T-SPOT.TB檢測結(jié)核專業(yè)人員結(jié)核潛伏感染與結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)的對比研究

宋　韜，李莉娟，付洪義

(1.河北省胸科醫(yī)院結(jié)核內(nèi)科，河北 石家莊 050041；2.中國人民解放軍白求恩國際和平醫(yī)院干部一科，河北 石家莊 050082)

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·論著·

T-SPOT.TB檢測結(jié)核專業(yè)人員結(jié)核潛伏感染與結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)的對比研究

宋韜1，李莉娟2，付洪義1

(1.河北省胸科醫(yī)院結(jié)核內(nèi)科，河北 石家莊 050041；2.中國人民解放軍白求恩國際和平醫(yī)院干部一科，河北 石家莊 050082)

[摘要]目的探討結(jié)核分枝桿菌感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)(T-SPOT.TB)診斷結(jié)核專業(yè)人員潛伏結(jié)核感染(latent tuberculous infection，LTBI)的價(jià)值。方法選取85例結(jié)核內(nèi)科醫(yī)護(hù)人員(結(jié)核專業(yè)人員)為研究組，另選85例健康者為對照組，2組既往均無結(jié)核病史、無結(jié)核病癥狀，胸片正常，應(yīng)用T-SPOT.TB對2組進(jìn)行外周血結(jié)核菌特異γ干擾素( interferon γ，IFN-γ)水平檢測，同時(shí)進(jìn)行平行的結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)(tuberculin skin test,TST)檢測。結(jié)果2組T-SPOT.TB陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而TST陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2種方法陽性率比較，研究組和對照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。一致性檢驗(yàn)結(jié)果顯示T-SPOT.TB與TST一致性較差(Kappa=0.123)。結(jié)論①密切接觸傳染性結(jié)核病患者是感染結(jié)核分枝桿菌的危險(xiǎn)因素，其成為LTBI者的概率較非密切接觸人群明顯增高；②T-SPOT.TB陽性結(jié)果與是否密切接觸傳染性結(jié)核病患者顯著相關(guān)，而TST陽性結(jié)果與是否密切接觸傳染性結(jié)核病患者無明顯相關(guān)，這可能與我國極高的卡介苗接種率有關(guān)；③T-SPOT.TB診斷LTBI特異度高于TST；④T-SPOT.TB與TST的相關(guān)性較低，它為診斷LTBI提供了新的更為準(zhǔn)確的方法。

[關(guān)鍵詞]潛伏性結(jié)核；結(jié)核菌素試驗(yàn)；診斷

doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2016.07.008

潛伏結(jié)核感染(latent tuberculosis infection ,LTBI)是指宿主感染結(jié)核分枝桿菌(mycobacterium tuberculosis，Mtb)后尚未發(fā)病的一種狀態(tài)[1]。我國第5次流行病學(xué)調(diào)查顯示Mtb感染者中絕大部分為LTBI[2]。LTBI人群是罹患結(jié)核病的高危人群，一旦其機(jī)體免疫能力減弱，發(fā)展為活動性結(jié)核病的可能性極高[3]。由于職業(yè)暴露的緣故，結(jié)核專業(yè)工作人員極易感染Mtb而成為LTBI者。本研究在河北省胸科醫(yī)院結(jié)核內(nèi)科開展，分別采用結(jié)核分枝桿菌感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)(T-SPOT.TB)和結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)(tuberculin skin test,TST)檢測85名醫(yī)護(hù)人員結(jié)核分枝桿菌感染情況，并設(shè)立健康對照組，比較并分析二者的一致性，旨在探討T-SPOT.TB診斷結(jié)核專業(yè)人員LTBI的價(jià)值。

