不同標(biāo)本類型對一種NT-proBNP（POCT法）檢測結(jié)果的影響

龍林會，陳芳四川省自貢市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川自貢　643000

不同標(biāo)本類型對一種NT-proBNP（POCT法）檢測結(jié)果的影響

龍林會，陳芳
四川省自貢市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川自貢643000

目的 探討不同標(biāo)本類型對一種POCT法檢測N末端B型利鈉肽（NT-proBNP）檢測結(jié)果的影響。 方法 收集6例患者樣本，其中男女各3例。另收集正常體檢者2例樣本作為樣本稀釋液。隨機(jī)收集20例心功能不全病例標(biāo)本用于相關(guān)性分析。結(jié)果 以化學(xué)發(fā)光定量檢測作為標(biāo)準(zhǔn)，測定干燥血清管標(biāo)本的NT-proBNP結(jié)果與武漢明德公司POCT法分析儀檢測兩種標(biāo)本NT-proBNP濃度的Pearson相關(guān)系數(shù)分別是r干燥管=0.952 8，rEDTA-K2抗凝管=0.930 7；不同類型標(biāo)本NT-proBNP（POCT法）濃度比較P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；將干燥管分離出的血清為最適標(biāo)本存放在室溫下0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h后測定的NT-proBNP，各組數(shù)據(jù)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 該研究認(rèn)為采用武漢明德公司POCT法檢測NT-proBNP使用干燥真空管采集標(biāo)本為最適標(biāo)本。

N末端B型利鈉肽，POCT法，檢測，心力衰竭

［Abstract］Objective To study the effect of different specimen types on the test results of NT-proBNP by the POCT method.Methods The specimens of 3 female cases and 3 male cases were collected，and another 2 specimens of cases of normal physical examiners were selected as the sample diluent，and 20 specimens of disease cases with cardiac insufficiency were randomly collected for the relevant analysis.Results The Pearson correlation coefficients of NT-proBNP result of dry serum tube specimen and NT-proBNP concentration of two specimens detected by the analysis meter by the POCT method in Wuhan Mingde Company were respectively rdrying tube=0.9528 and rEDTA-K2anticoagulative tube=0.9307 taking the chemiluminescence quantitative test as standards，the difference in the NT-proBNP concentration between different types of specimens had statistical significance，P＜0.05，the serum isolated from the drying tube were used as the optimal specimen and stored at the room temperature，and the NT-proBNP was measured after 0 h，2 h，4 h，8 h，12 h and 24 h，and the difference between groups had no statistical significance，P＞0.05.Conclusion The research shows that the specimen collected by the dry vacuum tube is the optimal specimen after testing NT-proBNP by the POCT method in Wuhan Mingde Company

［Key words］NT-proBNP；POCT method；Detection；Heart failure

心力衰竭（Heart Failure，HF）是指由于心臟功能障礙而產(chǎn)生的體征和癥狀的臨床綜合征；它是目前嚴(yán)重危害人類健康的最常見的一種綜合征 因此心衰的早期診斷及規(guī)范治療對逆轉(zhuǎn)左室重構(gòu)，阻斷心血管病的發(fā)生與發(fā)展極為重要B-型腦利鈉肽（BNP）主要由心室分泌，因此在診斷心室功能障礙時(shí)，是個(gè)直接客觀的標(biāo)志物。N末端B型利鈉肽（NT-proBNP）和BNP同屬利鈉肽家族，均用于臨床檢測心肌細(xì)胞受刺激后，產(chǎn)生含134個(gè)氨基酸的B型利鈉肽原前體（pre-proBNP），隨后形成含108個(gè)氨基酸的BNP前體（proBNP），后者在內(nèi)切酶的作用下裂解為含有76個(gè)氨基酸 無生物活性的NT-proBNP和含有32個(gè)氨基酸 有活性的B型利鈉肽 （BNP）BNP半衰期短（22 min），體外穩(wěn)定性差，而NT-proBNP半衰期較長（120 min），體外穩(wěn)定性強(qiáng)，體外檢測影響因素相對BNP的檢測要少，且在心力衰竭患者中的濃度較BNP高，在有些情況下更有利于心力衰竭的診斷 在應(yīng)用基因重組技術(shù)產(chǎn)生的重組人B型利鈉肽（rhBNP）進(jìn)行治療時(shí)，測定NT-proBNP不受干擾［1］現(xiàn)在國內(nèi)多數(shù)醫(yī)院采用進(jìn)口的儀器和試劑進(jìn)行檢測，成本較高，檢測時(shí)間較長，床旁檢測（POCT法）測定NT-proBNP可方便快速地提供較可靠檢驗(yàn)結(jié)果，有助于醫(yī)生更早制訂治療策略，并節(jié)省治療費(fèi)用；它作為中心實(shí)驗(yàn)室的擴(kuò)展，能夠增加檢測能力，并減輕實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員的壓力；管理人員也能更合理地使用資源。更為重要的是它滿足了人們在時(shí)間上的需要，使患者及時(shí)得到診斷和治療［2］。怎樣獲得準(zhǔn)確的檢測結(jié)果是至關(guān)重要的，其中選擇正確的標(biāo)本類型是取得準(zhǔn)確結(jié)果的關(guān)鍵。該院使用的武漢明德公司的NT-proBNP （POCT法）是一種國產(chǎn)試劑，在開始使用時(shí)，臨床反映檢測結(jié)果有偏高現(xiàn)象，經(jīng)詳細(xì)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)為標(biāo)本類型選擇不適導(dǎo)致?，F(xiàn)將在室溫下不同標(biāo)本類型對該院應(yīng)用的武漢明德公司NT-proBNP（POCT法）檢測結(jié)果影響分析如下。

