重慶地區(qū)漢族妊娠晚期女性血漿D-二聚體參考區(qū)間的建立

劉定華，周子滟，劉　歡，封　雪，薛建江，余雪梅

(1.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬大學(xué)城醫(yī)院檢驗(yàn)科,重慶 401331；2.徐州醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇徐州 221006)

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重慶地區(qū)漢族妊娠晚期女性血漿D-二聚體參考區(qū)間的建立

劉定華1，周子滟2，劉歡1，封雪1，薛建江1，余雪梅1

(1.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬大學(xué)城醫(yī)院檢驗(yàn)科,重慶 401331；2.徐州醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇徐州 221006)

目的建立重慶地區(qū)漢族妊娠晚期女性血漿D-二聚體參考區(qū)間。方法連續(xù)納入2012年1月至2013年4月在重慶醫(yī)科大學(xué)附屬大學(xué)城醫(yī)院行產(chǎn)前檢查的健康單胎孕婦430名(孕周大于或等于35周)，對照組為同期來院體檢的健康非孕女性90名，均按30歲分段。采集枸櫞酸鈉抗凝靜脈血2.7 mL，分離血漿檢測D-二聚體水平。結(jié)果觀察組及對照組內(nèi)不同年齡段女性血漿D-二聚體水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。觀察組血漿D-二聚體水平明顯高于對照組(P<0.05)，該地區(qū)漢族妊娠晚期女性血漿D-二聚體參考區(qū)間為0～≤2.031 mg/L。結(jié)論重慶地區(qū)漢族妊娠晚期女性血漿D-二聚體水平參考區(qū)間為0～≤2.031 mg/L。

參考值；漢族；年齡因素；D-二聚體；妊娠晚期；參考區(qū)間；靜脈血栓栓塞；重慶

妊娠期女性血液常表現(xiàn)為高凝狀態(tài)，隨著孕期的延長，其高凝程度逐漸增強(qiáng)，至產(chǎn)褥期達(dá)高峰，產(chǎn)后才逐漸恢復(fù)正常[1]。妊娠是目前公認(rèn)的血栓高危因素[2]，產(chǎn)科中血栓形成以妊娠晚期和產(chǎn)褥期深靜脈血栓形成相對多見，深靜脈血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE)合稱為靜脈血栓栓塞癥(VTE)，它是妊娠和產(chǎn)褥期的重要死亡原因之一[3]。D-二聚體是纖維蛋白單體交聯(lián)后被降解所產(chǎn)生的特異性產(chǎn)物，其血漿水平正常時有助于排除急性VTE[4]。由于妊娠晚期女性多表現(xiàn)為高凝狀態(tài)且其發(fā)生VTE風(fēng)險也較高，若其血漿D-二聚體檢測套用健康非妊娠者的參考區(qū)間，可能會造成假陽性，因此需要專門建立參考區(qū)間。本研究通過檢測健康妊娠晚期女性血漿D-二聚體水平，建立了重慶地區(qū)漢族妊娠晚期女性血漿D-二聚體的參考區(qū)間，以期幫助該時期女性血液凝固狀態(tài)的判斷、血栓性疾病的診斷和預(yù)防。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2012年1月至2013年4月在重慶醫(yī)科大學(xué)附屬大學(xué)城醫(yī)院做產(chǎn)前檢查的健康單胎孕婦500名為觀察組，對入選孕婦隨訪至臨產(chǎn)，共有70名孕婦因流產(chǎn)或出現(xiàn)并發(fā)癥而被排除，其余430名被最終納入本研究。按照第7版《婦產(chǎn)科學(xué)》孕期分類標(biāo)準(zhǔn)[5],將觀察組按照年齡分為小于30歲組(n=295)及大于或等于30歲組(n=135)。對照組為同期來院體檢的健康育齡期非孕女性90名，年齡18～41歲，將其按年齡分為小于30歲組(n=48)及大于或等于30歲組(n=42)，納入和排除標(biāo)準(zhǔn)同觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)[6]：年齡18～41歲；孕周大于或等于35周。排除標(biāo)準(zhǔn)：糖尿病、高血壓、惡性腫瘤、心腦血管疾?。挥醒ㄐ约膊∈坊蚣易迨?；凝血功能異常；肝、肺、腎、胰疾?。蛔陨砻庖咝约膊?；甲狀腺功能減退；30 d內(nèi)有手術(shù)或者創(chuàng)傷史，半年內(nèi)有輸血史；30 d內(nèi)有感染，體溫高于37.5 ℃；有異常流產(chǎn)史或胎兒發(fā)育異常史；正在服用可能影響凝血、纖溶系統(tǒng)的藥物；采血前1 d內(nèi)處于應(yīng)激狀態(tài)。

1.2方法

1.2.1試驗(yàn)儀器日本Sysmex公司CA-1500型全自動血凝儀，原裝配套試劑，標(biāo)準(zhǔn)品及高、低水平質(zhì)控物。D-二聚體采用免疫透射法測定，每天做高、低兩個水平的配套質(zhì)控物，質(zhì)控結(jié)果在控方開始樣本的檢測。操作過程嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程進(jìn)行[3]。

1.2.2血樣處理所有對象均于清晨采集空腹靜脈血2.7 mL，置于0.109 mmol/L枸櫞酸酸鈉抗凝管，立即混勻，3 000×g離心10 min，血漿標(biāo)本在2 h內(nèi)完成檢測。

2　結(jié)　　果

2.1年齡對血漿D-二聚體的影響不同年齡段妊娠晚期女性血漿D-二聚體水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而不同年齡段對照組女性血漿D-二聚體水平差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1　　各組不同年齡段血漿D-二聚體水平的比較

