雞源致病性E.coli藥物敏感性試驗

陳占莉 張永明 蘇 震　付瑞霞　雷 艷

（榆林市府谷縣武家莊鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，陜西府谷 719400）

雞源致病性E.coli藥物敏感性試驗

陳占莉 張永明 蘇 震付瑞霞雷 艷

（榆林市府谷縣武家莊鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，陜西府谷 719400）

對2012-2015年分離于陜西榆林地區(qū)50株雞源致病性E.colj進行8種常用喹諾酮類藥物藥物敏感性試驗，為指導(dǎo)臨床合理使用喹諾酮類藥物提供數(shù)據(jù)參考。參照CLSI推薦的K-B藥敏紙片法對所有菌株進行藥物敏感性試驗。結(jié)果顯示50株被測菌株對喹諾酮類藥物都產(chǎn)生了耐藥性，可能會導(dǎo)致該藥物耐藥性的水平傳播，應(yīng)加強監(jiān)控。

E.colj；藥物敏感性試驗

大腸埃希菌（E.coli）俗稱大腸桿菌，是埃希氏菌屬（Escherichia）的代表菌，是構(gòu)成人類和大多數(shù)溫血動物腸道中的正常菌群之一，也是環(huán)境中的常在菌。在一定條件下，由致病性大腸埃希菌引起雞的大腸桿菌病是危害養(yǎng)雞業(yè)的重要細(xì)菌性疾病，各個品種的雞在不同日齡均可發(fā)病。本研究通過藥物敏感性試驗對雞源致病性E.coli喹諾酮類藥物耐藥性進行檢測。從而探討雞致病性E.coli中耐藥性情況，對抑制喹諾酮類藥物耐藥性的迅速傳播具有重要意義。

1 材料

菌株：50株E.coli于2012-2015年分離于陜西省榆林市陜西大匠農(nóng)科產(chǎn)業(yè)集團有限公司。

藥品：8種藥敏紙片（喹諾酮類藥物）：吡哌酸、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、依諾沙星、洛美沙星、格帕沙星、吉米沙星均購自杭州天和微生物試劑有限公司。

2 方法

采用K-B紙片擴散法進行藥物敏感性試驗［1-4］，將所保存的50株純化菌株分別接種于普通肉湯中，37 ℃培養(yǎng)24 h后，用無菌生理鹽水校正菌液濁度，使其與標(biāo)準(zhǔn)比濁管的濃度相同（一般為0.5麥?zhǔn)蠁挝唬?。用無菌棉簽蘸取矯正過的菌液涂布于新鮮配制的普通瓊脂平板上，37 ℃放置10 min后，用滅菌鑷子將抗生素紙片貼附在瓊脂表面（每張紙片間距不小于24 mm，紙片中心距邊緣不小于15 mm），每種藥物做兩個重復(fù)，此操作全部在無菌間進行。置于恒溫培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)18～24 h后，測量抑菌圈直徑，求其平均值。

結(jié)果判定：按2005年美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（CLSI/ NCCLS）指導(dǎo)原則的標(biāo)準(zhǔn)計算E.coli對抗菌藥物的耐藥率（R%）、中介率（I%）、敏感率（S%）。（I%）、敏感率（S%）的標(biāo)準(zhǔn)。

表1　紙片法藥物敏感性試驗抑菌環(huán)直徑判斷標(biāo)準(zhǔn)（mm）

3 結(jié)果

試驗中用吡哌酸、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、依諾沙星、洛美沙星、格帕沙星、吉米沙星來檢測分離至陜西榆林地區(qū)的50株雞源致病性E.coli對喹諾酮類藥物的耐藥情況。50株E.coli全部對喹諾酮類藥物產(chǎn)生了耐藥性，其中對諾氟沙星和氧氟沙星呈現(xiàn)嚴(yán)重耐藥；對吉米沙星中度敏感，敏感率為58%；而對其它喹諾酮類藥物則表現(xiàn)為耐藥。試驗結(jié)果見表2。

表2　50株分離菌藥物敏感性試驗情況（8種）

4 結(jié)論

陜西榆林地區(qū)分離的50株雞源致病性E.coli對喹諾酮類藥物產(chǎn)生了不同程度的耐藥性，其中對諾氟沙星和氧氟沙星呈現(xiàn)嚴(yán)重耐藥；對洛美沙星高度敏感敏感率為70%，其次為洛美沙星，敏感率為70%；對吉米沙星中度敏感，敏感率為58%；而對其它喹諾酮類藥物則表現(xiàn)為耐藥，引起獸醫(yī)臨床治療的難度加大，有必要對其跟蹤監(jiān)視，以便采取必要措施。這一結(jié)果與張志峰等［6］在2008年及鐘江國等［5-8］在1999年報道的不同，分析原因可能與各地區(qū)菌株的血清型不同或不同地區(qū)的用藥習(xí)慣不同，進而產(chǎn)生耐藥性不同有關(guān)。因此，臨床應(yīng)用藥物防治雞大腸桿菌病時，應(yīng)該結(jié)合藥物敏感性試驗結(jié)果選取敏感藥物，同時將2-3種敏感藥物交替使用。應(yīng)首選洛美沙星，也可將洛美沙星與吉米沙星交替使用，以避免新耐藥性的產(chǎn)生；而且在每次用藥之前都需通過藥物敏感性試驗掌握雞群中E.coli對喹諾酮類藥物及其他抗生素的敏感程度，最終選取敏感藥物用于雞大腸桿菌病的防治。

［1］徐?；?，牛鐘相，秦愛建.細(xì)菌耐藥性研究進展［J］.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2010，41（1）：156-160.

陳占莉（1985—），女，陜西榆林人，助理獸醫(yī)師，從事動物疫病防控工作。