升高的血清Nexilin是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險(xiǎn)因素

魏　清　李光華　金愛花　宋英蘭　崔松彪　尤　昕

(延邊大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林　延吉　133000)

?

升高的血清Nexilin是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險(xiǎn)因素

魏清1李光華金愛花宋英蘭崔松彪2尤昕

(延邊大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林延吉133000)

〔摘要〕目的探討缺血性腦卒中患者檢測(cè)血清Nexilin水平的臨床價(jià)值。方法連續(xù)收集急性缺血性腦卒中患者185例〔男120例，女65例，平均年齡(64.6±9.3)歲〕，對(duì)照組215例〔男120例，女95例，平均年齡(64.7±9.0)歲〕。采用ELISA方法檢測(cè)血清Nexilin含量。結(jié)果與對(duì)照組比較，急性缺血性腦卒中患者血清Nexilin含量明顯升高〔0.81(0.51～1.33)ng/ml vs.0.15(0.11～0.26)ng/ml,P<0.001〕，以Nexilin≥0.80 ng/ml(對(duì)照組95百分位數(shù))作為升高標(biāo)準(zhǔn)，缺血性腦卒中患者高血清Nexilin比率明顯高于對(duì)照組(50.81% vs.5.58%，P<0.001)。多因素回歸分析顯示升高的血清Nexilin水平是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。結(jié)論急性缺血性腦卒中患者血清Nexilin水平明顯升高，升高的血清Nexilin是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

〔關(guān)鍵詞〕Nexilin；缺血性腦卒中

顱外、顱內(nèi)血栓形成或栓塞是引起缺血性腦卒中的主要原因〔1〕。腦卒中診斷依賴醫(yī)師的臨床檢查和各種影像學(xué)技術(shù)作為補(bǔ)充。有一些潛在的生物學(xué)標(biāo)志物有望應(yīng)用于缺血性腦卒中診斷、病情監(jiān)測(cè)、預(yù)后評(píng)估、風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)，如N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體的抗體、S-100B蛋白、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)9、脂蛋白相關(guān)磷酸酶A2(Lp-PLA2)等〔2～5〕。然而，由于應(yīng)用生物學(xué)標(biāo)志物鑒別腦卒中缺乏足夠的靈敏度和特異性，目前還沒有一個(gè)生物學(xué)標(biāo)志物應(yīng)用于臨床實(shí)踐。

Nexilin(NEXN)具有肌動(dòng)蛋白結(jié)合特性。大鼠穿通性彈道樣腦外傷(PBBI)后，腦組織Nexilin在6、24 h上調(diào)，48、72 h下調(diào)〔6〕，提示Nexilin可能是一個(gè)腦損傷潛在的血液標(biāo)志物。本研究初步探討血清Nexilin含量與缺血性腦卒中的相關(guān)性。

1對(duì)象與方法

1.1對(duì)象2012年6月至2013年5月來延邊大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的急性缺血性腦卒中患者共185例，男120例，女65例，平均年齡(64.6±9.3)歲，所有患者均符合全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)頭部CT或MRI證實(shí)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)均為首次發(fā)?。?2)病程12～72 h。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)出血性腦卒中；(2)短暫性腦缺血發(fā)作(TIA)；(3) 心臟疾??；(4)有嚴(yán)重感染和癲癇者。所有入選者均記錄是否存在高血壓、糖尿病、吸煙史和腦卒中家族史等腦血管病的危險(xiǎn)因素。根據(jù)急性卒中治療低分子肝素試驗(yàn)(TOAST)亞型分類標(biāo)準(zhǔn)，將缺血性腦卒中分為大動(dòng)脈粥樣硬化性卒中(LAA)、心源性腦栓塞(CE)、小動(dòng)脈閉塞性卒中(SAO)、其他原因所致的缺血性卒中(SOE)、原因不明的缺血性卒中(SUE)〔7〕。腦卒中的嚴(yán)重程度采用美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)進(jìn)行評(píng)分〔8〕。對(duì)照組隨機(jī)選取相同時(shí)期來延邊大學(xué)附屬醫(yī)院體檢的個(gè)體，經(jīng)詢問病史、心電圖、實(shí)驗(yàn)室檢查等排除血栓、TIA、心臟疾病，共215例，男120例，女95例，平均年齡(64.7±9.0)歲。本研究經(jīng)延邊大學(xué)附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2樣本采集與處理健康受試者早晨空腹采集外周靜脈血3 ml，加入速凝管內(nèi)，室溫放置不超過2 h，以1 000 r/min離心20 min，取血清-20℃保存，用于血清Nexilin含量檢測(cè)。

