2012-2013年廣西犬狂犬病監(jiān)測及免疫效果分析

韋顯凱,鄭敏,鄭列豐,蘇姣秀,尹彥文,梁晟,蘭斌

(1.廣西大學動物科技學院,廣西南寧530005;2.廣西動物疫病預(yù)防控制中心,廣西南寧530001)

2012-2013年廣西犬狂犬病監(jiān)測及免疫效果分析

韋顯凱1,2,鄭敏2,鄭列豐2,蘇姣秀2,尹彥文2,梁晟2,蘭斌2

(1.廣西大學動物科技學院,廣西南寧530005;2.廣西動物疫病預(yù)防控制中心,廣西南寧530001)

為了解當前廣西家犬狂犬病流行情況,評價防控效果,采集免疫過狂犬病疫苗的犬血清2 325份進行抗體檢測,抗體陽性的有1 571份,陽性率為67.57%.另外,采集交易市場或屠宰場表觀健康犬的腦組織樣品1 012份,通過RT-PCR方法檢測狂犬病病原,結(jié)果表觀,健康犬1份樣品呈陽性,陽性率為0.099%.結(jié)果表明,實施狂犬病疫苗免疫后,廣西家犬總體免疫抗體水平良好,表觀健康犬攜帶狂犬病病毒比率下降到極低水平.提示應(yīng)繼續(xù)加強農(nóng)村犬只的免疫和管理,有效降低狂犬病的發(fā)生.

狂犬病;調(diào)查;RT-PCR;抗體監(jiān)測

狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus)引起的一種人畜共患病,當人被患有狂犬病的動物咬傷后,病毒可以通過傷口的外周神經(jīng)傳至中樞神經(jīng)系統(tǒng),人一旦發(fā)病,死亡率100%.世界上每年因狂犬病死亡的人數(shù)達到55 000人,上千萬人需要進行病毒暴露后處理[1],中國每年因狂犬病死亡的人數(shù)達3 300人,為世界第二,僅次于印度[2].在中國,因狂犬病死亡的人大部分為攜帶狂犬病病毒的犬和貓咬、抓傷后引起,犬是引起中國狂犬病病人高發(fā)的最主要原因[3].而對犬進行狂犬病疫苗的免疫則是預(yù)防犬感染狂犬病,進而降低犬咬傷人發(fā)病幾率的重要措施.本研究通過在廣西區(qū)內(nèi)對犬進行狂犬病疫苗免疫后采集犬血清,并收集市場上的狗腦,分別進行狂犬病抗體及病原檢測,分析疫苗免疫和狂犬病抗體產(chǎn)生以及病原攜帶情況的相互關(guān)系,為控制狂犬病的發(fā)生提供理論依據(jù).

1　材料與方法

1.1樣品來源2012年和2013年分別安排8個縣、區(qū)用狂犬病疫苗進行免疫,采集免疫后1個月的犬血清共計2 325份,其中2012年1 305份,2013年1 020份.2012年和2013年分別從市場上采集狗肉攤點的狗腦506份.其中隆安縣用進口的疫苗進行犬的免疫,每年采集血清300份以上,犬腦100份.其他縣用國產(chǎn)疫苗進行免疫,其中2012年用國產(chǎn)弱毒苗進行免疫,2013年用國產(chǎn)滅活苗進行免疫,每年每個縣采集血清約100份,犬腦50份.

1.2試劑狂犬病抗體ELISA檢測試劑盒,購自浙江同點生物科技有限公司;RT-PCR所需試劑為寶生物工程(大連)有限公司產(chǎn)品.

1.3方法對犬血清進行狂犬病抗體檢測,檢測方法按照試劑盒說明書進行.犬腦則通過RTPCR方法進行狂犬病病毒檢測,引物和反應(yīng)條件依據(jù)曾蘭等[4]的方法進行,引物序列為L1:5′-GAACAACTGGCAACACTTCTCAAC-3′,L2:5′-AGACAAGAC TTGATCC CCAGCAAT-3′.

2　結(jié)果

2.12012-2013年狂犬病抗體檢測結(jié)果2012-2013年共采集的犬血清樣品2 325份,抗體合格1 571份,合格率為67.57%.2012年采集的犬血清1 305份,其中抗體合格795份,合格率60.92%.2013年采集血清1 020份,抗體合格776份,合格率為76.08%.2013年的合格率比2012年高15.16%,差異顯著(P<0.05),如表1所示.

2.2不同類別犬抗體合格情況在采集的犬血清樣品中,有1 928份來自散養(yǎng)犬,抗體合格數(shù)為1 380份,合格率71.58%.寵物犬397份,抗體陽性191份,合格率為48.11%,兩者相比差異極其顯著(P<0.01).

2.3不同疫苗類別抗體合格情況在采集樣品的犬中所應(yīng)用的疫苗類別主要有進口滅活苗、國產(chǎn)弱毒苗和滅活苗.其中使用進口滅活苗的血清樣品有928份,抗體合格的有730份,合格率78.66%.使用國產(chǎn)疫苗的犬所采集樣品1 397份,抗體合格841份,合格率為60.20%,差異顯著(P<0.05).其中國產(chǎn)弱毒苗免疫合格率38.89%,國產(chǎn)滅活苗的合格率80.43%,差異極顯著(P< 0.01),但進口疫苗和國產(chǎn)滅活苗相比差異不顯著(P>0.05).

