不同蛋白梯度對草魚部分生化指標(biāo)影響的試驗報告

范鵬

（重慶市長壽區(qū)畜牧獸醫(yī)局　重慶　長壽　401220）

不同蛋白梯度對草魚部分生化指標(biāo)影響的試驗報告

范鵬

（重慶市長壽區(qū)畜牧獸醫(yī)局重慶長壽401220）

本文采取投喂不同蛋白含量飼料的方法，對草魚部分生化指標(biāo)的變化情況進(jìn)行研究，以期為草魚飼料蛋白質(zhì)的合理添加量提供參考。

1　材料與方法

1.1試驗用魚

選擇體表無傷、體質(zhì)健壯的草魚作為試驗用魚，經(jīng)2%食鹽水消毒后暫養(yǎng)兩周開始試驗，周期為8周。試驗用魚體長為20.87±2.49cm，體重為118.19±16.53g。試驗魚分3組，分別投喂蛋白含量為28%、33%、38%的膨化飼料，除蛋白質(zhì)外，其他飼料成分相同。

1.2試驗方法

1.2.1血液生化指標(biāo)測定

血糖、甘油三酯和總膽固醇含量測定在半自動生化分析儀上測定。

1.2.2血漿總氨基酸含量測定

采用銅離子絡(luò)合物法。原理為銅離子能與各種氨基酸絡(luò)合產(chǎn)生藍(lán)綠色的絡(luò)合物，在一定波長下顏色的深淺與總氨基酸的含量成正比。

1.3粗酶液的制備

取出草魚的腸道以及肝胰臟，將腸分為前、中、后3段，用預(yù)冷蒸餾水沖洗并吸干；取心臟、肝胰臟、脾臟、中腎、鰓、肌肉、血液等做常規(guī)指標(biāo)檢測。相同組織剪碎后稱重，加10倍體積的預(yù)冷蒸餾水，電動勻漿機(jī)勻漿，冷凍離心機(jī)12000r/min低溫離心20min，取上清液。

1.4SOD酶活性測定

采用SOD試劑盒測定。測定原理是通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子自由基（O2-），后者氧化羥胺形成亞硝酸鹽，在顯色劑的作用下呈現(xiàn)紫紅色，用紫外分光光度計測其吸光度。當(dāng)被測樣品中含SOD時，則對超氧陰離子自由基有專一性的抑制作用，使形成的亞硝酸鹽減少，比色時測定管的吸光度值低于對照管的吸光度值，通過公式計算可以求出被測樣品中的SOD活力。

1.5MDA含量測定

采用MDA測試盒測試。測定原理是過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物中的丙二醛（MDA）可與硫代巴比妥酸（TBA）縮合，形成紅色產(chǎn)物，在532nm處有最大吸收峰。

2　結(jié)果

2.1不同蛋白梯度飼料對草魚生化指標(biāo)的影響

不同蛋白梯度飼料對草魚SOD、CAT、MDA活力的影響結(jié)果分別見表1、表2、表3。

表1　不同蛋白梯度飼料對草魚SOD活力的影響（±SD）

表1　不同蛋白梯度飼料對草魚SOD活力的影響（±SD）

SOD　28%　33%　38%心臟（U/mg）　24.84±3.58a　27.27±3.92a　26.86±1.95a肝胰臟（U/mg）　47.90±3.45a　50.59±4.14a　54.34±2.76a脾臟（U/mg）　9.42±1.50a　8.49±1.05a　9.10±0.84a頭腎（U/mg）　14.26±2.12b　18.30±1.55ab　20.90±2.78a中腎（U/mg）　33.06±2.57a　35.68±2.56ab　39.53±2.47a鰓（U/mg）　13.59±2.26a　15.90±2.40a　17.04±2.15a肌肉（U/mg）　8.14±1.92a　11.34±2.78a　8.11±1.79a血液（U/ml）　14.90±4.18a　16.12±2.73a　18.62±2.59a

