血漿sLOX-1水平與冠狀動(dòng)脈慢血流的相關(guān)性

任引剛， 劉　軍， 任一然， 張　昕， 韓　偉， 楚　軼， 李宏增*

(1第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院老年病科，西安　710038; 2第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院心內(nèi)科；*通訊作者，E-mail: tangduzhaoly@126.com)

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血漿sLOX-1水平與冠狀動(dòng)脈慢血流的相關(guān)性

任引剛1， 劉軍1， 任一然1， 張昕1， 韓偉2， 楚軼2， 李宏增1*

(1第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院老年病科，西安710038;2第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院心內(nèi)科；*通訊作者，E-mail: tangduzhaoly@126.com)

摘要：目的探討血漿可溶性凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1 (sLOX-1)水平與冠狀動(dòng)脈慢血流的相關(guān)性。 方法該研究共納入82名冠脈慢血流患者(慢血流組，n=82)及184名冠脈血流正常者(對(duì)照組，n=184)，采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定兩組的血漿sLOX-1水平并比較，采用參照心肌梗死溶栓治療后(thrombolysis in myocardial infarction，TIMI)血流幀數(shù)(TFC)評(píng)價(jià)冠脈血流速度。通過多元Logistic 回歸分析評(píng)價(jià)血漿sLOX-1水平與合并冠心病的獨(dú)立相關(guān)性，采用Spearman相關(guān)分析評(píng)價(jià)血漿sLOX-1水平與平均TMI-TFC的相關(guān)性。結(jié)果慢血流組患者血清sLOX-1水平顯著高于對(duì)照組[0.94(0.48-1.30)vs 0.47(0.39-0.86) ng/ml，P﹤0.001]。多元Logistic回歸分析顯示血漿sLOX-1水平是預(yù)測(cè)冠脈慢血流獨(dú)立危險(xiǎn)因子(優(yōu)勢(shì)比2.044, 95% 可信區(qū)間1.274-3.279;P=0.003)。Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，血漿sLOX-1水平與TIMI-TFC呈顯著正相關(guān)(rs=0.315，P=0.004)。結(jié)論血漿sLOX-1水平與冠脈慢血流的發(fā)生及嚴(yán)重程度存在獨(dú)立正相關(guān)，sLOX-1有望成為預(yù)測(cè)冠脈慢血流風(fēng)險(xiǎn)并對(duì)其進(jìn)行危險(xiǎn)分層的重要生物標(biāo)記物。

關(guān)鍵詞：心血管疾病;冠狀動(dòng)脈慢血流;可溶性凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1;生物學(xué)標(biāo)記物

冠狀動(dòng)脈慢血流現(xiàn)象(coronary slow flow phenomenon，CSFP)是一種冠脈造影時(shí)的血流現(xiàn)象，主要指在冠狀動(dòng)脈不存在顯著狹窄(狹窄程度﹤40%)的情況下，遠(yuǎn)端冠脈血管發(fā)生血流灌注延遲的現(xiàn)象[1，2]。據(jù)報(bào)道，在疑診冠心病進(jìn)行冠脈造影的人群中，大約有7%的患者會(huì)出現(xiàn)CSFP[3]。研究表明，CSFP與心絞痛發(fā)作、心肌梗死、惡性心律失常甚至心源性猝死等不良心血管事件有一定關(guān)聯(lián)[4，5]，因此越來越受到重視。

CSFP的病理生理機(jī)制仍未完全明確，前期研究表明，炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、冠脈內(nèi)皮功能不全等都可能在CSFP的發(fā)生發(fā)展中起一定作用[5,6]。凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)是一種主要表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)及巨噬細(xì)胞的Ⅱ型糖蛋白，其主要功能是結(jié)合、內(nèi)吞并降解氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)[7]。LOX-1與其配體的結(jié)合，可激活下游的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，廣泛參與炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、內(nèi)皮功能不全等病理生理過程[8,9]?；诖耍琇OX-1的高表達(dá)可能與CSFP的發(fā)生發(fā)展存在一定關(guān)聯(lián)。LOX-1跨膜的結(jié)構(gòu)域可以被水解為可溶性的sLOX-1，sLOX-1能夠反映LOX-1的表達(dá)水平[10]。因此，本研究檢測(cè)CSFP患者的血漿sLOX-1水平，并評(píng)價(jià)其與CSFP發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。

