• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    羊肚菌菌絲體蛋白的理化特性及抗氧化活性

    2016-08-18 03:36:44吳彩娥1南京林業(yè)大學(xué)輕工科學(xué)與工程學(xué)院江蘇南京210037安徽科技學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院安徽蚌埠233100
    浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報 2016年8期
    關(guān)鍵詞:羊肚菌絲體乳化

    張 強,吳彩娥1,*(1.南京林業(yè)大學(xué)輕工科學(xué)與工程學(xué)院,江蘇南京210037;2.安徽科技學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,安徽蚌埠233100)

    羊肚菌菌絲體蛋白的理化特性及抗氧化活性

    張 強1,2,吳彩娥1,*
    (1.南京林業(yè)大學(xué)輕工科學(xué)與工程學(xué)院,江蘇南京210037;2.安徽科技學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,安徽蚌埠233100)

    為了探討羊肚菌菌絲體蛋白在食品和保健品行業(yè)中應(yīng)用的可能性,以液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)的羊肚菌菌絲體為原料,采用堿溶酸沉法提取菌絲體蛋白,對其理化特性和體外抗氧化活性進行了研究。結(jié)果表明,羊肚菌菌絲體蛋白具有良好的乳化性、乳化穩(wěn)定性、起泡性與泡沫穩(wěn)定性,其等電點為4.1,含有7種人體必需氨基酸,占氨基酸總含量的38.09%;羊肚菌菌絲體蛋白的總抗氧化能力和還原力的半抑制濃度(IC50)分別為(6.93±0.05)和(4.24±0.16)mg·mL-1,抗壞血酸(VC)當(dāng)量分別為(11.74±0.48)和(10.15±0.48)mg· g-1,對DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基及ABTS自由基具有不同效果的清除活性。羊肚菌菌絲體蛋白可作為功能性食品和保健品開發(fā)的良好基料。

    羊肚菌菌絲體;蛋白質(zhì);理化特性;抗氧化活性;氨基酸組成

    羊肚菌(Morchella esculenta)名羊肚菜、羊肚蘑,隸屬子囊菌亞門、盤菌綱、羊肚菌屬,多生于潮濕闊葉林地上,表面呈羊肚狀,味美,營養(yǎng)價值高,是一種珍貴的藥食兩用真菌[1]。羊肚菌富含多糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、不飽和脂肪酸、微量元素和維生素等多種對人體有益的活性物質(zhì),具有抗氧化、降血脂、增強人體免疫力、防癌抗癌、抗疲勞、抗病毒、抗輻射、抑制腫瘤生長等諸多功效[2-3]。隨著液態(tài)深層發(fā)酵技術(shù)的快速發(fā)展,羊肚菌源功能性食品的開發(fā)已呈現(xiàn)出極為廣闊的前景,但是目前相關(guān)的研究多集中于其粗提物或多糖組分上[4-6],對蛋白質(zhì)組分的研究報道鮮見。

    羊肚菌的粗蛋白含量在20%以上,氨基酸含量居所有食用菌之首,并含有順-3-氨基-L-脯氨酸、2,4-二氨基異丁酸和α-氨基異丁酸等使羊肚菌具有獨特風(fēng)味的一些稀有氨基酸,是國際上公認的極好的蛋白質(zhì)來源[7]。因此,本文以液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)的羊肚菌菌絲體為試驗材料,利用堿溶酸沉法提取羊肚菌菌絲體蛋白,研究其理化特性及體外抗氧化活性,旨在為羊肚菌菌絲體蛋白在功能性食品及保健品方面的開發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)和試驗依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    羊肚菌菌種GIM 5.69,由廣東省微生物研究所菌種保藏中心提供;斜面培養(yǎng)基:馬鈴薯提取液20%、蔗糖2%、蛋白胨0.5%、KH2PO40.3%、MgSO4·7H2O 0.1%、瓊脂1.8%;種子培養(yǎng)基:馬鈴薯提取液25%、蔗糖3%、KH2PO40.3%、Mg-SO4·7H2O 0.1%、蛋白胨0.5%;發(fā)酵培養(yǎng)基:葡萄糖 3.5%、酵母粉 0.5%、蛋白胨 0.5%、KH2PO40.3%,MgSO4·7H2O 0.1%;1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)、2,2'-連氮基-雙-(3-乙基苯并二氫噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)購自Sigma公司;鐵氰化鉀、氯化亞鐵、三氯乙酸、焦性沒食子酸、水楊酸及四水合鉬酸銨等試劑均為國產(chǎn)分析純。

    1.2 主要儀器設(shè)備

    PP-15酸度儀(Sartorius公司);TU-1810紫外可見分光光度計(北京普析通儀器有限公司);5804R低溫冷凍離心機(德國Eppendorf公司);FD-1A-50真空冷凍干燥機(北京博醫(yī)康實驗儀器有限公司);NICOLET 380紅外光譜儀(美國賽默飛世爾科技公司);FUS-50L發(fā)酵罐(上海國強生化工程裝備有限公司);日立8900全自動氨基酸分析儀(日立高新技術(shù)公司)。

    1.3 試驗方法

    1.3.1 羊肚菌菌絲體的制備

    將羊肚菌菌株接種于斜面培養(yǎng)基上,25℃恒溫培養(yǎng),待菌絲長滿斜面后,將3塊黃豆粒大小的斜面菌絲接種到裝有50 mL種子培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中,將三角瓶置于25℃搖床,180 r· min-1振蕩培養(yǎng)7 d,得液體種子;液體種子用高速分散器打碎,按15%的接種量接種于50 L發(fā)酵罐中,轉(zhuǎn)速180 r·min-1,25℃發(fā)酵培養(yǎng)7 d,發(fā)酵液用雙層紗布過濾、蒸餾水洗滌,冷凍干燥得羊肚菌菌絲體。