注：表中同一行數(shù)據(jù)右上角標(biāo)有相同字母的表示差異不顯著（P>0.05）；標(biāo)有不同字母的表示差異顯著（P<0.05）。顯著水平為0.05。

表2　不同蛋白梯度飼料對草魚CAT活力的影響（±SD）

表2　不同蛋白梯度飼料對草魚CAT活力的影響（±SD）

注：表中同一行數(shù)據(jù)右上角標(biāo)有相同字母的表示差異不顯著(P>0.05)；標(biāo)有不同字母的表示差異顯著(P<0.05)。顯著水平為0.05。

CAT　28%　33%　38%心臟（U/mg）　0.86±0.15b　1.06±0.08ab　1.18±0.08a肝胰臟（U/mg）　2.68±0.25b　2.99±0.10b　3.58±0.38a脾臟（U/mg）　1.40±0.10a　1.30±0.10a　1.61±0.32a頭腎（U/mg）　1.00±.011b　1.00±.011b　1.64±0.10a中腎（U/mg）　1.80±0.15b　2.07±0.21a　2.09±0.18a鰓（U/mg）　1.10±0.13b　1.05±0.18b　1.46±0.17a肌肉（U/mg）　1.50±0.14b　1.86±0.11a　2.07±0.20a血液（U/ml）　1.28±0.14b　1.51±0.14ab　1.73±0.13a

表3　不同蛋白梯度飼料對草魚MDA活力的影響（nmol/mg）（±SD）

表3　不同蛋白梯度飼料對草魚MDA活力的影響（nmol/mg）（±SD）

注：表中同一行數(shù)據(jù)右上角標(biāo)有相同字母的表示差異不顯著（P>0.05）；標(biāo)有不同字母的表示差異顯著（P<0.05）。顯著水平為0.05。

MDA　28%　33%　38%心臟（nmol/mg）　0.99±0.12b　1.33±0.10a　1.54±0.87a肝胰臟（nmol/mg）　1.39±0.14a　1.68±0.17a　1.49±0.16a脾臟（nmol/mg）　0.82±0.05b　0.95±0.11ab　1.05±0.09a頭腎（nmol/mg）　2.64±0.15a　2.89±0.16a　2.88±0.20a中腎（nmol/mg）　1.98±0.12b　2.07±0.09b　2.44±0.18a鰓（nmol/mg）　1.53±0.11a　1.71±0.21a　1.72±0.13a肌肉（nmol/mg）　0.82±0.15b　1.09±0.13a　1.27±0.07a血液（nmol/ml）　2.87±0.25a　3.29±0.27a　3.08±0.25a

2.2生化指標(biāo)的影響分析

SOD是機(jī)體重要的抗氧化酶，其活性與生物的免疫水平密切相關(guān)。草魚心臟的SOD酶活力在33%蛋白濃度組時有較大升高，當(dāng)飼料蛋白繼續(xù)升高至38%時，SOD活力停止上升，甚至稍有下降。肝胰臟SOD活力最強(qiáng)，隨著飼料蛋白濃度的增加，酶活力逐漸增強(qiáng)。脾臟SOD活力較小，其SOD活力沒有隨著飼料蛋白水平變化出現(xiàn)明顯規(guī)律變動。頭腎隨著飼料蛋白梯度變化明顯上升，28%-33%梯度組之間變化強(qiáng)于33%-38%梯度組。中腎SOD活性僅次于肝胰臟，SOD活性隨著飼料蛋白梯度變化規(guī)律上升。鰓的SOD酶活力同頭腎相近，SOD活性在38%梯度組低于頭腎。肌肉SOD活力最弱，33%梯度組飼料對肌肉SOD活力有較好的提高。血液SOD活性隨著飼料蛋白梯度變化，緩慢上升。

