結(jié)腸腺癌組織基質(zhì)金屬蛋白酶-10、-14和血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的關(guān)系

趙福強(qiáng)　鄭春雷　趙晶瑩

(齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院腫瘤外科 ，黑龍江　齊齊哈爾　161000)

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結(jié)腸腺癌組織基質(zhì)金屬蛋白酶-10、-14和血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的關(guān)系

趙福強(qiáng)鄭春雷趙晶瑩

(齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院腫瘤外科 ，黑龍江齊齊哈爾161000)

〔摘要〕目的檢測結(jié)腸腺癌中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-10、-14和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)，關(guān)注其相關(guān)性及臨床意義。方法69例結(jié)腸腺癌患者臨床資料及術(shù)后標(biāo)本作為觀察組，51例結(jié)腸上皮內(nèi)瘤變標(biāo)本作為對照組，51例正常結(jié)腸黏膜組織作為正常對照組。檢測3組中MMP-10、-14和VEGF的表達(dá)。結(jié)果3組中MMP-10、-14和VEGF表達(dá)的陽性率差別均明顯(P<0.000 1)。觀察組中MMP-10、-14和VEGF表達(dá)的陽性率均與腫瘤的最大徑線、脈管內(nèi)瘤栓密切相關(guān)。MMP-10、-14的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。三者均與腫瘤的性別和年齡無關(guān)。相關(guān)性分析顯示觀察組中MMP-10和VEGF、MMP-14和VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)性。結(jié)論結(jié)腸腺癌中MMP-10、-14和VEGF高表達(dá)，其不僅具有促進(jìn)腫瘤生長的作用，還對腫瘤進(jìn)展有一定影響。MMP-10、-14均與VEGF的表達(dá)具有協(xié)同作用。

〔關(guān)鍵詞〕結(jié)腸腺癌；基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-10；MMP-14；血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)

結(jié)腸腺癌是原發(fā)于結(jié)腸黏膜上皮的惡性腫瘤，腫瘤常繼發(fā)于腸黏膜的上皮內(nèi)瘤變(不典型增生)，同時(shí)腫瘤形成后常伴隨著腫瘤細(xì)胞的遷移，此過程均涉及腫瘤的分子調(diào)控。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-10、-14是MMPs家族中的重要成員〔1〕，可以使細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜溶解，引起腫瘤轉(zhuǎn)移的屏障功能減弱或消失〔2,3〕。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是較為經(jīng)典的血管生成促進(jìn)因子，尤其是在缺氧時(shí)的表達(dá)更加增強(qiáng)，VEGF表達(dá)升高時(shí)可以引起腫瘤間質(zhì)的血管新生，對腫瘤中的氧和營養(yǎng)的供應(yīng)增加，促進(jìn)腫瘤的生長及浸潤〔4,5〕。本實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)腸腺癌中MMP-10、-14和VEGF的表達(dá)，探討其臨床特征及相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料2014年1月至2015年6月我院行結(jié)腸腺癌根治手術(shù)患者的臨床資料作為觀察組，術(shù)后留取蠟塊組織，共69例，其中男35例，女34例，年齡46～79歲，平均(62.1±7.2)歲，嚴(yán)格按WHO中關(guān)于結(jié)腸腺癌的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行界定。51例結(jié)腸上皮內(nèi)瘤變標(biāo)本作為對照組，男26例，女25例，年齡34～72歲，平均(58.2±8.9)歲。51例正常結(jié)腸黏膜組織作為正常對照組，男25例，女26例，年齡47～77歲，平均(60.5±6.5)歲。三組常規(guī)資料無明顯差別。

1.2MMP-10、-14和VEGF的檢測MMP-10、-14和VEGF蛋白的檢測均應(yīng)用免疫組化SP法，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色，嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)行，做好質(zhì)量控制，減少誤差。

1.3MMP-10、-14和VEGF結(jié)果判定MMP-10、-14和VEGF均以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng)細(xì)胞，100倍視野下選擇上皮細(xì)胞集中的區(qū)域，并在400倍鏡下進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)，共選擇3個(gè)高倍視野，取平均值。以陽性細(xì)胞<10%為陰性，以陽性細(xì)胞≥10%為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)或相關(guān)性分析。

2結(jié)果

2.1三組中MMP-10、-14和VEGF陽性率的比較正常對照組、對照組和觀察組中MMP-10、-14和VEGF的表達(dá)有升高趨勢(P<0.000 1)。見表1。

2.2觀察組中不同臨床特征患者M(jìn)MP-10、-14和VEGF表達(dá)陽性率見表2。觀察組中MMP-10、-14和VEGF表達(dá)的陽性率均與腫瘤的最大徑線、脈管內(nèi)瘤栓密切相關(guān)。MMP-10、-14的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。三者均與性別和年齡無關(guān)。