    1.3.2 羊肚菌菌絲體蛋白的提取

    羊肚菌菌絲體經(jīng)粉碎機粉碎,過80目篩,按料液比1∶35添加蒸餾水,用1 mol·L-1NaOH調(diào)pH值至12.0,50℃水浴浸提1 h,3 600 g離心10 min。上清液用1 mol·L-1HCl調(diào)pH值至4.0,3 600 g離心10 min。棄上清,沉淀裝入7 ku的透析袋,用蒸餾水4℃透析,隔6 h換1次水,透析48 h,將透析袋中的溶液冷凍干燥,得羊肚菌菌絲體蛋白。

    1.3.3 等電點的測定

    配制9份10 mg·mL-1的羊肚菌菌絲體蛋白溶液,用0.1 mol·L-1的HCl或NaOH將其pH值分別調(diào)至3.0、3.5、3.7、3.9、4.0、4.1、4.3、4.5和5.0,室溫下攪拌30 min,1 400 g離心15 min,沉淀不溶性蛋白,采用考馬斯亮藍(Bradford)法測定上清液中蛋白含量。上清液中蛋白質(zhì)剩余率最低時對應(yīng)的溶液pH值即為羊肚菌菌絲體蛋白的等電點。

    蛋白質(zhì)剩余率(%)=上清液中的蛋白質(zhì)含量/溶液中蛋白質(zhì)總量×100。

    1.3.4 乳化性及其穩(wěn)定性測定

    參照薛蕾等[8]的方法。稱取一定量的蛋白樣品,用蒸餾水溶解制備成20 mL不同濃度、pH、溫度和離子強度(以氯化鈉質(zhì)量濃度表示)梯度的分散系,移入至50 mL的刻度離心管中,使用高速分散器在12 000 r·min-1下均質(zhì)2 min,然后加入10 mL大豆油,再用高速分散器在12 000 r· min-1下均質(zhì)2 min,2 500 g離心5 min,測量離心管液體總高度和乳化層高度。將離心管置于60℃恒溫水浴鍋中放置30 min,用自來水冷卻至室溫,2 500 g離心5 min,取出離心管,測量乳化層高度。

    乳化性(%)=乳化層高度(cm)/離心管液體總高度(cm)×100;

    乳化穩(wěn)定性(%)=離心后的乳化層高度(cm)/初始乳化層高度(cm)×100。

    1.3.5 起泡性及其穩(wěn)定性的測定

    用蒸餾水把樣品蛋白配制成不同濃度、pH、溫度和離子強度(以氯化鈉質(zhì)量濃度表示)梯度的分散系,量取20 mL,移入至100 mL量筒中,用高速分散器10 000 r·min-1均質(zhì)2 min,盡快記錄泡沫體積;30 min之后再記錄泡沫體積。試驗重復(fù)3次,羊肚菌菌絲體蛋白的起泡性和泡沫穩(wěn)定性按下式計算[9]:

    起泡能力/%=均質(zhì)停止時泡沫體積/均質(zhì)前液體體積×100;

    泡沫穩(wěn)定性/%=30 min后泡沫體積/均質(zhì)停止時泡沫體積×100。

    1.3.6 紅外光譜分析

    將完全干燥的樣品蛋白與干燥的溴化鉀粉末混合,在瑪瑙研缽中研磨均勻,置于模具中壓片,用傅立葉變換紅外光譜儀于400~4 000 cm-1進行掃描,觀察最大吸收峰位置,獲取樣品相關(guān)基團的信息。

    1.3.7 氨基酸組成分析

    樣品蛋白用6 mol·L-1HCl于110℃水解24 h,然后將水解液蒸干,加5 mL 0.02 mol·L-1HCl溶解,用氨基酸自動分析儀進行氨基酸組成的測定(測定1次)。

    1.3.8 抗氧化活性測定

    總抗氧化能力的測定采用磷鉬酸銨比色法[10];還原力的測定采用普魯士藍法[11];清除DPPH自由基和ABTS自由基能力的測定采用直接比色法[12-13];清除超氧陰離子自由基能力的測定采用鄰苯三酚自氧化法[14];清除羥基自由基能力的測定采用水楊酸比色法[15]??偪寡趸芰瓦€原力的測定中,吸光度值越大表明活性越強;對DPPH自由基、ABTS自由基、超氧陰離子自由基和羥基自由基的清除能力的測定中,清除率越大,表明活性越強。清除率按式(1)計算。

    式中,R表示清除率;D0表示對照管的吸光度;D表示樣品管的吸光度。

    所有試驗均以VC作陽性對照,根據(jù)試驗結(jié)果計算樣品和VC的IC50(總抗氧化能力和還原力為吸光度值為0.5時對應(yīng)的樣品濃度;其他為清除率50%時對應(yīng)的樣品濃度),并計算樣品的VC當(dāng)量(每克羊肚菌菌絲體蛋白相當(dāng)于VC的毫克數(shù),即 VC的 IC50除以羊肚菌菌絲體蛋白的IC50)。

    1.3.9 數(shù)據(jù)處理

    無特殊說明,試驗平行測定3次,用Excel進行數(shù)據(jù)處理,用Origin Pro 8.5軟件作圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 羊肚菌菌絲體蛋白的等電點

    兩性物質(zhì)處于等點狀態(tài)時,凈電荷為零,在溶液中的溶解度最低,容易沉淀析出,所以,通過測定不同pH條件下離心上清液中的蛋白質(zhì)剩余率可以判定蛋白質(zhì)的等電點。由圖1可知,當(dāng)pH為3.0~5.0時,隨著pH的增加,蛋白質(zhì)剩余率先降低后升高,當(dāng)pH為4.1時,蛋白質(zhì)剩余率最低,所以羊肚菌菌絲體蛋白的等電點約為4.1。

    圖1 羊肚菌菌絲體蛋白的等電點Fig.1 Isoelectric point of protein from Morchella esculenta mycelium

    2.2 羊肚菌菌絲體蛋白的乳化性及乳化穩(wěn)定性

    乳化性是蛋白質(zhì)促進油水混合,形成乳狀液的能力,而乳化穩(wěn)定性是指蛋白質(zhì)乳化特性對外界條件的抗應(yīng)變能力,兩者都是食品加工過程中非常重要的質(zhì)量控制指標[16]。羊肚菌菌絲體蛋白的乳化性及其穩(wěn)定性與pH值、溫度、NaCl濃度及蛋白質(zhì)濃度的關(guān)系見圖2。

