芪紅散對(duì)慢性心衰大鼠BNP及ET-1水平的影響

王　東, 劉　江, 王曉峰

(新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院VIP病房, 烏魯木齊　830000)

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芪紅散對(duì)慢性心衰大鼠BNP及ET-1水平的影響

王東, 劉江, 王曉峰

(新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院VIP病房, 烏魯木齊830000)

目的探討芪紅散對(duì)慢性心衰大鼠血漿中腦鈉肽(brain natriuretic peptide，BNP)及內(nèi)皮素(Endothelin-1，ET-1)水平的影響。方法選用健康雄性SD大鼠，采用腹主動(dòng)脈結(jié)扎法，建立慢性心衰動(dòng)物模型。將造模成功的大鼠隨機(jī)分成5組：假手術(shù)組、模型組、陽性藥物組、芪紅散低劑量組和芪紅散高劑量組，每組10只。正常喂養(yǎng)及喂藥4 w后，使用多普勒超聲心動(dòng)圖測(cè)定各組大鼠心功能，采用ELA 法測(cè)定各組血漿中BNP 的含量；采用放免法測(cè)定各組血清中ET-1的含量。結(jié)果芪紅散低劑量組、芪紅散高劑量組、陽性藥物組心功能較模型組明顯提高(P<0.01～0.05)；芪紅散低劑量組、芪紅散高劑量組、陽性藥物組血漿中BNP及ET-1的含量較模型組明顯下降(P<0.01～0.05)。結(jié)論芪紅散可以降低血漿中BNP及ET-1水平，改善心功能，減輕心力衰竭癥狀。

芪紅散； 慢性心衰； 腦鈉肽； 內(nèi)皮素

Urumqi830000,China)

慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)簡(jiǎn)稱心衰，是一種由各種心臟疾病導(dǎo)致心功能不全的復(fù)雜的臨床綜合征，是各種心血管疾病終末階段的臨床表現(xiàn)，同時(shí)也是所有心血管疾病的最終歸宿[1]。CHF的發(fā)病機(jī)制為心臟功能障礙，無法充分排出靜脈回心血量，導(dǎo)致左心室擴(kuò)張、神經(jīng)內(nèi)分泌紊亂，且常伴有心臟增大、心功能不全病癥，對(duì)患者的生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響[2]。近年來，CHF發(fā)病率和病死率也呈明顯上升趨勢(shì)[3]。本實(shí)驗(yàn)通過復(fù)制CHF動(dòng)物模型, 觀察該模型血漿腦鈉肽(BNP)、內(nèi)皮素( ET)水平的變化 , 從細(xì)胞因子水平探討芪紅散對(duì)實(shí)驗(yàn)性 CHF 大鼠的作用機(jī)制,為中醫(yī)藥治療心力衰竭提供新的思路。

1　資料與方法

1.1儀器與材料

1.1.1儀器與試劑 哺乳類動(dòng)物手術(shù)器械 ( 手術(shù)刀、組織剪、有齒鑷、止血鉗、12號(hào)灌胃針、5 mL注射器、4號(hào)頭皮針), MSE-25 型高速冷凍離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠),低溫冰箱、電子秤 (湖南儀器儀表總廠天平廠) ，VEvo2100彩色多普勒超聲心動(dòng)圖(由VisualSonics Inc公司生產(chǎn))。腦鈉素試劑盒(上海貝西公司),內(nèi)皮素-1放射免疫分析試劑盒(解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所)。

1.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康雄性 SD大鼠(由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào):524426), 60 只,體質(zhì)量250～300 g。

1.1.3藥物芪紅散由黃芪24 g、當(dāng)歸12 g、紅景天9 g、桂枝12 g、丹參9 g、紅花9 g、桃仁12 g、雞血藤15 g、全栝蔞12 g、薤白9 g、郁金9 g、貝母9 g、葶藶子9 g 等組成(由新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)院制劑室制備, 生產(chǎn)批號(hào)：1012113)。實(shí)驗(yàn)時(shí)分別配制成濃度為 0.15 g /mL(低劑量) 和 0.30 g /mL(高劑量) 水溶液?？ㄍ衅绽?北京天惠參股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào):1206135)，蒸餾水稀釋成0.2 mg /mL濃度,滅菌備用。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1造模方法參考Anversea等[4]的方法，在雙腎動(dòng)脈上方分離腹主動(dòng)脈,沿腹主動(dòng)脈平行置一直徑為 0.7 mm 的小圓棒，用絲線繞腹主動(dòng)脈和小圓棒一起結(jié)扎，隨后抽出小圓棒,造成腹主動(dòng)脈狹窄。造模后4 w進(jìn)行血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)，鑒定慢性心衰模型成功與否，經(jīng)多普勒超聲心動(dòng)圖檢測(cè)左室射血分?jǐn)?shù)計(jì)算EF值≤60%為心衰，同時(shí)出現(xiàn)精神萎靡、毛色無光澤的大鼠列入觀察對(duì)象。

