兩種低聚糖對煙草種子萌發(fā)及幼苗生長的影響

余　錢，尹顯慧*，陳　雪，黃化剛，代園鳳，喻會(huì)平

(1.貴州大學(xué) 作物保護(hù)研究所，貴州 貴陽 550025；2.貴州省煙草公司畢節(jié)市公司，貴州 畢節(jié) 551700)

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兩種低聚糖對煙草種子萌發(fā)及幼苗生長的影響

余錢1，尹顯慧1*，陳雪2，黃化剛2，代園鳳2，喻會(huì)平2

(1.貴州大學(xué) 作物保護(hù)研究所，貴州 貴陽 550025；2.貴州省煙草公司畢節(jié)市公司，貴州 畢節(jié) 551700)

為研究低聚糖對煙草種子萌發(fā)、早期幼苗生長及生理生化指標(biāo)的影響，通過不同濃度浸種，記錄種子萌發(fā)情況，30 d后觀察早期幼苗形態(tài)特征，并分別測定了幼苗葉片的葉綠素、MDA、可溶性蛋白含量、脯氨酸含量、細(xì)胞膜透性和SOD、POD、CAT等保護(hù)酶活性等生理生化指標(biāo)。結(jié)果表明，兩種低聚糖處理對煙草的萌發(fā)都有一定的抑制作用，但在其生長期可以補(bǔ)充營養(yǎng)，促進(jìn)幼苗生長發(fā)育。

煙草；低聚糖；種子萌發(fā)；幼苗生長；生理生化指標(biāo)

煙草屬于茄科(Salanaceae) 煙屬(Nitotiana)，是我國廣泛栽培的一種經(jīng)濟(jì)作物[1]。雖隨著煙草行業(yè)“合作社種植經(jīng)營模式”的推廣及煙草種植產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，高質(zhì)量的煙草種子成為保障煙葉產(chǎn)量和質(zhì)量的基礎(chǔ)。目前中國煙草行業(yè)生產(chǎn)用種已全部使用包衣種子，通過包衣處理的種子極大地提高了播種操作的方便性，同時(shí)對種子的萌發(fā)和壯苗有顯著的促進(jìn)作用[2-3]。但為了更大的經(jīng)濟(jì)效益，科研人員開展了大量的研究工作。目前，天達(dá)-2116對葡萄[4]、小麥[5]、玉米[6]、馬鈴薯[7]和寡聚糖對黃瓜[8]、番茄[9]等作物都有明顯的促進(jìn)作用。田香華等研究報(bào)道了低聚糖對煙草黑脛病菌菌絲生長具有較好抑菌活性[10]；商文靜報(bào)道了低聚糖可以誘導(dǎo)煙草對TMV的侵染產(chǎn)生系統(tǒng)誘導(dǎo)抗病性,減輕病毒侵染引起的系統(tǒng)癥狀[11],這樣產(chǎn)量就會(huì)更高。而采用低聚糖浸泡煙草種子，使更多的低聚糖融入煙草種子中，這樣的方法在國內(nèi)外還鮮有報(bào)道。

本文研究不同濃度低聚糖浸種處理對煙草種子萌發(fā)、發(fā)芽30 d早期幼苗生長及生理生化特性的影響，旨在篩選合適的低聚糖濃度，為提高煙草種子萌發(fā)率、縮短發(fā)芽時(shí)間及生產(chǎn)中培育煙草壯苗和高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培提供參考。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)時(shí)間、地點(diǎn)

研究于2014年5月～7月在貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院農(nóng)藥和農(nóng)安實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

1.2試驗(yàn)材料

供試材料煙草種子畢納1號由貴州省烤煙良種繁育基地提供。

供試藥劑：

天達(dá)-2116為山東天達(dá)生物股份有限公司提供，藍(lán)甲寡聚糖為山東嘉豐海洋生物科技有限公司提供。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1低聚糖對煙草種子萌發(fā)的影響

