• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    分子診斷技術應用于運動分子生物學科研的研究進展

    2016-08-10 02:18:57王曉紅張冠男邢麗麗
    河北體育學院學報 2016年4期

    王曉紅,張冠男,張 棟,王 清,邢麗麗

    (1.河北省體育局 田徑運動管理中心,石家莊 050000;2.河北省體育科學研究所,石家莊 050000)

    ?

    分子診斷技術應用于運動分子生物學科研的研究進展

    王曉紅1,張冠男2,張棟2,王清2,邢麗麗2

    (1.河北省體育局 田徑運動管理中心,石家莊050000;2.河北省體育科學研究所,石家莊050000)

    摘要:近年來,隨著新的分子診斷技術的不斷發(fā)展,從分子水平上評價運動員在調整期、訓練期和比賽期的體質、狀態(tài)已成為可能。分子診斷技術早在2000年就應用于國內的競技體育科研中,其主要應用在運動員選材、運動疲勞機理、運動誘導骨骼肌適應、基因治療技術、基因興奮劑檢測等幾方面??偨Y了各種新的分子診斷技術在運動分子生物學科研中的應用原理及優(yōu)缺點,并指出未來其發(fā)展方向將側重于以下幾方面:①快速、簡便的等位基因檢測方法在運動員選材和運動遺傳病篩查中的應用;②應用基因技術對運動員選材的地域和種族多態(tài)性進行劃分;③基因興奮劑檢測技術的革新。

    關鍵詞:分子診斷;基因選材;疲勞機理;基因興奮劑

    1分子診斷及運動分子生物學

    分子診斷技術是應用分子生物學方法檢測患者體內遺傳物質的結構或表達水平的變化而做出診斷的技術,分子診斷是預測診斷的主要方法,其對象主要包括DNA、RNA和蛋白質。

    分子生物學的研究對運動生命科學的發(fā)展起著巨大的推動作用,在此基礎上發(fā)展起來的運動分子生物學,是通過運用分子診斷技術,闡釋運動過程中各種生命現(xiàn)象的機理,了解運動對機體影響的實質的科學。通過分子診斷技術基因多態(tài)性的研究可以盡早發(fā)現(xiàn)具有特殊競技能力的人才,提高優(yōu)秀運動員選材的準確性;還可以借此了解個體對運動訓練的適應能力,制訂個性化運動處方,提高訓練的科學性;可以從分子水平上了解運動性疲勞產(chǎn)生的規(guī)律,開發(fā)用于預測運動員過度疲勞的基因芯片;轉基因技術可以改造營養(yǎng)補充劑,使其更符合運動項目特點,實施運動營養(yǎng)藥物的創(chuàng)新;基因治療技術將用于運動損傷的治療,加快運動損傷的康復,減少損傷的復發(fā);對蛋白質的診斷有助于了解運動對蛋白三維結構和功能的影響,采用人工手段干預蛋白質的結構和功能,達到提高運動能力的目的??傊?,分子診斷技術的發(fā)展必將大大推動運動分子生物學的進步,為運動訓練科學化做出貢獻。

    2分子診斷在運動分子生物學中的應用

    2.1運動相關疾病的臨床預防診斷

    近年來,隨著新的基因擴增技術不斷發(fā)展,NASBA、3SR、SDA、RT-PCR、nest-PCR、multiplex PCR、PCR-RFLP、IEXPAR、AS-PCR、cDNA等新的特定基因檢測技術不斷涌現(xiàn)。隨著運動分子生物學的不斷發(fā)展,研究人員發(fā)現(xiàn),一些運動相關疾病是由特定基因的多態(tài)性引起的,具有顯著的遺傳性,如心源性猝死、肌腱炎、手指腱鞘炎、韌帶斷裂等,這些運動損傷和疾病的發(fā)生不僅影響運動員的競技能力和運動職業(yè)生涯,甚至危及健康和生命。

    BMP4由腱細胞產(chǎn)生,為肌腱提供穩(wěn)定的定位點,能夠降低過度運動對軟組織產(chǎn)生的壓力[1],F(xiàn)GF3、FGF10和FGFR1相互作用有促進有絲分裂、細胞遷移、分化和傷口愈合等多種生物學功能[2]。Salle等人[3]研究了138名18歲和35歲之間、每天接受4-5小時訓練的排球運動員的肌腱狀況,通過核磁共振成像觀察有疼痛反應的運動員的肌腱髕骨、腳踝、肩胛和髖外展肌等處的肌腱,并從其中提取唾液樣本的DNA,使用TaqMan實時定量PCR比較組間基因型差異。發(fā)現(xiàn)BMP4和FGF3基因單倍型與運動員肌腱病變高度相關,F(xiàn)GF10基因參與肌腱病變過程,F(xiàn)GFR1基因多態(tài)性與肌腱病變無相關性。