1.3實(shí)驗(yàn)方法血清Nexilin檢測(cè)采用雙抗體夾心法ELISA商品試劑盒(Uscn Life Science Inc)，試劑檢測(cè)范圍0.156～10 ng/ml，最低檢測(cè)限為0.053 ng/ml，批內(nèi)精密度<10%，批間精密度<12%。實(shí)驗(yàn)前將待測(cè)標(biāo)本和所有試劑緩慢均衡至室溫，嚴(yán)格按說明書的操作步驟完成實(shí)驗(yàn)。血清總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)等采用Roche PPI自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng)按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程檢測(cè)。

2結(jié)果

2.1兩組臨床特征比較缺血性腦卒中患者血清Nexilin含量較對(duì)照組明顯升高(P<0.001)，以Nexilin≥0.80 ng/ml(對(duì)照組95百分位數(shù))作為升高標(biāo)準(zhǔn)，缺血性腦卒中患者高血清Nexilin比例〔94例(50.81%)〕同樣明顯高于對(duì)照組〔12例(5.58%)〕(P<0.001)；腦卒中組高血壓、糖尿病、吸煙史、腦卒中家族史比率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

表1　研究對(duì)象的臨床和生化指標(biāo)比較±s)

2.2年齡和性別對(duì)卒中患者血清Nexilin的影響腦卒中患者和對(duì)照組血清Nexilin含量均與年齡不相關(guān)(缺血性腦卒中患者：r=0.118，P=0.109；對(duì)照組：r=0.010，P=0.887)。

缺血性腦卒中患者男性與女性血清Nexilin含量無明顯差異(P=0.062)，但對(duì)照組男性血清Nexilin含量明顯高于女性(P<0.001)，見表2。

2.3多因素回歸分析選取單因素分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的參數(shù)進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示高血清Nexilin比例、高血壓和糖尿病是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。見表3。

與對(duì)照組女性比較:1)P<0.001

表3　缺血性腦卒中多因素回歸分析結(jié)果

3討論

Nexilin cDNA全長(zhǎng)為3 405 bp，染色體定位1p31.1，編碼一個(gè)675個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。大鼠的Nexilin有兩個(gè)剪切變異體，為b-Nexilin和s-Nexilin，其中b-Nexilin是從大鼠腦組織中純化得到的一個(gè)新的肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白，主要在大鼠腦和睪丸表達(dá)〔6〕。研究表明Nexilin突變可破壞心臟的Z-線和引發(fā)擴(kuò)張型心肌病〔9〕，Nexilin突變和肥厚性心肌病相關(guān)〔10〕。Nexilin參與肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)和胰島素信號(hào)調(diào)節(jié)〔11〕，通過結(jié)合并調(diào)節(jié)IRS1信號(hào)影響骨骼肌細(xì)胞的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)。

本研究結(jié)果表明缺血性腦卒中患者血清Nexilin含量升高，高血清Nexilin比例是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，為缺血性腦卒中的預(yù)防和診治研究提供了一個(gè)新的潛在標(biāo)志物。

血清Nexilin含量是一個(gè)受年齡和性別影響的指標(biāo)〔12〕。本研究腦卒中患者和對(duì)照組血清Nexilin含量均與年齡不相關(guān)。但對(duì)照組男性血清Nexilin含量明顯高于女性，提示性別可能對(duì)血清Nexilin含量有一定影響。

綜上所述，本研究提示Nexilin是一個(gè)潛在的缺血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)的標(biāo)志物。

4參考文獻(xiàn)

1Adams HP,Bendixen BH,Kappelle LJ,etal.Classification of subtype of acute ischemic stroke:definitions for use in a multicenter clinical trial TOAST.Trial of Org 10172 in Acute Stroke Treatment〔J〕.Stroke,1993;24(1):35- 41.