試驗(yàn)設(shè)2種藥劑各5個(gè)濃度，清水為對照，共11個(gè)處理，見表1。選取大小均勻一致的煙草種子，分別放于上述稀釋溶液中浸種2 h，清水為對照CK。在直徑為90 mm的培養(yǎng)皿中放置約1 cm厚的高溫蛭石，其上再墊一張濾紙做發(fā)芽床，在其內(nèi)均勻地放置浸泡過的種子，每個(gè)處理90粒種子，排列整齊，分為3個(gè)培養(yǎng)皿，每個(gè)培養(yǎng)皿30粒種子，重復(fù)3次。在25℃，光照16 h/d，光強(qiáng)2000 lx條件下的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)萌發(fā)。從置床之日起每天定時(shí)起蓋通氣2次，加入清水，以保證發(fā)芽床濕潤。萌發(fā)指標(biāo)以胚根長度為種子長度的1/2時(shí)為準(zhǔn)，萌發(fā)時(shí)間從播種日算起。種子萌發(fā)后逐日記錄發(fā)芽數(shù)量，記錄12 d，測定并計(jì)算種子萌發(fā)指標(biāo)。

表1　供試低聚糖及處理濃度

(1)發(fā)芽率：從放入種子起至第12天終止，統(tǒng)計(jì)正常發(fā)芽種子粒數(shù)占供試種子總數(shù)的百分率。即發(fā)芽率(%)=(發(fā)芽種子數(shù)/種子總數(shù))×100

(2)發(fā)芽勢：從放入種子起至第6天，統(tǒng)計(jì)發(fā)芽種子粒數(shù)占供試種子總數(shù)的百分率。即發(fā)芽勢(%)=(播種后6 d發(fā)芽數(shù)/種子總數(shù))×100

(3)發(fā)芽指數(shù)=Σ(逐日發(fā)芽數(shù)/發(fā)芽試驗(yàn)天數(shù))

1.3.2低聚糖對煙草幼苗形態(tài)指標(biāo)的影響

將藥劑浸泡后，每個(gè)處理90粒種子，播種于盛有蛭石的沙盤內(nèi)，每個(gè)沙盤里30粒種子，排列整齊，重復(fù)3次。置于人工氣候室培養(yǎng)，培養(yǎng)環(huán)境設(shè)為溫度25℃/18℃(晝/夜)，光周期晝夜各16 h/d，相對濕度75%。從置床之日起每天定時(shí)加入清水，定期加入天達(dá)-2116和藍(lán)甲寡聚糖各自不同濃度的稀釋液，培育30 d后，測定鮮重、根上重、根鮮重以及根長、株高等農(nóng)藝性狀指標(biāo)。

1.3.3低聚糖對煙草早期幼苗生理生化指標(biāo)的影響

待沙盤內(nèi)幼苗長到5片葉時(shí)，采用煙草營養(yǎng)土移栽到花盆中，用上述處理液進(jìn)行灌澆，清水為對照，放置在25℃，光周期晝夜為16 h/d的溫室中進(jìn)行培養(yǎng)，間隔3～5天用處理藥液澆灌，2個(gè)月后采集第三到第四片葉片，進(jìn)行生理生化指標(biāo)檢測。其中，葉綠素含量采用李合生等[12]改進(jìn)的丙酮法進(jìn)行測定；MDA含量采用硫代巴比妥酸法[13]進(jìn)行測定；抗氧化酶液提取參照Moerschbacher等[13]的方法，SOD活性采用氮藍(lán)四唑(NBT)光還原法[14]測定；POD活性采用Kochba等[15]方法測定；CAT活性采用Dhindsa等[14]的方法測定?？扇苄缘鞍缀繙y定采用考馬斯亮藍(lán)G-250染色法[16]；細(xì)胞膜透性測定采用電導(dǎo)儀測定法[17]；脯氨酸含量采用茚三酮法[18]。

1.4統(tǒng)計(jì)方法

利用SPSS 16.0軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA)和LSD檢驗(yàn)。

2　結(jié)果與分析

2.1低聚糖浸種對煙草萌發(fā)的影響

2.1.1發(fā)芽動(dòng)態(tài)

從著床開始，所有處理均在第四天開始萌發(fā)，第十天萌發(fā)完畢，但對照(ck) 在發(fā)芽的第8天就達(dá)到了最高峰，而天達(dá)-2116和藍(lán)甲寡聚糖各處理達(dá)到發(fā)芽高峰的時(shí)間均為第10 天，表明這兩種低聚糖的不同濃度處理都延遲了煙草種子的萌發(fā)高峰期，對煙草的萌發(fā)都有一定的抑制作用。

