可見(jiàn)植入熒光標(biāo)記和微金屬線碼標(biāo)記標(biāo)志拉薩裂腹魚(yú)的研究

朱挺兵， 顏文斌， 楊德國(guó)

(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所/農(nóng)業(yè)部淡水生物多樣性保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北武漢 430223)

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可見(jiàn)植入熒光標(biāo)記和微金屬線碼標(biāo)記標(biāo)志拉薩裂腹魚(yú)的研究

朱挺兵， 顏文斌， 楊德國(guó)*

(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所/農(nóng)業(yè)部淡水生物多樣性保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北武漢 430223)

摘要[目的]研究不同標(biāo)記方法對(duì)拉薩裂腹魚(yú)的標(biāo)記效果，為其增殖放流與效果評(píng)估提供技術(shù)支撐。[方法]分別采用可見(jiàn)植入熒光標(biāo)記(VIE)、微金屬線碼標(biāo)記(CWT)和空白對(duì)照處理對(duì)拉薩裂腹魚(yú)幼魚(yú)(5～7 cm)進(jìn)行為期40 d的標(biāo)志試驗(yàn),研究不同標(biāo)記方法對(duì)拉薩裂腹魚(yú)的標(biāo)記效果。[結(jié)果]VIE組試驗(yàn)魚(yú)的存活率明顯高于CWT組和對(duì)照組。VIE組和CWT組試驗(yàn)魚(yú)的標(biāo)志保持率分別為100%和98%。VIE和CWT標(biāo)記對(duì)試驗(yàn)魚(yú)生長(zhǎng)均沒(méi)有顯著影響。[結(jié)論] VIE標(biāo)記是拉薩裂腹魚(yú)幼魚(yú)較適宜的短期標(biāo)志方式。

關(guān)鍵詞拉薩裂腹魚(yú)；可見(jiàn)植入熒光標(biāo)記；微金屬線碼標(biāo)記；魚(yú)類標(biāo)志

AbstractSchizothoraxwaltoniRegan; Visible implant fluorescent tag; Micro metal coded wire tag; Fish marking

拉薩裂腹魚(yú)(SchizothoraxwaltoniRegan) 隸屬鯉形目鯉科裂腹魚(yú)亞科裂腹魚(yú)屬，又名拉薩弓魚(yú)、貝氏裂腹魚(yú)，主要分布于西藏雅魯藏布江中游干支流，是當(dāng)?shù)靥赜恤~(yú)類和主要經(jīng)濟(jì)魚(yú)類之一。拉薩裂腹魚(yú)主要以底棲無(wú)脊椎動(dòng)物為食，兼食著生藻類，漁獲物個(gè)體一般在500 g/尾以上[1]。近年來(lái)，隨著雅魯藏布江流域經(jīng)濟(jì)和社會(huì)的快速發(fā)展，拉薩裂腹魚(yú)正面臨著棲息地破壞、過(guò)度捕撈、外來(lái)物種入侵等問(wèn)題，導(dǎo)致其自然資源量明顯下降，嚴(yán)重威脅著拉薩裂腹魚(yú)的生存與物種延續(xù)。為保護(hù)這一物種，一些科研單位已經(jīng)開(kāi)展了拉薩裂腹魚(yú)的人工增殖與放流研究，但目前還沒(méi)有開(kāi)展比較系統(tǒng)的放流效果評(píng)估工作?？梢?jiàn)熒光植入標(biāo)記(Visible implant elastomer tag，VIE)和微金屬線碼標(biāo)記(Coded wire tag，CWT)是2種最常見(jiàn)的魚(yú)類標(biāo)記方法，被廣泛應(yīng)用于魚(yú)類增殖放流活動(dòng)的效果評(píng)估。筆者研究了VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記對(duì)拉薩裂腹魚(yú)的標(biāo)志效果，旨在為拉薩裂腹魚(yú)增殖放流的效果評(píng)估提供技術(shù)儲(chǔ)備。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)魚(yú)試驗(yàn)魚(yú)為2014年2月人工孵化的拉薩裂腹魚(yú)，2014年9月從四川律貝生物科技有限公司購(gòu)得。試驗(yàn)魚(yú)暫養(yǎng)于中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所武漢研究中心封閉循環(huán)水控溫養(yǎng)殖系統(tǒng)，暫養(yǎng)所用的圓形水缸直徑80 cm，水體積300 L，水溫保持在(15±0.5)℃，DO保持在8 mg/L以上。試驗(yàn)魚(yú)暫養(yǎng)期間使用商業(yè)配合飼料(升索牌，型號(hào)S4)進(jìn)行投喂。