2Rothstein L,Jickling GC.Ischemic stroke biomarkers in blood〔J〕.Biomark Med,2013:7(1):37-47.

3Foerch C,Montaner J,Furie KL,etal.Invited article:searching for oracles? Blood biomarkers in acute stroke〔J〕.Neurology,2009;73(5):393-9.

4Elkind MS,Tai W,Coates K,etal.Lipoprotein-associated phospholipase A2 activity and risk of recurrent stroke〔J〕.Cerebrovasc Dis,2009；27(1):42-50.

5Kim MH,Kang SY,Kim MC,etal.Plasma biomarkers in the diagnosis of acute ischemic stroke〔J〕.Ann Clin Lab Sci,2010；40(4):336-41.

6Ohtsuka T,Nakanishi H,Ikeda W,etal.Nexilin:a novel actin filament-binding protein localized at cell-matrix adherens junction〔J〕.J Cell Biol,1998；143(5):1227-38.

7Yao CP,Lu XM,Liao ZL,etal.Verification of proteomic-based protein changes by western blot analysis in a rat model of penetrating ballistic-like brain injury〔J〕.J Neurotrauma,2008；25(7):853-935.

8Kasner SE.Clinical interpretation and use of stroke scales〔J〕.Lancet Neurol,2006；5(7):603-12.

9Hassel D,Dahme T,Erdmann J,etal.Nexilin mutations destabilize cardiac Z-disks and lead to dilated cardiomyopathy〔J〕.Nat Med,2009；15(11):1281-8.

10Wang H,Li Z,Wang J,etal.Mutations in NEXN,a Z-disc gene,are associated with hypertrophic cardiomyopathy〔J〕.Am J Hum Genet,2010；87(5):687-93.

11Wang C,You X,Jiang C,etal.Hepatocyte growth factor upregulates nexilin gene expression in cardiomyocytes via JNK pathway〔J〕.Genet Mol Res，2014；13(3):4976-82.

12王婧婧，金愛花，丁大植，等.年齡和性別對(duì)健康成人血清Nexilin含量的影響〔J〕.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015；42(3):533-6.

〔2015-12-03修回〕

(編輯袁左鳴)

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81260263)

通訊作者：尤昕(1969-)，男，主任技師，博士，碩士生導(dǎo)師，主要從事臨床生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究。

〔中圖分類號(hào)〕R743

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)12-2904-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.036

High serum Nexilin level is an independent risk factor for ischemic stroke

WEI Qing,LI Guang-Hua,JIN Ai-Hua,et al.

Department of Laboratory Medicine,the Affiliated Hospital of Yanbian University,Yanji 133000,Jilin,China

【Abstract】Objective To detect serum Nexilin concentrations and to explore the potential clinical value in patients with ischemic stroke.MethodsA total of 185 patients with acute ischemic stroke and 215 control subjects were involved.Serum Nexilin concentration was detected by enzyme-linked immunosorbent assay.ResultsCompared with controls,ischemic stroke patients had significantly higher nexilin concentration 〔0.81 (0.51～1.33)ng/ml vs.0.15 (0.11～0.26)ng/ml,P<0.001〕.When Nexilin 0.80 ng/ml (95% of controls) was defined as elevation,the percentage of subjects with elevated Nexilin level was significantly higher in ischemic stroke group compared to that in control group (50.81% vs.5.58%,P<0.001).High serum level of Nexilin was an independent risk factor for ischemic stroke.ConclusionsIschemic stroke patients have significantly elevated serum Nexilin levels,and serum Nexilin is a potential useful biomarker for ischemic stroke.

【Key words】Nexilin;Ischemic stroke

1吉林大學(xué)口腔醫(yī)院檢驗(yàn)科2延邊大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科

第一作者：魏清(1970-)，女，副主任技師，碩士，主要從事臨床生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究。