1　材料與方法

1.1儀器、試劑與標(biāo)本

1.1.1儀器與試劑NT-proBNP定量檢測采用羅氏Cobas E601電化學(xué)發(fā)光分析儀測定，校準(zhǔn)液、試劑、質(zhì)控物、消耗品等由羅氏公司原裝配套提供；NT-proBNP （POCT法），定量分析儀，試劑，質(zhì)控卡由武漢明德公司提供。

1.1.2標(biāo)本的選擇臨床標(biāo)本采集考慮到檢測干擾的存在，所選標(biāo)本均無溶血、脂血及黃疸的新鮮標(biāo)本。抽血患者為臨床確診為心力衰竭患者。共收集6例患者樣本，其中男女各3例。另收集正常體檢者2例樣本作為樣本稀釋液。隨機(jī)收集20例心功能不全病例標(biāo)本用于相關(guān)性分析。

1.2檢測方法

1.2.1標(biāo)本采集于清晨空腹抽取靜脈血4～5 mL，分別置于EDTA-K2真空抗凝管、干燥血清管，3 000 r/min離心10 min，分離血清和血漿（標(biāo)本管均由BD公司提供）。已有較多研究表明NT-proBNP定量檢測最適標(biāo)本為干燥真空管采集的標(biāo)本［3］。為了節(jié)約成本，使用美國羅氏公司Cobas E601免疫分析儀檢測干燥血清管標(biāo)本NT-proBNP濃度。武漢明德公司NT-proBN（POCT法）分析儀檢測兩種標(biāo)本NT-proBNP濃度。

1.2.2標(biāo)本準(zhǔn)備將分離后的患者標(biāo)本按不同標(biāo)本管用低值血清或血漿進(jìn)行配制成高值，中值，低值。立即連續(xù)測定高、中、低5次并取均值。剩余標(biāo)本分別分裝成20份備用。

1.2.3室溫下穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)將干燥血清管標(biāo)本于室溫（22℃±3℃）放置0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h，測定NT-proBNP濃度，根據(jù)其檢測結(jié)果觀察其結(jié)果穩(wěn)定性。

1.3統(tǒng)計(jì)方法

2　結(jié)果

2.1相關(guān)性分析

以化學(xué)發(fā)光定量檢測作為標(biāo)準(zhǔn)，測定干燥血清管標(biāo)本的NT-proBNP結(jié)果與武漢明德公司NT-proBN（POCT法）分析儀檢測兩種標(biāo)本NT-proBNP濃度的相關(guān)性比較，見表1。

表1　不同標(biāo)本類型POCT法檢測NT-proBNP與Cobas E601免疫分析儀檢測NT-proBNP相關(guān)性分析

2.2不同類型標(biāo)本NT-proBNP（POCT法）濃度比較

兩種不同類型標(biāo)本中，NT-proBNP濃度存在明顯差異，EDTA-K2抗凝血漿較高，與干燥管標(biāo)本的NT-proBNP水平相比明顯升高（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這個(gè)結(jié)果與化學(xué)發(fā)光分析法檢測結(jié)果相關(guān)研究不符［3-4］，化學(xué)發(fā)光法定量檢測認(rèn)為二者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

表2　不同標(biāo)本類型NT-proBNP（POCT）檢測結(jié)果間比較（±s）

表2　不同標(biāo)本類型NT-proBNP（POCT）檢測結(jié)果間比較（±s）

注：與干燥管（紅色頭）血清比較，△P＜0.05。

NT-proBNP（pg/mL）　干燥管（紅色頭）血清　EDTA-K2抗凝血漿高值中值低值8 440±743.64 560±66.71 148±19.24 （9 300±1 004.03）△（652±81.97）△（166±20.4）△

2.3 NT—proBNP（POCT法）不同保存條件下結(jié)果的穩(wěn)定性觀察

將干燥管分離出的血清為最適標(biāo)本存放在室溫下0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h后測定的NT-proBNP結(jié)果見下圖。NT-proBNP水平在室溫下24 h內(nèi)檢測結(jié)果不受存放時(shí)間的影響，各組數(shù)據(jù)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