    從圖2-A可以看出,羊肚菌菌絲體蛋白的乳化性及乳化穩(wěn)定性隨pH值的變化均呈V型曲線,在pH 4.0時,均達到最低,可能是由于在等電點附近時,靜電斥力缺乏,故乳化性及乳化穩(wěn)定性較低。pH小于或大于4.0時,蛋白質(zhì)分子帶有靜電荷,分子間由于相互排斥而分散開,導(dǎo)致乳化性及乳化穩(wěn)定性增大。

    由圖2-B可知,在20~40℃,羊肚菌菌絲體蛋白的乳化性及其穩(wěn)定性隨溫度的上升而增加,40℃時,達到最大值,之后溫度升高乳化性及其穩(wěn)定性下降??赡艿脑蚴沁m度的熱處理會使蛋白分子的伸展程度增大,更加容易吸附在油水界面上,從而使乳化性及其穩(wěn)定性增加,但溫度繼續(xù)升高,乳化顆粒的運動加劇,蛋白質(zhì)凝膠作用降低,蛋白質(zhì)膜黏度和硬度降低,使乳化性及其乳化穩(wěn)定性下降。

    圖2-C表明,隨著NaCl濃度的不斷增大,羊肚菌菌絲體蛋白的乳化性和乳化穩(wěn)定性均呈現(xiàn)先升后降的趨勢。原因在于,低NaCl濃度作用下,由于鹽溶作用,蛋白質(zhì)分子的溶解度增大,表面電荷數(shù)量增多,阻止了油滴的相互靠近,表現(xiàn)為乳化性提高,但當(dāng)NaCl濃度過高時,由于鹽析作用,破壞了維持蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定的2個因素——凈電荷和水化膜,表現(xiàn)為乳化能力下降。

    從圖2-D可知,隨著羊肚菌菌絲體蛋白濃度的增加,乳化性及乳化穩(wěn)定性呈現(xiàn)增大趨勢,當(dāng)質(zhì)量濃度達到2%時,乳化性增幅趨于平緩。這可能是因為隨著蛋白質(zhì)濃度增大,界面膜的厚度和強度增加,乳化性能得到提高;當(dāng)濃度增大到一定數(shù)值時,參與界面作用的蛋白質(zhì)趨于飽和狀態(tài),乳化能力不再提高。

    圖2 羊肚菌菌絲體蛋白的乳化性及乳化穩(wěn)定性Fig.2 Emulsifying ability and stability of protein from Morchella esculenta mycelium

    2.3 羊肚菌菌絲體蛋白的起泡性及泡沫穩(wěn)定性

    起泡性是由于蛋白質(zhì)能夠降低氣—液界面的張力來推動空氣與液體相結(jié)合所致,并通過吸附在氣液界面形成保護膜來使泡沫穩(wěn)定存在;泡沫穩(wěn)定性是指泡沫形成后的維持能力,即泡沫間液膜保持液體不被析出的能力。利用蛋白的起泡性和泡沫穩(wěn)定性可以賦予食品以疏松的結(jié)構(gòu)和良好的口感,用于加工奶油、蛋糕、冰激凌等泡沫型產(chǎn)品[17]。羊肚菌菌絲體蛋白的起泡性及泡沫穩(wěn)定性與pH值、溫度、NaCl濃度及蛋白質(zhì)濃度的關(guān)系見圖3。

    從圖3-A可知,pH為4.0時,羊肚菌菌絲體蛋白質(zhì)的起泡性及泡沫穩(wěn)定性均最差,原因是pH 4.0處于羊肚菌菌絲體蛋白等電點附近,此時參與形成泡沫的蛋白質(zhì)濃度最低,其泡沫量最少,穩(wěn)定性最差,隨著pH的升高,蛋白質(zhì)的溶解性增大,起泡能力增強,但過高的pH可能會影響到蛋白質(zhì)分子表面基團的解離,從而導(dǎo)致泡沫穩(wěn)定性降低。

    圖3 羊肚菌菌絲體蛋白的起泡性及泡沫穩(wěn)定性Fig.3 Foaming ability and foam stability of protein from Morchella esculenta mycelium

    由圖3-B可以得出,隨著溫度的提高,羊肚菌菌絲體蛋白的起泡性明顯增強,而穩(wěn)定性則下降??赡苁菧囟壬呤沟玫鞍踪|(zhì)分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生部分解聚,從而提高了蛋白質(zhì)的起泡性。但溫度升高也導(dǎo)致決定泡沫穩(wěn)定性的蛋白質(zhì)分子間的相互作用力,如范德華力、氫鍵以及疏水作用力等變?nèi)酰瑥亩古菽€(wěn)定性下降。

    圖3-C表明,NaCl質(zhì)量濃度對蛋白質(zhì)的起泡性有明顯的影響,NaCl濃度為0.2~0.8 mol·L-1時,隨著NaCl質(zhì)量濃度的提高,羊肚菌菌絲體蛋白的起泡性及泡沫穩(wěn)定性均上升,這可能是由于NaCl的加入使蛋白質(zhì)的溶解度、黏度、展開和聚集等向有益于提高蛋白起泡性和泡沫穩(wěn)定性的方向改變,而當(dāng)NaCl濃度超過0.8 mol·L-1時,羊肚菌菌絲體蛋白的起泡性及泡沫穩(wěn)定性均呈現(xiàn)下降的趨勢,這可能是因為NaCl質(zhì)量濃度過高,出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象,降低了羊肚菌菌絲體蛋白的溶解性,從而使起泡性及泡沫穩(wěn)定性降低。

    圖3-D可以看出,隨著蛋白質(zhì)濃度的升高,其起泡性及泡沫穩(wěn)定性都呈上升的趨勢。這是由于蛋白質(zhì)的起泡性受蛋白質(zhì)分子表面張力的影響,而在一定范圍內(nèi),蛋白質(zhì)表面張力隨著蛋白質(zhì)濃度的上升而降低,從而使蛋白質(zhì)起泡性以及泡沫穩(wěn)定性上升。

