參蒜混合液對(duì)高脂膳食大鼠的抗氧化作用試驗(yàn)

白雪松，郗艷麗，杜　鵑，李善姬

（吉林醫(yī)藥學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，吉林 吉林 132013）

參蒜混合液對(duì)高脂膳食大鼠的抗氧化作用試驗(yàn)

白雪松，郗艷麗，杜鵑，李善姬

（吉林醫(yī)藥學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，吉林 吉林 132013）

研究不同配比的黑參黑蒜混合液對(duì)高脂膳食大鼠的抗氧化作用。方法將50只成年Wisrar大鼠按體重隨機(jī)分為5組，即空白對(duì)照組、高脂模型組、參蒜混合液A1、A2、A3給藥組，每組10只（雌雄各半）。其中，空白對(duì)照組給予普通飼料；其余各組給予高脂飼料；A1、A2、A3組分別以3種不同配比參蒜混合液灌胃。每天1次，連續(xù)30 d。試驗(yàn)結(jié)束后處死大鼠，取大鼠肝臟和腎臟稱重，計(jì)算其肝體指數(shù)和腎體比值，并檢測(cè)肝、腎超氧化物歧化酶（Superoxide Dis?mutase，SOD）的活力和丙二醛（Malondialdehyde，MDA）的含量。結(jié)果A3給藥組的大鼠肝體指數(shù)較高脂模型組顯著降低（P<0.05）；A1給藥組大鼠的腎體比值與高脂模型組相比顯著降低（P<0.05）；3個(gè)參蒜混合液給藥組大鼠肝臟SOD活性與高脂模型組相比均顯著提高（P<0.05）；A1、A3給藥組大鼠肝臟組織中MDA含量與高脂模型組相比顯著降低（P< 0.05）；A2給藥組大鼠腎臟組織中MDA含量與高脂模型組相比顯著下降（P<0.05）。結(jié)論是參蒜混合液可提高高脂膳食大鼠的抗氧化能力。

黑參黑蒜混合液；高脂膳食；大鼠；抗氧化

人參是五加科多年生草本植物，性溫味甘，具有大補(bǔ)元?dú)?、安神生津之功效[1]。人參中含有的人參皂苷、人參多糖、黃酮等活性物質(zhì)均具有較強(qiáng)的抗氧化活性。黑參是鮮人參經(jīng)反復(fù)蒸制干燥而成的炮制品，炮制過程中的加熱處理能夠提高人參的自由基清除能力，相比于白參、紅參具有更好的抗氧化作用[2]。大蒜是一種藥食兼用食物，含有多種氨基酸、豐富的維生素和礦物質(zhì)、30余種含硫成分，有較強(qiáng)的抗氧化活性，在抗動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、老年性退行性病變等與氧化損傷相關(guān)的疾病中發(fā)揮著重要作用[3]。但生蒜化學(xué)物質(zhì)不穩(wěn)定，無法令人體更好吸收和達(dá)到滿意的臨床療效。黑蒜是由新鮮生蒜在高溫高濕的環(huán)境下，不添加任何添加劑自然發(fā)酵而成。黑蒜沒有大蒜的刺激味，味道酸甜，口感好，可直接食用。本試驗(yàn)通過建立高脂膳食大鼠動(dòng)物模型，研究了不同配比的黑參黑蒜混合液對(duì)高脂膳食大鼠的抗氧化作用，為二者在食品、保健品、藥用等方面的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物50只健康成年Wistar大鼠，雌雄各半，體重210±20 g。由吉林醫(yī)藥學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。飼養(yǎng)于溫度22℃±2℃，濕度50%±5%。

1.2試驗(yàn)飼料高脂飼料配方：蛋黃粉10%、豬油10%、膽固醇1%、牛膽鹽0.2%、基礎(chǔ)飼料78.8%。

1.3動(dòng)物分組與處理將50只大鼠在試驗(yàn)環(huán)境下適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后，按體重隨機(jī)分為5組，即空白對(duì)照組、高脂模型組、高脂A1給藥組、高脂A2給藥組和高脂A3給藥組，每組10只（雌雄各半），連續(xù)喂養(yǎng)30 d?？瞻讓?duì)照組給予普通飼料，其他各組給予高脂飼料?？瞻讓?duì)照組和高脂模型組每天灌胃生理鹽水，高脂給藥組給予不同濃度參蒜混合液灌胃，A1給藥組：黑參∶黑蒜=4∶1；A2給藥組：黑參∶黑蒜=1∶1；A3給藥組：黑參∶黑蒜=1∶4。連續(xù)灌胃30 d后，禁食16 h，水合氯醛麻醉，眼眶取血，頸椎脫臼處死大鼠，迅速取出肝臟和腎臟，按常規(guī)方法制成10%組織約漿液備用（組織∶生理鹽水=1∶9）。

