前列腺腺癌組織中果蠅Zeste基因增強(qiáng)因子2、磷酸酶與張力蛋白同源蛋白表達(dá)及對(duì)Ki67增殖指數(shù)的影響

鄭　超　王　卓　曹余光

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院泌尿外科，遼寧　錦州　121000)

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前列腺腺癌組織中果蠅Zeste基因增強(qiáng)因子2、磷酸酶與張力蛋白同源蛋白表達(dá)及對(duì)Ki67增殖指數(shù)的影響

鄭超王卓曹余光

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院泌尿外科，遼寧錦州121000)

〔摘要〕目的檢測(cè)前列腺腺癌中果蠅Zeste基因增強(qiáng)因子(EZH)2、磷酸酶與張力蛋白同源蛋白(PTEN)的表達(dá)，關(guān)注二者對(duì)Ki67增殖指數(shù)的影響及其臨床意義。方法64例前列腺腺癌術(shù)后蠟塊組織作為觀察組，54例前列腺增生術(shù)后蠟塊組織作為對(duì)照組。應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)兩組中EZH2、PTEN和Ki67的表達(dá)。結(jié)果兩組中EZH2、PTEN陽(yáng)性率、Ki67增殖指數(shù)表達(dá)的差別顯著。觀察組中EZH2、PTEN陽(yáng)性率、Ki67增殖指數(shù)均與組織病理學(xué)分級(jí)密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示觀察組中EZH2和Ki67的表達(dá)呈正相關(guān)性，PTEN和Ki67的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性。結(jié)論前列腺腺癌中EZH2高表達(dá)、PTEN低表達(dá)對(duì)腫瘤的形成和進(jìn)展可能有一定作用，EZH2、PTEN均可以通過(guò)調(diào)節(jié)Ki67的增殖起而發(fā)揮生物學(xué)作用。

〔關(guān)鍵詞〕前列腺腺癌；果蠅Zeste基因增強(qiáng)因子(EZH)2；磷酸酶與張力蛋白同源蛋白(PTEN)；Ki67；免疫組化

前列腺腺癌是男性第三重要的腫瘤，病變形成中發(fā)現(xiàn)多種蛋白可以表達(dá)異常。研究顯示在前列腺癌形成過(guò)程中，細(xì)胞增殖是活躍的，尤其是表現(xiàn)為以Ki67升高的增殖反應(yīng)，不僅加劇了腫瘤性的形成和進(jìn)展，還對(duì)腫瘤的失控性增生起到了重要作用〔1〕。Zeste基因增強(qiáng)因子(EZH)2是1996年發(fā)現(xiàn)的一種人類(lèi)基因，與細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)有關(guān)〔2〕。EZH2可以抑制染色質(zhì)結(jié)構(gòu)中的靶基因，引起細(xì)胞的增殖，并對(duì)腫瘤擴(kuò)散可能有一定調(diào)節(jié)作用〔3〕。磷酸酶與張力蛋白同源蛋白(PTEN)具有特異性磷酸酯酶的活性，是一種抑癌基因，其對(duì)調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)及凋亡有一定作用〔4〕。前列腺腺癌中EZH2、PTEN和Ki67的聯(lián)合檢測(cè)尚未見(jiàn)報(bào)道。本文檢測(cè)前列腺腺癌中EZH2和PTEN的表達(dá)，關(guān)注二者對(duì)Ki67增殖指數(shù)的影響及其臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料我院行手術(shù)治療的前列腺腺癌患者64例作為觀察組，年齡57～88歲，平均71.5歲。病例均經(jīng)術(shù)后病理醫(yī)師閱片確診，并經(jīng)免疫組化檢測(cè)輔助證實(shí)。前列腺增生患者54例作為對(duì)照組，年齡55～86歲，平均68.6歲。兩組一般資料無(wú)明顯差異。

1.2EZH2、PTEN和Ki67的檢測(cè)方法兩組標(biāo)本均于術(shù)后制備蠟塊組織，切片后進(jìn)行EZH2、PTEN和Ki67蛋白的免疫組化檢測(cè)。三種蛋白的檢測(cè)均應(yīng)用免疫組化SP法，并由病理科的主管技師操作完成，做好質(zhì)量控制。

1.3EZH2、PTEN和Ki67結(jié)果的判讀EZH2蛋白染色主要位于細(xì)胞核，PTEN蛋白染色主要位于細(xì)胞質(zhì)，低倍鏡下選擇上皮細(xì)胞集中且染色明顯的區(qū)域進(jìn)行觀察，于400倍下進(jìn)行計(jì)數(shù)，共取5個(gè)視野，取平均值，以<10%定為陰性，以≥10%定為陽(yáng)性。Ki67蛋白染色位于細(xì)胞核，其陽(yáng)性率為增殖指數(shù)，并定量觀察。

1.4組織病理學(xué)分級(jí)方法組織病理學(xué)分級(jí)以Gleason評(píng)分為依據(jù)，2～4分高分化，5～6分中分化，7～10分低分化。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)、方差分析、線性相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1兩組EZH2、PTEN陽(yáng)性率和Ki67增殖指數(shù)比較兩組EZH2、PTEN陽(yáng)性率、Ki67增殖指數(shù)差異均顯著。見(jiàn)表1。

