銀屑病患者外周血 TL1A及其受體DcR3的表達(dá)

繆澤群　宋繼權(quán)　張麗芳　鄭楷平　宋　韜　盛晚香

銀屑病患者外周血 TL1A及其受體DcR3的表達(dá)

繆澤群宋繼權(quán)張麗芳鄭楷平宋韜盛晚香

目的： 檢測(cè)腫瘤壞死因子樣配體1A（TL1A）及其受體DcR3在尋常型銀屑病患者外周血中的表達(dá)。方法： 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)30例尋常型銀屑病患者及30名健康對(duì)照者血清中TL1A及其受體DcR3的水平。結(jié)果： 銀屑病組外周血TL1A和DcR3水平分別為（478.21± 231.18）pg/mL和（638.31±310.73）pg/mL，顯著高于對(duì)照組的（125.67±82.85）pg/mL和（245.16± 111.52）pg/mL（均P＜0.05）。進(jìn)行期患者TL1A和DcR3水平分別為（584.91±298.52）pg/mL和（860.41±402.78）pg/mL，顯著高于靜止期患者的（261.73±120.84）pg/mL和（467.34±225.16）pg/mL（均P＜0.05）；銀屑病患者組外周血TL1A與DcR3水平呈正相關(guān)。結(jié)論： 銀屑病患者外周血清TL1A及其受體DcR3水平顯著升高，TL1A可能通過(guò)與其受體DcR3結(jié)合參與銀屑病的發(fā)生與發(fā)展。

銀屑??； 腫瘤壞死因子樣配體1A； 誘騙受體3

腫瘤壞死因子樣配體1A（TNF-like ligand 1 aberrance，TL1A），屬于腫瘤壞死因子超家族成員 15 （tumornecrosisfactorsuperfamilymember15，TNFSF15）。TL1A通過(guò)與其受體結(jié)合影響機(jī)體免疫調(diào)節(jié)。近年研究發(fā)現(xiàn)，TL1A與其受體在腫瘤［1］、自身免疫性疾病［2］、炎性腸病［3］以及動(dòng)脈粥樣硬化［4］等的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用，誘導(dǎo)炎癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，TL1A及其受體也可能在銀屑病發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮作用，導(dǎo)致銀屑病患者表皮炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、角質(zhì)細(xì)胞角化異常及真皮血管異常增生。TL1A主要由內(nèi)皮細(xì)胞及淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，TL1A除了以膜結(jié)合形式存在以外，同時(shí)也存在可溶性形式。TL1A擁有兩個(gè)受體，分別為DR3和DcR3，通過(guò)與其特定的受體相結(jié)合在炎癥中發(fā)揮不同的作用。TL1A與DR3結(jié)合促進(jìn)炎癥的發(fā)生發(fā)展、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤生長(zhǎng)，還具有獨(dú)特的Th1及Th17極化特性，在Th1及Th17介導(dǎo)的免疫反應(yīng)發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要的作用［5，6］。本文選擇30例尋常型銀屑病患者為研究對(duì)象，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)血清中TL1A及其受體DcR3的水平，研究TL1A及其受體DcR3在銀屑病中表達(dá)的相關(guān)性。

1　資料和方法

1.1研究對(duì)象 觀察組所有標(biāo)本均來(lái)自本院2014 年1月至2014年12月門診及住院患者，經(jīng)臨床及病理診斷為尋常型銀屑病的患者30例，其中進(jìn)展期17例，靜止期13例；男18例，女12例，年齡18～82歲，平均（39.65±11.53）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①PASI評(píng)分診斷為中、重度尋常型銀屑?。虎?個(gè)月內(nèi)無(wú)光療或光化學(xué)治療史；③2周內(nèi)無(wú)糖皮質(zhì)激素治療史；④6周內(nèi)無(wú)維A酸類藥物、免疫調(diào)節(jié)劑及中藥等系統(tǒng)性抗銀屑病治療史；⑤經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者知情同意并簽署書面文件。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有著色性干皮病、皮肌炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等其他免疫功能疾病；②妊娠期及哺乳期；③無(wú)嚴(yán)重肝腎功能損害、無(wú)糖尿病及心臟病。選取同期健康志愿者30例為對(duì)照組，其中男16例，女14例，年齡19～80歲，平均（38.71±10.86）歲。兩組間年齡和性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2　結(jié)果