1　資料與方法

1.1一般資料選取河北省胸科醫(yī)院結(jié)核內(nèi)科符合入組標(biāo)準(zhǔn)的85名醫(yī)護(hù)人員為研究組，男性10例，女性75例；年齡19～61歲，平均(33.58±10.25)歲。從本院體檢中心進(jìn)行健康體檢的人群中隨機(jī)選取符合入組標(biāo)準(zhǔn)的85名設(shè)為對照組，男性46例，女性39例；年齡17～58歲，平均(33.98±10.57)歲。入組標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥16歲；②既往無結(jié)核病病史，無糖尿病及風(fēng)濕免疫病史，無其他肺部疾病史，無艾滋病病毒感染，無妊娠，無嚴(yán)重肝腎衰竭病史，近3個月內(nèi)未應(yīng)用免疫抑制劑及增強(qiáng)劑；③目前無任何結(jié)核病的臨床表現(xiàn)，如咳嗽、咳痰、咯血、胸痛、胸悶、氣短、午后低熱、乏力、納差、消瘦及夜間盜汗；④胸片正常；⑤簽署知情同意書。

1.2主要試劑無血清培養(yǎng)基：RPMI 1640，PPA laboratory Gmbh，僅用于樣本開始的處理，培養(yǎng)液使用結(jié)束后丟棄。AIM-VTM，Invitrogen公司，用于細(xì)胞孵育階段。PBMCs分離液：LymphoprepTM，Ads-Shield PocAS.Oslo.Norway，用于分離外周血單個核細(xì)胞(peripheral blood mononuckear cells，PBMCs)。無水乙醇(分析純)，上海彤晟化工科技有限公司。PBS緩沖液：1x D-PBS(catalogue number 14040-091)，美國GIBCOTM公司，用于溶解保護(hù)試劑。T-SPOT.TB試劑盒，Oxford Immunotec，Abingdon，UK，進(jìn)行T-SPOT.TB的原材料包括：①微孔培養(yǎng)板，96(12×8)孔，由板條組成，外層披覆有無毒的小鼠抗人的干擾素γ(interferon γ ，INF-γ)單抗；②抗原A(0.8 mL/瓶)，其內(nèi)含有ESAT-6抗原以及牛血清白蛋白和抑菌劑；③抗原B(0.8 mL/瓶)，其內(nèi)含有CFP-10抗原以及牛血清白蛋白和抑菌劑；④植物血凝素(phytohaemagglutin,PHA)對照(0.8 mL/瓶)，其內(nèi)含有用于監(jiān)控細(xì)胞活性的PHA以及牛血清白蛋白和抑菌劑；⑤200倍濃縮的標(biāo)記抗體(50 μL)，其內(nèi)含有堿性磷酸酶標(biāo)記的小鼠的抗人INF-γ單抗；⑥顯色底物溶液(25 mL)，其內(nèi)含有BCIP/NBTplus；⑦結(jié)核菌素純蛋白衍生物，北京祥瑞制藥有限公司。

1.3主要儀器二級生物安全柜，美國Thermo Scientific公司。流式細(xì)胞儀，美國BD公司，進(jìn)行PBMCs記數(shù)。ELISPOT分析儀，德國ADI公司，進(jìn)行斑點(diǎn)記數(shù)。37 ℃，90%濕度，5%CO2培養(yǎng)箱，美國Thermo Scientific公司。4 ℃冰箱BCD-257SL，青島海爾公司。超大容量低溫離心機(jī)，美國Thermo Scientific公司。臺式振蕩器Vortex-Geniez，上海易擴(kuò)儀器有限公司。電熱恒溫水槽，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。新型全自動恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海智城分析儀器制造有限公司。移液器，美國Thermo Scientific公司。肝素鋰真空采血管(CPT，4 mL)，美國BD公司。流式標(biāo)本檢測管，美國BD公司。細(xì)胞計(jì)數(shù)板，美國HYCOR生物醫(yī)學(xué)公司。

