中段尿標(biāo)本283例培養(yǎng)分離大腸埃希菌的耐藥性分析

楊新原，忽勝和，王源，馬霞（大理學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南大理671000）

中段尿標(biāo)本283例培養(yǎng)分離大腸埃希菌的耐藥性分析

楊新原，忽勝和，王源，馬霞
（大理學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南大理671000）

目的了解該院中段尿標(biāo)本培養(yǎng)分離的大腸埃希菌耐藥情況，為臨床治療尿路感染患者提供經(jīng)驗(yàn)用藥依據(jù)。方法對(duì)該院2014年6月至2015年5月283例尿路感染患者清潔中段尿標(biāo)本培養(yǎng)分離所得大腸埃希菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果大部分β內(nèi)酰胺類、喹諾酮類抗菌藥物及四環(huán)素、復(fù)方磺胺甲惡唑、慶大霉素耐藥率比較高；碳青霉烯類、拉氧頭孢類、頭霉烯類、四代頭孢菌素及部分加β內(nèi)酰胺類酶抑制劑的復(fù)合制劑、部分三代頭孢菌素耐藥率較低。結(jié)論對(duì)該院就診的能推斷病原菌是大腸埃希菌的尿路感染患者，可結(jié)合病情，先依據(jù)該文分析所得的耐藥率進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)性治療。

尿分析；大腸桿菌；藥物耐受性

大腸埃希菌引起的尿路感染是最主要的感染性疾病之一［1］；在臨床工作中，中段尿標(biāo)本培養(yǎng)分離率最高的病原菌是大腸埃希菌。為了解本院中段尿標(biāo)本培養(yǎng)分離所得大腸埃希菌的耐藥性，向臨床治療尿路感染患者提供經(jīng)驗(yàn)用藥依據(jù)，對(duì)本院283例中段尿標(biāo)本培養(yǎng)分離所得大腸埃希菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，并報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料對(duì)本院2014年6月至2015年5月收治的283例尿路感染患者（其中男133例，女150例；年齡1～93歲，中位年齡44歲）清潔中段尿標(biāo)本分離所得大腸埃希菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析。所分析的菌株均為非重復(fù)菌株。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑主要采用法國(guó)梅里埃VITEK2-Compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定、藥敏分析儀及其配套的鑒定、藥敏卡。

1.2.2質(zhì)控菌株用3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)菌株：大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、銅綠假單胞菌ATCC27853對(duì)所用培養(yǎng)基及藥敏試驗(yàn)每周進(jìn)行1次質(zhì)控。

1.2.3檢驗(yàn)方法嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》留取標(biāo)本和試驗(yàn)操作。培養(yǎng)結(jié)果排外污染后進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)，革蘭陰性桿菌大于或等于105cfu/mL時(shí)繼續(xù)進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)［2］；必要時(shí)，結(jié)合臨床診斷、抗菌藥物使用情況、尿液酸堿度、尿沉渣鏡檢白細(xì)胞數(shù)及上皮細(xì)胞數(shù)、尿干化學(xué)亞硝酸鹽試驗(yàn)是否陽(yáng)性等相關(guān)信息，綜合考慮和判定后，再?zèng)Q定是否進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)［3］。

1.3數(shù)據(jù)處理應(yīng)用WHONET5.6統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2　結(jié)果

2.1283例中段尿標(biāo)本中大腸埃希菌分離情況283例分離大腸埃希菌的中段尿標(biāo)本中女性患者比例略多［53.00%（150/283）］；絕大多數(shù)來(lái)自泌尿外科［55.48% （157/283）］；產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL）大腸埃希菌為89株（31.45%）；產(chǎn)頭孢菌素酶（AMPC）大腸埃希菌僅3株（1.06%）；產(chǎn)碳青霉烯酶（KPC）大腸埃希菌未檢出。

2.2283例中段尿標(biāo)本培養(yǎng)分離的大腸埃希菌耐藥情況283例中段尿標(biāo)本培養(yǎng)分離的大腸埃希菌，對(duì)28種常見抗菌藥物的耐藥率見表1。氨芐西林耐藥率最高，超過(guò)90.00%；美洛西林次之，為86.96%；四環(huán)素耐藥率也高，將近80.00%；哌拉西林、頭孢唑啉、頭孢呋辛、氨芐西林-舒巴坦、復(fù)方磺胺甲惡唑、頭孢曲松耐藥率較高，均在60.00%以上；環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、慶大霉素耐藥率近50.00%；氨曲南耐藥率接近38.00%。耐藥率較低的抗菌藥物依次有：厄他培南、美羅培南、亞胺培南、拉氧頭孢、哌拉西林-他唑巴坦、阿米卡星、頭孢替坦、呋喃妥因、頭孢美唑、頭孢哌酮-舒巴坦、頭孢西丁、頭孢吡肟、妥布霉素、頭孢唑肟、頭孢他啶。