1材料與方法

1.1研究對(duì)象

本研究設(shè)計(jì)為前瞻性的橫斷面研究，研究對(duì)象為2013-05～2015-05在我院住院行冠脈造影的患者，共納入CSFP患者82例(慢血流組，n=82)，另外納入冠脈造影正常者184例作為對(duì)照(對(duì)照組，n=184)。CSPF定義為任一冠脈主支血管心肌梗死溶栓治療(thrombolysis in myocardial infarction，TIMI)血流幀數(shù)(TIMI frame count，TFC)>27[11]。主要排除標(biāo)準(zhǔn)：①急性冠脈綜合征；②心臟節(jié)律異常如心房顫動(dòng)及病態(tài)竇房結(jié)綜合征；③其他器質(zhì)性心臟病,如心肌病、嚴(yán)重的心瓣膜病、先天性心臟病或嚴(yán)重的心功能不全；④2型糖尿??；⑤嚴(yán)重的肝腎功能障礙；⑥惡性腫瘤。所有入選者(包括慢血流組及對(duì)照組)在行冠脈造影之前均按照臨床常規(guī)給予雙聯(lián)抗血小板、他汀穩(wěn)定斑塊等治療。

1.2研究方法

1.2.1冠脈造影按照常規(guī)方法行冠脈造影術(shù)，按照Gibson等[12]提供的方法計(jì)算主支冠脈血管的TIMI-TFC，將前降支血管的TFC除以1.7以校正其長(zhǎng)度[9]，將前降支(校正后)、回旋支、右冠的TFC加起來除以3取均值，即得到平均TFC。

1.2.2血生化檢測(cè)所有研究對(duì)象均采集清晨靜脈血10 ml，各常規(guī)血生化指標(biāo)如空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)由Hitachi 7600全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。使用Abbott ci8200全自動(dòng)分析儀測(cè)量超敏C反應(yīng)蛋白(Hs-CRP)。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)法檢測(cè)各組的sLOX-1水平，試劑盒購(gòu)自美國(guó)Cloud-Clone公司，各組血清標(biāo)本的吸光光度值由BIO-RAD680酶標(biāo)儀檢測(cè)。

1.3統(tǒng)計(jì)分析

采用Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)檢測(cè)數(shù)據(jù)分布的正態(tài)性。正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組比較采用t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用中位數(shù)(四分位差)表示，兩兩比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用百分率表示，兩兩比較采用秩和檢驗(yàn)。采用多因素Logistic逐步回歸法評(píng)價(jià)其與存在CSFP的獨(dú)立相關(guān)性。采用Spearman相關(guān)分析評(píng)價(jià)血漿sLOX-1水平與平均TFC的相關(guān)性。所有統(tǒng)計(jì)分析均采用SPSS17.0軟件進(jìn)行。雙側(cè)檢驗(yàn)P﹤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1基本臨床資料

除慢血流組的Hs-CRP 水平及TIMI-TFC均較對(duì)照組顯著升高外，其余各基線臨床資料兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見表1)。

表1兩組患者的基本臨床特征及冠脈造影結(jié)果

Table 1Baseline characteristics and angiographic findings

組別n年齡(歲)男性[例(%)]吸煙[例(%)]BMI(kg/m2)收縮壓(mmHg)舒張壓(mmHg)FBG(mmol/L)TC(mmol/L)對(duì)照組18456(50-63)112(60.87)79(42.93)25.27(23.98-26.25)131.65±16.6981.85±10.615.49±0.734.48±1.07慢血流組8255(50-65)53(64.63)41(50.00)25.30(24.37-26.42)133.10±17.2383.18±11.045.50±0.884.47±1.07檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量-0.1300.3411.143-0.543-0.648-0.936-0.0900.054 P 0.8970.5590.285 0.587 0.517 0.350 0.9280.957