1.4黑參黑蒜提取液的制備將700 g新鮮吉林市售大蒜去皮洗凈后放入發(fā)酵罐中蒸制30 h，制得黑蒜，烘干后加2 500 mL蒸餾水煮18 h制備2 200 mL黑蒜提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至375 mL。人參為吉林省通化市集安市售5年參，取500 g人參放入發(fā)酵罐中蒸制30 h后變?yōu)楹趨ⅲ帥鎏庯L(fēng)干后加3 000 mL蒸餾水煮18 h制備2 700 mL黑參提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至400 mL。分別用高壓蒸汽法消毒滅菌，冷藏備用。

1.5試劑膽固醇、牛膽鹽、蛋黃粉（鄭州龍晨食品添加劑有限公司）；超氧化物歧化酶試劑盒、丙二醛試劑盒、蛋白定量測(cè)定試劑盒（南京建成生物工程研究所）；按照試劑盒檢測(cè)方法測(cè)定，發(fā)酵罐（韓國(guó)）。

1.6數(shù)據(jù)處理所有的數(shù)據(jù)用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差（Mean± SE）表示，各試驗(yàn)組差異檢驗(yàn)使用單因素方差分析，兩兩比較使用Duncan′s multiple range test。

2　結(jié)果

2.1參蒜混合液對(duì)高脂大鼠體重、肝體指數(shù)、腎體比值的影響試驗(yàn)結(jié)果表明，A3給藥組的肝體指數(shù)較高脂模型組顯著降低（P<0.05），A1給藥組、A2給藥組以及A3給藥組大鼠的腎體比值與空白對(duì)照組相比顯著降低（P<0.05）；A1給藥組大鼠的腎體比值與高脂模型組相比顯著降低（P<0.05）。結(jié)果見表1。

表1　參蒜混合液對(duì)高脂大鼠體重、肝體指數(shù)、腎體比值的影響 （n=10，±s）

表1　參蒜混合液對(duì)高脂大鼠體重、肝體指數(shù)、腎體比值的影響 （n=10，±s）

注：*：與空白對(duì)照組有顯著性差異（P<0.05）；#：與高脂模型組有顯著性差異（P<0.05），下表同

肝臟　腎臟　肝體　腎體組別　體重/g　重量/g　重量/g指數(shù)/%　指數(shù)/%空白對(duì)照組 309.64±79.22　8.44±2.25 2.04±0.50 2.75±0.16 0.0065±0.00038高脂模型組 318.88±75.71　9.03±1.99 1.97±0.40 2.89±0.52 0.0063±0.0010 A1給藥組　328.79±85.25　8.52±1.76 1.86±0.46 2.64±0.34 0.0057±0.00036*#A2給藥組　328.11±89.39　8.73±2.06 1.96±0.54 2.69±0.17 0.0060±0.00032*A3給藥組　343.27±101.25 8.73±2.33 2.04±0.56 2.57±0.17#0.0061±0.00061*

2.2參蒜混合液對(duì)高脂大鼠肝臟、腎臟的SOD活力和MDA含量的影響本次試驗(yàn)結(jié)果表明，高脂模型組大鼠肝、腎SOD活力較空白對(duì)照組明顯降低，有顯著性差異（P<0.05），A1、A2、A3給藥組大鼠肝臟SOD活力較高脂模型組均顯著升高（P< 0.05）。高脂模型組大鼠肝、腎MDA含量與空白對(duì)照組相比顯著增高（P<0.05），A1、A3給藥組大鼠肝臟MDA含量較高脂模型組均顯著降低（P< 0.05）。A2給藥組大鼠腎臟組織中MDA含量與高脂模型組相比顯著下降（P<0.05）。結(jié)果見表2。