    前交叉韌帶斷裂(ACL)是最嚴重的骨骼肌軟組織損傷之一,然而產(chǎn)生這種傷病的機制尚未明確。Posthumus等人[4]發(fā)現(xiàn)存在間質金屬蛋白酶的染色體11q22片段與ACL 的發(fā)病有密切關系。Raleigh等人[5]通過研究126名歐洲人種ACL病患者和214名對照者發(fā)現(xiàn),GDF5基因的多態(tài)性位點(rs143383)和ACL跟腱病變的風險相關。Posthumus等人[6]對129名(女性38名)ACL疾病患者組和216名(女性83名)正常對照者進行研究,所有參與者進行COL12A1基因分型ALU1和BSRI限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)分析。研究結果表明,ALU1限制性片段長度多態(tài)性的AA基因型與女性患ACL疾病的風險相關聯(lián),與男性無關聯(lián)性;BSRI限制性片段長度多態(tài)性基因表達與ACL疾病風險不相關。

    扳機指的發(fā)病往往歸因于第一環(huán)狀韌帶損傷,但Lundin等人[7]發(fā)現(xiàn),其病變部位出現(xiàn)與跟腱炎或肌腱炎類似的變化,因此,推測手指肌腱在病變時會和跟腱炎出現(xiàn)相似的基因表達差異。對13名病患者及13名正常對照者的10組(膠原蛋白型1a1、 collagen 3a1、MMP-2、MMP-3、ADAMTS-5、TIMP-3、雙鏈蛋白聚糖、雙糖鏈蛋白多糖、核心蛋白聚糖、多功能蛋白聚糖)基因表達進行差異化分析,在病患的手指肌腱,膠原蛋白型1a1和3a1、雙鏈蛋白聚糖和雙糖鏈蛋白多糖均顯著性上調,MMP-3和TIMP-3顯著性下調,其余四個基因沒有顯著改變,這種基因表達的改變支持扳機指屬于肌腱病變的理論,為臨床上應用外科手術治療肌腱病變提供了參考。

    運動猝死與多種遺傳性心臟疾病有關。Shah 等人[8]以2 847名實驗參與者為模型,研究了NOS1AP基因28個SNPs位點,結果表明,歐洲人的NOS1AP基因與QT間期的關聯(lián)性比其他種族更為顯著,每一次rs1932933等位基因的復制都會相應延長QT間期(4.9 msec,P=7.20×10-7)。黃京璐等人[9]通過研究60例不明原因猝死人群和80例正常人群的NOS1AP 部分SNP位點,發(fā)現(xiàn)NOS1AP第6外顯子區(qū)域的s3751284 位點可能是不明原因猝死的易感基因位點。Koskela等人[10]通過對1 963例芬蘭志愿者進行運動測試,發(fā)現(xiàn)體育運動對心源性猝死有一定的誘導作用。

    2.2運動誘導骨骼肌適應及相關疾病的診斷

    表1 與miRNAs相關的骨骼肌疾病[13]

    骨骼肌功能疾病主要包括肌營養(yǎng)不良癥、多發(fā)性肌炎、線粒體肌病、肌肉萎縮、肌肉肥大、肌強直、炎癥性肌肉疾病及先天性肌病等,近年研究發(fā)現(xiàn),miRNAs異常可能是引發(fā)或延緩這些疾病的原因。

    McCarthy等人[11]通過誘導小鼠骨骼肌肥大試驗,發(fā)現(xiàn)在小鼠的跖肌和比目魚肌特異性miRNAs中,miR-206的表達不變,miR-1和miR-133的表達卻都下降了50%,首次證明了肌肉特異性miRNAs對骨骼肌肥大有一定作用。

    肌肉萎縮癥是一類以消瘦虛弱肌肉為特征的遺傳疾病,McCarthy等人[12]通過后肢懸掛誘導肌肉萎縮研究大鼠比目魚肌miRNAs的表達變化,實驗后發(fā)現(xiàn)18種miRNAs的表達有明顯變化,推測其機制可能為通過miRNA-499間接調控b-肌球蛋白抑制子(sox6)的表達。

    肌營養(yǎng)不良癥是一種原發(fā)于肌肉的遺傳性變性疾病,組織學特征為肌纖維壞死、再生和脂肪及結締組織增生。Greco等人[14]通過比較mdx小鼠與野生型小鼠、Duchenne型肌營養(yǎng)不良患者與正常人骨骼肌組織中表達改變的miRNA,發(fā)現(xiàn)有11個miRNA在mdx小鼠和Duchenne 型肌營養(yǎng)不良患者中有類似的表達改變。

    肌萎縮側索硬化癥(漸凍人癥)是運動神經(jīng)元病的一種,在ALS動物模型運動元再生過程中,miR-206調控HDAC4發(fā)揮著關鍵作用。Williams等人[15]發(fā)現(xiàn)在ALS模型小鼠中miR-206表達顯著增加。Velleca等人[16]發(fā)現(xiàn)在骨骼肌發(fā)育過程中,miR-206分子的前體在運動終板形成區(qū)域呈現(xiàn)優(yōu)勢表達分布。

    2.3運動員選材

    運動能力受遺傳因素影響很大。當前,有超過200個染色體位點和18個線粒體DNA多態(tài)性位點被發(fā)現(xiàn)與人的肌肉力量、體力活動水平、耐力水平和個人訓練效果相關。