圖1(a)

圖1(b)

2.1.2發(fā)芽率與發(fā)芽勢

如圖2所示，經(jīng)天達(dá)-2116和藍(lán)甲寡聚糖浸泡處理過的種子，發(fā)芽率與發(fā)芽勢均明顯呈現(xiàn)出“低高低高”的趨勢。兩者的發(fā)芽率與發(fā)芽勢與對照(CK)相比都偏低，差異顯著，天達(dá)-2116 200 mg/L

圖2(a)

圖2(b)

和藍(lán)甲寡聚糖10000 mg/L時(shí)的發(fā)芽率、發(fā)芽勢最低。天達(dá)-2116 50 mg/L的發(fā)芽率、發(fā)芽勢最高，為44.33%、59.33%，與ck相比下降了16.67%、17.84%；藍(lán)甲寡聚糖1250 mg/L的發(fā)芽率、發(fā)芽勢最高，為49.33%、61.33%，與ck相比降低11.67%、6.34%。由天達(dá)-2116和藍(lán)甲寡聚糖的發(fā)芽勢與發(fā)芽率的降低可看出，經(jīng)過這兩種低聚糖浸泡處理，對煙草萌發(fā)都具有抑制作用。

2.1.3發(fā)芽指數(shù)

如圖3所示，雖然天達(dá)-2116和藍(lán)甲寡聚糖對種子發(fā)芽指數(shù)的影響各異，但其趨勢與發(fā)芽率和發(fā)芽勢相同，兩種低聚糖的發(fā)芽指數(shù)都顯著偏低于ck,且天達(dá)-2116處理組的發(fā)芽指數(shù)普遍低于藍(lán)甲寡聚糖處理組。天達(dá)-2116 50 mg/L的發(fā)芽指數(shù)最高，為7.78，與ck相比降低1.05；寡聚糖各個(gè)處理之間的發(fā)芽指數(shù)無顯著性差異，但都顯著低于ck。發(fā)芽指數(shù)是測定種子發(fā)芽全過程快慢程度的指標(biāo)。天達(dá)-2116和藍(lán)甲寡聚糖均降低了煙草種子的活力，延緩了種子萌發(fā)速度。

2.2低聚糖浸種對煙草幼苗形態(tài)特征的影響

從表2和表3可以看出，各處理對早期幼苗農(nóng)藝性狀的影響各不相同。天達(dá)-2116 處理組的主根都極顯著長于ck，而株高普遍低于ck，且濃度為800 mg/L的株高最矮。藍(lán)甲寡聚糖處理組的主根也都顯著長于ck， 且濃度為625 mg/L的主根最長。藍(lán)甲寡聚糖處理組的株高呈“低高低高”的趨勢，與ck差異不顯著。天達(dá)-2116處理組的總鮮重隨著濃度的增大而增大，藍(lán)甲寡聚糖處理組隨著濃度的增大，總鮮重、地上部重呈“高低高低”的趨勢。表明經(jīng)不同濃度低聚糖浸種后對煙草早期幼苗總鮮重的影響不同，在一定濃度下可以有效提高總鮮重。天達(dá)-2116處理組和藍(lán)甲寡聚糖處理組的地上部重與ck無顯著差異。在試驗(yàn)中，天達(dá)-2116

圖3　低聚糖不同濃度處理下煙草種子的發(fā)芽指數(shù)Fig.3　Germination index of tobacco seed treatingwith oligosaccharides

處理組和藍(lán)甲寡聚糖處理組都有側(cè)根的生長，而ck未有側(cè)根生長。所以，經(jīng)天達(dá)-2116和藍(lán)甲寡聚糖浸泡過的煙草種子有利于主根和側(cè)根的生長，表明經(jīng)這兩種低聚糖浸種后對煙草早期幼苗生長有積極的影響。