1.4實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1T-SPOT.TB試驗(yàn)①收集標(biāo)本：肝素鋰真空采血管收集每位受試者2管4 mL外周靜脈血，收集之后立刻顛倒5～10次，18～25 ℃存放。標(biāo)本應(yīng)盡早進(jìn)行檢測，不宜超過4 h。②PBMCs分離：將4 mL血液與4 mL預(yù)熱到37 ℃的RPMI 1640培養(yǎng)液等體積混勻；再加入4 mL預(yù)熱的Lymphoprep分離液混勻，1 800 g，18 ℃，離心處理約30 min；用吸管吸起呈牛奶色、云霧狀的PBMCs層，轉(zhuǎn)移至15 mL尖底離心管中，加入AIM-V培養(yǎng)液至10 mL； 600 g，離心7 min，棄去上清液；再加入1 mLAIM-V培養(yǎng)液使其重懸沉淀；加入AIM-V培養(yǎng)液至10 mL， 350 g，離心7 min；棄去上清液，將沉淀懸浮于0.7 mLAIM-V培養(yǎng)液中。③細(xì)胞記數(shù)和稀釋：記數(shù)活細(xì)胞后，調(diào)整細(xì)胞濃度在2.0～3.0×109/L；配制標(biāo)準(zhǔn)溶液500 μL，使其濃度達(dá)到25萬個細(xì)胞/100 μL。④培養(yǎng)板組裝和孵育：將培養(yǎng)板條嵌入培養(yǎng)板架內(nèi)，逐漸使其恢復(fù)至室溫；分別加入50 μL培養(yǎng)基(陰性控制)、陽性控制、結(jié)核分枝桿菌特異抗原A和B于對應(yīng)的檢測孔；每個樣本使用4個檢測孔供使用，每孔加入配制好的100 μL細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)溶液，于37 ℃，90%濕度2，5%CO2培養(yǎng)箱中孵育18 h。⑤斑點(diǎn)形成與記數(shù)：將培養(yǎng)板從培養(yǎng)箱端出，棄去細(xì)胞培養(yǎng)液；再在各個孔中加入PBS緩沖液200 μL，棄去PBS緩沖液，用吸水紙將殘留于反應(yīng)孔中的液體拍干；反復(fù)用新鮮PBS緩沖液將培養(yǎng)板洗滌4次；用PBS緩沖液200倍稀釋濃縮標(biāo)記抗體試劑；將工作酶復(fù)合物溶液50 μL置于各個孔中，6 ℃孵育1 h；再次用200 μL PBS緩沖液洗板4次；加入50 μL BCIP/NBT底物溶液至各個檢測孔中，室溫孵育7 min；蒸餾水徹底洗滌培養(yǎng)板，終止反應(yīng)；37 ℃溫箱干燥培養(yǎng)板；干燥后各個反應(yīng)孔內(nèi)有清晰可見的深藍(lán)色的斑點(diǎn)，將其記數(shù)。⑥質(zhì)量控制：對于一般的正常結(jié)果來說，空白對照孔應(yīng)該是無或有很少的斑點(diǎn)，而放置有植物血凝素PHA對照孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)應(yīng)該≥20個；當(dāng)空白對照孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)≥10個時(shí)，為“不確定”結(jié)果。還有一種檢測結(jié)果被認(rèn)為是“不確定”結(jié)果，即當(dāng)放置有細(xì)胞活性PHA對照孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)≥20個或反應(yīng)孔內(nèi)遍布斑點(diǎn)(斑點(diǎn)數(shù)量太多)，而放置有PHA對照孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)應(yīng)該<20個時(shí)。對此情況的解釋是絕大多數(shù)人群的T細(xì)胞對PHA有反應(yīng)。除非能把抗原A孔或抗原B孔中的斑點(diǎn)數(shù)作依據(jù)結(jié)果解釋和判斷標(biāo)準(zhǔn)確定為有“反應(yīng)性”，才能說明結(jié)果有效?；谏锟茖W(xué)和反應(yīng)體系的原因，當(dāng)空白的對照孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)≤5個，并且抗原A孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)減去空白對照孔斑點(diǎn)數(shù)或抗原B孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)減去空白對照孔斑點(diǎn)數(shù)的結(jié)果在5～7之間時(shí)，也被認(rèn)定為“不確定”結(jié)果。此時(shí)應(yīng)當(dāng)根據(jù)受試者所有相關(guān)的臨床資料進(jìn)行判斷，如有必要，可再次進(jìn)行復(fù)查。雖然ESAT-6和CFP 10抗原的特異性很高，在所有牛性分枝桿菌(包括卡介苗)以及絕大部分非結(jié)核分枝桿菌都不存在，但當(dāng)受試者感染海分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌、轉(zhuǎn)黃分枝桿菌、蘇爾加分枝桿菌、胃分枝桿菌時(shí)，T-SPOT.TB檢測有可能出現(xiàn)“假陽性”結(jié)果。若懷疑受試者為上述細(xì)菌感染時(shí)，需要進(jìn)行相關(guān)的鑒別診斷。結(jié)果判定，目視法判定標(biāo)準(zhǔn)：①陽性對照孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)≥20個視為試驗(yàn)有效；②陰性對照孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)為≤5個，A孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)或B孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)-陰性孔斑點(diǎn)數(shù)≥6個，認(rèn)定結(jié)果為陽性；③若陰性對照孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)≥6個，A孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)或B孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)≥陰性孔斑內(nèi)點(diǎn)數(shù)×2，認(rèn)定結(jié)果為陽性；④若A孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)或B孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)的數(shù)量<20，且陽性對照孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)≥20個，認(rèn)定結(jié)果為陰性。