1.2試驗(yàn)方法共設(shè)置3個(gè)處理組，分別為可見(jiàn)植入熒光標(biāo)記(VIE)組、微金屬線碼標(biāo)記(CWT)組和對(duì)照組。試驗(yàn)所用標(biāo)記設(shè)備均由美國(guó)西太平洋公司(NMT)生產(chǎn)。

從試驗(yàn)魚(yú)中挑選規(guī)格較為統(tǒng)一(5～7 cm)的個(gè)體進(jìn)行試驗(yàn)，每個(gè)處理組100尾試驗(yàn)魚(yú)。試驗(yàn)時(shí)，先用0.3 mg/L的MS-222將試驗(yàn)魚(yú)麻醉，然后測(cè)量全長(zhǎng)和體重，再迅速進(jìn)行標(biāo)志操作。使用CWT標(biāo)記時(shí)，利用標(biāo)記槍將CWT標(biāo)記(長(zhǎng)1.10 mm、直徑0.25 mm)注入試驗(yàn)魚(yú)背部肌肉，標(biāo)志后用檢測(cè)棒(V-Detector; NMT)進(jìn)行檢測(cè)，以確保標(biāo)志成功。使用VIE標(biāo)記時(shí)，使用0.3 mL注射器將橙色熒光絡(luò)合物注入試驗(yàn)魚(yú)的頭部皮層，并肉眼檢查顏色標(biāo)志是否完好。標(biāo)志操作均由同一個(gè)人完成。為排除由于操作人員經(jīng)驗(yàn)不足而造成的影響，標(biāo)記的前30尾試驗(yàn)魚(yú)不用于正式試驗(yàn)。標(biāo)志完成后，將試驗(yàn)魚(yú)放入封閉循環(huán)水控溫養(yǎng)殖系統(tǒng)的水缸中，每個(gè)處理組2個(gè)缸，每缸放入50尾試驗(yàn)魚(yú)，2個(gè)平行。對(duì)照組試驗(yàn)魚(yú)不進(jìn)行標(biāo)志，但其他處理均按照與標(biāo)記組相同的要求進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)期間水溫控制在(15.0±0.5)℃，DO保持在8 mg/L以上，光照周期12L:12D。試驗(yàn)魚(yú)每天飽食投喂2次，所用飼料為商業(yè)配合飼料。分別于試驗(yàn)開(kāi)始后的第7天和第40天，對(duì)試驗(yàn)魚(yú)生長(zhǎng)、存活和標(biāo)志保持率進(jìn)行檢測(cè)。

2結(jié)果與分析

2.1存活率與標(biāo)志保持率由表1可知，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，VIE標(biāo)記組試驗(yàn)魚(yú)的存活率為45%，明顯高于CWT標(biāo)記組(9%)和對(duì)照組(19%)，說(shuō)明VIE標(biāo)記對(duì)試驗(yàn)魚(yú)存活的影響要小于CWT標(biāo)記。對(duì)照組試驗(yàn)魚(yú)存活率較低的原因是由于試驗(yàn)1個(gè)月后對(duì)照組試驗(yàn)魚(yú)突發(fā)小瓜蟲(chóng)病，至試驗(yàn)結(jié)束時(shí)病情已經(jīng)得到控制。VIE標(biāo)記組和CWT標(biāo)記組試驗(yàn)魚(yú)的標(biāo)記保持率都在98%以上，說(shuō)明2種標(biāo)記方法對(duì)拉薩裂腹魚(yú)的短期標(biāo)志保持率都較高。