CAT是生物體第一道抗氧化防線，能迅速清除細(xì)胞代謝產(chǎn)生的毒性物質(zhì)，具有一定的解毒能力。草魚心臟的CAT活力在各組織中最低，隨著飼料蛋白的變化緩慢升高。肝胰臟的CAT活力最高，隨著飼料蛋白梯度的升高，CAT活力提高較快。脾臟CAT活力隨著蛋白梯度變化影響不大，沒有規(guī)律性的改變。頭腎在28%-33%梯度組之間CAT活力有較大提高，33%-38%梯度組之間變化較慢。中腎變化趨勢同頭腎相近，CAT活力在28%-33%梯度之間有較快升高。鰓的CAT活力在28%-33%梯度組之間變化不大，甚至略有降低，在33%-38%梯度組之間，有一定程度的升高。肌肉CAT活力隨著飼料蛋白梯度的升高，穩(wěn)定上升。血液CAT活力略低于肌肉，受飼料蛋白梯度影響同肌肉相近。

MDA反映機(jī)體受氧化損傷的程度，是脂質(zhì)過氧化的最終產(chǎn)物。心臟MDA活力隨著飼料蛋白梯度上升，穩(wěn)定上升。肝胰臟在28%-33%飼料梯度組之間MDA活力上升，33%-38%濃度組之間有所下降，但仍高于28%梯度組。脾臟MDA活性最弱，隨飼料蛋白梯度升高，緩慢上升。頭腎MDA在28%-33%梯度組之間有一定程度的上組升，33%-38%梯度組之間變化不大。中腎MDA在28%-33%梯度組之間上升較慢，在33%-38%梯度組之間有較快升高。鰓的MDA活力低于中腎，隨飼料蛋白梯度變化規(guī)律同頭腎相近。肌肉MDA活力略高于脾臟，隨飼料蛋白梯度變化規(guī)律同脾臟相近。血液MDA活力在28%-33%梯度組之間有較大的促進(jìn)作用，33%-38%梯度組之間，MDA活力略有回降。

3　分析

綜合SOD、CAT、MDA數(shù)據(jù)分析，草魚主要的抗氧化酶在肝胰臟和血液里，這兩者的抗氧化能力大多隨著蛋白含量的升高而升高，在飼料蛋白質(zhì)33%升高至38%時，肝胰臟和血液的MDA活力有所下降。SOD活力僅次與肝胰臟的心臟，在38%飼料組的酶活力也出現(xiàn)回落。綜合來看，33%飼料組的草魚抗氧化能力高于28%飼料組，38%蛋白飼料使得草魚部分器官抗氧化能力出現(xiàn)回落，但一部分器官的抗氧化能力依然得到較大加強(qiáng)。心臟和肝胰臟的溶菌酶活力均隨著飼料蛋白梯度的上升而有所提高，肝胰臟在草魚各組織中溶菌酶活力最高。脾臟在28%-33%蛋白梯度組時，溶菌酶活力有一定程度升高，在33%-38%蛋白梯度組之間，溶菌酶活力略有下降。頭腎溶菌酶活力略強(qiáng)于心臟，在28%-33%梯度組之間的溶菌酶活力上升速度高于33%-38%梯度組。中腎溶菌酶活力在28% -33%梯度組之間有一定程度的上升，33%-38%梯度組之間上升加快。鰓的溶菌酶活力在各器官之中活力最小，溶菌酶活力受飼料蛋白梯度變化影響不大。肌肉溶菌酶活性隨著飼料蛋白梯度變化有一定程度上升。血液溶菌酶活力在28%-33%梯度組之間的上升速度高于33%-38%梯度組。

加大飼料中的蛋白含量，對草魚各組織的生化指標(biāo)的含量均有一定程度的提高。反之則反，但是在33%-38%梯度組之間有較快的上升。各種含量隨飼料蛋白含量變化有一定程度的上升，上升幅度較小。頭腎、中腎和鰓的總蛋白含量上升較大，肌肉在33%-38%梯度組之間上升較大，血液總蛋白含量受飼料蛋白含量變化影響較少。綜合來看，33%飼料組的草魚抗氧化能力高于28%梯度組，38%梯度組使得草魚部分器官抗氧化能力出現(xiàn)回落，但一部分器官的抗氧化能力依然得到較大加強(qiáng)。