1.4.2TST由在結(jié)核菌素純蛋白衍生物(purified protein derivative tuberculin，PPD)試驗(yàn)室工作5年以上的專業(yè)護(hù)士進(jìn)行操作，用PPD 5 U，在研究對象左前臂屈側(cè)做皮內(nèi)注射，72 h后觀察結(jié)果。結(jié)果判定：在室內(nèi)自然光線下，用食指和中指輕摸腫硬程度，然后用米度尺測量硬結(jié)的平均直徑(縱徑和橫徑相加再除以2)，測量時(shí)以垂直的最大縱徑和最大橫徑為標(biāo)準(zhǔn)。①陰性：無反應(yīng)或輕微紅潤，硬結(jié)平均直徑在5 mm以下；②一般陽性：硬結(jié)平均直徑在5～19 mm，且無水泡、壞死及淋巴管炎；③強(qiáng)陽性：硬結(jié)平均直徑≥20 mm或不論硬結(jié)平均直徑大小，出現(xiàn)水泡、壞死及淋巴管炎[4]。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。T-SPOT.TB與TST的一致性分析應(yīng)用Kappa檢驗(yàn)測量評估，Kappa值≥0.75，二者一致性較好；Kappa值<0.4，二者一致性較差。

2　結(jié)　　果

2組T-SPOT.TB陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而TST差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2種方法陽性率比較，研究組和對照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

一致性檢驗(yàn)結(jié)果顯示T-SPOT.TB與TST一致性較差(Kappa=0.123)。

表1　2組T-SPOT.TB與TST陽性率比較Table 1　The positive rates of T-SPOT.TB group and TST group　(n=85，例數(shù)，%)

3　討　　論

結(jié)核病是慢性呼吸道傳染病，它嚴(yán)重危害著人體的健康和公共衛(wèi)生安全，是全世界都在努力遏制和重點(diǎn)防控的傳染病之一，而結(jié)核病感染控制是全球結(jié)核病控制的一項(xiàng)難題。據(jù)世界衛(wèi)生組織調(diào)查全球約20億人感染Mtb，絕大部分為LTBI[5]。LTBI是機(jī)體感染Mtb未被清除但不表現(xiàn)出任何臨床癥狀的一種特殊狀態(tài)，當(dāng)機(jī)體免疫功能下降的時(shí)候，休眠的Mtb被喚醒、繁殖，從而發(fā)展成為活動性肺結(jié)核病[6]?？梢奓TBI不是簡單的細(xì)菌暫停生長狀態(tài)，而是與宿主免疫系統(tǒng)的動態(tài)平衡[7]。因此，如何快速而準(zhǔn)確地診斷LTBI，如何采取有效的檢測方法及早發(fā)現(xiàn)LTBI者，并加以早期干預(yù)，減少其發(fā)展為結(jié)核病患者的概率，是結(jié)核病防控的關(guān)鍵，對結(jié)核病的防控意義重大。目前我國尚無診斷LTBI的標(biāo)準(zhǔn)，臨床上僅以TST陽性而無活動性結(jié)核病的臨床表現(xiàn)和影像學(xué)改變?yōu)榕袛嘁罁?jù)[8]。由于TST應(yīng)用的PPD是數(shù)百種抗原的混合物，與卡介苗及多種非結(jié)核分枝桿菌有交叉性抗原，在我國這樣一個卡介苗高接種率的國家，存在很高的假陽性[9]。自2010年以來T-SPOT.TB在我國飛速發(fā)展，文獻(xiàn)顯示其對結(jié)核菌的特異度及敏感度均達(dá)到80%以上[10]，尤其對診斷LTBI特異度更高，大有取代TST之勢。本研究對此進(jìn)行了初步的探討。