2.2妊娠晚期女性血漿D-二聚體參考區(qū)間觀察組血漿D-二聚體水平明顯高于對照組(P<0.05)，重慶地區(qū)漢族妊娠晚期女性血漿D-二聚體參考區(qū)間為0～≤2.031 mg/L,其上限已接近通用疾病界定值(0.5 mg/L)的4倍，見表2。

表2　　妊娠晚期女性血漿D-二聚體的95%

*：P<0.05，與對照組比較。

3　討　　論

生理狀態(tài)下，機(jī)體止血功能處于動態(tài)平衡狀態(tài)，既不會形成血栓、也不會發(fā)生出血。妊娠期體內(nèi)多種凝血因子濃度增高/活性增強(qiáng)、抗凝蛋白水平及纖溶活性降低而使血液處于高凝狀態(tài)，隨著孕期的延長，其高凝程度逐漸增強(qiáng)[1]。正常情況下，妊娠期血液高凝狀態(tài)是一種生理性保護(hù)，有利于分娩時正常止血。然而，妊娠是目前公認(rèn)的血栓高危因素，妊娠本身可使血栓栓塞的危險升高5倍以上[2]，血液處于高凝狀態(tài)、血容量增加、靜脈擴(kuò)張、下腔靜脈受壓迫、血流速度減慢，加上其他的危險因素，就可能導(dǎo)致血栓性疾病。因此，一旦孕婦出現(xiàn)可疑癥狀和體征，就要盡快明確診斷以及時治療。

D-二聚體是交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物，是繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)的標(biāo)志物，其血漿水平升高意味著機(jī)體凝血和纖溶系統(tǒng)的雙重激活，如高凝狀態(tài)、血栓形成等。一般將血漿D-二聚體疾病界定值定為0.5 mg/L，當(dāng)?shù)陀?.5 mg/L時可基本排除靜脈血栓疾病。血漿D-二聚體靈敏、可靠、創(chuàng)傷性小，被公認(rèn)為是診斷血栓性疾病最有價值的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)之一[4,7]。由于妊娠女性血液較非孕人群更易出現(xiàn)高凝現(xiàn)象，而在妊娠晚期階段高凝狀態(tài)更甚，那么普通健康人群血漿D-二聚體參考區(qū)間可能并不適用于妊娠晚期女性，而靜脈血栓在該時期女性中發(fā)生率高而且危害嚴(yán)重，因此有必要建立起針對該時期女性血漿D-二聚體的參考區(qū)間并對其進(jìn)行驗(yàn)證評價，據(jù)此參考區(qū)間即使不能對相關(guān)疾病做出明確的臨床診斷，至少也可針對妊娠晚期女性靜脈血栓的排除診斷提供數(shù)據(jù)支持。基于上述考慮，本研究建立了重慶地區(qū)漢族妊娠晚期女性血漿D-二聚體的95%參考區(qū)間。

本研究嚴(yán)格遵循CLSI C28-A3E文件要求[8]，采用了合理的納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，滿足了樣本量120例以上的要求。研究最終共納入430名妊娠晚期女性，其血漿D-二聚體濃度結(jié)果值為偏態(tài)分布，結(jié)合臨床應(yīng)用，D-二聚體結(jié)果以過高為異常，因此本研究制定其單側(cè)參考區(qū)間，計(jì)算第95百分位數(shù)值(P95)。參考區(qū)間的建立，需考慮年齡因素是否有影響，因此本研究將研究對象以30歲分段，并比較各組內(nèi)不同年齡段血漿D-二聚體水平之間的差異，結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示在選定的納入和排除標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)，年齡因素對血漿D-二聚體水平未產(chǎn)生影響，因此在制定妊娠晚期女性血漿D-二聚體參考區(qū)間時可不考慮年齡因素。本地區(qū)漢族妊娠晚期女性血漿D-二聚體水平為1.020(0.766，1.309)，顯著高于對照組參考區(qū)間0.300(0.227，0.339)，其單側(cè)參考區(qū)間上限(2.031 mg/L)也遠(yuǎn)高于通用的疾病界定值(0.5 mg/L)。本研究數(shù)據(jù)與既往報道結(jié)果不完全一致[9-10]，可能與地域、人種、測定方法等因素有關(guān)。本研究針對的是重慶地區(qū)漢族妊娠晚期女性，采用的是免疫比濁法。在血漿D-二聚體的測定方法中，免疫比濁法不僅抗干擾能力佳、分析速度快[11]，而且我國許多醫(yī)院所配備自動血凝儀均采用該方法來常規(guī)查血漿D-二聚體水平，因此制訂該方法的妊娠晚期女性血漿D-二聚體參考區(qū)間在臨床上具有較強(qiáng)的可操作性與再現(xiàn)性。隨著妊娠女性孕周的增加，應(yīng)對其血漿D-二聚體水平進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測，以預(yù)防血栓事件的發(fā)生并及時采取治療措施。

本研究初步建立了重慶地區(qū)漢族妊娠晚期女性血漿D-二聚體的參考區(qū)間，但還未使用合適的陽性病例對其進(jìn)行全面評估驗(yàn)證，另外，樣本例數(shù)還可以進(jìn)一步擴(kuò)大，這些問題將在今后的研究中進(jìn)一步改進(jìn)和完善。

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劉定華(1980-)，助理研究員，碩士，主要從事血液體液臨床檢驗(yàn)研究。

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.14.031

R446.1

B

1671-8348(2016)14-1966-03

2015-11-08

2016-02-05)