急性缺血性卒中患者血清Ox-LDL水平與疾病嚴(yán)重程度及預(yù)后的相關(guān)性

翟曉斌，葛朝明，范禎禎，蔡宏斌，劉志艷，王浩玥

急性缺血性卒中患者血清Ox-LDL水平與疾病嚴(yán)重程度及預(yù)后的相關(guān)性

翟曉斌1，葛朝明1，范禎禎1，蔡宏斌1，劉志艷1，王浩玥1

目的 探討急性缺血性卒中患者血清氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）水平與卒中嚴(yán)重程度及預(yù)后的相關(guān)性。方法 入選141例急性缺血性卒中患者（AIS組）和30例正常人（對(duì)照組）的血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)兩組血清Ox-LDL水平，并在入院第1 d進(jìn)行神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分（NIHSS），第6個(gè)月進(jìn)行日常生活活動(dòng)能力量表評(píng)分（BI）。比較AIS組與對(duì)照組Ox-LDL水平結(jié)果，并分析AIS組患者Ox-LDL水平與入院時(shí)NIHSS評(píng)分及6個(gè)月后BI評(píng)分的相關(guān)性。結(jié)果 急性缺血性卒中組血清Ox-LDL水平明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），其Ox-LDL水平與第1天NIHSS評(píng)分存在顯著相關(guān)性（r =0.056，P＜0.05），與第6個(gè)月BI評(píng)分無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0.05）。結(jié)論 急性缺血性卒中患者血清Ox-LDL水平與臨床嚴(yán)重程度有相關(guān)性，但與缺血性卒中預(yù)后指標(biāo)的相關(guān)性不明顯。

急性缺血性卒中；氧化型低密度脂蛋白；嚴(yán)重程度；預(yù)后

急性缺血性卒中（AIS）已成為全球致死和致殘的首要原因［1，2］，對(duì)人類(lèi)健康的危害極大。目前公認(rèn)動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是缺血性腦卒中的主要發(fā)病原因，且后者已被發(fā)現(xiàn)與氧化應(yīng)激損傷密切相關(guān)［3-5］。氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）是由低密度脂蛋白（LDL）在體內(nèi)氧化修飾形成，LDL的核心含有大量不飽和脂肪酸，易發(fā)生自身氧化。氧化應(yīng)激學(xué)說(shuō)認(rèn)為，LDL的氧化修飾是啟動(dòng)和大量不飽和脂肪酸，易發(fā)生自身氧化。氧化應(yīng)激學(xué)說(shuō)認(rèn)為，LDL的氧化修飾是啟動(dòng)和加速AS病變形成的關(guān)鍵［6］。國(guó)內(nèi)外多項(xiàng)研究證實(shí)，AIS患者血清Ox-LDL水平明顯高于健康人群［7-9］。據(jù)此推測(cè)血清Ox-LDL可能參與了AIS的發(fā)病過(guò)程，因此本研究擬通過(guò)對(duì)比檢測(cè)AIS患者和健康體檢者的血清Ox-LDL，進(jìn)一步驗(yàn)證Ox-LDL在兩組的表達(dá)差異，在此基礎(chǔ)上評(píng)估其表達(dá)水平與AIS發(fā)病嚴(yán)重程度及預(yù)后的相關(guān)性。

1　資料和方法

1.1研究對(duì)象和分組 入選2014年2月～6月在蘭州大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科入院治療的急性缺血性卒中患者141例，其中男性86例，年齡25～92 （59.09±12.54）歲；女性55例，年齡28～88 （65.58±12.47）歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18歲；②所有患者均符合中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南 2010 的診斷標(biāo)準(zhǔn)［10］，均經(jīng)頭顱CT和（或）MRI檢查，部分經(jīng)DSA檢查證實(shí)，責(zé)任病灶與臨床癥狀相符合；③發(fā)病時(shí)間≤7 d。排除標(biāo)準(zhǔn)：①影像學(xué)排除出血和其他病理性疾?。ㄈ缪芑?、腫瘤、膿腫、多發(fā)性硬化或其他常見(jiàn)的非缺血性疾病）；②短暫性腦缺血發(fā)作（TIA）；③血管成形術(shù)或血管外科手術(shù)導(dǎo)致的醫(yī)源性卒中。入選同期門(mén)診體檢健康人群30例作為對(duì)照組，均經(jīng)體格檢查、頭顱CT和（或）MRI、血生化檢查均未發(fā)現(xiàn)異常，既往無(wú)心腦血管疾病史；其中男性21例，年齡27～86（63.70±16.04）歲；女性9例，年齡51～83（72.60±10.62）歲。入組患者均簽署知情同意書(shū)。