    2.4 羊肚菌菌絲體蛋白的紅外光譜

    羊肚菌菌絲體蛋白的紅外光譜見圖4。羊肚菌菌絲體蛋白的酰胺A出現(xiàn)在3 419 cm-1處,該峰的出現(xiàn)與蛋白質(zhì)羥基及N—H的伸縮振動有關(guān),也表明了氫鍵的存在。Doyle等[18]的研究表明,自由的N—H伸縮振動一般在3 400~3 440 cm-1處,當(dāng)肽鍵中的N—H基團包含在氫鍵中時,其振動的波數(shù)會下降。酰胺B出現(xiàn)于2 925 cm-1處,這是蛋白質(zhì)中常出現(xiàn)的波數(shù),同 Kittiphattanabawon[19]的研究結(jié)果一致。羊肚菌菌絲體蛋白的酰胺Ⅰ出現(xiàn)在1 649 cm-1處,表示了C=O的伸縮振動,該條帶和蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)有關(guān);酰胺Ⅱ出現(xiàn)在1 540 cm-1處,這是由N—H的彎曲振動和C—N的伸縮振動引起的;酰胺Ⅲ在1 240 cm-1處,來自C—H伸縮振動和N—H的彎曲振動,該波數(shù)同1 454 cm-1的比值接近1,表明了3股螺旋結(jié)構(gòu)的存在[20]。

    2.5 羊肚菌菌絲體蛋白的氨基酸組成

    圖4 羊肚菌菌絲體蛋白的紅外光譜Fig.4 Infrared spectra of protein from Morchella esculenta mycelium

    羊肚菌菌絲體蛋白的氨基酸組成如表1所示。羊肚菌菌絲體蛋白經(jīng)酸法水解共檢測到17種氨基酸,其中甘氨酸、谷氨酸和天冬氨酸含量最為豐富,摩爾分數(shù)分別為10.77%、10.23%和 9.22%;含有7種人體必需的氨基酸(Thr、Val、Met、Ile、Leu、Phe、Lys),占羊肚菌菌絲體蛋白氨基酸總含量的38.09%,必需氨基酸與非必需氨基酸含量的比值為0.68,分別與FAO/WHO標準規(guī)定的40%和0.6相接近,可認為是1種優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)來源。

    2.6 羊肚菌菌絲體蛋白的抗氧化活性

    羊肚菌菌絲體蛋白的抗氧化活性如表2所示。羊肚菌菌絲體蛋白具有較好的總抗氧化能力和還原力,IC50分別為(6.93±0.05)和(4.24± 0.16)mg·mL-1,VC當(dāng)量分別為(11.74±0.48)和(10.15±0.48)mg·g-1;對DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基及ABTS自由基具有不同效果的清除活性,從VC當(dāng)量來看,羊肚菌菌絲體蛋白對羥基自由基的清除能力最強,對各種自由基清除能力依次為羥基自由基>ABTS自由基>超氧陰離子自由基>DPPH自由基。羊肚菌菌絲體蛋白對DPPH自由基的清除能力優(yōu)于麥胚蛋白(2.0 mg·mL-1,清除率23.27%)[21],對羥基自由基的清除能力與黃芪蛋白(5 mg·mL-1,清除率66%)[22]相當(dāng),對超氧陰離子自由基的清除能力優(yōu)于菜籽清蛋白 (IC5033.36 mg· mL-1)[23]。羊肚菌菌絲體蛋白的抗氧化能力雖然遠不及VC,但是它屬于天然產(chǎn)物,與合成的抗氧化劑相比,使用起來更加安全。而且,通過酶切、自由基降解等適當(dāng)?shù)睦砘揎椞幚?,其抗氧化能力有望大幅度提高?/p>

    表1 羊肚菌菌絲體蛋白的氨基酸組成Table 1 Amino acid composition of protein from Morchella esculenta mycelium

    表2 羊肚菌菌絲體蛋白的抗氧化活性Table 2 Antioxidant activities of protein from Morchella esculenta mycelium

    3 結(jié)論

    羊肚菌菌絲體蛋白具有較好的乳化性、乳化穩(wěn)定性、起泡性與泡沫穩(wěn)定性,其等電點為4.1,通過調(diào)節(jié)pH值、溫度、NaCl質(zhì)量濃度及蛋白濃度等因素,可以明顯改善羊肚菌菌絲體蛋白的各項功能特性。同時,羊肚菌菌絲體蛋白氨基酸組成合理,必需氨基酸占氨基酸總量的38.09%,必需氨基酸與非必需氨基酸含量的比值為0.68,具有很高的營養(yǎng)價值。此外,羊肚菌菌絲體蛋白具有較好的總抗氧化能力和還原能力,對DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基及ABTS自由基具有不同效果的清除活性。因此,羊肚菌菌絲體蛋白在功能性食品和保健品開發(fā)方面具有很大的潛力,值得進一步研究。

    (References):

    [1] 李娟.泰山羊肚菌液體培養(yǎng)條件優(yōu)化及富鐵,鋅,硒研究初探[D].泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2005. LI J.Studies on the submerged fermentation conditions of Morchella esculenta and its bioaccumulation of ferrum,zinc,selenium[D].Tai'an:Shandong Agricultural University,2005.(in Chinese with English abstract)

    [2] HELENO S A,STOJKOVI C′D,BARROS L,et al.A comparative study of chemical composition,antioxidant and antimicrobial properties of Morchella esculenta(L.)Pers.from Portugal and Serbia[J].Food Research International,2013,51 (1):236-243.

    [3] MENG F,ZHOU B,LIN R,et al.Extraction optimization and in vivo antioxidant activities of exopolysaccharide by Morchella esculenta SO-01[J].Bioresource Technology,2010,101(12):4564-4569.

    [4] NITHA B,F(xiàn)IJESH P V,JANARDHANAN K K.Hepatoprotective activity of cultured mycelium of Morel mushroom,Morchella esculenta[J].Experimental and Toxicologic Pathology,2013,65(1):105-112.