表1不同標(biāo)志方式下拉薩裂腹魚(yú)幼魚(yú)的存活率與標(biāo)志保持率比較

Table 1Comparison of survival rate and marker retention rate ofS.younghusbandijuveniles under different marking ways

試驗(yàn)時(shí)間Testtimed存活率Survivalrate∥%VIE組VIEgroupCWT組CWTgroup對(duì)照組Controlgroup標(biāo)志保持率Markerretentionrate∥%VIE組VIEgroupCWT組CWTgroup01001001001001007849095100100404591910098

2.2生長(zhǎng)情況由表2可知，試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，各組試驗(yàn)魚(yú)的全長(zhǎng)和體重都比較接近。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，VIE標(biāo)記組試驗(yàn)魚(yú)的體重增長(zhǎng)了13.8%，CWT標(biāo)記組試驗(yàn)魚(yú)的體重增長(zhǎng)了5.5%，對(duì)照組試驗(yàn)魚(yú)的體重增長(zhǎng)了7.5%，說(shuō)明VIE標(biāo)記對(duì)拉薩裂腹魚(yú)生長(zhǎng)的影響較小。

3討論與結(jié)論

在開(kāi)展魚(yú)類標(biāo)記試驗(yàn)時(shí)，都希望盡可能減小標(biāo)記操作對(duì)魚(yú)類生長(zhǎng)和存活的影響。該研究結(jié)果表明VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記對(duì)拉薩裂腹魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)沒(méi)有顯著影響，但是VIE標(biāo)記組存活率明顯高于CWT標(biāo)記組。造成這種差異的原因可能在于標(biāo)志部位的不同。VIE標(biāo)記只在魚(yú)體的表皮層操作，沒(méi)有傷及更深層的體組織，因而試驗(yàn)魚(yú)可以快速愈合傷口。CWT標(biāo)記要插入魚(yú)體肌肉深處，試驗(yàn)魚(yú)規(guī)格又較小，可能對(duì)試驗(yàn)魚(yú)造成了較大的傷害，從而最終降低了總體的存活率。

表2　不同標(biāo)志方式下拉薩裂腹魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)情況

該研究結(jié)果表明VIE標(biāo)志和CWT標(biāo)記對(duì)拉薩裂腹魚(yú)均具有極高的標(biāo)志保持率。然而，一些研究表明VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記在不同時(shí)間尺度下對(duì)魚(yú)類的標(biāo)志效果存在較大差異。例如，采用VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記標(biāo)志小鰻鱺(Anguillaanguilla)的32 d標(biāo)志保持率分別為100%和99%，但512 d的標(biāo)志保持率分別為66%和99%，說(shuō)明VIE只適合短期標(biāo)志，而CWT更適合長(zhǎng)期標(biāo)志[2]。造成這種現(xiàn)象的原因可能在于VIE標(biāo)記會(huì)隨著魚(yú)體的生長(zhǎng)而擴(kuò)散和淡化，到了一定程度肉眼將無(wú)法識(shí)別顏色，而CWT標(biāo)記是固態(tài)的金屬絲，不會(huì)自行擴(kuò)散，只要找準(zhǔn)部位就能用檢測(cè)棒檢測(cè)到信號(hào)。由于條件所限，筆者只開(kāi)展了為期40 d的試驗(yàn)，未能進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的試驗(yàn)，但在更長(zhǎng)的時(shí)間尺度下CWT標(biāo)記拉薩裂腹魚(yú)幼魚(yú)的長(zhǎng)期標(biāo)志保持率可能會(huì)保持較高水平，而VIE標(biāo)記拉薩裂腹魚(yú)幼魚(yú)的保持率可能會(huì)高于溫帶和熱帶地區(qū)的魚(yú)類，由于西藏魚(yú)類生長(zhǎng)速度緩慢，VIE標(biāo)記在皮層的擴(kuò)散速度可能會(huì)更慢。