    De Moor等人[17]通過GWAS分析研究了荷蘭及美國人的體力活動水平,發(fā)現(xiàn)位于3’-磷酸腺苷5’-磷酰硫酸合成酶2基因的rs10887741與體力活動水平關聯(lián)最大。夏小慧[18]發(fā)現(xiàn)AMPKa2基因rs2796516位點G等位基因、rs2746342-rs11206889位點AC單體型等基因可能是優(yōu)秀長跑運動員的分子標記。

    對著名的“冠軍基因”α-輔肌動蛋白3(ACTN3)基因第577密碼子進行的多態(tài)分析是肌肉力量遺傳學研究中的經(jīng)典。陳偉民等人[19]采用等位基因特異性PCR 法擴增目的基因, 建立了靈敏、快速的ACTN3-C17基因多態(tài)性檢測方法。

    人類最大有氧耐力的遺傳度為30%—80%,目前被細致描述的與耐力素質相關的基因位點共有49個,但由于受樣本量、種族差異、地域差異等影響,大部分位點的確切效應并不明確。鄧瀟瀟等人[20]發(fā)現(xiàn)12 722位點T等位基因與馬拉松跑能力有關聯(lián)。Thomaes等人[21]發(fā)現(xiàn)GPS對預測冠心病患者最大攝氧量訓練效果增加與否效果顯著,而位于AMP脫氨酶1基因、睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子基因和糖皮質激素受體基因的rs1800169、rs17602729、rs6190與耐力水平變化有關。楊曉琳等人[22]發(fā)現(xiàn)G1357A多態(tài)位點GG基因型可以作為中國女性優(yōu)秀舉重運動員選材用候選分子遺傳學標記。吳劍[23]發(fā)現(xiàn)UCP2基因3’-UTR 45bp Ins/Del DD型與有氧運動能力有關;OGDHL基因rs 1268722 AA型與超長跑有氧運動能力有關;ACSL4基因rs5943427 GG型、rsl324805 TT型、rs5943427-rsl324805(GT)單體型與男子長跑運動員有氧運動能力有關。

    表2 目前發(fā)現(xiàn)的一些可能用于運動員選材標記的基因

    續(xù)表

    2.4基因興奮劑的檢測

    表3 目前發(fā)現(xiàn)的可能被用于興奮劑基因的種類、蛋白表達、作用及檢測方法

    Else:Transcription factor Pax7 gene(Pax7 protein:One paired domain made up with 128 amino acids),F(xiàn)ATP1 gene(FATP),CD36 gene,Insulin receptor gene,GLUTs gene(Glucose transport protein).

    國際反興奮劑組織將基因興奮劑定義為以非治療目的用于提高運動員運動能力的基因、遺傳元件和(或)細胞。利用基因治療的手段可以使運動員獲得競技優(yōu)勢。但由于基因治療技術尚不成熟,基因興奮劑無法控制插入的目的基因,導致細胞的某些機能失常,因此存在很多危害。例如EPO的使用可導致高血壓,hGH過量可導致腫瘤,IGF-I可導致肌肉過度生長、結締組織損傷等癥狀。還有一類基因興奮劑為重組蛋白,其與內源蛋白結構極為相似,造成檢測非常困難。目前發(fā)現(xiàn)的有EPO、HIFs、CERA、ACE、hGH、IGF-I、MGF、FGF、VEGF、PPAR-δ、Myostatin Leptin、Follistatin等90余個潛在具有興奮劑作用的基因。檢測基因興奮劑的方法主要是檢測常規(guī)生化指標、導入基因和表達蛋白質等方法,以及用基因表達譜、蛋白質譜、代謝譜、活體成像等新技術檢測目的基因及蛋白質。

    肖衛(wèi)華等人[24]通過常規(guī)PCR多管擴增技術建立了實時定量RT-PCR法檢測機械生長因子(MGF)基因表達。結果表明,熒光定量RT-PCR法能絕對定量MGF興奮劑基因表達水平,相關系數(shù)大于0.99。

    呂國平等人[25]建立了PPAR-δ高通量篩選模型,通過檢測螢光素酶基因表達狀況評價化合物對目的基因的激動活性,此模型方法靈敏穩(wěn)定,可用于篩選PPAR-δ的激動劑。

    重組人促紅細胞生成素(rhEPO)和重組人生長激素(rhGH)等已被國際奧委會禁用,通過免疫分析法可以測定血清中的EPO 濃度,其中以酶聯(lián)免疫分析、化學發(fā)光免疫分析和放射免疫分析為主。

    Kawasaki等人[26]將 LC-MS及石墨化碳柱結合,可對 CHO細胞表達的rhEPO各種糖基化位點、與位點特異性直接相關的糖微觀不均一性、糖的結構進行分析,以及鑒別出BHK細胞表達的rhEPO所特異具有的硫酸化N-連接多糖部分。

    3結論與展望

    在運動相關疾病的臨床預防診斷中,我們發(fā)現(xiàn)某些特定基因的多態(tài)性能夠引起一些運動相關疾病,然而,還需要進行大量不同種族、不同人群、不同運動方式的研究,包括檢測方法的研究、功能學研究等,以闡明蛋白質在筋腱修復過程中的機制、筋腱的衰退過程等。這項工作的開展能夠提供分子生物學科研的新視角,為發(fā)掘副作用小、療效好的新型治療方法提供參考,一旦發(fā)現(xiàn)運動員有潛在傷病危險,教練和隊醫(yī)可以通過外部干預和調整訓練計劃來規(guī)避風險。

