摘要:現(xiàn)如今,食品安全問題已然成為社會各界人士都普遍關(guān)注的問題。鑒于此,本文結(jié)合實(shí)際情況重點(diǎn)研究了ELLSA、DNA探針、生物芯片等生物技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用。
關(guān)鍵詞:食品;檢測;生物;技術(shù);應(yīng)用
中圖分類號:G718 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B 文章編號:1672-1578(2016)07-0279-01
隨著食品安全問題與人們食品安全訴求矛盾日益增強(qiáng),做好食品檢測工作是妥善解決社會發(fā)展矛盾的有效措施。由于我國食品安全檢測技術(shù)起步較晚,現(xiàn)目前技術(shù)成熟度較低,加之食品安全問題日益繁雜,倘若僅僅采取傳統(tǒng)的化學(xué)、物理等檢測手段便不能夠契合現(xiàn)代食品檢測需求。生物技術(shù)在食品檢測中,具有靈敏度高、識別功能強(qiáng)、成本低廉、選擇性高等特點(diǎn)。因此,在食品檢測中,生物技術(shù)開始占有一席之地且得到廣泛的關(guān)注,尤其在人們普遍關(guān)注的轉(zhuǎn)基因食品檢測中,生物技術(shù)發(fā)揮出來較強(qiáng)的優(yōu)越性,此外對于致病微生物的檢測,生物技術(shù)也具有不可估量的優(yōu)勢。于茲,下文將重點(diǎn)探究幾種在食品檢測中常用的生物技術(shù)。
1. DNA探針技術(shù)的應(yīng)用
1.1 DNA探針技術(shù)概念簡介。DNA探針技術(shù)在食品檢測中,主要是利用DNA抑或RNA堿基序列的互補(bǔ)性,將已知DNA用同位素法進(jìn)行標(biāo)記,然后做成DNA探針,并尋找可以匹配的待測微生物的DNA或RNA從而結(jié)合成雜交分子鏈。然后通過顯微鏡觀測,被標(biāo)記的DNA探針是否與待測微生物結(jié)合成了分子雜交鏈以此判斷是否存在某種微生物。隨著DNA探針技術(shù)不斷改進(jìn)與發(fā)展,現(xiàn)目前已經(jīng)成為較為成熟的食品檢測技術(shù),并且在市場上得到了較為廣泛的使用?,F(xiàn)目前,DNA探針技術(shù)主要用于微生物檢測,對某些致病源檢測效果極佳。譬如利用DNA探針技術(shù)可以成功且高效的檢測食品中的大腸桿菌、李斯特氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌等。
1.2 DNA探針技術(shù)的應(yīng)用。上文我們首先簡要探究了DNA有關(guān)概念,接下來我們將進(jìn)一步探究DNA探針技術(shù)在食品檢測中的具體應(yīng)用。DNA探針技術(shù)的核心是構(gòu)建DNA探針,但是構(gòu)建探針的方法我們不能按部就班、一層不變的進(jìn)行,因?yàn)槲⑸锾匦愿鞑幌嗤?。不同的微生物所適用的探針不僅具有特殊的堿基序列,同時其特異性也需要著重考慮。因此構(gòu)建DNA探針時,必須結(jié)合待測微生物特異性,并將具有特異性的DNA保守基因序列作為目標(biāo)DNA。而DNA探針則應(yīng)該以目標(biāo)DNA作為模版,利用互補(bǔ)法構(gòu)建配對的堿基序列。一般而言,決定微生物特異性DNA的關(guān)鍵因素是生理特征、生化特征。因此工作人員要抓住待測食品微生物的特異性,采取合理的措施構(gòu)建具有實(shí)效性的DNA探針。
2.PCR 及其改進(jìn)技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用
2.1 傳統(tǒng)PCR技術(shù)簡介。PRC技術(shù)有被稱之為聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù),該技術(shù)的機(jī)理是運(yùn)用酶促反應(yīng)對DNA進(jìn)行體外擴(kuò)增。此技術(shù)主要是依賴于DNA聚合酶較強(qiáng)的促進(jìn)作用,使得DNA能夠有效連接堿基序列從而復(fù)制具有特異性的DNA堿基序列片段。傳統(tǒng)的PCR技術(shù)在食品檢測中,主要用于對病源微生物的檢測。該技術(shù)濫觴于1985年,在1992得到實(shí)際運(yùn)用。但是直到近幾年該技術(shù)在食品檢測中才得到較為廣泛的運(yùn)用,現(xiàn)目前利用傳統(tǒng)的PCR技術(shù),我們已經(jīng)可以成功且高效的檢測出小腸耶爾森氏菌、 單增李氏菌、金黃色葡萄球菌、腸出血性大腸桿菌0157等病原體。除此之外,PCR技術(shù)通過有關(guān)實(shí)驗(yàn)證實(shí)其還可以用于檢測轉(zhuǎn)基因食品。由此可見PCR技術(shù)不僅能夠有效檢測一般致病源同時還能有效檢測轉(zhuǎn)基因食品。
但是從今年來的實(shí)踐效果來看,傳統(tǒng)PCR技術(shù)也存在諸多缺陷:譬如:傳統(tǒng)PCR技術(shù)在食品檢測中偏向于定性檢測,而對于定量檢測則顯得比價乏力;同時利用傳統(tǒng)PCR技術(shù)檢測微生物時,在存在部分衰老或者死亡微生物的情況下,檢測結(jié)果會出現(xiàn)假陽性特征,這就很容易對檢測結(jié)果造成極大的干擾。