注：A：干燥管標(biāo)本NT-proBNP高值在室溫保存不同時(shí)間穩(wěn)定性分析；B：干燥管標(biāo)本NT-proBNP低值在室溫保存不同時(shí)間穩(wěn)定性分析。

3　討論

①根據(jù)使用美國羅氏公司Cobas E601免疫分析儀檢測干燥血清管標(biāo)本的NT-proBNP；其檢測結(jié)果與武漢明德公司NT-proBN（POCT）分析儀檢測兩種標(biāo)本NT-proBNP濃度進(jìn)行相關(guān)性分析結(jié)果可見（r干燥管=0.952 8，rEDTA-K2抗凝管=0.930 7）：檢測結(jié)果與武漢明德公司 NT-proBNP（POCT）分析儀檢測干燥管分離的血清標(biāo)本結(jié)果相關(guān)性較好。與王偉佳等人研究相符［3-4］。

②通過表2結(jié)果分析可以看出，采用武漢明德公司NT-proBN（POCT法）分析儀檢測NT-proBNP，EDTA-K2抗凝血漿檢測結(jié)果明顯高于干燥管（紅色頭）血清檢測結(jié)果，二者比較P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與采用化學(xué)發(fā)光分析法檢測的臨床研究不符［3-4］。盡管EDTA-K2抗凝血漿檢測結(jié)果明顯高于干燥管（紅色頭）血清檢測結(jié)果，似乎前者靈敏度更高，但特異性太低會增加臨床醫(yī)生鑒別診斷的難度，導(dǎo)致不必要的麻煩。目前NT-proBNP是臨床醫(yī)生對心衰發(fā)生和發(fā)展的觀測指標(biāo)之一，其與臨床癥狀不符的異常升高或降低是引起臨床醫(yī)生質(zhì)疑的重要原因［5］。

③結(jié)合相關(guān)性分析、不同類型標(biāo)本檢測結(jié)果分析、該方法檢測NT-proBNP穩(wěn)定性分析，以及“NT-proBNP臨床應(yīng)用中國專家共識”的相關(guān)陳述，該院采用武漢明德公司NT-proBN（POCT法）分析儀檢測NT-proBNP使用干燥真空管采集標(biāo)本進(jìn)行檢測。自2013年2月至今檢測結(jié)果穩(wěn)定可靠。因此正確的選擇標(biāo)本類型是獲得準(zhǔn)確結(jié)果的前提。

④床旁檢測 （point of care testing，POCT）測定NT-proBNP方便快速地提供可靠檢驗(yàn)結(jié)果，有助于醫(yī)生更早制訂治療策略，并節(jié)省治療費(fèi)用；它作為中心實(shí)驗(yàn)室的擴(kuò)展，能夠增加檢測能力，并減輕實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員的壓力；管理人員也能更合理地使用資源。但是該方法目前還無法進(jìn)行國家性的標(biāo)準(zhǔn)化管理，所以在投入使用前一定要做方法的性能評價(jià)，選擇最適檢測條件，盡可能的避免一些影響因素導(dǎo)致的結(jié)果不準(zhǔn)確。同時(shí)在應(yīng)用的過程中多與臨床聯(lián)系，了解檢測結(jié)果與臨床診斷、臨床治療效果的評價(jià)，從而為臨床醫(yī)療和患者健康提供更有效的服務(wù)。

［1］NT-proBNP臨床應(yīng)用中國專家共識小組.NT-proBNP臨床應(yīng)用中國專家共識［J］.中國心血管病研究，2011，9（6）：401-408.

［2］康熙雄.床旁檢測臨床應(yīng)用手冊［M］.人民軍醫(yī)出版社，2010，5（1）：前言.

［3］王偉佳，張秀明，溫冬梅，等.不同抗凝劑、樣本放置時(shí)間及保存溫度對B型利鈉肽和氨基末端B型利鈉肽原檢測的影響［J］.現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，27（2）：83-87.

［4］戴雯，李艷，蘇漢文.標(biāo)本類型及存放時(shí)問對心衰患者BNP 和NT-proBNP檢測結(jié)果的影響［J］.微循環(huán)學(xué)雜志，2010，20 （2）：37-38.

［5］韋丙奇，楊躍進(jìn)，張健，等.血漿N末端B型利鈉肽原對預(yù)測心力衰竭患者住院病死率的價(jià)值［J］.中華心血管病雜志，2009，37：481-485.

Effect of Different Specimen Types on the Test Result of a Kind of NT-proBNP by the POCT Method

LONG Lin-hui，CHEN Fang
Department of Clinical Laboratory，Zigong Third People's Hospital，Zigong，Sichuan Province，643000 China

R541

A

1672-5654（2016）06（c）-0114-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.18.114

龍林會（1971.11-），女，四川宜賓人，本科，主管技師，主要從事臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)工作，E-mail：2644815114@qq. com）。

（2016-03-26）