    骨骼肌疾病是世界性健康問題,近年來很多研究闡明了一些miRNAs在骨骼肌疾病中的作用機制,大部分集中在遺傳和神經(jīng)性骨骼肌疾病中,而對其他骨骼肌疾病研究很少,我們應該更進一步地探索miRNAs對骨骼肌疾病的作用,使得科研覆蓋面更廣、醫(yī)療應用性更強。

    分子診斷技術在運動能力遺傳學上應用的研究越來越多,人們對運動遺傳學的理解也不斷加深,但多數(shù)研究都僅針對不同種族、不同人群中已知基因位點與運動能力關聯(lián)性的重復檢驗,而新基因、新位點的探索卻漸入瓶頸。在對基因多態(tài)性影響運動能力的研究中,一些基因可以作為預測某種運動能力強弱的遺傳標記,但其基因型影響人體運動能力的機制尚不明確,如ACE基因就是現(xiàn)在國內外研究比較深入的基因之一,很多研究表明ACE基因與人體有氧運動之間存在顯著相關性,但是也有很多研究不支持此觀點,J. R. Ruiz[1]等人通過研究發(fā)現(xiàn),并沒有充分的證據(jù)表明ACTN3基因能夠促進西班牙游泳運動員的運動能力,GUAN WANG等人[2]也持同樣觀點。另有一些研究表明,某種運動的優(yōu)勢基因,對于另一種運動可能是劣勢基因,Sigal Ben-Zaken[27]等人研究發(fā)現(xiàn),IGF-IR AA基因多態(tài)性有利于耐力型運動,但對于力量型運動則表現(xiàn)出不利的影響。筆者相信,隨著各種分子生物學技術的日益成熟、國際間合作的不斷增多及統(tǒng)計學方法的不斷創(chuàng)新,與運動能力有關的新基因、蛋白及機制研究將大量涌現(xiàn),人們將能夠更系統(tǒng)、全面地描繪運動能力的遺傳圖譜。

    反基因興奮劑需要不斷關注基因治療技術的研究進展,及時對基因興奮劑檢測研究制訂針對性目標,才能最大限度地縮小兩者出現(xiàn)的時間差。同時,基因興奮劑的檢測涉及化學、醫(yī)學、生物學等多個研究領域,針對基因興奮劑檢測中的系列問題,需要充分利用光譜和電化學、免疫技術、核酸雜交技術結合質譜等手段,不斷發(fā)展新的技術應用于基因興奮劑的檢測,例如分子成像技術、生物傳感器技術以及更先進的分析軟件等,才能不斷更新高靈敏度的分析方法,并建立檢測新型基因興奮劑的方法。

    參考文獻:

    [1]Ruiz J R, Santiago C, Yvert T,et al.ACTN3 genotype in Spanish elite swimmers: No “heterozygous advantage”[J].Scand J Med Sci Sports,2013,23(3):162-167.

    [2]Wang G, Mikami E, Chiu L L,et al.Association Analysis of ACE and ACTN3 in Elite Caucasian and East Asian Swimmers [J].Med Sci Sports Exerc,2013,45(5):892-900.

    [3]Salles J I, Amaral M V, Aguiar D P,et al.BMP4 and FGF3 haplotypes increase the risk of tendinopathy in volleyball athlete [J].Journal of Science and medincine in sport,2015,18(2):150-155.

    [4]Posthumus M, Collins M, van der Merwe L,et al. Matrix metalloproteinase genes on chromosome 11q22 and the risk of anterior cruciate ligament (ACL) rupture [J]. Scand J Med Sci Sports,2012,22(4):523-533.

    [5]Raleigh S M, Posthumus M, O’Cuinneagain D,et al.The GDF5 Gene and Anterior Cruciate Ligament Rupture [J].Int J Sport Med,2013,34(4):364-367.

    [6]Posthumus M, September AV, O’Cuinneagain D,et al.The association between the COL12A1 gene and anterior cruciate ligament ruptures [J]. Br J Sports Med,2010,44(6):1160-1165.

    [7]Lundin A C, Aspenberg P, Eliasson P. Trigger finger, tendinosis,and intratendinous gene expression [J]. Scand J Med Sci Sports,2014,24(2): 363-368.

    [8]Shah S A, Herrington D M, Howard T D, et al. Associations between NOS1AP Single Nucleotide Polymorphisms (SNPs) and QT Interval Duration in Four Racial/Ethnic Groups in the Multi-Ethnic Study of Atherosclerosis (MESA) [J].Ann Noninvasive Electrocardiol, 2013,18(1):29-40.

    [9]黃京璐,郝博,王小廣.中國漢族人群不明原因猝死與NOS1AP基因多態(tài)性的相關性[J].法醫(yī)學雜志,2014,30 (1):27-35.

    [10]Koskela J, K?h?nen M, Nieminen T,et al.Allelic variant of NOS1AP effects on cardiac alternans of repolarization during exercise testing[J]. Scand J Clin Lab Invest,2012,72(2):100-107.