本研究結(jié)果顯示結(jié)核科醫(yī)護(hù)人員T-SPOT.TB陽性率為43.5%，提示LTBI明顯高于健康人群的4.7%，可見密切接觸傳染性結(jié)核病患者是感染Mtb的危險(xiǎn)因素。結(jié)核科是結(jié)核病患者尤其是高傳染性肺結(jié)核患者高度集中、頻繁活動的場所，極易造成病患與醫(yī)護(hù)人員之間的感染傳播，有資料顯示我國醫(yī)務(wù)人員結(jié)核分枝桿菌感染率在50%～70%之間，年均患病率在415/10萬～2240/10萬之間[11]。鑒于目前的國情，我國大部分結(jié)核防治機(jī)構(gòu)硬件設(shè)施不完善，這增大了結(jié)核科醫(yī)護(hù)人員感染Mtb的風(fēng)險(xiǎn)。張忠順等[12]利用T-SPOT.TB檢測結(jié)核病防治專業(yè)人員Mtb潛伏感染情況，結(jié)果顯示我國基層醫(yī)務(wù)工作者尤其是結(jié)核病防治專業(yè)人員受Mtb潛伏感染的危險(xiǎn)性高，且與接觸時(shí)間成正比。醫(yī)務(wù)人員被感染結(jié)核菌，一旦發(fā)病后果較嚴(yán)重，因?yàn)獒t(yī)務(wù)人員經(jīng)常與結(jié)核病人接觸，感染的Mtb不僅僅敏感菌，還有一部分是耐藥菌，尤其是耐多藥結(jié)核菌或是廣泛耐藥結(jié)核菌，對自身健康損害極大。我國分別于2010年和2012年發(fā)布了《中國結(jié)核感染預(yù)防控制手冊》和《中國結(jié)核感染控制標(biāo)準(zhǔn)操作程序》，開展對醫(yī)務(wù)人員Mtb感染控制宣教，加大感染控制經(jīng)費(fèi)投入等，但現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明我國大部分地區(qū)目前未能開展規(guī)范化培訓(xùn)和Mtb感染控制[13]。因此，國家制定并及時(shí)補(bǔ)充有效的防范政策及措施，各個醫(yī)療機(jī)構(gòu)(尤其是結(jié)核病專業(yè)防治機(jī)構(gòu))切實(shí)的貫徹和執(zhí)行，每個人防范意識的提高是保護(hù)我們不成為LTBI者的堅(jiān)實(shí)之盾。

本研究結(jié)核科醫(yī)護(hù)人員TST陽性率與健康人群組無明顯差異。這可以歸因于我國從上世紀(jì)50年代就對新出生的嬰兒常規(guī)接種卡介苗，而TST所應(yīng)用的PPD成分不單一，是200多個抗原的粗提純物，它與卡介苗及多種非結(jié)核分枝桿菌共享多個抗原表位，使TST特異度有限，故TST會導(dǎo)致一定數(shù)量的“假陽性”結(jié)果。