2.3低聚糖浸種對煙草幼苗葉片葉綠素含量的影響

從表4可知，藍(lán)甲寡聚糖組的葉綠素a和葉綠素(a+b)含量隨濃度的增大逐漸降低，但當(dāng)達(dá)到5000 mg/L時(shí)，葉綠素a和葉綠素(a+b)含量又開始增加；葉綠素b含量隨濃度的降低呈“升降升降”的趨勢；藍(lán)甲寡聚糖 625 mg/L葉綠素a和葉綠素(a+b)含量均顯著高于ck。在表5中，天達(dá)-2116 100 mg/L的葉綠素a、葉綠素b和葉綠素(a+b)含量極顯著低于ck；天達(dá)-2116 50 mg/L的葉綠素a、葉綠素b和葉綠素(a+b)含量顯著高于ck。說明藍(lán)甲寡聚糖 625 mg/L和天達(dá)-2116 50 mg/L 處理能有效提高葉綠素中的各種含量，促進(jìn)煙草幼苗的生長發(fā)育。

表2　低聚糖不同濃度處理對早期幼苗農(nóng)藝性狀的影響

表3　低聚糖不同濃度處理對早期幼苗農(nóng)藝性狀的影響

注：數(shù)據(jù)后的小寫字母表示不同處理間的顯著性差異(P<0.05)，大寫字母表示不同處理間的極顯著差異(P<0.01)，下同。

表4低聚糖不同濃度處理早期幼苗葉片葉綠素含量的影響

Tab.4Effects of oligosaccharides on the content of photosynthetic pigments in tobacco leaves at early-stage seedlings

處理組(mg/L)葉綠素a(mg/g·FW)葉綠素b(mg/g·FW)葉綠素(a+b)(mg/g·FW)ck—14.93±0.34bcABC5.16±0.19bcdBCD20.08±0.30cdBCD藍(lán)甲寡聚糖1000013.43±0.02dDE5.08±0.02bcdBCD18.51±0.15eEF500011.82±0.06eF5.18±0.75bcBCD17.00±0.73fG250012.45±0.64eEF4.76±0.26cdCD17.21±0.43fFG125014.08±0.31cdCD4.56±0.12dD18.64±0.42eDEF62515.54±0.30abAB5.04±0.27bcdBCD20.58±0.56bcBC

表5低聚糖不同濃度處理早期幼苗葉片葉綠素含量的影響

Tab.5Effects of oligosaccharides on the content of photosynthetic pigments in tobacco leaves at early-stage seedlings

處理組(mg/L)葉綠素a(mg/g·FW)葉綠素b(mg/g·FW)葉綠素(a+b)(mg/g·FW)ck—14.93±0.34bcABC5.16±0.19bcdBCD20.08±0.30cdBCD天達(dá) 211680014.54±0.25cBCD4.74±0.07cdD19.27±0.26deCDE40016.06±0.65aA5.54±0.36bABC21.61±0.87abAB20014.98±0.55bcABC5.63±0.24bAB20.60±0.52bcBC1006.41±0.45fG2.25±0.07eE8.66±0.50gH5016.19±0.94aA6.28±0.36aA22.47±1.11aA

2.4低聚糖浸種對煙草幼苗葉片MDA含量的影響

從圖4可看出，天達(dá)-2116處理組和藍(lán)甲寡聚糖處理組的MDA含量隨著濃度的降低呈“降升降升”的趨勢，天達(dá)-2116處理組各個(gè)濃度的MDA含量與ck無顯著性差異。藍(lán)甲寡聚糖10000 mg/L的MDA含量最高且極顯著高于ck，為2.566 mg/g，可能是濃度設(shè)置過高，使其煙草幼苗中的MDA過高，煙草葉片細(xì)胞膜脂過氧化程度加?。?500 mg/L的MDA含量最低且明顯低于ck，為0.833 mg/g，這可能是因?yàn)樵谠囼?yàn)中此濃度更容易受環(huán)境等因素的影響，寡聚糖其它各處理的MDA含量與ck相比差異不明顯。

圖4　低聚糖不同濃度浸種對煙草早期幼苗葉片MDA含量的影響

2.5低聚糖浸種對煙草幼苗葉片抗氧化酶活性的影響

在圖5(a)中，天達(dá)-2116處理組和藍(lán)甲寡聚糖處理組的SOD活性隨濃度的降低均呈“升降升降”的趨勢，只是SOD活性達(dá)到最高點(diǎn)的處理不一樣，天達(dá)-2116處理組的SOD活性在T3(200 mg/L)時(shí)達(dá)到最高點(diǎn)，藍(lán)甲寡聚糖處理組的SOD活性在T4(1250 mg/L)時(shí)達(dá)到最高點(diǎn)。雖然兩個(gè)處理組的SOD活性都達(dá)到過最高點(diǎn)，但均顯著低于ck。在圖5(b)中，天達(dá)-2116處理組和藍(lán)甲寡聚糖處理組的POD活性均高于ck。在圖5(c)中，天達(dá)-2116處理組的CAT活性在一定范圍內(nèi)隨濃度降低而逐漸