1.2 采用相關(guān)量表評(píng)定患者嚴(yán)重程度及預(yù)后

1.2.1卒中嚴(yán)重程度評(píng)定方法 入院24 h內(nèi)，對(duì)AIS患者進(jìn)行NIHSS評(píng)分，評(píng)估患者卒中的嚴(yán)重程度。1.2.2 卒中預(yù)后評(píng)定方法 發(fā)病后第6個(gè)月，對(duì)AIS患者進(jìn)行BI評(píng)分［11，12］，評(píng)估患者的臨床預(yù)后。

均由兩名臨床經(jīng)驗(yàn)豐富的神經(jīng)科主治醫(yī)師，參照NIHSS量表及BI量表評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分，取其均值作為最終評(píng)分。若兩組評(píng)分差異較大，則由第三名神經(jīng)科醫(yī)師再次評(píng)分，取前兩者中更接近第三評(píng)分值的評(píng)分，與第三評(píng)分值的均值作為最終評(píng)分。

1.3血清Ox-LDL的檢測(cè)

1.3.1血液樣本的采集與保存 采集AIS患者空腹時(shí)肘靜脈血4 ml，置于已加入抗氧化劑及抗凝劑的試管中。搖勻后，3000 r/min離心5 min后析出血清；微量移液器移取1～1.5 ml新鮮血清置于塑料試管中，-4℃保存。

1.3.2檢測(cè)方法 兩周內(nèi)采用ELISA法測(cè)定血清Ox-LDL濃度。本研究使用的 Ox-LDL ELISA 試劑盒由上海科興生物科技有限公司生產(chǎn)，所有操作步驟嚴(yán)格按試劑盒所附說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用（±s）表示，兩組均數(shù)比較采用立樣本t檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析方法進(jìn)行；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩組人群一般資料及Ox-LDL水平比較 AIS組與對(duì)照組臨床基線數(shù)據(jù)及Ox-LDL水平的比較見(jiàn)表1。兩組患者在年齡、空腹血糖、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平的差異均無(wú)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。AIS組患者血清Ox-LDL水平明顯高于對(duì)照組（P ＜0.05）。

2.2AIS患者血清Ox-LDL水平與疾病嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān)性 AIS患者血清Ox-LDL水平與其發(fā)病嚴(yán)重程度（即NIHSS評(píng)分）及預(yù)后的相關(guān)性分析見(jiàn)表2。AIS患者血清Ox-LDL水平與其發(fā)病時(shí)嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（P＜0.05），與其預(yù)后無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0.05）。

3　討論

氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）及其所含的生理活性脂質(zhì)溶血磷脂酰膽堿（LPC）、溶血磷脂酸（LPA）等，與心血管、免疫、神經(jīng)系統(tǒng)、炎癥、動(dòng)脈硬化和癌癥的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。這些生理活性物質(zhì)通過(guò)激活多種類(lèi)型的G蛋白偶聯(lián)受體，發(fā)揮維持細(xì)胞鈣離子的動(dòng)態(tài)平衡，促進(jìn)細(xì)胞骨架重排，促進(jìn)細(xì)胞增殖和存活、遷移和黏附的作用［13］。在動(dòng)脈粥樣硬化的形成過(guò)程中，Ox-LDL是導(dǎo)致血管內(nèi)皮損傷的主要因素之一，是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。長(zhǎng)期持續(xù)性的氧化應(yīng)激反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生大量的活性物質(zhì)，后者可進(jìn)一步被脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)生大量的Ox-LDL［14］。此外Ox-LDL還可通過(guò)促進(jìn)血管平滑肌遷移及增殖、促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成及引發(fā)血管炎癥反應(yīng)等機(jī)制參與動(dòng)脈粥樣硬化［15，16］。由于動(dòng)脈粥樣硬化是急性缺血性腦卒中的最主要病因，而Ox-LDL是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，由此推測(cè)Ox-LDL可能與動(dòng)脈粥樣硬化所致急性缺血性卒中密切相關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)AIS患者血清Ox-LDL水平與其卒中嚴(yán)重程度正相關(guān)，與其預(yù)后無(wú)明顯相關(guān)性。我們的研究結(jié)果與RIINA等［7］研究結(jié)果不完全相符，RIINA的研究結(jié)果認(rèn)為AIS患者血清Ox-LDL水平與患者發(fā)病時(shí)嚴(yán)重程度及其預(yù)后均無(wú)相關(guān)性。但RIINA研究所采集的患者血標(biāo)本，已為發(fā)病5～7 d。而Uno等［17］的研究顯示，AIS患者Ox-LDL血清水平峰值出現(xiàn)在發(fā)病第3 d，Polidori等［18］研究表明脂質(zhì)過(guò)氧化指標(biāo)濃度峰值出現(xiàn)在發(fā)病5 d內(nèi)的卒中患者，且與其嚴(yán)重程度正相關(guān)。此外，Masaaki等［19］的研究亦證明，AIS患者Ox-LDL水平與NIHSS評(píng)分正相關(guān)，血清Ox-LDL水平可反映初始神經(jīng)功能缺損情況。據(jù)此我們推測(cè)RIINA等在檢測(cè)血清Ox-LDL時(shí)錯(cuò)過(guò)了峰值以致實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在偏差。