    [5] MENG F,LIU X,JIA L,et al.Optimization for the production of exopolysaccharides from Morchella esculenta SO-02 in submerged culture and its antioxidant activities in vitro[J]. Carbohydrate Polymers,2010,79(3):700-704.

    [6] NITHA B,JANARDHANAN K K.Aqueous-ethanolic extract of morel mushroom mycelium Morchella esculenta,protects cisplatin and gentamicin induced nephrotoxicity in mice[J]. Food and Chemical Toxicology,2008,46(9):3193-3199.

    [7] 付天宇.基于深層發(fā)酵的羊肚菌功能性食品研究[D].長春:吉林大學(xué),2013. FU T Y.Study of Morchella esculenta functional food based on the submerged fermentation[D].Changchun:Jilin University,2013.(in Chinese with English abstract)

    [8] 薛蕾,李大文,尉芹,等.苦杏仁蛋白的功能特性[J].食品科學(xué),2013,34(7):70-75. XUE L,LI D W,WEI Q,et al.Functional properties of bitter almond protein[J].Food Science,2013,34(7):70-75. (in Chinese with English abstract)

    [9] LIU Y,ZHAO G,ZHAO M,et al.Improvement of functional properties of peanut protein isolate by conjugation with dextran through Maillard reaction[J].Food Chemistry,2012,131 (3):901-906.

    [10] UMAYAPARVATHI S,MEENAKSHI S,VIMALRAJ V,et al.Antioxidant activity and anticancer effect of bioactive peptide from enzymatic hydrolysate of oyster(Saccostrea cucullata)[J].Biomedicine&Preventive Nutrition,2014,4(3):343-353.

    [11] DUAN X,OCEN D,WU F,et al.Purification and characterization of a natural antioxidant peptide from fertilized eggs [J].Food Research International,2014,56(2):18-24.

    [12] WANG Q,LI W,HE Y,et al.Novel antioxidative peptides from the protein hydrolysate of oysters(Crassostrea talienwhanensis)[J].Food Chemistry,2014,145(2):991 -996.

    [13] HONG J,CHEN T T,Hu P,et al.Purification and characterization of an antioxidant peptide(GSQ)from Chinese leek (Allium tuberosum Rottler)seeds[J].Journal of Functional Foods,2014,10(9):144-153.

    [14] LIU D,SHENG J,LI Z,et al.Antioxidant activity of polysaccharide fractions extracted from Athyrium multidentatum (Doll.)Ching[J].International Journal of Biological Macromolecules,2013,56(5):1-5.

    [15] ZHUANG H,TANG N,YUAN Y.Purification and identification of antioxidant peptides from corn gluten meal[J]. Journal of Functional Foods,2013,5(4):1810-1821.

    [16] DEL MAR YUST M,PEDROCHE J,DEL CARMEN MILLáNLINARES M,et al.Improvement of functional properties of chickpea proteins by hydrolysis with immobilised Alcalase[J]. Food Chemistry,2010,122(4):1212-1217.

    [17] 龐雪風(fēng),何東平,胡傳榮,等.牡丹籽蛋白功能特性的研究[J].中國糧油學(xué)報,2014,29(7):45-48. PANG X F,HE D P,HU C R,et al.Functional characteristics of peony seed protein[J].Joumal of the Chinese Cereals and Oils Association,2014,29(7):45-48.(in Chinese with English abstract)

    [18] DOYLE B B,BENDIT E G,BLOUT E R.Infrared spectroscopy of collagen and collagen-like polypeptides[J].Biopolymers,1975,14(5):937-957.

    [19] KITTIPHATTANABAWON P,BENJAKUL S,VISESSANGUAN W,et al.Isolation and characterisation of collagen from the skin of brownbanded bamboo shark(Chiloscyllium punctatum)[J].Food Chemistry,2010,119(4):1519 -1526.

    [20] GUZZI PLIPIS A M D,GOISSIS G,DAS-GUPTA D K.Dielectric and pyroelectric characterization of anionic and native collagen[J].Polymer Engineering&Science,1996,36 (24):2932-2938.

    [21] 孫婕,尹國友,劉文霞,等.小麥麥胚蛋白提取工藝及抗氧化活性初探[J].糧食與飼料工業(yè),2014(3):26-29. SUN J,YIN G Y,LIU W X,et al.Extraction process and antioxidant activity of wheat germ protein[J].Cereal&Feed Industry,2014(3):26-29.(in Chinese with English abstract)

    [22] 李敏,閆帥,薛慧清,等.黃芪蛋白組分的抗氧化性測定[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2015,10(5):642-644. LI M,YAN S,XUE H Q,et al.Measurement of the oxidation resistance in the protein components of Astragalus membranaceus[J].World Journal of Integrated Traditional and Western Medicine,2015,10(5):642-644.(in Chinese with English abstract)

    [23] 趙蓓,李欣蓉,魏瑞芝,等.超聲輔助提取對菜籽清蛋白抗氧化活性的影響[J].食品科技,2015(8):235-239. ZHAO B,LI X R,WEI R Z,et al.Effect on the antioxidant activity of rapeseed albumin of ultrasonic-assisted extraction [J].Food Science and Technology,2015(8):235-239. (in Chinese with English abstract)

    (責(zé)任編輯 侯春曉)

    Physicochemical properties and antioxidant activities of protein from Morchella esculenta mycelium

    ZHANG Qiang1,2WU Cai-e1,*
    (1.College of Light Industry Science and Engineering,Nanjing Forestry University,Nanjing 210037,China;2.College of Life Science,Anhui Science and Technology University,Bengbu 233100,China)

    In this study,Morchella esculenta protein was extracted by alkaline dissosution and acid precipitation from Morchella esculenta mycelium obtained by liquid-state fermentation,and its physicochemical properties and in vitro antioxidant activity were investigated in order to explore the application possibility in food and health care products industry.The results showed that the protein had an isoelectric point of 4.1,contained 7 kinds of essential amino acids,which accounted for 38.09%of the total amino acids,exhibited excellent emulsifying ability and stability as well as admirable foaming ability and stability.The protein showed good performance of the total antioxidant activity,with IC50value of(6.93±0.05)mg·mL-1and VCequivalent of(11.74±0.48)mg·g-1,and also the reducing power,with IC50value of(4.24±0.16)mg·mL-1and VC equivalent of(10.15±0.48)mg·g-1.Furthermore,the protein exhibited different scavenging effects on DPPH,superoxide,hydroxyl and ABTS radicals.It was concluded that the protein could be served as an excellent material for the development of functional foods and health care products.