圖5(a)

圖5(b)

圖5(c)

升高，50 mg/L時(shí)含量最高，但也顯著低于ck，表明使用天達(dá) -2116浸泡時(shí)高濃度對CAT活性有抑制作用；藍(lán)甲寡聚糖處理組的CAT活性隨濃度降低呈“先降后升”的趨勢，在T3(625 mg/L)時(shí)CAT活性達(dá)到最高，在此濃度下顯著高于ck?？傮w來說，經(jīng)過浸泡處理，兩種低聚糖均降低了煙草早期幼苗葉片的SOD活性，顯著提高POD活性。

2.6低聚糖浸種對煙草幼苗葉片可溶性蛋白含量的影響

從圖6可以看出，在一定范圍內(nèi)，天達(dá)-2116組的可溶性蛋白含量隨濃度降低逐漸升高，在50 mg/L時(shí)可溶性蛋白含量達(dá)到最高，但也極顯著低于ck，表明經(jīng)過天達(dá)-2116浸泡處理，明顯降低煙草幼苗葉片的可溶性蛋白含量。藍(lán)甲寡聚糖組的可溶性蛋

圖6　低聚糖不同濃度浸種對煙草早期幼苗葉片可溶性蛋白含量的影響

白含量隨濃度的降低呈“先降后升”的趨勢，在T3(2500 mg/L)時(shí)可溶性蛋白含量最低，為20.74 μg/g，比ck降低49.57 μg/g；在5個(gè)處理濃度中，T5(625 mg/L)時(shí)可溶性蛋白含量最高，為77.49 μg/g，比ck提高7.18 μg/g。結(jié)果表明只有合適的低聚糖濃度才能有效提高煙草幼苗葉片的可溶性蛋白含量。2.7低聚糖浸種對煙草幼苗葉片細(xì)胞膜透性的影響

由圖7可得，天達(dá)-2116組和藍(lán)甲寡聚糖組的相對電導(dǎo)率都隨著濃度的降低而成“減增減增” 的趨勢。天達(dá)-2116組的相對電導(dǎo)率在T1時(shí)達(dá)到最大，與ck無顯著性差異。藍(lán)甲寡聚糖組的相對電導(dǎo)率在T4時(shí)達(dá)到最大，為52.44%，顯著高于ck；藍(lán)甲寡聚糖在T1、T2、T5時(shí)的相對電導(dǎo)率與對照相比，都表現(xiàn)出差異不明顯。說明不同濃度低聚糖處理在一定程度上，不會(huì)造成細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)外滲。

圖7　低聚糖不同濃度浸種對煙草早期幼苗葉片細(xì)胞膜透性的影響

2.8低聚糖浸種對煙草幼苗葉片脯氨酸含量的影響

脯氨酸含量的多少是衡量植物在逆境下抗逆性強(qiáng)弱的一種指標(biāo)，脯氨酸含量越多，作物抗逆性越強(qiáng)。由圖8可得，兩個(gè)處理組的脯氨酸含量都顯

