菌之前,必須對待檢樣品進行增菌。目前我國的檢測方法主要是按照國家標準GB4789.30-2010[29]進行的,其檢出時間一般在4～6 d。近幾年來,很多研究人員對單增李斯特菌的增菌進行了研究,其中朱敏[30]等人就做了有關于改良李斯特菌增菌液的研究。因李斯特菌的顯色培養(yǎng)基增菌效果沒有那么明顯,故向其中加入增菌劑和抑菌劑,將不同濃度的吖啶黃、萘啶酮酸、亞碲酸鉀、氯霉素加入增菌液中,發(fā)現(xiàn)用吖啶黃15 mg/L、萘啶酮酸20 mg/L、亞碲酸鉀15 mg/L的李斯特菌改良增菌液增菌,單增李斯特菌檢出率明顯高于國標法(p<0.05),單增李斯特菌的檢出率明顯提高了很多。傅宜方[31]等人提出了一種“前增菌方法”,即對損傷的李斯特菌進行修復以使菌體數(shù)量達到更多,使檢出效果更明顯,在用此方法增菌4 h后,與傳統(tǒng)方法比較,其檢出率為8.04%,遠遠大于傳統(tǒng)方法的檢出率1.79%,是前增菌的一個有利選擇。

2.4副溶血性弧菌前增菌培養(yǎng)的研究

副溶血性弧菌(VP)每年導致大約35000人患有食源性疾病[32],因該菌是一種在海洋中或鹽湖中廣泛生長的嗜鹽菌,所以其一般浸染的海產(chǎn)品居多[33]。目前我國的檢測方法主要是按照國家標準GB4789.7-2010[34]進行的,其檢出時間一般在44～66 h。為了提高副溶血性弧菌的檢出率,檢測前的前增菌是必不可少的,現(xiàn)有的培養(yǎng)基增菌時間過慢,因此,許多人對優(yōu)化培養(yǎng)基進行了研究。趙廣英[35]等人根據(jù)副溶血性弧菌的培養(yǎng)生長條件以混合型蛋白胨和酵母浸膏為基礎培養(yǎng)基,向其中添加有益于副溶血性弧菌增長的試劑,通過正交實驗得到配方:混合蛋白胨2%(胰蛋白胨1%、魚蛋白胨1%)、酵母浸膏0.2%、氯化鈉3.5%,當用這種配方并調(diào)節(jié)pH至8.6時,其對副溶血性弧菌增菌效果是普通增菌液的(1.4±0.5)倍,由此可見,其增菌效果明顯提高,可以提前達到檢出限并可以提高檢出率。陳冠武[36]等人也對海水中的副溶血性弧菌的培養(yǎng)基進行了優(yōu)化,其通過將不同的副溶血性弧菌培養(yǎng)基組合或?qū)⑵渲幸环N弧菌培養(yǎng)基與堿性蛋白胨水相組合,并與常用于檢測弧菌的TCBS瓊脂和弧菌顯色培養(yǎng)基進行比較,實驗結(jié)果表明,堿性蛋白胨水與3%氯化鈉堿性蛋白胨水組合后增菌5～6 h后,其對副溶血性弧菌的分離效果和檢出效果都有明顯的提高。劉雪飛[37]等人利用響應面法優(yōu)化了副溶血性弧菌的培養(yǎng)基,最佳的配方:酪蛋白胨6.75 g/L、胰蛋白胨3.25 g/L、牛肉膏4.76 g/L、氯化鈉36.75 g/L。用此配方通過響應面法進行檢測,當培養(yǎng)12 h后,其檢測結(jié)果是模型預測值的98.77%,可以充分的檢測出副溶血性弧菌,是一個可靠地結(jié)果。

3　食源性致病菌共增菌培養(yǎng)的研究

食源性疾病暴發(fā)時,引發(fā)暴發(fā)的致病菌并不明確,如果只對單一的菌種進行增菌然后逐個檢測,十分的浪費人力與財力,因此,對于可以同時富集多種致病菌培養(yǎng)基的研究變得更加重要了。就目前而言,共增菌培養(yǎng)的研究相對較少,現(xiàn)最多只有三種菌的富集。常用的方法為向液體培養(yǎng)基中加入增菌劑和抑菌劑,通常向培養(yǎng)基中所添加的增菌劑與抑菌劑[38-39]有亞碲酸鉀、氯化鋰、甘露醇、丙酮酸鈉、吖啶黃、萘啶酮酸、檸檬酸鈉、水楊酸、苯乙醇、磷霉素等。