2.1銀屑病患者組外周血TL1A、DcR3水平比較

銀屑病患者組外周血TL1A、DcR3水平顯著高于正常對(duì)照組（t=7.86，6.52，均P＜0.05）；進(jìn)行期患者組外周血 TL1A、DcR3水平顯著高于靜止期（t=3.67，3.15，均P＜0.05），詳見(jiàn)表1。

表1　銀屑病患者組外周血TL1A、DcR3水平與正常對(duì)照組比較 （ˉx±s，pg/mL）

2.2TL1A與DcR3間相關(guān)性分析 銀屑病患者組外周血TL1A與DcR3水平呈正相關(guān)趨勢(shì)（r=0.347，P＜0.05）。

2.3銀屑病患者外周血TL1A、DcR3與PASI相關(guān)性分析 銀屑病患者組外周血TL1A水平與PASI無(wú)相關(guān)性（r=0.285，P＞0.05）；銀屑病患者組外周血DcR3水平與PASI呈正相關(guān)（r=0.372，P＜0.05）。

3　討論

TL1A與DcR3結(jié)合抑制細(xì)胞凋亡及自身免疫反應(yīng)，介導(dǎo)慢性炎癥及血管增生［7］，促進(jìn)Th2細(xì)胞功能等。DcR3是新發(fā)現(xiàn)的可溶性腫瘤壞死因子受體（TNFRSF6B），目前已知 DcR3的配體主要有 FasL （TNFSF6）、LIGHT（TNFSF14）、TL1A（TNFSF15），DcR3與這3種配體的親和力依次為：TL1A＞FasL＞LIGHT［8］。DcR3競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合TL1A，而DcR3本身缺少跨膜結(jié)構(gòu)域，兩者結(jié)合拮抗了TL1A-DR3介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡信號(hào)，促炎介質(zhì)的分泌，誘騙阻礙機(jī)體免疫系統(tǒng)的監(jiān)視和清除。但DcR3并沒(méi)完全像其他TNFR超家族成員一樣觸發(fā)“反轉(zhuǎn)信號(hào)”調(diào)節(jié)細(xì)胞功能，DcR3阻斷DR3后繼續(xù)協(xié)同TL1A參與炎癥的發(fā)生發(fā)展［9］。此外，DcR3降低IL-2反應(yīng)的生物活性，上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶-2mRNA的表達(dá)及活性，促進(jìn)新生血管形成［10］。近來(lái)有報(bào)道顯示，血清或組織中DcR3水平可作為多種腫瘤及自身免疫性疾病的生物學(xué)標(biāo)志物［11］。

我們的研究結(jié)果顯示，銀屑病患者外周血TL1A、DcR3水平顯著高于正常對(duì)照組，且進(jìn)行期患者TL1A、DcR3水平顯著高于靜止期（P＜0.05），提示二者可能參與銀屑病的發(fā)生發(fā)展；銀屑病患者組外周血TL1A與DcR3水平呈正相關(guān)趨勢(shì)（P＜0.05），提示二者在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中有一定的協(xié)同作用，TL1A可能作為銀屑病發(fā)病的啟動(dòng)因子與DcR3結(jié)合介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，促使炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、表皮角質(zhì)細(xì)胞角化異常及真皮血管異常增生。TL1A/DcR3在銀屑病發(fā)病機(jī)制中的作用還有待進(jìn)一步研究，為新一代以受體為主的生物靶向治療的應(yīng)用開發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。

［1］Mattei PL，Corey KC，Kimball AB.Psoriasis Area Severity Index and the Dermatology Life Quality Index：the correlation between disease severity and psychological burden in patients treated with biological therapies［J］.J Eur Acad Dermatol Venereol，2014，28（3）：333-337.

［2］Pitti RM，Marsters SA，Lawrence DA，et al.Genomic amplification of a decoy receptor for Fas ligand in lung and colon cancer［J］.Nature，1998，396（6712）：699-703.

［3］Lin WW，Hsieh SL.Decoy receptor 3：a pleiotropic immunomodulator and biomarker for inflammatory diseases，autoimmune diseases and cancer［J］.Biochem Pharmacol，2011，87 （7）：838-847.

［4］Bamias G，Kaltsa G，Siakavellas SI，et al.Differential expression of the TL1A/DcR3 system of TNF/TNFR-like proteins in large vs.small intestinal Crohn's disease［J］.Dig Liver Dis，2012，44（1）：30-36.