組別nTG(mmol/L)LDL-C(mmol/L)HDL-C(mmol/L)Hs-CRP(mg/L)TIMI-TFC前降支(校正后)回旋支右冠平均TFC對(duì)照組1841.80(1.29-2.65)2.77±0.851.05±0.220.61(0.43-0.87)22.26±3.5920.57±2.6621.83±3.0321.76±2.55慢血流組821.91(1.55-2.57)2.93±0.981.01±0.230.80(0.47-1.29)30.89±7.9228.62±8.0531.33±8.4330.28±5.84檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量-1.279-1.2721.520-2.402-16.628-17.425-18.604-17.536 P0.2010.2040.1300.016﹤0.001﹤0.001﹤0.001﹤0.001

BMI：體質(zhì)量指數(shù)；FBG：空腹血糖；TC：總膽固醇；TG：甘油三酯；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇;Hs-CRP：超敏C-反應(yīng)蛋白;TIMI-TFC：血管心肌梗死溶治療血流幀數(shù)；與對(duì)照組相比，*P﹤0.05

2.2血漿sLOX-1水平

慢血流組患者血漿sLOX-1水平較對(duì)照組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[0.94(0.48-1.30)ng/mlvs0.47(0.39-0.86)ng/ml，P﹤0.001]。

2.3各變量與合并慢血流的獨(dú)立相關(guān)性

將各變量納入多因素Logistic逐步回歸分析，結(jié)果顯示，血漿sLOX-1水平是存在CSFP的獨(dú)立危險(xiǎn)因子(優(yōu)勢(shì)比2.044,95% CI 1.274-3.279;P=0.003,見表2)。

表2多元Logistic回歸分析評(píng)價(jià)CSFP的獨(dú)立危險(xiǎn)因子

Table 2Multiple Logistic regression analysis for the independent predictor of CSFP

變量BSEWalsOR95%CIP年齡0.0030.0150.0511.0030.974-1.0340.822男性0.0460.3160.0211.0470.563-1.9460.884吸煙-0.3020.3040.9870.7390.407-1.3420.321BMI0.0340.0640.2871.0350.913-1.11720.592收縮壓0.0050.0110.2041.0050.983-1.0270.652舒張壓0.0070.0170.1701.0070.973-1.0420.680FBG0.0480.1840.0691.0490.732-1.5050.793TC-0.0510.1390.1320.9510.723-1.2490.716TG0.1310.1620.6591.1410.830-1.5670.417LDL-c0.2040.1621.5831.2260.893-1.6830.208HDL-c-0.9360.6452.1080.3920.111-1.3880.147Hs-CRP0.0700.0591.4121.0720.956-1.2030.235sLOX-10.7150.2418.7802.0441.274-3.2790.003

2.4血漿sLOX-1水平與平均TFC的相關(guān)性

在CSFP患者中，我們進(jìn)一步評(píng)價(jià)了血漿sLOX-1水平與平均TFC的關(guān)系，Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，血漿sLOX-1水平與平均TFC的關(guān)系呈顯著正相關(guān)(rs=0.315，P=0.004，見圖1)。

圖1　患者血漿sLOX-1水平與平均TFC的相關(guān)性Figure 1　Correlation between plasma sLOX-1 levels and mean-TFC

3討論

隨著冠脈介入技術(shù)的普及，臨床上觀察到的CSFP越來越多，因?yàn)镃SFP與患者的預(yù)后存在一定的關(guān)聯(lián)[4,5]，其受到的重視程度也越來越高，早期預(yù)測(cè)CSFP發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)對(duì)于降低與其相關(guān)的各種臨床不良事件的發(fā)生率具有重要意義。而無創(chuàng)、簡(jiǎn)便快捷的生物學(xué)標(biāo)記物檢測(cè)在疾病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和危險(xiǎn)分層方面發(fā)揮著越來越重要的作用。

LOX-1是由ox-LDL受體1(OLR1)基因編碼的Ⅱ型糖蛋白，與大多數(shù)糖蛋白一樣，LOX-1可以通過其特有的結(jié)構(gòu)域特異性地結(jié)合下游的活性分子，廣泛參與機(jī)體的病理生理過程。LOX-1的主要配體有AGEs、CRP等，LOX-1與其配體結(jié)合后，通過激活多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，會(huì)加重冠脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷，并促進(jìn)平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞吞噬脂質(zhì)，并轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞[13-15]。另外，LOX-1能誘導(dǎo)各種黏附分子和炎癥因子的表達(dá)，促進(jìn)單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的黏附聚集[16-18]。上述病理生理過程與CSFP的發(fā)生密切相關(guān)。