王永志[40]等人研制出了一種可以使沙門氏菌、志賀氏菌和金黃色葡萄球菌共增菌的培養(yǎng)基,其以15 g/L胰蛋白胨、5 g/L大豆蛋白胨、2.5 g/L磷酸二氫鉀、2.5 g/L葡萄糖、35 g/L氯化鈉為基礎增菌培養(yǎng)基,向其中加入增菌集和抑菌劑:氯化鋰0.5 g/L、牛膽鹽0.1 g/L、甘露醇2 g/L、亞碲酸鉀0.3 mg/L,最終得到的培養(yǎng)基可以充分滿足三種菌共同生長,增菌12 h就可以使菌從103CFU/mL增加至107CFU/mL,能夠充分達到檢測限。翁思聰[41]等人研制出了一種SSSV共增菌培養(yǎng)基,其可以使沙門氏菌、志賀氏菌和金黃色葡萄球菌同時生長,其以BPW為基礎培養(yǎng)基,向其中加入促進目標菌生長,抑制其他菌的添加劑,最終得到配方:緩沖蛋白胨水20 g/L、魚蛋白胨12 g/L、膽鹽3號3 g/L、檸檬酸鈉1.5 g/L、氯化鋰1 g/L、亞碲酸鉀1.2 mg/L、氯化鈉15 g/L、葡萄糖2 g/L、甘露醇1 g/L、丙酮酸鈉4 g/L。將此配方調(diào)節(jié)pH至7.2±0.4進行驗證,結(jié)果表明,利用SSSV培養(yǎng)三種菌8 h后,菌體濃度可達到106CFU/mL,不僅增菌時間短,增菌效果也十分明顯。陳萍[42]等人對沙門菌、志賀菌和金葡菌共增菌的培養(yǎng)基也進行了研制,其利用PCR對增菌效果進行鑒定,結(jié)果顯示,增菌培養(yǎng)基在增菌4 h即可達到PCR的檢測限,接種100 CFU/mL的菌液,在培養(yǎng)12 h后,可增加至106～108CFU/mL的菌量,充分達到了增菌的效果。王虎虎[43]等人提出了一種新的增菌方法,3種菌共修復,其利用TSB-YE作為修復亞致死狀態(tài)的致病菌,且得到了較好的增菌效果。

經(jīng)過這幾種培養(yǎng)基的比較,得出結(jié)果表明,大多數(shù)增菌培養(yǎng)基的研究都是以現(xiàn)有的培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基,通過添加對菌體有促進作用的試劑,并抑制其他菌體的生長,得到一種全新的共增菌培養(yǎng)基,此培養(yǎng)基的研制可以同時富集多種致病菌,最終達到可以同時檢出的效果,節(jié)省檢出時間。

4　展望

目前,食品安全問題一直是各國關注的焦點,而食源性致病菌的致病問題又是這一焦點的核心,每年都會有眾多的人群受到食源性致病菌的毒害,因此,能夠方便、快速的檢測出食源性致病菌將是大勢所趨。就目前而言,食源性致病菌的快速檢測技術要從快速增菌和快速檢測兩個方向入手,如何能夠在短時間內(nèi)大量增菌,如何能夠快速、簡捷的分離提取出致病菌,將是阻止疾病暴發(fā)的關鍵存在點。通過查閱文獻,2000～2010年這十年間,前增菌的研究幾乎是一個空白,因此,前增菌液的研究將是以后研究的又一重點,其研究的方向有以下幾點。第一,單菌檢測的前增菌液種類繁多,要選定一種對單菌菌屬有增菌效果的增菌液并進行改良。第二,共增菌的增菌液仍需要進一步研究,達到最終可以同時富集5種或5種以上菌體。第三,將增菌方法與完善的檢測方法合理的結(jié)合,最終達到快速檢測的目的。

[1]徐方旭,劉詩揚,蘭桃芳,等.食源性致病菌污染狀況及其應對策略[J].食品研究與開發(fā),2014,35(1):98-101.

[2]Hu K,Renly S,Edlund S,et al. A modeling framework to accelerate food-borne outbreak investigations[J]. Food Control,2016,59:53-58.

[3]AM Valadez,KR Schneider,AMD Danyluk,et al. Outbreaks of Foodborne Diseases Associated with Tomatoes[J]. Food Science & Human Nutrition,2013,12(8):.

[4]國家食品藥品監(jiān)督管理總局.解毒沙門氏菌食物中毒(三)—關于美國金槍魚壽司事件[EB/OL].http://www.sda.gov.cn/WS01/CL1679/128402.html

[5]Angelo K M,Alvina C,Madhu A,et al. Outbreak of salmonella newport infections linked to cucumbers-United States,2014.[J]. Morbidity & Mortality Weekly Report,2015,64(6):.

[6]食品伙伴網(wǎng).菲律賓糖果食物中毒“元兇”為金黃色葡萄球菌[EB/OL].http://news.foodmate.net/2015/07/319955.html

[7]Fetsch A,Contzen M,Hartelt K,et al. Staphylococcus aureus food-poisoning outbreak associated with the consumption of ice-cream[J]. International Journal of Food Microbiology,2014,187:1-6.