    [11]McCarthy J J, Esser K A.MicroRNA-1 and microRNA-133a expression are decreased during skeletal muscle of mdx mouse[J].J Appl Physiol,2007,102(1):306-313.

    [12]McCarthy J J, Esser K A, Peterson C A,et al.Evidence of MyomiRnetwork regulation of beta-myosin heavy chain gene expression during skeletal muscle atrophy[J].Physiol Genomics,2009,39(3):219-226.

    [13]李莎莎,于新凱.microRNAs與骨骼肌疾病[J].解剖科學進展,2014,20(1):82-86.

    [14]Greco S, De Simone M,Colussi C,et al.Common microRNA signature in skeletal muscle damage and regeneration induced by Duchenne muscular dystrophy and acute ischemia[J]. FASEB J,2009,23(10):3335-3346.

    [15]Williams A H,Valdez G,Moresi V,et al.MicroRNA-206 Delays ALS Progression and Promotes Regeneration of Neuromuscular Synapses in Mice[J].Science,2009,326(5959):1549-1554.

    [16]Velleca M A,Wallace M C,Merlie J P.A novel synapse-associated noncoding RNA[J].Mol Cell Biol,1994,14(11):7095-7104.

    [17] De Moor M H, Liu Y J, Boomsma D I,et al.Genome-wide association study of exercise behavior in Dutch and American adults[J].Med Sci Sports Exerc,2009,41(10):1887-1895.

    [18]夏小慧. AMPK及其下游基因與有氧運動能力相關分子標記篩選及功能研究[D].北京:北京體育大學,2011.

    [19]陳偉民,婁婧婧,趙廣才.速度/爆發(fā)力相關基因ACTN3-C1747T多態(tài)性快速檢測方法[J].中國運動醫(yī)學雜志,2014,33(3):229-232.

    [20]鄧瀟瀟,胡揚,楊賢罡,等.中國專業(yè)長跑運動員V型膠原蛋白a1鏈基因多態(tài)性分析[J].中國運動醫(yī)學雜志, 2013,32(11): 955-960.

    [21]Thomaes T, Thomis M, Onkelinx S.A genetic predisposition score for muscular endophenotypes predicts the increase in aerobic power after training: the CAREGENE study[J].BMC Genet, 2011, 12(1):1-10.

    [22]楊曉琳,胡揚,李燕春.睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子基因G1357A多態(tài)位點作為舉重運動員選材用分子標記可行性研究[J].中國運動醫(yī)學雜志,2014,33(4):308-311.

    [23]吳劍.ATP合成調控相關蛋白基因與有氧運動能力相關的分子標記研究[D].北京:北京體育大學,2013.

    [24]肖衛(wèi)華,陸耀飛.機械生長因子實時熒光定量RT-PCR 檢測方法研究[J].上海體育學院學報,2010,34(6):43-45.

    [25]呂國平,鄭智慧,趙寶華.PPARD激動劑高通量篩選模型的建立[J].生物工程學報,2007,23(2):343-346.

    [26]Kawasaki N,Ohta M,Hyuga S,et al.Application of liquid chromatography/mass spectrometry and liquid chromatography with tandem mass spectrometry to the analysis of the site-specific carbohydrate heterogeneity in erythropoietin[J].Anal Biochem,2000,285(1):82-91.

    [27]Ben S.IGF-I receptor 275124A>C (rs1464430) polymorphism and athletic performance Sigal[J].Journal of Science and Medicine in Sport, 2014, 18(3):323-327.

    收稿日期:2016-03-09

    基金項目:河北省體育局體育科技項目(20151011;20151015)

    作者簡介:王曉紅(1978-),女,河北趙縣人,助理研究員,研究方向為運動醫(yī)學和運動訓練。

    中圖分類號:G804

    文獻標志碼:A

    文章編號:1008-3596(2016)04-0089-08

    Research Progress of the Application of Molecular Diagnostic Techniques in Sports Molecular Biology

    WANG Xiao-hong1, ZHANG Guan-nan2, ZHANG Dong2, WANG Qing2, Xing Li-li2

    (1.Track and Field Sports Management Center, Sports Bureau of Hebei Province, Shijiazhuang 050000, China;2.Sports Science Institute of Hebei Province, Shijiazhuang 050000, China)

    Abstract:In recent years, with the continuous development of new molecular diagnostic techniques, it has become possible to evaluate physique and athletic state of athletes at the molecular level during the adjustment, training, and competition periods. Molecular diagnostic techniques were applied to domestic sports scientific research as early as the year of 2000, and its application mainly lie in athlete selection, mechanism of sports fatigue, exercise-induced skeletal muscle adaptation, gene therapy, gene doping detection. This article summarizes a variety of application principles of new molecular diagnostic techniques and their advantages and disadvantages in sport molecular biology researches, and puts forward that in the future, the following directions of its development should be focused on: (1) Application of rapid and easy allelic gene detection method in athlete selection and sports genetic disease screening; (2) Application of gene techniques in dividing the regional and ethnic polymorphism of athlete selection; (3) Innovation of gene doping detection techniques.