1.2.2實(shí)驗(yàn)分組將60只大鼠隨機(jī)分為 5 組，每組 12 只 ，所有動(dòng)物均常規(guī)喂養(yǎng)。由于在造模過程中，技術(shù)不嫻熟，造成部分大鼠死亡，最后共剩余50只大鼠。(1) 假手術(shù)組：手術(shù)時(shí)只分離動(dòng)脈不造成動(dòng)脈狹窄，手術(shù)4 w后，灌服蒸餾水，1次/d, 連續(xù)4 w；(2) 模型組: 造模 4 w后,灌服蒸餾水，1次/d,連續(xù)4 w; (3) 芪紅散低劑量治療組(低劑量組): 造模4 w后，灌服芪紅散每日用藥劑量為1.5 g/kg體質(zhì)量(相當(dāng)于成人劑量 10倍) , 1 次/d, 連續(xù) 4 w; (4) 芪紅散高劑量治療組( 高劑量組) : 造模 4 w后, 灌服芪紅散每日用藥劑量為 3.0 g/kg體質(zhì)量(相當(dāng)于成人劑量 20倍) ,1次/d,連續(xù) 4 w; (5) 陽性藥卡托普利治療：造模4 w后, 灌服卡托普利水溶液1.6 mg/kg體質(zhì)量(相當(dāng)于成人劑量20倍),1 次/d,連續(xù) 4 w。每次用藥體積均按 1 mL/100 g 計(jì)算。

1.2.3各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)量

1.2.3.1心衰大鼠心功能的測(cè)定動(dòng)物造模分組飼養(yǎng)4 w后,由超聲科醫(yī)生為大鼠做彩色超聲多普勒心動(dòng)圖,測(cè)定射血分?jǐn)?shù)(LVEF)、左室收縮末容量(ESV)、左室舒張末容量(EDV)、左室每分搏出量(SV)。

1.2.3.2心衰大鼠血漿中BNP及ET-1的測(cè)定動(dòng)物造模分組飼養(yǎng)4 w后，于最后1次給藥禁食12 h后股動(dòng)脈取血2 mL，注入試管中，搖勻，4℃、3 000 r/min離心10 min，取血漿置于-20℃保存，冷存待檢。血漿 BNP 的測(cè)定采用 ELA 法；血漿ET-1的測(cè)定采用放免法，均嚴(yán)格按說明書操作,

2　結(jié)果

2.1芪紅散對(duì)心衰大鼠心功能的影響模型組LVEF顯著低于假手術(shù)組，提示造模成功；與模型組比較，芪紅散低、高劑量組及陽性藥物組LVEF、ESV、EDV、SV各項(xiàng)指標(biāo)均有良好改善，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01～0.05)，芪紅散低、高劑量組治療效果較陽性藥物組明顯(P<0.05)，見表1。

表1　芪紅散對(duì)心衰大鼠心功能的影響(±s)

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01； 與陽性藥組比較，△P<0.05。

2.2芪紅散對(duì)心衰大鼠血漿中BNP及ET-1水平的影響模型組血漿BNP、ET-1水平較假手術(shù)組顯著升高。芪紅散低、高劑量組血漿BNP、ET-1水平較模型組顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01～0.05)，芪紅散高劑量組血漿BNP、ET-1水平較陽性藥物組下降明顯(P<0.05)，見表2。

組別nBNP(ng/mL)ET-1(pg/mL)假手術(shù)組10128.46±21.54*132.48±24.56*模型組10353.83±55.28285.04±28.31陽性藥物組10190.87±36.29**183.39±32.16**芪紅散低劑量組10203.51±39.85**194.33±30.16**芪紅散高劑量組10178.35±30.62**△179.12±28.23**△

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01； 與陽性藥物組比較，△P<0.05。

3　討論

中醫(yī)學(xué)將慢性心力衰竭歸于“心水”、“喘證”、“水腫”等范疇，病屬本虛標(biāo)實(shí)。中醫(yī)認(rèn)為心衰的發(fā)生主要在于臟腑的損害，其病位在心，并與肺、脾、腎的功能紊亂有關(guān)，與氣、血、水關(guān)系密切[5]。凡病至心衰，多為多臟器合而為病，中醫(yī)的整體觀念及辨證施治則具有其優(yōu)勢(shì)，治療上可根據(jù)病人的具體情況予以辨證施治，或助心陽，或益脾氣，或養(yǎng)氣血，或滋腎陰，同時(shí)抓住扶正這一關(guān)鍵，調(diào)整臟腑的陰陽不足，使正氣得復(fù)，陽氣得壯，取得療效[6-7]。因此，本研究在常規(guī)治療基礎(chǔ)上聯(lián)合芪紅散治療CHF，以提高其療效。