圖8　低聚糖不同濃度浸種對煙草早期幼苗葉片脯氨酸含量的影響

著高于ck。表明煙草種子通過天達(dá)-2116和藍(lán)甲寡聚糖浸泡均能有效提高早期幼苗葉片中脯氨酸的含量，對煙草的抗逆性有積極的影響。

3　討論

低聚糖是指聚合度(多糖的糖基數(shù))在20以下的殼聚糖[19]。低聚糖素是一類生物活性分子，具有調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、果實(shí)成熟以及抗逆性等功能[20-21]。殼聚糖對植物病原菌的抗菌活性會(huì)產(chǎn)生誘導(dǎo)效果[22]。在本實(shí)驗(yàn)中所使用的兩種低聚糖：天達(dá)-2116(含復(fù)合氨基低聚糖、抗病誘導(dǎo)物質(zhì)、多種維生素、多種氨基酸、水楊酸等)和藍(lán)甲寡聚糖(含有機(jī)質(zhì)、殼聚物以及多種微量元素)，這兩種低聚糖都含有作物生長所需的大量物質(zhì)。在楊文平[23]等人的研究中天達(dá)-2116 拌種對小麥種子萌發(fā)具有促進(jìn)作用，而在本實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)過天達(dá)-2116和藍(lán)甲寡聚糖浸泡過的煙草種子，卻延遲了種子的萌發(fā)時(shí)間，降低了煙草種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)。這可能是因?yàn)檫@兩種低聚糖在浸種時(shí)抑制了煙草種子中催化萌發(fā)的某些酶的活性，在后期進(jìn)行對煙草幼苗葉片抗氧化酶活性的影響實(shí)驗(yàn)測定中也發(fā)現(xiàn)超氧化歧化酶(SOD)顯著降低，這與孫群[24]等人的研究中SOD等保護(hù)性酶的活性降低會(huì)造成種子活力下降一致。在后期測定中兩個(gè)處理組均增加了過氧化物酶(POD)活性，這可使植物體為了抵抗活性氧對自身的毒害作用，就利用自身的POD，清除過多的活性氧，避免自身受到活性氧的損傷[25]。兩種低聚糖都促進(jìn)了煙草早期幼苗的生長，使煙草幼苗有較高的主根長、鮮重和莖粗以及增加側(cè)根的生長。這可能是因?yàn)閮煞N低聚糖內(nèi)都含有殼聚糖物質(zhì)，這是一種氨基多糖類聚合物，含有豐富的C、N，可被微生物分解利用并作為植物生長的養(yǎng)分，同時(shí)，土壤中使用殼聚糖或其他甲殼素衍生物可改變土壤微生物區(qū)系，促進(jìn)有益微生物的生長而抑制一些植物病原菌[26]，這樣使煙草在早期幼苗生長中能夠促進(jìn)根系正常生長，快速生根，使生長均衡健壯。葉片中葉綠素是植物光合作用中能量轉(zhuǎn)化的物質(zhì)基礎(chǔ)，其含量影響著植株的生長和營養(yǎng)物質(zhì)的含量[27]。若葉綠素含量降低，葉綠體發(fā)育受到抑制，葉色表現(xiàn)出黃化、白化、蒼綠色等癥狀，光合效率降低，生長遲緩，有的甚至?xí)?dǎo)致植株死亡[28-32]。與對照相比，天達(dá)-2116 50 mg/L和藍(lán)甲寡聚糖 625 mg/L浸種時(shí)能有效增加葉綠素含量，促進(jìn)煙草生長，增加葉片光合效率。天達(dá)-2116組的MDA 含量和相對電導(dǎo)率明顯降低，在一定程度上抑制了葉片MDA 的積累和膜質(zhì)過氧化作用的發(fā)生[33]，維持了細(xì)胞質(zhì)膜的完整性，保證了植物體各種代謝的正常進(jìn)行[34]。而脯氨酸在植物組織內(nèi)是一種理想的滲調(diào)物質(zhì)[33]，脯氨酸含量的明顯增加，有利于煙草幼苗葉片的滲透調(diào)節(jié)。天達(dá)-2116和藍(lán)甲寡聚糖都是新型低聚糖，都含有作物生長所需的多種物質(zhì)，在農(nóng)業(yè)上已經(jīng)得到了大量應(yīng)用，但在煙草上尚處于嘗試階段[35]。在此次研究中，雖然兩者都延遲了煙草種子的萌發(fā)時(shí)間，但為煙草幼苗的生長提供了充分的營養(yǎng)。總體來說，采用天達(dá)-2116 50 mg/L和藍(lán)甲寡聚糖625 mg/L浸種效果最佳，能有效增加煙草的主根長、葉綠素含量、脯氨酸含量、POD活性等，對煙草幼苗的生長有積極作用。這對低聚糖在煙草上的研究應(yīng)用提供了一定的參考資料。本研究為室內(nèi)結(jié)果，為實(shí)際應(yīng)用僅提供參考，還需進(jìn)一步開展田間試驗(yàn)，為獲得更大的煙草經(jīng)濟(jì)收益提供更為具體和科學(xué)的指導(dǎo)。

[1]馬文廣，韓瑞，李永平，等. 不同藥劑浸種處理對煙草種子活力和幼苗生長的影響[J]. 種子，2011，30(9): 48-51.