    Morchella esculenta mycelium;protein;physicochemical properties;antioxidant activities;amino acid composition

    TS202.1

    A

    1004-1524(2016)08-1408-08

    10.3969/j.issn.1004-1524.2016.08.20

    2015-11-26

    江蘇省普通高校研究生科研創(chuàng)新計劃項目(KYLX15_0916);南京林業(yè)大學(xué)優(yōu)秀博士學(xué)位論文創(chuàng)新基金項目;安徽科技學(xué)院重點學(xué)科項目(AKZDXK2015B02)

    張強(1979—),男,遼寧錦州人,博士,副教授,從事天然產(chǎn)物開發(fā)與利用方面的研究。E-mail:zq7964@163.com
    *

    ,吳彩娥,E-mail:sxwucaie@163.com

    猜你喜歡
    羊肚菌絲體乳化
    羊肚菌“飛天記”
    軍事文摘(2023年18期)2023-10-31 08:10:18
    小小羊肚菌 拓寬致富路
    現(xiàn)代溫室羊肚菌栽培技術(shù)
    乳化瀝青廠拌冷再生在陜西的應(yīng)用
    石油瀝青(2019年3期)2019-07-16 08:48:22
    SBS改性瀝青的乳化及應(yīng)用
    石油瀝青(2018年3期)2018-07-14 02:19:20
    簡析一種新型乳化瀝青的生產(chǎn)工藝
    中國公路(2017年17期)2017-11-09 02:25:42
    葡萄糖酸鈉發(fā)酵廢棄菌絲體提取殼聚糖的研究
    中國釀造(2016年12期)2016-03-01 03:08:25
    新型環(huán)保吸聲材料——菌絲體膠合秸稈
    安全(2015年7期)2016-01-19 06:19:39
    冬蟲夏草發(fā)酵液和菌絲體中主要核苷類成分分析
    羊肚參的生藥學(xué)研究
    人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 国产一区亚洲一区在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 成人二区视频| 国产乱来视频区| 97热精品久久久久久| 久久精品影院6| 草草在线视频免费看| 少妇人妻一区二区三区视频| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 直男gayav资源| 99热这里只有精品一区| 啦啦啦啦在线视频资源| 老司机福利观看| 久久精品久久久久久久性| 国产精品一二三区在线看| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲va在线va天堂va国产| 99国产精品一区二区蜜桃av| 69人妻影院| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 听说在线观看完整版免费高清| 超碰av人人做人人爽久久| 少妇的逼好多水| 日韩强制内射视频| 青春草亚洲视频在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 国国产精品蜜臀av免费| 久久久久久大精品| 偷拍熟女少妇极品色| 欧美zozozo另类| 国产成人福利小说| 丰满乱子伦码专区| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲最大成人手机在线| 精品一区二区三区视频在线| 一本一本综合久久| 最近2019中文字幕mv第一页| 好男人在线观看高清免费视频| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产中年淑女户外野战色| 国产视频内射| 青春草国产在线视频| 干丝袜人妻中文字幕| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产乱来视频区| 老司机福利观看| av黄色大香蕉| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 日韩欧美精品免费久久| 色播亚洲综合网| 欧美zozozo另类| 一边摸一边抽搐一进一小说| 成人无遮挡网站| 中文字幕熟女人妻在线| 亚洲精品国产成人久久av| 久久久精品欧美日韩精品| 综合色丁香网| 日韩av在线大香蕉| 毛片女人毛片| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久草成人影院| 久热久热在线精品观看| 99久久成人亚洲精品观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 夜夜爽夜夜爽视频| a级一级毛片免费在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 免费av不卡在线播放| 亚洲电影在线观看av| 亚洲第一区二区三区不卡| 神马国产精品三级电影在线观看| 久久国产乱子免费精品| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲自拍偷在线| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产成人91sexporn| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久久久久国产a免费观看| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 一边摸一边抽搐一进一小说| 在线免费十八禁| a级毛色黄片| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 久久久久久久久久久丰满| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲无线观看免费| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 大话2 男鬼变身卡| 蜜臀久久99精品久久宅男| 久久久成人免费电影| 亚洲内射少妇av| 免费大片18禁| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 少妇人妻精品综合一区二区| 晚上一个人看的免费电影| 欧美一级a爱片免费观看看| 欧美日本视频| 黄色日韩在线| 日韩人妻高清精品专区| 精品久久久久久久久亚洲| 国产亚洲91精品色在线| 免费观看人在逋| 亚洲欧美清纯卡通| 麻豆成人午夜福利视频| 特大巨黑吊av在线直播| 十八禁国产超污无遮挡网站| 欧美变态另类bdsm刘玥| 大香蕉久久网| 日日啪夜夜撸| 精品久久久久久电影网 | 国产成人a区在线观看| 国产亚洲精品av在线| 亚洲欧美日韩东京热| 国产极品精品免费视频能看的| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 国产一区二区三区av在线| 看非洲黑人一级黄片| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 简卡轻食公司| 国产91av在线免费观看| 成人欧美大片| 少妇高潮的动态图| 日韩人妻高清精品专区| 久久久久精品久久久久真实原创| 长腿黑丝高跟| 国产精品女同一区二区软件| 欧美色视频一区免费| 日本三级黄在线观看| 国产又色又爽无遮挡免| 欧美区成人在线视频| 免费观看a级毛片全部| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 久久久久久国产a免费观看| 青春草亚洲视频在线观看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 乱系列少妇在线播放| 亚洲国产精品久久男人天堂| 秋霞伦理黄片| 国产精品一区二区在线观看99 | 欧美日本视频| av福利片在线观看| 久久99精品国语久久久| 高清日韩中文字幕在线| 一级二级三级毛片免费看| 日韩亚洲欧美综合| 99热这里只有精品一区| 国产午夜精品论理片| 国产黄片美女视频| 日本免费一区二区三区高清不卡| www日本黄色视频网| 国产成年人精品一区二区| 欧美一区二区亚洲| 国产亚洲精品久久久com| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲精品一区蜜桃| 免费av观看视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 精品无人区乱码1区二区| 国产在线一区二区三区精 | 国产黄片美女视频| 久久精品人妻少妇| 亚洲av成人精品一二三区| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产精华一区二区三区| 韩国av在线不卡| 国产av一区在线观看免费| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 少妇高潮的动态图| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产成人91sexporn| 精品免费久久久久久久清纯| 国产亚洲av嫩草精品影院| 91精品国产九色| 日韩一区二区视频免费看| 永久网站在线| av.