由于患小瓜蟲(chóng)病的影響，該研究中各組試驗(yàn)魚(yú)的最終存活率均不高。因此，該試驗(yàn)無(wú)法說(shuō)明標(biāo)記對(duì)試驗(yàn)魚(yú)的存活能力是否有影響。但是，筆者同步開(kāi)展的VIE和CWT對(duì)拉薩裸裂尻魚(yú)的標(biāo)志效果試驗(yàn)也許能說(shuō)明一定的問(wèn)題。拉薩裸裂尻魚(yú)和拉薩裂腹魚(yú)均屬于裂腹魚(yú)類，且分布區(qū)域也大體一致。ZHU T等[3]研究表明VIE和CWT對(duì)拉薩裸裂尻魚(yú)的存活均沒(méi)有顯著影響。該試驗(yàn)中VIE組拉薩裂腹魚(yú)的存活率高于對(duì)照組。據(jù)此推斷，VIE標(biāo)記對(duì)拉薩裂腹魚(yú)幼魚(yú)的存活率沒(méi)有顯著影響，而CWT組試驗(yàn)魚(yú)的存活率略低于對(duì)照組。目前，并不能確定CWT標(biāo)記或患病是影響成活率的主因，仍需要進(jìn)一步研究。

綜合考慮成本、操作的便利性，損傷性和標(biāo)志保持率等因素，VIE標(biāo)記是拉薩裂腹魚(yú)幼魚(yú)短期標(biāo)志的較佳方式。

參考文獻(xiàn)

[1] 西藏自治區(qū)水產(chǎn)局.西藏魚(yú)類及其資源[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1995.

[2] SIMON J,DORNER H.Growth,mortality and tag retention of smallAnguillaanguillamarked with visible implant elastomer tags and coded wire tags under laboratory conditions [J].Journal of applied ichthyology,2011,27(1)：94-99.

[3] ZHU T,GUO W,WU X,et al.Effects of visible implant elastomer and coded wire tags on growth and survival ofSchizopygopsisyounghusbandiRegan,1905[J].Journal of applied ichthyology,2016,32(1)：110-112.

基金項(xiàng)目農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(201403012)。

作者簡(jiǎn)介朱挺兵(1987- )，男，江西南康人，助理研究員，博士，從事魚(yú)類生態(tài)學(xué)研究。*通訊作者，研究員，碩士生導(dǎo)師，從事魚(yú)類保護(hù)生物學(xué)研究。

收稿日期2016-03-22

中圖分類號(hào)S 931.1

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A

文章編號(hào)0517-6611(2016)13-004-02

Study of Visible Implant Fluorescent Tag and Micro Metal Coded Wire Tag inSchizothoraxwaltoniJunvenile

ZHU Ting-bing,YAN Wen-bin,YANG De-guo*

(Yangtze River Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences/Key Laboratory of Freshwater Biodiversity Conservation,Ministry of Agriculture,Wuhan,Hubei 430223)

Abstract[Objective] To examine the effect of different marking methods on Schizothorax waltoni Regan,and to provide technical support for its artificial releasing and effect evaluation.[Method] Junvenile S.waltoni Regan (total length 5-7 cm) were treated with visible implant elastomer tag (VIE)implantation,coded wire tag (CWT)implantation and no implantation (control) for 40 days,effects of different marking methods on S.waltoni were studied.[Result] The survival rate of experimental fish in VIE group was significantly higher than that of CWT and control group.Tag retention in VIE and CWT group were 100% and 98%,respectively.No significant effects were found of both VIE and CWT marking on the growth of experimental fish.[Conclusion] VIE is suitable short-term marking method for S.waltoni junvenile.