[2]薛曉兵.中國烤煙種子引發(fā)包衣技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 種子，2012，31(2): 60- 63.[3]坎平，王莎莎，馬文廣，等. 赤霉素引發(fā)同時(shí)提高煙草種子及幼苗抗旱性和抗冷性[J]. 種子，2014，33(2): 30-38.

[4]韋青俠. 天達(dá)-2116對葡萄生長發(fā)育的影響[D]. 西北農(nóng)林科技大學(xué)，2002.

[5]楊文平. 天達(dá)-2116對冬小麥生長發(fā)育調(diào)控效應(yīng)的研究[D]. 西安：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2002.

[6]龍友華，李華，何騰兵. 天達(dá)-2116 對玉米生長、產(chǎn)量及品質(zhì)的調(diào)節(jié)效應(yīng)[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，(23):1-3.

[7]龍友華，夏錦慧. 天達(dá)-2116 浸種對馬鈴薯的調(diào)節(jié)效應(yīng)[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，48(5):1084-1085.

[8]于仁竹，于賢昌，王桂紅. 殼聚糖對黃瓜幼苗生長和生理特性的影響[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2003,12(4):102-104.

[9]劉偉，楊廣玲，王金信，等. 0.3%殼聚糖水劑對番茄產(chǎn)量和病害發(fā)生的影響[J]. 現(xiàn)代農(nóng)藥，2004，3(2):30-32.

[10]田香華，楊軍，侯明生. 幾丁低聚糖對煙草黑脛病菌及寄主防御酶的影響[C]. 中國植物病理學(xué)會(huì)，2006.

[11]商文靜. 殼寡糖對煙草花葉病毒的誘導(dǎo)抗病作用和體外抑制作用[D]. 西安：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2006.

[12]李合生，陳崔蓮，洪玉枝. 植物生理生化試驗(yàn)原理和技術(shù)[M]. 北京:高等教育出版社，2000: 153-156.

[13]Moerschbacher B M，Noll U M，F(xiàn)lott B E，etal. Lignin biosynthetic enzymes in stem rust infected，resistant and susceptible near-isogenic wheat lines[J].PhysiologicalandMolecularPlantPathology，1988，33(1): 33-46.[14]Dhindsa R S，Plumb P，Thorpe T A. Leaf senescence: correlated with increased levels of membrane permeability and lipid-peroxidation and decreased levels of superoxide dismutase and catalase[J].JournalofExperimentalBotany，1981(32): 93-101

[15]Kochba J，Lavee S，Spiegel P. Differences in peroxidase activity and isoenzymes in embryogenic and non-embryogenic ‘Shamouti’ orange ovular callus lines[J].PlantandCellPhysiology，1977(18)：463-467.

[16]Bradford W W. A rapid and sensitive method for the quantization of microgram quantities of protein utilization the principle of protein-dye binding[J].Analyticalbiochemistry，1976(72): 248-254.

[17]張志良，瞿偉菁. 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]. 北京: 高等教育出版社，2002.

[18]杜娟，申磊，孫艷香. 氨基酸對NaCI脅迫下棉苗生理性狀及脯氨酸含量的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42(7): 99-102.

[19]嚴(yán)金龍，許琦，蔡照盛，等. 甲殼低聚糖的制備、特性與應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 安徽化工，2005(1): 24-27.

[20]李落葉.低聚糖誘導(dǎo)小麥抗病性的研究[D]. 西安：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2002.

[21]周自云.低聚糖激發(fā)子誘導(dǎo)楊樹細(xì)胞抗病機(jī)制的研究[D]. 西安：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2004.

[22]鄭連英.甲殼低聚糖的研究進(jìn)展[J]. 材料科學(xué)與工程，1999，17(3): 97-100.[23]楊文平，胡喜巧.天達(dá)-2116 拌種對冬小麥18種子萌發(fā)和幼苗生長特性的影響[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010(8):28-29.

[24]孫群，王建華，孫寶啟.種子活力的生理和遺傳機(jī)理研究進(jìn)展[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，40(1)：48-53.