LOX-1位于細(xì)胞外的結(jié)構(gòu)域可以被水解成sLOX-1并釋放入血，使其具備了成為血生物標(biāo)記物的基本條件。本研究首先發(fā)現(xiàn)，CSFP的血漿sLOX-1水平較對(duì)照者顯著升高，這初步表明血漿sLOX-1水平越高者在冠脈造影過程中出現(xiàn)CSFP的可能性就越大。在進(jìn)一步的多元Logistic回歸分析中發(fā)現(xiàn)，在排除了混雜因素干擾后，血清sLOX-1水平與CSPF存在具有獨(dú)立正相關(guān)的趨勢(shì)，這一結(jié)果表明高血漿sLOX-1水平是CSFP發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因子。因兩組患者在基線臨床資料方面的不一致性，我們進(jìn)一步進(jìn)行了多項(xiàng)二元Logistic回歸分析，結(jié)果表明，在排除了各種混雜因素干擾后，高血清sLOX-1水平是CSFP發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因子。因臨床實(shí)踐中常用平均TFC來評(píng)價(jià)CSFP的嚴(yán)重程度，我們進(jìn)一步在CSFP患者中評(píng)價(jià)了血漿sLOX-1水平與平均TFC的相關(guān)性，研究結(jié)果顯示，血漿sLOX-1水平與CSFP患者的冠脈平均TFC呈正相關(guān)，這一研究結(jié)果表明，血漿sLOX-1水平也能反映CSFP的嚴(yán)重程度。

總之，我們發(fā)現(xiàn)血漿sLOX-1水平與CSFP的發(fā)生及嚴(yán)重程度存在獨(dú)立正相關(guān)，sLOX-1有望成為預(yù)測(cè)CSFP風(fēng)險(xiǎn)并對(duì)其進(jìn)行危險(xiǎn)分層的重要的生物標(biāo)記物。然而，本研究是一個(gè)小樣本量的橫斷面研究，在將本研究結(jié)論應(yīng)用于臨床實(shí)踐之前，研究結(jié)論尚需要大樣本的前瞻性研究來證實(shí)。

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作者簡(jiǎn)介：任引剛，男，1978-03生，本科，主治醫(yī)師，E-mail:sxrenyingang@163.com

收稿日期：2016-03-16

中圖分類號(hào)：R541.4

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1007-6611(2016)07-0589-04

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2016.07.002

Correlation between plasma sLOX-1 levels and coronary slow flow phenomenon

REN Yingang1, LIU Jun1, REN Yiran1, ZHANG Xin1, HAN Wei2, CHU Yi2, LI Hongzeng1*

(1DepartmentofGeriatrics,TangduHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi’an710038,China;2DepartmentofCardiology,TangduHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity;*Correspondingauthor，E-mail:tangduzhaoly@126.com)

Abstract：ObjectiveTo explore the correlation between plasma sLOX-1 levels and coronary slow flow phenomenon(CSFP).MethodsEighty-two patients with CSFP and 184 controls with normal coronary flow were enrolled. Plasma sLOX-1 levels were determined by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) and compared between the two groups. Coronary flow rate was assessed by thrombolysis in myocardial infarction(TIMI) frame count (TFC). Multivariate Logistic regression was used to analyze the independent association between plasma sLOX-1 levels and CSFP. Spearman correlation coefficient was performed to assess the correlation between plasma sLOX-1 levels and mean-TFC.ResultsPlasma sLOX-1 levels in CSFP group were significantly higher than those in control group[0.94(0.48-1.30) ng/ml vs 0.47 (0.39-0.86)ng/ml, P﹤0.001]. Multivariate Logistic regression analysis demonstrated that sLOX-1 was the independent predictor of CSFP(odds ratio 2.044, 95% CI 1.274-3.279; P=0.003). Spearman correlation analysis revealed that plasma sLOX-1 level was positively correlated with mean-TFC (r=0.311,P=0.004). ConclusionThe plasma sLOX-1 levels is independently associated with the presence and severity of CSFP, suggesting that sLOX-1 might be a potential biomarker for CSFP prediction and risk stratification.

Key words:cardiovascular disease;coronary slow flow phenomenon;sLOX-1;biomarker