表1　2012-2013年狂犬病抗體檢測

2.4犬腦狂犬病毒檢測2012-2013年共采集市場銷售犬犬腦1 012份,共檢測到狂犬病病毒1份,陽性率0.099%.其中2012年共檢測506份,病毒陽性1份,2013年檢測506份,病毒陽性0份.

3　討論

從2009年開始,廣西就參與了國家公益性項目子課題"免疫示范區(qū)狂犬病的凈化和示范效果評價"和"動物狂犬病快速診斷與有效疫苗研究",在以隆安縣為核心的免疫示范區(qū)內(nèi)進行了狂犬病疫苗免疫,通過抗體檢測得知,8個采樣縣的抗體合格率差異較大,經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn),有些地區(qū)特別是肉狗養(yǎng)殖場的犬,由于養(yǎng)殖周期相對較短,在進行免疫后的較短時間即進行了采血檢測,造成了抗體滴度較低.而有些地區(qū)采集的樣品來源于年齡較大的看家狗,進行過多次的疫苗免疫,抗體水平較高.此外,犬的年齡對免疫效果有影響,可能與年齡小的犬發(fā)育不完全、母源抗體影響,免疫機能較差有關(guān)[5].

在本研究中,隨機抽取的寵物犬的狂犬病抗體水平較低.從2012年的西鄉(xiāng)塘區(qū)送檢樣品的檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),僅有9%合格,2013年也僅有33%合格,該地區(qū)的樣品全部來自于寵物.趙永旺等[6]對泰州市寵物犬狂犬病免疫情況調(diào)查,發(fā)現(xiàn)免疫合格率為31.7%.寵物犬使用狂犬病多聯(lián)疫苗的犬只狂犬病抗體水平比較低,免疫合格率為11.8%;免疫單聯(lián)疫苗的犬抗體水平較好,免疫合格率為61.4%.說明盡管寵物主人對于犬貓的疾病治療較為重視,但對于免疫后的抗體產(chǎn)生效果卻知之甚少.寵物和人類的接觸機會更多,如果免疫后產(chǎn)生抗體較差,則后患無窮,建議寵物主人定期對犬、貓的狂犬病抗體進行檢測.本研究通過對采集樣品的犬中所應(yīng)用的不同類別狂犬病疫苗的抗體合格率進行比較,結(jié)果顯示,進口苗的抗體合格率為78.66%,國產(chǎn)弱毒苗的抗體合格率為38.89%,其中國產(chǎn)滅活苗的抗體合格率為80.43%,滅活苗的效果優(yōu)于弱毒苗,這和陳軍[5]等的報道一致.

對狂犬病免疫抗體進行監(jiān)測,以及市場屠宰犬犬腦組織狂犬病抗原的檢測.結(jié)果發(fā)現(xiàn),2010-2013年,抗體檢測合格率分別為:86.70%,90.21%, 60.92%,72.08%;市場犬犬腦狂犬病病毒檢出率分別為:3.66%,0.26%,0.20%,0;人間狂犬病發(fā)病數(shù)分別為:300,280,235,168人.2010-2011年,在廣西區(qū)采集市場銷售犬中犬腦狂犬病病毒陽性率1.38%(11/800),疑似狂犬病犬犬腦陽性率20%(5/ 25)[7].病毒檢出率呈下降趨勢,而人間發(fā)病數(shù)也呈下降趨勢.說明對犬進行免疫,提高犬的狂犬病抗體水平對減少人間狂犬病發(fā)病率起到重要作用.不同年份的抗體合格率抗體有差異,尤其是2012年的抗體合格率最低,推測和樣品來源、疫苗質(zhì)量、不同批次檢測試劑盒的特異性有關(guān).2012年所采集樣品中有較多的寵物樣品,所使用的疫苗主要是國產(chǎn)弱毒疫苗,動物疫病防治人員在免疫過程中,稀釋好的弱毒苗未能及時免疫、保存不當?shù)染軐?dǎo)致免疫抗體合格率較低.

[1]Zhang,Hualei Wang,Fazal Mahmooda.Rabies virus glycoprotein is an important determ inant for the induction of innate immune re?sponses and the pathogenic mechanisms[J].2013,162(2-4): 601-613.

[2]湯重發(fā),俞永新,劉景華,等.狂犬病病毒不同毒株的生物學特性研究[J].中國病毒病雜志,2014,4(3):179-186.

[3]李澤盛,劉愛林,譚榮榮,等.狂犬病研究進展[J].中國畜牧獸醫(yī),2010,37(7):189-191.

[4]曾蘭,陸武,王雯,等.廣西狂犬病野毒株L基因3'端的多態(tài)性分析[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學報,2009,31(11):906-909.

[5]陳軍,鄭文成,張朝陽,等.湖南部分地區(qū)免疫犬狂犬病免疫效果研究[J].中國動物檢疫,2009,26(12):56-58.

[6]趙永旺,蘇曉健,管遠紅.泰州市寵物犬狂犬病免疫情況調(diào)查[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2014,5:114-115.

[7]韋顯凱,鄭敏,鄭列豐,等.2010-2011年廣西狂犬病監(jiān)測及效果分析[J].畜牧與獸醫(yī),2013,45(7):86-88.

S851.35

B

0529-6005(2016)02-0071-02

2014-10-28

農(nóng)業(yè)公益性行業(yè)科研專項項目"動物狂犬病快速診斷與有效疫苗研究"(2001103032)

韋顯凱(1982-),男,獸醫(yī)師,博士生,主要從事畜禽傳染病診斷與防控,E-mail:wxkdnnm@163.com

鄭列豐,E-mail:zhengliefeng-999@163.com