    Key words:molecular diagnostics; athlete selection by gene; fatigue mechanism; gene doping

    丝袜在线中文字幕| 久久人妻熟女aⅴ| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产一区二区三区av在线| 国产在线视频一区二区| 精品人妻一区二区三区麻豆| 黄色视频在线播放观看不卡| 两个人看的免费小视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 老女人水多毛片| 久久午夜福利片| 七月丁香在线播放| 老鸭窝网址在线观看| 久久女婷五月综合色啪小说| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 男女午夜视频在线观看| 9热在线视频观看99| 亚洲av福利一区| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 精品国产乱码久久久久久小说| 国产午夜精品一二区理论片| 999精品在线视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 免费高清在线观看视频在线观看| 人妻一区二区av| 熟妇人妻不卡中文字幕| 亚洲综合精品二区| 97在线视频观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 色网站视频免费| 久久精品国产亚洲av涩爱| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 嫩草影院入口| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产精品一国产av| 午夜福利在线免费观看网站| 午夜影院在线不卡| 自线自在国产av| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 免费观看a级毛片全部| 交换朋友夫妻互换小说| 精品少妇黑人巨大在线播放| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 久久久久国产一级毛片高清牌| 免费高清在线观看视频在线观看| 黑丝袜美女国产一区| 伦精品一区二区三区| 国产乱人偷精品视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 久久综合国产亚洲精品| 七月丁香在线播放| 精品国产乱码久久久久久小说| 91午夜精品亚洲一区二区三区| av有码第一页| 少妇被粗大的猛进出69影院| av在线app专区| 久久久久国产精品人妻一区二区| av卡一久久| 久久综合国产亚洲精品| 国产国语露脸激情在线看| 交换朋友夫妻互换小说| 久久精品国产亚洲av涩爱| 丝袜喷水一区| 男人舔女人的私密视频| 国产成人aa在线观看| 亚洲四区av| 精品午夜福利在线看| 91aial.com中文字幕在线观看| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲国产精品999| 亚洲欧美色中文字幕在线| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久人人爽人人片av| 一区二区三区激情视频| 最近的中文字幕免费完整| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 久久久久网色| 日韩欧美精品免费久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产精品 欧美亚洲| 大码成人一级视频| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 最黄视频免费看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 国产福利在线免费观看视频| 日本免费在线观看一区| 成人免费观看视频高清| 午夜福利乱码中文字幕| 99久久人妻综合| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 最近的中文字幕免费完整| av女优亚洲男人天堂| 99久久综合免费| 黄色怎么调成土黄色| 久久久久人妻精品一区果冻| 久久精品国产自在天天线| 国产 精品1| 免费黄色在线免费观看| 一级黄片播放器| 久久久精品免费免费高清| 欧美亚洲日本最大视频资源| 最近的中文字幕免费完整| 在线免费观看不下载黄p国产| 性色avwww在线观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲国产精品一区三区| 国产精品免费大片| 亚洲综合色惰| 亚洲av成人精品一二三区| 男女边摸边吃奶| 中文天堂在线官网| 永久免费av网站大全| 大陆偷拍与自拍| 久久鲁丝午夜福利片| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲第一青青草原| 涩涩av久久男人的天堂| 如何舔出高潮| 亚洲精品在线美女| 久久国内精品自在自线图片| 大片免费播放器 马上看| 热re99久久国产66热| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产av国产精品国产| 伦理电影免费视频| 伦理电影免费视频| 激情五月婷婷亚洲| 啦啦啦在线观看免费高清www| 欧美日韩视频精品一区| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| av免费在线看不卡| 少妇人妻 视频| 亚洲国产av新网站| 欧美精品国产亚洲| www.熟女人妻精品国产| 中国国产av一级| 久久热在线av| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 精品第一国产精品| 在线观看国产h片| 天堂8中文在线网| 久久99热这里只频精品6学生| 日韩成人av中文字幕在线观看| 午夜免费鲁丝| 男男h啪啪无遮挡| 欧美人与性动交α欧美软件| 在线 av 中文字幕| 亚洲精品第二区| 丰满饥渴人妻一区二区三| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 丝袜在线中文字幕| 亚洲伊人色综图| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 在线观看国产h片| 夫妻午夜视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 日本爱情动作片www.在线观看| 精品少妇内射三级| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 久久精品夜色国产| 18禁动态无遮挡网站| av在线app专区| 考比视频在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 免费大片黄手机在线观看| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 街头女战士在线观看网站| 久久这里只有精品19| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 久久韩国三级中文字幕| 人妻人人澡人人爽人人| 9热在线视频观看99| 啦啦啦啦在线视频资源| 丝瓜视频免费看黄片| 一级爰片在线观看| 美女午夜性视频免费| 久久av网站| 黑丝袜美女国产一区| 久久久亚洲精品成人影院| 制服诱惑二区| 国产97色在线日韩免费| 国产高清国产精品国产三级| 色播在线永久视频| 日韩免费高清中文字幕av| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 天美传媒精品一区二区| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲综合色网址| 多毛熟女@视频| 