在线天堂| www日本黄色视频网| a级毛片免费高清观看在线播放| 一本久久精品| 国产91av在线免费观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| 波野结衣二区三区在线| 国产一区二区三区av在线| 高清av免费在线| 国产在视频线精品| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 天天一区二区日本电影三级| 日韩精品青青久久久久久| 丰满乱子伦码专区| 亚洲av免费高清在线观看| 国产在线一区二区三区精 | 男的添女的下面高潮视频| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 激情 狠狠 欧美| 一本久久精品| 成年av动漫网址| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲av中文av极速乱| 黑人高潮一二区| 一区二区三区四区激情视频| 少妇人妻精品综合一区二区| 一级爰片在线观看| 欧美区成人在线视频| 男女下面进入的视频免费午夜| 一级二级三级毛片免费看| 国产中年淑女户外野战色| 又爽又黄a免费视频| 日韩国内少妇激情av| 婷婷色麻豆天堂久久 | 欧美成人精品欧美一级黄| 免费av观看视频| 男人舔奶头视频| 欧美精品国产亚洲| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 国产黄a三级三级三级人| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 在线免费十八禁| 久久久精品大字幕| 我的老师免费观看完整版| 亚洲av免费在线观看| 一本久久精品| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲精品国产av成人精品| 最近最新中文字幕大全电影3| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | av在线亚洲专区| 国产精品国产三级专区第一集| 男女国产视频网站| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 18禁动态无遮挡网站| 岛国毛片在线播放| 男的添女的下面高潮视频| 国产亚洲91精品色在线| 99久国产av精品国产电影| 午夜久久久久精精品| 国产高清不卡午夜福利| 日韩制服骚丝袜av| 天美传媒精品一区二区| 亚洲国产精品成人久久小说| 欧美成人午夜免费资源| 国产精品一区二区在线观看99 | 成人毛片a级毛片在线播放| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 国产日韩欧美在线精品| 国产老妇女一区| 亚州av有码| 国产老妇伦熟女老妇高清| 青春草视频在线免费观看| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 亚洲av免费在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 99久久成人亚洲精品观看| 小说图片视频综合网站| 亚洲av男天堂| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产在线一区二区三区精 | 国产成人免费观看mmmm| 毛片一级片免费看久久久久| 九九爱精品视频在线观看| 日本熟妇午夜| 欧美bdsm另类| 一区二区三区免费毛片| 直男gayav资源| 国产老妇女一区| 国产亚洲91精品色在线| 国产精品一及| 天美传媒精品一区二区| 极品教师在线视频| 国产精品.久久久| 国内揄拍国产精品人妻在线| 能在线免费看毛片的网站| 亚洲人成网站高清观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 久久久久久国产a免费观看| 久久精品久久久久久久性| 岛国毛片在线播放| 国产精品av视频在线免费观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 级片在线观看| av.在线天堂| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 午夜爱爱视频在线播放| 国产色爽女视频免费观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 变态另类丝袜制服| 超碰97精品在线观看| 国产不卡一卡二| 国产在线一区二区三区精 | 日日干狠狠操夜夜爽| 在线免费十八禁| 亚洲在线观看片| 在线观看av片永久免费下载| 免费大片18禁| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产老妇女一区| 国产男人的电影天堂91| 午夜激情福利司机影院| 国产精品国产高清国产av| 国内揄拍国产精品人妻在线| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 国产免费一级a男人的天堂| 青春草亚洲视频在线观看| 中文字幕亚洲精品专区| 色网站视频免费| 淫秽高清视频在线观看| 久久99热6这里只有精品| 国产毛片a区久久久久| 美女国产视频在线观看| 午夜精品在线福利| 国产日韩欧美在线精品| 欧美一区二区精品小视频在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产老妇女一区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 好男人在线观看高清免费视频| 日韩欧美在线乱码| 精品久久久久久久久亚洲| 性色avwww在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 午夜福利在线在线| 最近中文字幕高清免费大全6| 午夜福利成人在线免费观看| 日本黄色视频三级网站网址| 久久久久久国产a免费观看| 国产v大片淫在线免费观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 不卡视频在线观看欧美| 久久这里只有精品中国| 欧美色视频一区免费| 国产午夜精品论理片| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 大香蕉97超碰在线| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| av国产免费在线观看| 精品久久久久久久末码| 成人美女网站在线观看视频| 国产高潮美女av| 观看美女的网站| 级片在线观看| 91久久精品电影网| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 中文字幕亚洲精品专区| 成人毛片a级毛片在线播放| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 中文字幕制服av| 国产精品一区二区性色av| or卡值多少钱| 亚洲人成网站在线播| av在线蜜桃| 精品免费久久久久久久清纯| 又爽又黄a免费视频| 国产三级中文精品| 丝袜美腿在线中文| 精品久久久噜噜| 2022亚洲国产成人精品| 91久久精品国产一区二区成人| 联通29元200g的流量卡| 看非洲黑人一级黄片| 少妇人妻精品综合一区二区| 免费av不卡在线播放| 久久久久久久午夜电影| 亚洲四区av| 亚洲最大成人中文| 国产成年人精品一区二区| 国产成人aa在线观看| www.av在线官网国产| 国产成人精品婷婷| 免费看av在线观看网站| 国产成人精品久久久久久| 亚洲av熟女| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲美女视频黄频| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 亚洲五月天丁香| 午夜视频国产福利| 精品国产三级普通话版| 精品欧美国产一区二区三| 女人久久www免费人成看片 | 