[8]國家食品藥品監(jiān)督管理總局.解讀單增李斯特菌食物中毒(二)—關于美國食用問題冰淇淋致死事件[EB/OL]. http://www.sda.gov.cn/WS01/CL1679/118560.html

[9]國家食品藥品監(jiān)督管理總局.解讀單增李斯特菌食物中毒(二)—關于丹麥食用問題香腸致死事件[EB/OL].http://www.cfda.gov.cn/WS01/CL1679/106016.html

[10]南方日報.珠海市民吃自助餐中毒 食監(jiān)部門:是副溶血性弧菌引起的食物中毒事件[EB/OL].http://help.3g.163.com/15/0831/10/B2BE4IO000964JUQ.html

[11]郜杏麗,高琦,陳墨等.一起由副溶血性弧菌引起的食物中毒[J].中國實用醫(yī)藥,2015,10(30):265-266

[12]僑報紐約網(wǎng).加州餐館菌痢爆發(fā) 80病患12病危[EB/OL].http://ny.usqiaobao.com/kong/2015/10-21/81637.html

[13]Painter J E,Allison Taylor W,Jarratt P,et al. Notes from the field:outbreak of diarrheal illness caused by Shigella flexneri-American Samoa,May-June 2014.[J]. Morbidity & Mortality Weekly Report,2015,64(1):30-30..

[14]Wang L,Ye C,Xu H,et al. Development of an SD-PMA-mPCR assay with internal amplification control for rapid and sensitive detection of viable Salmonella spp.,Shigella spp. and Staphylococcusaureus in food products[J]. Food Control,2015,57:314-320.

[15]Bapanpally C,Maganty G,Khan S,et al. Immunomagnetic Separation and Visual Fluorescence Detection of Salmonella spp.,Using AOAC Approved SASTM Molecular Tests[J]. Journal of Aoac International,2014,97(4):1067-1072.

[16]中華人民共和國衛(wèi)生部GB4789.4-2010 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗[S].北京,中國標準出版社2010.

[17]索標,滕要輝,史賢明,等.食品中熱損傷沙門氏菌選擇性增菌及實時熒光聚合酶鏈式反應檢測[J].食品科學,2012,33(10):223-227.

[18]郭闖,賀寬軍,王煒,等.應用PCR檢測食品中沙門氏菌前增菌程序的優(yōu)化[J].食品科學,2009,30(4):189-192.

[19]范媛媛,鄭冰,王樹祥,等.一種新型培養(yǎng)基在沙門氏菌檢測中的效果評價[J].食品工業(yè)科技,2011,8(08):415-417.

[20]Johler S,Weder D,Bridy C,et al. Outbreak of staphylococcal food poisoning among children and staff at a Swiss boarding school due to soft cheese made from raw milk[J]. Journal of Dairy Science,2015,98(5):2944-2948.

[21]金少華,徐粒子.食源性疾病(致病菌)監(jiān)測與調(diào)查處置研究進展[J].安徽預防醫(yī)學雜志,2010,6:458-461.

[22]中華人民共和國衛(wèi)生部GB4789.10-2010 食品微生物學檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗[S].北京,中國標準出版社2010.

[23]李曉琍,楊祖順,范璐，等.食品中金黃色葡萄球菌2種增菌液增菌效果的實驗觀察研究[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2015,3.

[24]李瑩.金黃色葡萄球菌快速檢測顯色培養(yǎng)基的研制與應用[D].鄭州：鄭州大學,2013.

[25]張超楠.食品中金黃色葡萄球菌的快速檢測方法研究[D].長春：吉林大學,2012.

[26]Kevin M,Damian M,Jerry C,et al. The effect of high hydrostatic pressure,sodium nitrite and salt concentration on the growth of Listeria monocytogenes on RTE ham and turkey[J]. Meat Science,2013,93(2):263-268.

[27]Dailey R C,Martin K G,Smiley R D. The effects of competition from non-pathogenic foodborne bacteria during the selective enrichment of Listeria monocytogenes using buffered Listeria enrichment broth[J]. Food Microbiology,2014,44(6):173-179.

[28]Yang L L,Han L,Zhang L. Formula of Mixed Fermentation of Lactic Acid Bacteria and Optimization of Enrichment Medium[J]. Food & Fermentation Industries,2011,37(11):113-116.

[29]中華人民共和國衛(wèi)生部GB4789.30-2010 食品微生物學檢驗 單核細胞增生李斯特氏菌檢驗[S].北京,中國標準出版社2010.

[30]朱敏,梅玲玲,程蘇云.改良李斯特菌增菌液的研究[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2007,17:293-295.

