鹽酸克侖特羅對(duì)小鼠心電圖的影響

鄒本革（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)海都學(xué)院 山東 萊陽 265200）鄒 明（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 山東 青島） 尉玉杰（山東省萊陽市畜牧獸醫(yī)局）

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鹽酸克侖特羅對(duì)小鼠心電圖的影響

鄒本革（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)海都學(xué)院 山東 萊陽 265200）
鄒 明*（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 山東 青島） 尉玉杰（山東省萊陽市畜牧獸醫(yī)局）

摘要為研究鹽酸克侖特羅對(duì)小鼠心電圖（ECG）的影響，選用4周齡健康清潔級(jí)雄性昆明小鼠50只，體重18～22g，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為對(duì)照組（生理鹽水）、1組（0.1mg/kg b.w.）、2組（1mg/kg b.w.）、3組（2mg/kg b.w.）和4組（5mg/kg b.w.），各組小鼠均通過腹腔注射給藥，1次/d，連續(xù)給藥30d。末次給藥后24h，監(jiān)測(cè)小鼠的心電圖（ECG）變化。結(jié)果表明：第2、3和4組小鼠心率加快，竇性心動(dòng)過速，T波低平，與對(duì)照組相比差異均極顯著（P＜0.01）；J點(diǎn)下移，第2組與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05），第3組和第4組與對(duì)照組相比差異均極顯著（P＜0.01）。鹽酸克侖特羅導(dǎo)致小鼠ECG異常，且具有劑量依賴性。

關(guān)鍵詞克侖特羅 小鼠 心電圖

鹽酸克侖特羅（CL）是一種β2-腎上腺素受體激動(dòng)劑，1964年由美國氰胺公司合成，首先用于治療人和動(dòng)物的呼吸道疾病。二十世紀(jì)80年代初，美國一家公司發(fā)現(xiàn)CL可促進(jìn)動(dòng)物生長，在用量高于治療劑量5～10倍時(shí)，可明顯促進(jìn)動(dòng)物生長、改善胴體品質(zhì)和提高瘦肉率，歐美等許多國家逐步將CL作為飼料添加劑廣泛應(yīng)用于動(dòng)物生產(chǎn)。近年來，因食用含有CL殘留的動(dòng)物及其內(nèi)臟發(fā)生集體食物中毒事件，多個(gè)國家和地區(qū)先后禁止將其作為飼料添加劑應(yīng)用于動(dòng)物養(yǎng)殖。據(jù)報(bào)道，CL可造成人和動(dòng)物多器官系統(tǒng)的損傷［1］，特別是心血管系統(tǒng)。但目前CL對(duì)心肌的毒性及作用機(jī)理報(bào)道較少，為此試驗(yàn)從CL對(duì)小鼠心電圖影響的角度進(jìn)行研究，為進(jìn)一步揭示CL對(duì)心肌的毒性作用機(jī)理及其殘留的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 健康的清潔級(jí)雄性昆明小鼠，由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證號(hào)SCXK（京）2006-0008。試驗(yàn)前小鼠在18～22℃、相對(duì)濕度為40%～70%的條件下飼喂7d，自由飲水，飼喂不含任何藥物的全價(jià)配合飼料，并觀察其健康狀況，剔除活動(dòng)、飲食、排便等異常的非健康鼠。

1.2 供試藥品 CL，純度99.7%，批號(hào)：M061001，常州亞邦制藥有限公司提供。

1.3 方法 選用18～22g健康雄性小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為對(duì)照組（生理鹽水）、1組（0.1mg/kg b.w.）、2組（1mg/kg b.w.）、3組（2mg/kg b.w.）和4組（5mg/kg b.w.）。用生理鹽水將CL稀釋成所需濃度后，過濾除菌。各組動(dòng)物均通過腹腔注射染毒，1次/d，連續(xù)30d，染毒量為20ml/kg b.w.。末次給藥后24h，每組小鼠，腹腔注射10%烏拉坦溶液，小鼠麻醉后，仰臥保定，采用RM6240B型生理試驗(yàn)系統(tǒng)，監(jiān)測(cè)各組小鼠ECG標(biāo)準(zhǔn)肢體Ⅱ?qū)?lián)心率（HR）、PR間期、QRS間期、J點(diǎn)和T波等指標(biāo)的變化。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法 試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析處理，數(shù)值均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±SD）形式表示