[25]杜世章，劉婷婷，代其林，等. 輻照對煙草抗氧化酶活性的影響[J]. 中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2012，14(1): 72-75.

[26]于漢壽，吳漢章，楊冰.殼聚糖抑制植物病害的研究進(jìn)展[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2000，12(3); 94 -96.

[27]劉春陽，鄭玉紅，陸波，等. 廢棄礦山生態(tài)復(fù)綠常用17種植物葉綠素含量及SOD和POD活力測定[J]. 環(huán)境監(jiān)測管理與技術(shù)，2012，24(1): 14-19.

[28]JUNG K H ，H UR J ，RYU C H，etal, Characterization of a rice chlorophyll deficient mutant using the T-DNA gene-trap system[J].PlantCellPhysiol, 2003，44(5): 463 -472.

[29]N AKANISHI H，NOZUE H，SUZUKI K，etal. Characterization of the Arabidopsis thaliana mutant pcb 2 which accumulates diviny l chlorophylls [J].PlantCellPhysiol, 2005，46(3): 467 -473.

[30]ZH ANG H，LI J，YOO J H，etal.Rice Chlorina-l and Chlorina-9 encode ChlD and ChlI subunits of Mg-chelatase，a key enzyme for chlorophyll synthesis and chloroplast development[J] .PlantMol.Biol，2006，62: 325 -337.

[31]HUANG X Q，ZHAO H X，DONG CH L，etal. Chlorophyll-deficit rice mutants and their research advances in biology[J].ActaBot.Boreal.-Occident.Sin, 2005，25(8): 1685 -1691.

[32]王平榮，張帆濤，高家旭，等. 高等植物葉綠素生物合成的研究進(jìn)展[J]. 西北植物學(xué)報(bào)，2009，29(3): 629- 636.

[33]王紅紅，李凱榮，侯華偉. 油菜素內(nèi)酯提高植物抗逆性的研究進(jìn)展[J]. 干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究，2005，23(3): 213-218.

[34]尹顯慧，簡芳，龍友華. 微生物菌劑仙豐168對番茄種子萌發(fā)及早期幼苗生長的影響[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，40(17): 28-37.

[35]劉桂智，朱英波，杜金有，等. 殼聚糖在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2007，23(8): 377-381.

Effects of two kinds of oligosaccharidesonthe on seed germination and early seedling growth of Tobacco

YUQian1，YINXian-hui1*，CHENXue2，HUANGHua-gang2，DAIYuan-feng2，YUHui-ping2

(1.InstituteofCropProtection，GuizhouUniversity，Guiyang，Guizhou550025，China; 2.BijieTobaccoCompanyofGuizhouProvince，Bijie，Guizhou551700,China)

Tobacco seeds were soaked in different concentrations of two kinds of oligosaccharides. To study their effects on tobacco seed germination，early-stage seedlings growth and physiological and biochemical property. Seed germination was recorded every day. After 30 days，the morphologicalcharacteristics of early-stage seedling were examined. The physiological and biochemical indicators (chlorophyll contents，MDA contents，soluble protein contents，proline content，cell membrane permeability,SOD activity，POD activity and CAT activity) of early-stage seedling leaves were measured，respectively. The results showed that both oligosaccharide treatments had inhibition on seed germination of tobacco.However,during the growing season，the treatments could supplement seedling nutrition，improve the growth and development.

tobacco;oligosaccharide;seed germination;seedling growth;physiological and biochemical indexes

1008-0457(2016)03-0079-07國際DOI編碼：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2016.03.016

2015-11-07；修回日期：2015-12-10

中國煙草總公司貴州省公司科技項(xiàng)目“畢納1號氣候斑和馬鈴薯Y病毒病流行機(jī)理及防控技術(shù)研究”(201311)；貴州省煙草公司畢節(jié)市公司科技項(xiàng)目“畢納1號氣候斑和馬鈴薯Y病毒病流行機(jī)理及防控技術(shù)研究”(BJYC-201304)；貴州大學(xué)大學(xué)生“SRT計(jì)劃”項(xiàng)目“生物制劑對煙草種子萌發(fā)及早期幼苗生長的影響”(貴大SRT字(2014)088號)。

尹顯慧(1978-)，女，博士，副教授，主要研究方向：有害生物綠色治理及農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全；E-mail：16678192@qq.com。

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