本研究中T-SPOT.TB顯示結(jié)核科醫(yī)護(hù)人員LTBI陽性率明顯低于TST，而T-SPOT.TB顯示健康人群LTBI陽性率明顯低于TST?？梢奣-SPOT.TB診斷LTBI較TST有更高的特異度。這得益于ESAT-6和CFP-10作為抗原，二者編碼來源于結(jié)核分枝桿菌基因中的一個菌種特異性基因片段。這個基因片段不存在于大部分的非結(jié)核分枝桿菌以及所有的牛型分枝桿菌(包括卡介苗)中[14]。研究顯示，T-SPOT.TB在診斷Mtb感染方面比TST有更高的特異度，WHO也強(qiáng)烈推薦T-SPOT.TB在部分資源條件許可的高收入和中高收入國家用于檢測LTBI[15]。

本研究一致性分析結(jié)果顯示T-SPOT.TB與TST的一致性較差，這可以歸因于T-SPOT.TB診斷準(zhǔn)確性的提高和由于我國廣泛接種卡介苗而導(dǎo)致的TST診斷準(zhǔn)確性下降。

綜上所述，密切接觸傳染性結(jié)核病患者是感染Mtb的危險(xiǎn)因素，其成為LTBI者的概率較非密切接觸人群明顯增高；T-SPOT.TB陽性結(jié)果與是否密切接觸傳染性結(jié)核病患者顯著相關(guān)，而TST陽性結(jié)果與是否密切接觸傳染性結(jié)核病患者無明顯相關(guān)，這可能與我國極高的卡介苗接種率有關(guān)；T-SPOT.TB診斷LTBI的特異度高于TST；T-SPOT.TB與TST的相關(guān)性較低，它為診斷LTBI提供了新的更為準(zhǔn)確的方法。

本研究的不足之處：結(jié)核專業(yè)組與健康人群組性別不匹配，結(jié)核病專業(yè)人員以女性居多，但T-SPOT.TB與性別分布關(guān)聯(lián)較小，故未做校正；由于實(shí)際條件所限，研究樣本量較小，且不同的醫(yī)院、不同的科室由于管理方法的不同，Mtb的感染率亦會不同，故更具說服力的調(diào)查應(yīng)在多家不同的醫(yī)院進(jìn)行，并進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，以求得出更完善的結(jié)論。

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(本文編輯：劉斯靜)

[收稿日期]2015-10-21；[修回日期]2015-11-15

[基金項(xiàng)目]河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題(1020140373)

[作者簡介]宋韜(1980-)，男，河北石家莊人，河北省胸科醫(yī)院主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事結(jié)核疾病診治研究。

[中圖分類號]R52

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

[文章編號]1007-3205(2016)07-0772-05

A comparative study of applying T-SPOT.TB and TST in the diagnosis of LTBI in TB professionals

SONG Tao1, LI Li-juan2, FU Hong-yi1

(1.Department of TB Medicine， Hebei Chest Hospital， Shijiazhuang 050041， China；2.First Department of Cadre's Ward, Bethune International PeaceHospital of Chinese PLA， Shijiazhuang 050082， China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the value of T-SPOT.TB in the diagnosis of latent tuberculous infection (LTBI) in TB professionals. MethodsEight-five cases of TB medical staff as TB professionals were selected. Eight-five cases of healthy people were selected for control group, all without previous TB history or symptoms and with normal chest film. Apply T-SPOT.TB was detected by the specific interferon γ (IFN-γ)level of the peripheral blood. Tuberculin skin test(TST) was used also. TB bacillus while carrying out parallel TST tests. ResultsT-SPOT.TB results show that the difference between the study group and the control group was statistically significant. TST indicates that there is no statistic difference between the 2 groups. The positive rate comparison of the two methods shows that there is statistic difference between the 2 groups(P<0.05). Consistency check indicates that there is poor consistency between the two test methods (Kappa=0.123). Conclusion①Closely contacting with TB infected patients is a risk factor which leads to MTB infection. People with close contact have a higher rate of becoming LTBI patients than those without close contact. ②T-SPOT.TB positive results are positively correlated with those who closely contact with TB infected patients, while TST positive results are not correlated, probably due to a very high BCG vaccination rate in China. ③T-SPOT.TB has a higher specificity than TST in LTBI diagnosis. ④T-SPOT.TB has a low correlation with TST and serves as a more accurate method of LTBI diagnosis.

[Key words]latent tuberculosis； tuberculin test； diagnosis