日韩制服骚丝袜av| 国产激情久久老熟女| 2021少妇久久久久久久久久久| 韩国av在线不卡| 国产成人欧美| 三上悠亚av全集在线观看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲第一av免费看| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 青春草视频在线免费观看| 伦精品一区二区三区| 在线天堂最新版资源| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 婷婷色麻豆天堂久久| 一区二区av电影网| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产精品一区二区在线不卡| 久久97久久精品| 久久午夜福利片| 国产精品久久久久成人av| 欧美日韩av久久| 中文字幕制服av| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 在线观看免费视频网站a站| 久久久久国产网址| 国产成人精品无人区| 久久免费观看电影| 婷婷色综合大香蕉| av免费在线看不卡| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 午夜91福利影院| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产在线一区二区三区精| 男女无遮挡免费网站观看| 十八禁网站网址无遮挡| 精品福利永久在线观看| 国产一区二区在线观看av| 国产视频首页在线观看| 人妻人人澡人人爽人人| 国产在视频线精品| 亚洲三区欧美一区| 精品国产一区二区三区四区第35| 成人免费观看视频高清| 亚洲av欧美aⅴ国产| 免费播放大片免费观看视频在线观看| av一本久久久久| 春色校园在线视频观看| 99热全是精品| 一个人免费看片子| 精品少妇黑人巨大在线播放| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 中文字幕色久视频| av国产精品久久久久影院| 亚洲色图综合在线观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 成人黄色视频免费在线看| 2022亚洲国产成人精品| 永久免费av网站大全| 熟女电影av网| 欧美日本中文国产一区发布| 一区二区日韩欧美中文字幕| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 在线观看免费日韩欧美大片| 人体艺术视频欧美日本| 美女高潮到喷水免费观看| 精品国产一区二区三区四区第35| 飞空精品影院首页| 人妻系列 视频| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 国产成人av激情在线播放| 最新中文字幕久久久久| 免费人妻精品一区二区三区视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 大码成人一级视频| 亚洲色图综合在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡 | 美国免费a级毛片| 国产亚洲一区二区精品| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲久久久国产精品| 电影成人av| 色吧在线观看| av国产精品久久久久影院| a级毛片黄视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 免费看不卡的av| 亚洲av电影在线进入| 亚洲精品,欧美精品| 欧美国产精品一级二级三级| 久久 成人 亚洲| 三级国产精品片| 国产成人精品一,二区| 国产探花极品一区二区| 精品福利永久在线观看| 精品一区二区免费观看| 国产成人免费无遮挡视频| 免费黄色在线免费观看| 一级爰片在线观看| 在线天堂中文资源库| 亚洲av中文av极速乱| 国产精品人妻久久久影院| videossex国产| 国产爽快片一区二区三区| 欧美人与善性xxx| 五月伊人婷婷丁香| 精品第一国产精品| 国产精品久久久久久精品电影小说| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 18禁国产床啪视频网站| 电影成人av| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲国产最新在线播放| 丝袜在线中文字幕| 亚洲欧美成人精品一区二区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 日本欧美国产在线视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 在线精品无人区一区二区三| 视频在线观看一区二区三区| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲精品国产av成人精品| 激情视频va一区二区三区| 国产成人午夜福利电影在线观看| 在线看a的网站| 日韩三级伦理在线观看| 精品卡一卡二卡四卡免费| 老汉色∧v一级毛片| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 色哟哟·www| 午夜激情av网站| 日韩电影二区| 久久毛片免费看一区二区三区| 日韩一区二区视频免费看| 1024香蕉在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产毛片在线视频| 黄色配什么色好看| 黄色一级大片看看| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 久久久久久久久久久免费av| 国产av精品麻豆| 满18在线观看网站| 91国产中文字幕| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 一本色道久久久久久精品综合| 午夜激情久久久久久久| 激情五月婷婷亚洲| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 午夜日韩欧美国产| 一级a爱视频在线免费观看| 成年动漫av网址| 伊人亚洲综合成人网| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲精品第二区| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲精品,欧美精品| 色视频在线一区二区三区| 蜜桃国产av成人99| 欧美人与善性xxx| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 丝袜美腿诱惑在线| av免费在线看不卡| 老司机影院成人| 人妻 亚洲 视频| 超色免费av| 久久精品久久精品一区二区三区| 999精品在线视频| 国产精品.