表1　三組MMP-10、-14和VEGF陽性率的比較〔n(%)〕

表2　觀察組中不同臨床特征患者M(jìn)MP-10、-14和VEGF表達(dá)陽性率的比較〔n(%)〕

2.3觀察組中MMP-10、-14和VEGF的相關(guān)性MMP-10和VEGF(r=0.51，P=0.024 1)、MMP-14和VEGF(r=0.49，P=0.040 8)的表達(dá)呈正相關(guān)性。

3討論

環(huán)境因素及遺傳因素均對腫瘤病變形成起重要的作用。在腫瘤生長過程中，間質(zhì)的血管新生有重要意義〔6〕。VEGF被認(rèn)為是與血管形成密切相關(guān)的蛋白，在缺氧時(shí)表達(dá)升高，此時(shí)可以刺激血管內(nèi)皮的增生繁殖，同時(shí)引起管腔的形成，為高增殖狀態(tài)的腫瘤提高血液供應(yīng)〔7,8〕。近年人們發(fā)現(xiàn)機(jī)體在腫瘤發(fā)生和進(jìn)展時(shí)對VEGF影響的蛋白較多，直接或間接著調(diào)節(jié)著腫瘤的血管生成〔9,10〕。MMPs家族是一組鋅離子依賴性內(nèi)肽酶，幾乎能降解細(xì)胞外基質(zhì)的所有成分，同時(shí)參與胎兒發(fā)育過程中的組織重構(gòu)和傷口愈合過程中的膠原重構(gòu)等生理過程〔11,12〕。MMP-10、-14作用主要是對Ⅳ型膠原、酪蛋白、層黏連蛋白、蛋白多糖、彈性硬蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)進(jìn)行有效降解，使細(xì)胞外基質(zhì)的結(jié)構(gòu)和形態(tài)出現(xiàn)明顯變化，為腫瘤的轉(zhuǎn)移提供重要途徑〔13,14〕。安陽等〔15〕通過觀察MMP-10在肝細(xì)胞癌中的作用，發(fā)現(xiàn)MMP-10在腫瘤中高表達(dá)，且其對肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展起重要作用，同時(shí)與整合素連接激酶(ILK)有一定的協(xié)同作用，并可能對判斷預(yù)后有一定價(jià)值。MMP-14的作用可能更加具有多元性，如對血管生成促進(jìn)作用，對細(xì)胞黏附調(diào)節(jié)作用〔16〕。

本實(shí)驗(yàn)提示MMP-10、-14、VEGF三者在結(jié)腸黏膜上皮癌變過程中起重要作用，VEGF本質(zhì)也是癌基因，對促進(jìn)腫瘤發(fā)生的意義明確。而MMP-10、-14促進(jìn)腫瘤形成的作用可能與其對上皮黏附調(diào)節(jié)和對細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)有關(guān)。MMP-10、-14和VEGF高表達(dá)對腫瘤生長、瘤栓形成及伴隨的侵襲性作用有關(guān)。MMP-10、-14二者對淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定促進(jìn)作用，也提示MMP-10、-14高表達(dá)時(shí)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)性提高，臨床中應(yīng)關(guān)注二者的表達(dá)，尤其是對于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移而MMP-10、-14高表達(dá)的病例，應(yīng)當(dāng)在病理診斷中再次尋找淋巴結(jié)，最大可能排除淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)。MMP-10、-14高表達(dá)時(shí)可以促進(jìn)VEGF的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤間質(zhì)的血管生成，使腫瘤的氧和營養(yǎng)供應(yīng)更加豐富，腫瘤生長旺盛，腫瘤的失控性增生更加明顯，細(xì)胞更加幼稚〔17,18〕。MMP-10、-14均為與轉(zhuǎn)移和預(yù)后相關(guān)的蛋白，尤其是對于轉(zhuǎn)移的作用可能更加明顯。MMP-10、-14高表達(dá)時(shí)使腫瘤細(xì)胞間的信息傳遞減少，細(xì)胞外基質(zhì)降解，腫瘤細(xì)胞更加容易離開原發(fā)灶，形成浸潤灶，繼發(fā)播散和遠(yuǎn)處遷移〔19,20〕。

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〔2015-02-17修回〕

(編輯苑云杰)

基金項(xiàng)目：齊齊哈爾市指導(dǎo)性科研課題(9232014Y1445-01)

〔中圖分類號〕R735

〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)12-2944-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.057

第一作者：趙福強(qiáng)(1982-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤外科研究。