2.2觀察組中EZH2、PTEN陽(yáng)性率和Ki67增殖指數(shù)在不同組織病理學(xué)分級(jí)中的比較觀察組中EZH2、PTEN陽(yáng)性率和Ki67增殖指數(shù)在不同組織病理學(xué)分級(jí)中差異顯著。見(jiàn)表2。

表1　兩組EZH2、PTEN陽(yáng)性率和Ki67增殖指數(shù)的比較

表2　觀察組中EZH2、PTEN陽(yáng)性率和Ki67增殖指數(shù)在不同組織病理學(xué)分級(jí)中的比較±s〕

2.3觀察組中EZH2、PTEN和Ki67的相關(guān)性觀察組中EZH2和Ki67(r=0.48,P<0.05)具有正相關(guān)性，PTEN和Ki67(r=-0.44,P<0.05)具有負(fù)相關(guān)性。EZH2和PTEN未見(jiàn)明顯相關(guān)性(P>0.05)。

3討論

前列腺腺癌是由前列腺分泌性細(xì)胞構(gòu)成的一種侵襲性惡性上皮性腫瘤。從高分化到低分化表現(xiàn)為從分化好的腺體形成的癌到分化差的腫瘤。分化好的前列腺腺體臨床表現(xiàn)及病理形態(tài)均難以區(qū)分，而分化差的癌患者預(yù)后不良。良性前列腺腺體在良性前列腺增生的組織常呈局限的結(jié)節(jié)狀生長(zhǎng)，以線性排列方式從尿道向外周形成放射狀結(jié)構(gòu)，也有在外周區(qū)形成均勻性的分布〔5,6〕。而典型的有腺性結(jié)構(gòu)的前列腺癌，組織排列較為擁擠，呈不規(guī)則的生長(zhǎng)方式。腺體彼此間方向不一，腺體被平滑肌束不規(guī)則分隔。而浸潤(rùn)性生長(zhǎng)的另一種特征性方式是在大的良性腺體間出現(xiàn)小的不典型腺體，腺性分化消失、篩狀結(jié)構(gòu)形成、腺體融合及腺體形成障礙是前列腺癌與良性前列腺腺體在結(jié)構(gòu)上的突出區(qū)別。在腫瘤形成過(guò)程中及腫瘤分化的不同階段，均有基因表達(dá)的異?！?〕。EZH2是PcG基因家族中的重要成員，其具有核心地位，參與染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的形成、基因表達(dá)調(diào)節(jié)及細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)控〔8,9〕。研究顯示EZH2可編碼組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶，并通過(guò)兩種方式介導(dǎo)靶基因沉默：①通過(guò)催化組蛋白H3賴氨酸27三甲基化發(fā)揮作用；②聯(lián)合DNA甲基轉(zhuǎn)移酶使靶基因CpG島區(qū)DNA甲基化促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展〔10〕。而PTEN具有特征性的磷酸酯酶作用，對(duì)腫瘤有明顯的抑制作用?？梢砸鸺?xì)胞內(nèi)第二信使磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸(PIP3)形成去磷酸化的作用，進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞周期〔11，12〕。研究認(rèn)為PTEN對(duì)腫瘤抑制作用途徑的通路較多，且機(jī)制復(fù)雜〔13〕。

本實(shí)驗(yàn)提示EZH2高表達(dá)、PTEN低表達(dá)是腫瘤的促進(jìn)因素。有研究認(rèn)為EZH2能減少轉(zhuǎn)錄因子與DNA結(jié)合的作用，抑制靶基因的表達(dá)，對(duì)恢復(fù)相關(guān)因子介導(dǎo)的細(xì)胞周期素A啟動(dòng)子的活性有明顯作用，并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的周期演進(jìn)和惡性轉(zhuǎn)化〔14,15〕。Ki67是臨床標(biāo)記增殖指數(shù)的經(jīng)典蛋白，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示EZH2在促進(jìn)腫瘤進(jìn)展過(guò)程中可以對(duì)細(xì)胞增殖有重要的調(diào)節(jié)作用〔16〕。PTEN主要通過(guò)其蛋白磷酸酶活性來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞質(zhì)黏附遷移，其途徑有：①PTEN蛋白具有的磷酸酯酶活性，使C端磷酸化位點(diǎn)去磷酸化后顯示C2結(jié)構(gòu)域，引起功能改變；②下調(diào)斑激酶和P130的磷酸化水平，引起肌動(dòng)蛋白骨架重構(gòu)，并形成黏著斑復(fù)合體而發(fā)揮作用〔17〕。也有學(xué)者認(rèn)為PTEN可能通過(guò)調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶家族成員的異常表達(dá)，進(jìn)而有效抑制腫瘤的進(jìn)展〔18〕。因此PTEN表達(dá)丟失后，對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用下降或丟失，腫瘤增殖及繁殖活躍，腫瘤呈進(jìn)展趨勢(shì)，同時(shí)腫瘤具有高度的播散潛能。本文結(jié)果顯示EZH2、PTEN的陽(yáng)性率、Ki67增殖指數(shù)均與前列腺腺癌組織病理學(xué)分級(jí)密切相關(guān)，而組織病理學(xué)分級(jí)是腫瘤進(jìn)展的重要標(biāo)志，因此三種蛋白異常表達(dá)對(duì)促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展有重要意義。

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〔2014-12-11修回〕

(編輯苑云杰)

〔中圖分類(lèi)號(hào)〕R737

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)12-2946-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.058

第一作者：鄭超(1971-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事泌尿外科疾病研究。