久久久| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 女人久久www免费人成看片| 大香蕉久久成人网| 亚洲av中文av极速乱| 色网站视频免费| 美女午夜性视频免费| 在线免费观看不下载黄p国产| 夫妻午夜视频| 午夜久久久在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 最新的欧美精品一区二区| 免费观看性生交大片5| 欧美亚洲日本最大视频资源| 大香蕉久久网| 99热网站在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 精品人妻在线不人妻| 制服诱惑二区| videossex国产| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 香蕉国产在线看| 99久久综合免费| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲三区欧美一区| www.av在线官网国产| 亚洲综合色惰| av电影中文网址| 午夜福利乱码中文字幕| 两性夫妻黄色片| 亚洲 欧美一区二区三区| videos熟女内射| 天天操日日干夜夜撸| 国产成人av激情在线播放| 亚洲少妇的诱惑av| 永久免费av网站大全| 制服人妻中文乱码| 国产精品久久久久久精品古装| 国产伦理片在线播放av一区| 一区在线观看完整版| 不卡av一区二区三区| kizo精华| 亚洲国产av影院在线观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 少妇的逼水好多| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 一级毛片 在线播放| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产成人一区二区在线| 一级毛片 在线播放| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 国产欧美日韩综合在线一区二区| 99久国产av精品国产电影| 日韩一区二区视频免费看| 美女主播在线视频| 日本欧美国产在线视频| 尾随美女入室| 美女主播在线视频| av不卡在线播放| 欧美变态另类bdsm刘玥| 99热国产这里只有精品6| 国产精品久久久久成人av| 蜜桃在线观看..| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 少妇的逼水好多| 26uuu在线亚洲综合色| 97人妻天天添夜夜摸| 九草在线视频观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 三级国产精品片| 国产av码专区亚洲av| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 成人亚洲欧美一区二区av| 男女下面插进去视频免费观看| 欧美国产精品一级二级三级| 久久久久久免费高清国产稀缺| 波野结衣二区三区在线| 日本av免费视频播放| 一二三四中文在线观看免费高清| 18禁动态无遮挡网站| 十八禁网站网址无遮挡| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 日韩精品免费视频一区二区三区| 一级片免费观看大全| 亚洲精品av麻豆狂野| 美女午夜性视频免费| 一区二区三区精品91| 咕卡用的链子| 亚洲,欧美精品.| 国产97色在线日韩免费| 久久久精品区二区三区| 在线天堂最新版资源| 天堂8中文在线网| 亚洲欧美色中文字幕在线| 男人操女人黄网站| 国产 精品1| 亚洲av电影在线进入| 欧美少妇被猛烈插入视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产极品天堂在线| 最近手机中文字幕大全| 不卡视频在线观看欧美| 精品久久蜜臀av无| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 成人毛片a级毛片在线播放| 久久精品久久精品一区二区三区| 久热这里只有精品99| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 少妇熟女欧美另类| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 日本av手机在线免费观看| 美女午夜性视频免费| 日本wwww免费看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 制服丝袜香蕉在线| 91精品国产国语对白视频| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲国产av影院在线观看| 蜜桃国产av成人99| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产不卡av网站在线观看| 一区二区三区精品91| www日本在线高清视频| 国产精品一区二区在线观看99| 黄片播放在线免费| 久久久久久久亚洲中文字幕| 制服诱惑二区| 日本欧美国产在线视频| videosex国产| 国产综合精华液| 人妻 亚洲 视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久久久久人妻| av在线观看视频网站免费| 国产老妇伦熟女老妇高清| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲 欧美一区二区三区| 热99久久久久精品小说推荐| 欧美精品国产亚洲| 国产野战对白在线观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 久久人人爽人人片av| 亚洲一码二码三码区别大吗| 午夜老司机福利剧场| 久久久国产精品麻豆| 91在线精品国自产拍蜜月| 久久毛片免费看一区二区三区| 一边亲一边摸免费视频| 久久久a久久爽久久v久久| 国产一区二区在线观看av| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 亚洲精品,欧美精品| 久久久久国产精品人妻一区二区| av.在线天堂| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 国产一区二区三区综合在线观看| 男女国产视频网站| 精品一品国产午夜福利视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 亚洲国产av新网站| 激情视频va一区二区三区| 1024视频免费在线观看| 在线 av 中文字幕| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲成人手机| 女人久久www免费人成看片| 中文字幕最新亚洲高清| 美女中出高潮动态图| 爱豆传媒免费全集在线观看| av在线app专区| 人人妻人人澡人人看| 中文字幕制服av| 久久精品国产自在天天线| 国产亚洲一区二区精品| freevideosex欧美| 9热在线视频观看99| 免费观看在线日韩| 最近手机中文字幕大全| 黑丝袜美女国产一区| 黄色毛片三级朝国网站| 国产探花极品一区二区| 一区二区三区四区激情视频| 十八禁网站网址无遮挡| xxxhd国产人妻xxx| 久久久久精品人妻al黑| 天美传媒精品一区二区| 蜜桃在线观看..| 91久久精品国产一区二区三区| 国产午夜精品一二区理论片| 国产精品一区二区在线不卡| 午夜福利,免费看| 人人澡人人妻人| 日本黄色日本黄色录像| 黄色毛片三级朝国网站| 久久久国产精品麻豆| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久女婷五月综合色啪小说| 9191精品国产免费久久| 欧美最新免费一区二区三区| 99九九在线精品视频| 国产精品av久久久久免费| 亚洲国产欧美网| 国产精品.久久久| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 免费高清在线观看日韩| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 在线天堂中文资源库| 在线观看免费高清a一片| 国产成人精品在线电影| 久久精品国产综合久久久| 国产精品av久久久久免费| 2021少妇久久久久久久久久久| 男女免费视频国产| a级毛片黄视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 青春草国产在线视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产精品一国产av| 久久人人97超碰香蕉20202| 日日撸夜夜添| av在线老鸭窝| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲三级黄色毛片| 欧美另类一区| 黄片小视频在线播放| 最近中文字幕高清免费大全6| 精品酒店卫生间| 久久精品国产综合久久久| 天堂中文最新版在线下载| 超碰成人久久| 电影成人av| 日韩中文字幕欧美一区二区 |