表1　283例中段尿標(biāo)本培養(yǎng)分離的大腸埃希菌耐藥情況（n=283）

3　討論

大腸埃希菌是腸桿菌科埃希菌屬的代表菌種，也是人體腸道中正常菌群的主要組成部分。其中有5類致腹瀉性大腸埃希菌（包括腸毒素型、腸致病型、腸侵襲型、腸出血型、腸凝聚型大腸埃希菌）能致使腸道內(nèi)感染；其余菌株都是異位寄生引起腸道外感染。在泌尿道尿道口的上皮細(xì)胞處常常有大腸埃希菌等兼性厭氧菌定植，當(dāng)人體發(fā)生某些變化會(huì)導(dǎo)致定植菌繁殖引起尿路感染；特別是有K抗原和菌毛的大腸埃希菌菌株更易導(dǎo)致泌尿系統(tǒng)感染［4-6］。

無(wú)論是非復(fù)雜性上尿路感染或是下尿路感染，最常見病原菌均是大腸埃希菌；幾乎所有急性單純性下尿路感染初發(fā)病例均是大腸埃希菌導(dǎo)致的感染［7］；至于復(fù)雜性尿路感染，大腸埃希菌也是常見的病原菌［1］。因此，定期統(tǒng)計(jì)分析并發(fā)布該類患者尿標(biāo)本中所檢出大腸埃希菌的耐藥情況具有重要的臨床價(jià)值。

從表1中顯示，大部分β內(nèi)酰胺類抗生素如青霉素類、一代頭孢菌素、二代頭孢菌素、部分三代頭孢菌素、部分加β內(nèi)酰胺類酶抑制劑的復(fù)合制劑耐藥率均在60.00%以上；單環(huán)類氨曲南耐藥率接近38.00%；耐藥率較低的β內(nèi)酰胺類抗生素依次主要有碳青霉烯類、拉氧頭孢類、頭霉烯類、四代頭孢菌素及部分加β內(nèi)酰胺類酶抑制劑的復(fù)合制劑、部分三代頭孢菌素；其中碳青霉烯類、拉氧頭孢類耐藥率為0。究其原因主要是大腸埃希菌在β內(nèi)酰胺類抗生素選擇性壓力作用下可以產(chǎn)生各種β內(nèi)酰胺酶（包括ESBL、AMPC、KPC）引起藥物滅活，特別是ESBL陽(yáng)性菌株往往攜帶較大染色質(zhì)長(zhǎng)度的耐藥質(zhì)粒，更容易獲得多種耐藥基因［8-9］。在我國(guó)大腸埃希菌中，CTX-M型ESBL最流行，TEM型ESBL也有廣泛分布，此外，OXA、CMT、PER、VEB型酶有較少分布。大腸埃希菌也可以攜帶不被誘導(dǎo)的持續(xù)高水平表達(dá)的染色體AMPC基因，從而表現(xiàn)出耐藥性。本文中未發(fā)現(xiàn)產(chǎn)KPC的大腸埃希菌菌株，這可能和KPC主要在肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌和不動(dòng)菌屬分布有關(guān)；但在大腸埃希菌中也已有KPC-2、GES-5、IMP、VIM酶被發(fā)現(xiàn)的少數(shù)報(bào)道［8］。

從表1中可以看出，喹諾酮類中環(huán)丙沙星和左氧氟沙星耐藥率將近50.00%，其原因主要是大腸埃希菌DNA解旋酶及拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，致使喹諾酮類藥物不能與之結(jié)合導(dǎo)致耐藥［10］。氨基糖苷類中的慶大霉素耐藥較高，為46.32%，其耐藥主要是因?yàn)榇竽c埃希菌產(chǎn)生了一種或幾種氨基糖苷類鈍化酶、修飾酶，從而降低了氨基糖苷類藥物與靶位核糖體的親和力［6，10］；同屬于氨基糖苷類的阿米卡星和妥布霉素耐藥率較低，特別是阿米卡星耐藥率僅為2.92%，這可能與阿米卡星、妥布霉素、慶大霉素屬于不同來(lái)源的氨基糖苷類藥物有關(guān)。

另外，本研究中四環(huán)素的耐藥率將近80.00%，而復(fù)方磺胺甲惡唑的耐藥率也大于60.00%；前者與大腸埃希菌的藥物主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)等耐藥機(jī)制有關(guān)，后者則與大腸埃希菌獲得了從外界環(huán)境直接攝取葉酸的能力有關(guān)［4，6］。合成的硝基呋喃類抗菌藥物呋喃妥因耐藥率僅為4.46%，與有關(guān)報(bào)道一致［11］，提示其對(duì)大腸埃希菌的抗菌活性仍較高。

綜上所述，按照國(guó)家衛(wèi)計(jì)生委2015年版《抗菌藥物臨床應(yīng)用指導(dǎo)原則》，對(duì)本院就診的能推斷病原菌是大腸埃希菌的尿路感染患者，可依據(jù)以上分析所得的抗菌藥物耐藥率，結(jié)合患者病情，先對(duì)患者進(jìn)行合理有效的經(jīng)驗(yàn)治療；再在獲知中段尿標(biāo)本培養(yǎng)及藥敏結(jié)果后，結(jié)合之前的治療效果調(diào)整用藥方案［12］。

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［3］叢玉隆.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：382-384.

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10.3969/j.issn.1009-5519.2016.08.036

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1009-5519（2016）08-1218-03

（2016-01-10）