［5］Meylan F，Richard AC，Siegel RM.TL1A and DR3，a TNF family lingand receptor pair that promotes lymphocyte costim-ulation，mucosal hyperplasia and autoimmune inflammation ［J］.Immunol Rev，2011，244（1）：188-196.

［6］Di Cesare A，Di Meglio P，Nestle FO.The IL-23/Th17 axis in the immunopathogenesis of psoriasis［J］.J Invest Dermatol，2009，129（6）：1339-1350.

［7］Wu NL，Huang DY，Hsieh SL，et al.EGFR-driven upregulation of decoy receptor 3 in keratinocytes contributes to the pathogenesis of psoriasis［J］.Biochim Biophys Acta，2013，1832（10）：1538-1548.

［8］Hsu TL，Wu YY，Chang YC，et al.Attenuation of Th1 response in decoy receptor 3 transgenic mice［J］.J Immunol，2005，175（8）：5135-5145.

［9］Ge Z，Sanders AJ，Ye L，et al.Aberrant expression and function of death receptor-3 and death decoy receptor-3 in human cancer［J］.Exp Ther Med，2011，2（2）：167-172.

［10］Yang CR，Hsieh SL，Teng CM，et al.Soluble decoy receptor 3 induces angiogenesis by neutralization of TL1A，a cytokine belonging to tumor necrosis factor super-family and exhibiting angiostatic action［J］.Cancer Res，2004，64（3）：1122-1129.

［11］Lin WW，Hisieh SL.Decoy receptor 3：a pleiotropic immunomodulator and biomarker for inflammatory diseases，autoimmune diseases and cancer［J］.Biochem Pharmacol，2011，81（7）：838-847.

（收稿：2015-06-01 修回：2015-06-15）

The level of TL1A and its receptor DcR3 in the peripheral blood of patients with psoriasis vulgaris

MIAO Zequn，SONG Jiquan，ZHANG Lifang，ZHENG Kaiping，SONG Tao，SHENG Wanxiang.
Department of Dermatology，Zhongnan Hospital，Wuhan University，Wuhan 430071，China

Objective：To detect the level of TL1A and its receptor DcR3 in the peripheral blood of patients with psoriasis vulgaris.Methods：The level of serum L1A and its receptor DcR3 was detected by enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）in 30 patients with psoriasis vulgaris and 30 healthy controls.Results：The level of serum TL1A and its receptor DcR3 in the patients was（478.21±231.18）pg/mL and （638.31±310.73）pg/mL，which were higher than those in healthy controls（125.67±82.85 pg/mL and 45.16 ±111.52 pg/mL）（P＜0.05）and those in the patients of progressive stage were（584.91±298.52）pg/mL and （860.41±402.78）pg/mL，which were higher than those in the patients of stable stage（261.73±120.84 pg/ mL and 67.34±225.16 pg/mL）（P＜0.05）.The level of TL1A in the patients with psoriasis vulgaris was positively correlated with DcR3（P＜0.05）.Conclusion：The level of TL1A and its receptor DcR3 in the peripheral blood of patients with psoriasis vulgaris was significantly increased and TL1A may play important roles in the progress of psoriasis vulgaris by combining with its receptor DcR3.

psoriasis；TNF-like ligand 1 aberrance；decoy receptor 3

湖北省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（編號(hào)：2014CFB360）

武漢大學(xué)中南醫(yī)院皮膚科，湖北武漢，430071

1.2實(shí)驗(yàn)方法 采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)血清中TL1A及其受體DcR3的水平。受檢者清晨空腹靜脈采血2 mL，3000 r/min離心分離血清，快速凍存于-20℃冰箱。Human TL1A ELISA Kit（美國(guó) R&D公司），Human DcR3 ELISA Kit（美國(guó)R&D公司），嚴(yán)格按使用說(shuō)明書操作。采用Bio-Rad550酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio-Rad公司）在450 nm處測(cè)A值，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線求出樣品中的含量。

1.3采用銀屑病皮損面積和嚴(yán)重程度（psoriasis area and severity index，PASI）評(píng)分對(duì)皮損進(jìn)行評(píng)價(jià)［1］。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ˉx±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。TL1A、DcR3與PASI評(píng)分的相關(guān)性及TL1A與DcR3間表達(dá)相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。