2.2 革新的PCR 技術(shù) 在食品檢測中的應(yīng)用。正如上文所述,傳統(tǒng)PCR 技術(shù) 在食品檢測中雖然有較為明顯的效果,但也存在諸多可以矯治革新的問題。鑒于此,下文將進(jìn)一步說明改革的PCR 技術(shù) 在食品檢測中的具體應(yīng)用。
2.2.1 定量PCR 技術(shù)的應(yīng)用。所謂定量PCR 技術(shù) ,顧名思義即指的是不僅要檢測食品微生物類型及致病源,同時還能夠檢測微生物數(shù)學(xué)量。定量PCR 技術(shù) 是在傳統(tǒng)PCR技術(shù)上進(jìn)行改進(jìn)的新型技術(shù),它主要是在傳統(tǒng)PCR技術(shù)基礎(chǔ)上,在原有的檢測體系中加入了熒光基團(tuán)。而加入熒光基團(tuán)的作用一則是監(jiān)控檢測反應(yīng)速率,二來則是通過熒光信號計(jì)量,以此成功完成微生物的定量檢測。鑒于此該技術(shù)具有上述優(yōu)點(diǎn)因此在實(shí)際檢測中,我們通常是利用該技術(shù)檢測病原微生物數(shù)量、轉(zhuǎn)基因食品、摻假量等。
2.2.2 巢式PCR 技術(shù)的應(yīng)用。所謂巢式PCR技術(shù)其基礎(chǔ)仍然是傳統(tǒng)PCR技術(shù),巢式PCR技術(shù)的工作機(jī)理是,在傳統(tǒng)PCR技術(shù)基礎(chǔ)上同時加入兩隊(duì)引物,一對負(fù)責(zé)利用DNA聚合酶促使DNA擴(kuò)增反應(yīng)進(jìn)行,另一對引物的作用則是利用酶合反應(yīng)過程對病原微生物進(jìn)行檢測。
3.生物芯片技術(shù)及其在食品檢測中的作用
生物芯片技術(shù)是上個世紀(jì)90年代初的新興技術(shù),該技術(shù)自研發(fā)以來在各界都得到較為廣泛的運(yùn)用,現(xiàn)目前在食品檢測中也得到了有效的應(yīng)用。生物芯片技術(shù)的工作機(jī)理是利用微電子技術(shù)與微加工技術(shù)在固格體芯片上構(gòu)建起待測病原微生物的有關(guān)化學(xué)機(jī)構(gòu)以供分析。利用生物芯片技術(shù)就可以直觀的觀測病原微生物的化學(xué)結(jié)構(gòu),以此精確、快速的判斷并分析該微生物的細(xì)胞、DNA、RNA、蛋白質(zhì)等有關(guān)信息?,F(xiàn)目前生物芯片技術(shù)在食品檢測中具有十分重要的作用,因?yàn)樵摷夹g(shù)不僅充分認(rèn)識到了病原微生物的基因序列的保守性,同時也兼顧了各個菌種的差異性。不難看出,在食品檢測中使用生物芯片技術(shù),能夠極大的提高檢測數(shù)據(jù)的精確度。同樣的,生物芯片技術(shù)不僅對病原微生物檢測有作用,該技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食品檢測中也具有較好的效果。生物芯片技術(shù)不僅能夠有效檢測出食品是否含有轉(zhuǎn)基因同時也能夠分析出食品轉(zhuǎn)基因類型。
4.膠體金免疫層析技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用
根據(jù)實(shí)際情況來看,膠體金免疫層析技術(shù)普遍運(yùn)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,該技術(shù)在食品檢測領(lǐng)域的使用仍處于起步階段,但是就近幾年的發(fā)展?fàn)顩r而言,該技術(shù)在食品檢測中的運(yùn)用前景是十分可觀的。 膠體金免疫層析技術(shù)能夠?qū)Σ≡⑸镞M(jìn)行定性分析也可以進(jìn)行定量分析,因此使用該方法進(jìn)行食品檢測,能夠有效提升檢測數(shù)據(jù)的精確性。 膠體金免疫層析技術(shù)能夠檢測的有害微生物有:霍亂弧菌、金黃色葡萄球菌、布氏桿菌等。
5.結(jié)束語
綜上所述, 生物技術(shù)在食品檢測中發(fā)揮著巨大作用,DNA探針法、PCR技術(shù)、生物芯片技術(shù)、膠體金免疫層析技術(shù)等在食品有害微生物及轉(zhuǎn)基因食品檢測中都有著十分顯著的效果。我們期待生物學(xué)家們可以研發(fā)更加高效的生物檢測技術(shù),從而為人們賴以生活的食品提供安全和營養(yǎng)的可靠保障。
參考文獻(xiàn):
[1] 張奇志. DNA 探針和PCR技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用[J]. 廣東農(nóng)工商職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào), 2007
[2] 卿柳庭, 等. 核酸探針和PCR 技術(shù)在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J]. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2000
作者簡介:
邊瑞玲,女,漢族,1980年4月出生,內(nèi)蒙古包頭人,本科學(xué)歷,包頭輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院。研究方向:食品加工、檢測、營養(yǎng)、微生物等。