国产在线一区二区三区精 | 成人特级av手机在线观看| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲精品,欧美精品| 男插女下体视频免费在线播放| 特级一级黄色大片| 久久久久久久久久黄片| 一级av片app| 国产精品一区二区性色av| 69av精品久久久久久| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 在线免费观看不下载黄p国产| 波野结衣二区三区在线| 舔av片在线| 乱码一卡2卡4卡精品| 日韩欧美精品v在线| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲色图av天堂| 久久久久久久久久黄片| 国产v大片淫在线免费观看| 男的添女的下面高潮视频| 国产成人a∨麻豆精品| 麻豆一二三区av精品| 日韩制服骚丝袜av| 韩国高清视频一区二区三区| 国产av码专区亚洲av| 国产精品日韩av在线免费观看| 亚洲人成网站在线播| 午夜福利高清视频| 性插视频无遮挡在线免费观看| 看片在线看免费视频| 日本wwww免费看| 超碰97精品在线观看| 精品一区二区三区人妻视频| 国产高清有码在线观看视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 99热网站在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产免费一级a男人的天堂| 一个人免费在线观看电影| 亚洲人成网站高清观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 在现免费观看毛片| 女人久久www免费人成看片 | 欧美高清成人免费视频www| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 欧美3d第一页| 精品一区二区三区人妻视频| av卡一久久| 看片在线看免费视频| 亚洲怡红院男人天堂| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲第一区二区三区不卡| 免费观看人在逋| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲av男天堂| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲久久久久久中文字幕| 丰满乱子伦码专区| 欧美另类亚洲清纯唯美| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 少妇的逼好多水| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲最大成人手机在线| 网址你懂的国产日韩在线| 天美传媒精品一区二区| 人人妻人人看人人澡| 精品午夜福利在线看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 精品熟女少妇av免费看| 六月丁香七月| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲最大成人av| 青春草视频在线免费观看| 亚洲伊人久久精品综合 | 看免费成人av毛片| 舔av片在线| 成人午夜精彩视频在线观看| 久久久久久久久久黄片| 成年av动漫网址| 美女大奶头视频| 国产亚洲一区二区精品| 国产爱豆传媒在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产成人freesex在线| 欧美一区二区国产精品久久精品| 一级爰片在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产一级毛片在线| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产老妇女一区| 91久久精品国产一区二区成人| 国产成人一区二区在线| 国产成人福利小说| 免费观看精品视频网站| 爱豆传媒免费全集在线观看| 欧美成人午夜免费资源| av免费观看日本| 一级av片app| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 水蜜桃什么品种好| 大话2 男鬼变身卡| 成人无遮挡网站| 成年版毛片免费区| 69人妻影院| 亚洲最大成人中文| 超碰av人人做人人爽久久| 国产精品电影一区二区三区| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产av一区在线观看免费| 草草在线视频免费看| 欧美极品一区二区三区四区| 精华霜和精华液先用哪个| 国产v大片淫在线免费观看| 91av网一区二区| 免费看日本二区| 亚洲国产精品sss在线观看| 日韩一区二区三区影片| 午夜福利高清视频| 麻豆成人午夜福利视频| 免费av不卡在线播放| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 日本色播在线视频| 99久国产av精品国产电影| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产亚洲最大av| 欧美高清成人免费视频www| av在线天堂中文字幕| 国产亚洲精品av在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 久久久欧美国产精品| 九九热线精品视视频播放| 久久久久久久久中文| 国产视频首页在线观看| 免费av观看视频| 国产精品女同一区二区软件| 国产精品99久久久久久久久| 免费观看人在逋| 不卡视频在线观看欧美| 国产黄片视频在线免费观看| 少妇熟女aⅴ在线视频| 激情 狠狠 欧美| 中文资源天堂在线| 听说在线观看完整版免费高清| 国产精品人妻久久久影院| 观看免费一级毛片| 亚州av有码| 亚洲天堂国产精品一区在线| 美女国产视频在线观看| 99久久成人亚洲精品观看| 国产精品一及| 久久人妻av系列| 亚洲av成人av| 免费一级毛片在线播放高清视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 一级爰片在线观看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 人人妻人人看人人澡| 久久久精品欧美日韩精品| 国产亚洲精品av在线| 青青草视频在线视频观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 综合色丁香网| 欧美日韩国产亚洲二区| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲国产最新在线播放| 中文亚洲av片在线观看爽| 免费观看的影片在线观看| 天堂中文最新版在线下载 | 日韩欧美在线乱码| 深爱激情五月婷婷| 亚洲国产精品合色在线| av卡一久久| 网址你懂的国产日韩在线| 丰满少妇做爰视频| 亚洲国产高清在线一区二区三| 久久久国产成人免费| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久精品久久久久久久性| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 老司机福利观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 级片在线观看| 变态另类丝袜制服| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 岛国在线免费视频观看| 国产高清不卡午夜福利| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日本免费一区二区三区高清不卡| 久久精品夜色国产| 久久99蜜桃精品久久| 国产久久久一区二区三区| 亚洲精品色激情综合| 久久久欧美国产精品| 精品免费久久久久久久清纯| 少妇高潮的动态图| 一边摸一边抽搐一进一小说| 精品一区二区三区人妻视频| 51国产日韩欧美| 国产精品无大码| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 最近最新中文字幕免费大全7| 欧美97在线视频| АⅤ资源中文在线天堂| 午夜视频国产福利| 日本免费a在线| 看十八女毛片水多多多| 日韩欧美精品免费久久| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产麻豆成人av免费视频| 国产真实伦视频高清在线观看| 精品久久久久久成人av| 在线免费观看的www视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲av一区综合| 色网站视频免费| 亚洲成人久久爱视频|