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，人們對(duì)CHF認(rèn)識(shí)從單純血流動(dòng)力學(xué)的心臟收縮不良，發(fā)展為血流動(dòng)力學(xué)異常與神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的激活相互作用才形成了心力衰竭證候群，臨床對(duì)CHF治療不僅局限于改善血流動(dòng)力學(xué)，更重要的是兼顧到神經(jīng)內(nèi)分泌激活的干預(yù)和對(duì)心室重構(gòu)的干預(yù)。大量研究表明，心臟神經(jīng)激素內(nèi)皮素、腦鈉肽參與了CHF發(fā)生、發(fā)展的生理病理過程，對(duì)CHF的診斷、鑒別診斷、嚴(yán)重程度的判斷及預(yù)后評(píng)估具有重要的意義[8-12]。

本研究應(yīng)用芪紅散治療心衰大鼠，方中以黃芪為君大補(bǔ)脾胃之元?dú)?，使氣旺以促血行，瘀祛絡(luò)通化痰，改善患者胸悶、氣短、胸痛、乏力等癥狀。予桂枝溫通經(jīng)絡(luò)，溫心陽，從而達(dá)到溫通陽氣、助膀胱氣化，能達(dá)內(nèi)外以溫陽祛水；黃芪得桂枝，則補(bǔ)氣與溫陽相結(jié)合，則氣行血運(yùn)；桂枝得黃芪，加強(qiáng)溫通經(jīng)絡(luò)及行水之功，則畏寒肢冷、咳痰、水腫等癥狀可緩解。紅景天，為民族特色藥材，具有扶正固本、調(diào)和陰陽作用，為氣中之血藥，補(bǔ)氣養(yǎng)血，氣為血之帥，氣行則血行，氣行則瘀祛絡(luò)通，其可改善胸悶、氣短、胸痛、乏力、心悸等癥狀。紅花、丹參活血化瘀，使胸痛、心悸等癥狀得以改善；葶藶子、澤瀉等藥利水消腫化痰，使患者水腫、咳喘、咳痰等癥狀得以緩解。諸藥配伍，共奏益氣活血、溫陽化痰利水之功效，則諸癥緩解。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，芪紅散能顯著降低致心力衰竭大鼠血清BNP、ET-1水平，減少心衰大鼠的心肌張力,降低心臟前后負(fù)荷,減輕心室重構(gòu),，從而改善心功能，減輕心力衰竭癥狀,降低死亡率。

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(本文編輯施洋)

Effect of Qi Hong San on BNP and ET-1 in chronic heart failure rats

WANG Dong, LIU Jiang, WANG Xiaofeng

(WardofVIP,AffiliatedTraditionalChineseMedicalHospital,XinjiangMedicalUniversity,

ObjectiveTo investigate the effect of Astragalus on plasma level of brain natriuretic peptide (BNP) and endothelin-1 (ET-1) in rats with chronic heart failure. MethodsThe animal model of chronic heart failure was established by abdominal aorta ligation in healthy male SD rats. The successful model rats were randomly divided into 5 groups: sham operated group, model group, positive drug group, low dose group and high dose group, 10 rats in each group. The rats were normally fed or fed the medicines in different groups for 4 weeks, then Doppler echocardiography was used to determination of heart function of rats in each group and the ELA method was used to determine the content of each group of plasma BNP. The content of ET-1 in serum was detected by RIA method. ResultsThe cardiac function in low dose group, high dose group and positive drug group was significantly higher than that in the model group (P<0.01～0.05). The content of BNP and ET-1 in plasma in low dose group , high dose group and positive drug group were significantly lower than that in model group (P<0.01～0.05). ConclusionQi Hong San can reduce the level of BNP and ET-1 in serum, improve heart function and reduce the symptoms of heart failure.

Qi Hong San； chronic heart failure； BNP； endothelin-1

新疆維吾爾自治區(qū)科技成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目(201254126)

王東(1977 -),男，碩士,主治醫(yī)師,研究方向:心衰的防治。

R541

A

1009-5551(2016)06-0721-03

10.3969/j.issn.1009-5551.2016.06.013

2015-8-4]