2 結(jié)果

（1）CL導(dǎo)致小鼠ECG異常。與對(duì)照組相比，第2、3 和4組小鼠心率加快，竇性心動(dòng)過速，T波低平，且差異極顯著（P＜0.01），1組差異不顯著（P＞0.05）；J點(diǎn)下移，第2組差異顯著（P＜0.05），第3組和第4組差異極顯著（P＜0.01），第1組差異不顯著（P＞0.05）。（2）第2組小鼠心率顯著（P＜0.01）高于第1組小鼠心率；第3組小鼠心率顯著（P＜0.01）高于第2組小鼠心率；第4組小鼠心率顯著（P＜0.01）高于第3組小鼠心率。組間比較結(jié)果表明CL對(duì)小鼠心率的影響具有劑量依賴性。（3）第2組小鼠J點(diǎn)振幅低于第1組小鼠J點(diǎn)振幅，但差異不顯著（P＞0.05）；第3組小鼠J點(diǎn)振幅顯著（P＜0.01）低于第2組小鼠J點(diǎn)振幅；第4組小鼠J點(diǎn)振幅顯著（P＜0.01）低于第3組小鼠J點(diǎn)振幅。組間比較結(jié)果表明CL對(duì)小鼠J點(diǎn)振幅的影響具有劑量依賴性。（4）第2組小鼠T波振幅顯著（P＜0.05）低于第1組小鼠T波振幅；第3組小鼠T波振幅低于第2組小鼠T波振幅，但差異不顯著（P＞0.05）；第4組小鼠T波振幅顯著（P＜0.01）低于第3組小鼠T波振幅。組間比較結(jié)果表明CL對(duì)小鼠T波振幅的影響具有劑量依賴性。（5）各組小鼠PR和QRS間期時(shí)間，均差異不顯著（P＜0.05）。結(jié)果見附表。

3 討論

ECG是臨床常用的檢查手段，具有準(zhǔn)確性、無創(chuàng)性和重復(fù)性好的特點(diǎn)。當(dāng)心肌代謝改變和細(xì)胞損傷，心肌細(xì)胞膜內(nèi)外離子成分及濃度發(fā)生改變時(shí)，可影響心肌細(xì)胞的極化狀態(tài)，這可以通過ECG上的PR間期、QRS間期、ST段和T波反映出來，QRS波群的終點(diǎn)與ST段交接處稱為J點(diǎn)，由于小鼠ECG上的ST段很不明顯［2］，故將J點(diǎn)作為的觀察指標(biāo)。據(jù)報(bào)道，小鼠ECG的J點(diǎn)下移和T波平坦、雙向和倒置為心肌缺血和炎癥的心肌損傷的表現(xiàn)［3］。本試驗(yàn)中，CL給藥劑量大于等于1mg/kg b.w.時(shí)，小鼠心率加快，竇性心動(dòng)過速，T波低平，J點(diǎn)下移，且具有劑量依賴性，說明CL可能引起心肌缺血，且劑量越大缺血越嚴(yán)重。這與Daubert等［4］報(bào)道的一致。此外，研究發(fā)現(xiàn)，CL可降低心肌Na+-K+-ATP酶活性，使心肌細(xì)胞的Na+和K+轉(zhuǎn)運(yùn)失衡，從而引起心率加快和心律失常等癥狀［5］。其機(jī)理可能是由于CL激動(dòng)心臟的β2-腎上腺受體而引起心動(dòng)過速和心肌收縮力增強(qiáng)，心動(dòng)過速和心肌收縮力增強(qiáng)的同時(shí)導(dǎo)致心肌耗氧量增加和充盈時(shí)間縮短而使搏出量減少，從而導(dǎo)致心肌血液灌注量減少，表現(xiàn)為心肌缺血和壞死等變化。

附表 CL對(duì)小鼠ECG各指標(biāo)的影響（±SD，n=10）

附表 CL對(duì)小鼠ECG各指標(biāo)的影響（±SD，n=10）

注：①同列肩標(biāo)相同小寫字母或未標(biāo)字母為差異不顯著（P＞0.05），標(biāo)不同小寫字母為差異顯著（P＜0.05）。②同列肩標(biāo)不同大寫字母為差異極顯著（P＜0.01）。

組別　劑量（mg/kg b.w.）心率（bpm）PR間期（ms） QRS間期（ms） J點(diǎn)（mv） T波（mv）對(duì)照組　— 　396.25±37.83A a32.13±1.13 8.63±0.92 0.12±0.01Aa0.23±0.02Aa1組　0.1 　400.38±35.77A a34.00±1.77 8.25±1.04 0.11±0.01Aab0.23±0.03ABa2組　1 　422.50±44.22Bb33.88±1.81 8.50±0.93 0.10±0.02Ab0.20±0.03BCb3組　2 　493.88±25.10C c33.00±3.71 8.50±1.20 0.08±0.01Bc0.17±0.02Cb4組　5 　565.75±21.74D d34.06±3.52 8.25±0.89 0.04±0.01Cd0.12±0.02Dc

參考文獻(xiàn)

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［4］G.Patrick Daubert，Vincent H.Mabasa，Vivian W.Y.Leung，Cynthia Aaron.Acute clenbuterol overdose resulting in supraventricular tachycardia and atrial fibrillation［J］.Journal of medical toxicology.2007，3（2）:56-60.

［5］鄒本革，張啟迪，劉煥奇，鄒明.鹽酸克倫特羅對(duì)小鼠心肌ATP酶和抗氧化能力的影響［J］.中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2009，25（7）:33-35.

中圖分類號(hào)：S859.79

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-1733（2016）04-0004-02

*通訊作者

收稿日期：（2016–01–21）