有研究發(fā)現(xiàn)［20］，血清Ox-LDL含量多少與動(dòng)脈斑塊的不穩(wěn)定性密切相關(guān)［21］。王崢等［22］還發(fā)現(xiàn)血清Ox-LDL水平與斑塊最大厚度呈正相關(guān)。由此可見(jiàn)，缺血性腦卒中和斑塊不穩(wěn)定性存在相關(guān)性。李宏等［23］研究發(fā)現(xiàn)大面積腦梗死患者血清Ox-LDL水平顯著高于小面積腦梗死，這可能是血清Ox-LDL水平與腦梗死嚴(yán)重程度正相關(guān)的解釋之一。此外Uno等［17］的研究表明Ox-LDL水平與嚴(yán)重的皮質(zhì)梗死密切相關(guān)。Ox-LDL水平可能至少反映了動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死患者體內(nèi)氧化應(yīng)激水平［24］。氧化應(yīng)激是指體內(nèi)氧化應(yīng)激物質(zhì)產(chǎn)生和消失的平衡失調(diào)，或者外源性的氧化活性物質(zhì)攝入過(guò)多從而引起氧化反應(yīng)的狀態(tài)［25］。其值高，說(shuō)明氧化應(yīng)激水平高，故急性缺血性卒中發(fā)生時(shí)神經(jīng)功能缺損愈嚴(yán)重，NIHSS評(píng)分愈高。本研究的不足之處在于未進(jìn)一步探討血清Ox-LDL與AIS患者梗死面積及部位的關(guān)系。

表1　兩組人群一般治療及Ox-LDL水平比較

表2　Ox-LDL水平與AIS發(fā)病時(shí)嚴(yán)重程度及預(yù)后的相關(guān)性

本研究結(jié)果顯示，血清Ox-LDL與AIS患者的預(yù)后不存在明顯的相關(guān)性，這一點(diǎn)與RIINA的研究結(jié)果相符。這可能是由于AIS患者在發(fā)病的嚴(yán)重程度、所合并的基礎(chǔ)疾病、診治方案及康復(fù)的時(shí)機(jī)、時(shí)程等方面存在差異，從而導(dǎo)致研究結(jié)果出現(xiàn)偏倚。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)血清Ox-LDL水平與急性缺血性卒中嚴(yán)重程度存在正相關(guān)，檢測(cè)血清Ox-LDL對(duì)于預(yù)判急性缺血性卒中嚴(yán)重程度有重要的意義。通過(guò)檢測(cè)血清Ox-LDL，我們可以針對(duì)性地使用抗氧化劑對(duì)AIS患者進(jìn)行治療，但其深入的分子機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。此外，Ox-LDL水平與急性缺血性卒中預(yù)后是否存在相關(guān)性，尚需大樣本研究進(jìn)一步明確。

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本文編輯：田國(guó)祥

The correlation between oxidized low-density lipoprotein level with severity and outcome of acute ischemic stroke

ZHAI Xiao-bin*， GE Zhao-ming， Fan Zhen-zhen， CAI Hong-bin， LIU Zhi-yan， WANG Hao-yue.*Department of Neurology， Second Hospital of Lanzhou University， Lanzhou 730030， China.

GE Zhao-ming. E-mail: 13893285120@163.com

Objective To investigate the associations between oxidized low-density lipoprotein （Ox-LDL）with severity and outcome of acute ischemic stroke （AIS）. Methods Serum of 141 AIS patients （AIS group） and 30 normal subjects （control group） were collected. Enzyme linked immunosorbent assay （ELISA） was used to test the level of serum Ox-LDL in two groups， the NIH Stroke Scale （NIHSS） were used to evaluate their neurological deficit on the first day of admission， and the Barthel Index （BI） were used to measure activities of daily living at sixth month. Results Ox-LDL level of AIS group was significantly higher than control group （P＜0.05）. Ox-LDL level of AIS group was correlated with NIHSS score （r=0.056， P＜0.05）， but not related to BI score （P＜0.05）. Conclusion Ox-LDL level of AIS patients is correlated with severity but not related to prognostic indicator.

Acute ischemic stroke； Ox-LDL； Severity； Outcome

R743.3

A

1674-4055（2016）04-0436-04

1730030 蘭州，蘭州大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科

葛朝明，E-mail：13893285120@163.com

10.3969/j.issn.1674-4055.2016.04.15