表2　參蒜混合液對(duì)高脂大鼠肝臟、腎臟的SOD活力和MDA含量的影響 （n=10，±s）

表2　參蒜混合液對(duì)高脂大鼠肝臟、腎臟的SOD活力和MDA含量的影響 （n=10，±s）

肝SOD活力腎SOD活力肝MDA含量　腎MDA含量組別?。║/mgprot）（U/mgprot）（nmol/mgprot）（nmol/mgprot）空白對(duì)照組210.86±3.17 101.52±2.75 34.32±11.02　17.41±1.78高脂模型組191.71±10.25*94.26±3.26*44.53±4.30*　44.92±2.06*A1給藥組　201.16±7.00*#95.13±6.18*21.94±4.00*#　45.43±1.17*A2給藥組　200.60±7.55*#100.37±2.81 34.70±20.66　40.14±0.88*#A3給藥組　202.49±3.78*#99.74±4.39 33.58±6.21#　44.30±0.94*

3　討論

人參經(jīng)深加工后可獲得黑參，藥理作用與生曬參藥理作用相似。據(jù)報(bào)道，與傳統(tǒng)的白參和紅參相比，黑參更具抗氧化活性[4]。黑蒜中除含有大蒜素類、氨基酸、維生素類外，還有還原糖、蔗糖、多聚糖等。據(jù)報(bào)道，采用發(fā)酵工藝將這種普通大蒜加工成的黑蒜，它在保留生大蒜原有成分的基礎(chǔ)上，使生大蒜的抗氧化、抗酸化功效大大提升[5]。黑蒜的抗氧化能力的增加在一定程度上與其含有的總酚和美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的增加有關(guān)[6]。肝臟是脂類代謝的重要場(chǎng)所，肝臟中的脂肪含量約占肝臟重量的5%，而在高脂血癥狀態(tài)下，輸入肝臟的脂質(zhì)和脂肪酸過多，肝臟脂蛋白合成代謝就會(huì)發(fā)生障礙，導(dǎo)致脂質(zhì)代謝的紊亂，而脂肪酸氧化不足時(shí)，脂肪就會(huì)在肝臟沉積發(fā)生脂肪變性或形成脂肪肝，體積變大，重量增加。腎臟肥大是出現(xiàn)最早、最明顯的腎臟病理改變[7]。本次試驗(yàn)研究結(jié)果表明，3個(gè)參蒜混合液給藥組肝系數(shù)與高脂對(duì)照組相比均有降低趨勢(shì)，但只有A3給藥組的降低作用顯著。可能原因?yàn)樵囼?yàn)周期較短，高脂模型組肝臟病理變化不明顯。試驗(yàn)結(jié)果表明，參蒜混合液對(duì)高脂膳食大鼠具有降低肝體指數(shù)的作用，預(yù)防脂肪肝的形成，具有護(hù)肝作用。3個(gè)參蒜混合液給藥組的腎體比值較高脂模型組有下降趨勢(shì)，但只有A1給藥組對(duì)腎體比值降低作用顯著。結(jié)果表明，參蒜混合液對(duì)高脂膳食大鼠腎體比值有一定降低作用，在一定程度上可以預(yù)防與腎臟肥大相關(guān)的病理改變。SOD是一種有效的抗氧化劑，是體內(nèi)清除自由基的主要酶，對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著非常重要的作用。因此，SOD活性高低反映了機(jī)體抗氧化的能力[8]。MDA作為細(xì)胞膜不飽和脂肪酸過氧化反應(yīng)的最終產(chǎn)物，可反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，MDA含量的增減代表著脂質(zhì)過氧化作用的強(qiáng)弱，間接反映出細(xì)胞的受損程度[9]。本次試驗(yàn)研究結(jié)果表明，A1、A3給藥組大鼠肝臟中MDA含量低于高脂模型組。A2給藥組大鼠腎臟組織中MDA含量與高脂模型組相比顯著下降，這表明參蒜混合液可通過提高酶類抗氧化物質(zhì)來調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激水平，減少脂質(zhì)過氧化物的產(chǎn)生，起到保護(hù)肝、腎功能的作用。

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S865.1+2

B

0529-6005（2016）07-0095-02

2015-12-10

吉林省教育廳“十二五”科學(xué)技術(shù)研究（吉教科合字2015第400）；吉林省衛(wèi)生計(jì)生科研項(xiàng)目（2015Z070）

白雪松（1978-），男，副教授，碩士，研究方向?yàn)樯攀碃I(yíng)養(yǎng)與健康，E-mail：baixueso@163.com

李善姬，E-mail：shanji@hotmail.com