[31]傅宜方,梁春霞,盧國鈞.單增李斯特菌污染調(diào)查及前增菌方法效果觀察[C]//2012年鐵路衛(wèi)生防疫學術年會論文集.2012.

[32]Newton A E,Silk B J,Stroika S,et al. Multi-State Vibrio Parahaemolyticus Outbreak Associated with Consumption of Raw Oysters Harvested from Oyster Bay Harbor[J]. Cste,2013.

[33]凌莉,許龍巖,袁慕云,等.副溶血性弧菌MPCR-DHPLC檢測方法的建立[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2013,23(04):793-796.

[34]中華人民共和國衛(wèi)生部GB4789.7-2010 食品微生物學檢驗 副溶血性弧菌檢驗[S].北京,中國標準出版社2010.

[35]趙廣英,申科敏,勵建榮.副溶血性弧菌增菌培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件的改進[J].水產(chǎn)科學,2010,3:137-141.

[36]陳冠武,陳冬娥,林寧靜,等.海水中副溶血性弧菌增菌培養(yǎng)的優(yōu)化[J].環(huán)境與健康雜志,2013,30(1):73-74.

[37]劉雪飛,李玉嬌,李秀霞,等.響應面法優(yōu)化副溶血性弧菌增菌培養(yǎng)基[J].渤海大學學報:自然科學版,2015,35(4):385-393.

[38]Liu Y,Xiao X,Yu Y,et al.[A multi-pathogen selective enrichment broth for simultaneous growth of Salmonella enteritidis,Staphylococcus aureus,and Listeria monocytogenes].[J]. Wei sheng wu xue bao=Acta microbiologica Sinica,2009,49(10):1389-1396.

[39]Xing-Long X,Yi-Juan L,Yi-Ying Q,et al. A multipathogen selective enrichment broth for simultaneous growth of Salmonella spp.,Vibrio parahaemolyticus,and Vibrio cholerae.[J]. Journal of General & Applied Microbiology,2010,56(6):465-474.

[40]王永志,余以剛,黃秀麗,等.沙門氏菌、志賀氏菌和金黃色葡萄球菌共增菌培養(yǎng)基的研制[J].食品科學,2013,17(17):171-175.

[41]翁思聰,朱軍莉,馮立芳,等.1種選擇性富集沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌和副溶血性弧菌共增菌培養(yǎng)基SSSV研究[J].中國食品學報,2013,13(1):19-28.

[42]陳萍,魏瓊,劉道文,等.沙門氏菌、志賀氏菌和金黃色葡萄球菌復合增菌培養(yǎng)基及其制備方法和應用:CN,CN101851676 B[P].2013.

[43]王虎虎,董洋,閆振國,等.冰鮮雞肉中3種主要致病菌的共修復-增菌條件研究[J].食品科學,2012,33(9):182-187.

Research progress in the pre-enrichment of rapid detection of foodborne pathogenic bacteria

QIAN Hong-mei1,HU Wen-zhong2,*,FENG Ke3,Sa-ren-gao-wa3,SHAO Wen-jun2

(1.College of Food Science,Dalian Polytechnic University,Dalian 116600,China;2.College of Life Science,Dalian Nationalities University,Dalian 116600,China;3.College of Life Science and Biotechnology,Dalian University of Technology,Dalian 116024,China)

In recent years,the food poisoning and deaths caused by food-borne pathogens have frequently occurred in the world,serious harm to human health,food-borne microorganisms have become the No.1 killer of human health. At present,the research on the technology of food-borne pathogenic bacteria detection has become a hot spot for international scholars,and the focus of the research is on rapid detection technology. However,in the rapid detection,especially molecular biology techniques,pre-enrichment process is required,how to shorten the pre-enrichment time and improve the enrichment effect is a problem to solve that in the development of rapid detection. In this paper,outbreaks ofSalmonella,Staphylococcusaureus,Listeriamonocytogenes,VibrioparahaemolyticusandShigellaare discussed and focused on the status of the pre-enrichment of first four bacteria,in order to acquaintance the existing of pre-enrichment of rapid detection and achieve a shorter time to detect foodborne pathogens.

food-borne pathogenic bacteria;enrichment culture;rapid detection

2015-12-09

錢紅玫(1991-)，女，在讀碩士，研究方向：食品質(zhì)量與安全，E-mail：qhm171@126.com。

胡文忠(1959- )，男，博士，教授，研究方向：食品科學，E-mail：hwz@dlnu.edu.cn。

國家科技支撐計劃項目(2012BAD38B05)；國家自然科學基金項目(31172009，31471923)。

TS255.7

A

1002-0306(2016)13-0360-05

10.13386/j.issn1002-0306.2016.13.066