燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)用于燒傷創(chuàng)面修復(fù)的可行性研究

欒　芳

(淄博市中心醫(yī)院燒傷整形外科， 山東 淄博　255036)

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燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)用于燒傷創(chuàng)面修復(fù)的可行性研究

欒芳

(淄博市中心醫(yī)院燒傷整形外科， 山東 淄博255036)

摘要：目的評價燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)(denatured acellular dermal matrix，DADM)用于燒傷創(chuàng)面修復(fù)的可行性。方法選取該院收治的80例燒傷患者為研究對象，按照隨機數(shù)字表法，分為研究組和對照組，每組40例。實驗組患者實施DADM覆蓋創(chuàng)面移植術(shù)，對照組實施異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)(acellular dermal matrix，ADM)覆蓋創(chuàng)面移植術(shù)。比較兩組患者的植皮成活率、瘢痕形成及治療前后主要實驗室指標(biāo)。結(jié)果燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的療效顯著強于異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)(χ2=3.152，P=0.002)。燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)較異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)能夠減輕瘢痕增生，研究組的瘢痕評分顯著高于對照組(χ2=9.241，P=0.002))，其中愈合時間(18.2±5.76vs30.2±6.54)d，血管情況得分(0.8±0.78vs1.5±1.21)，柔軟性(0.9±0.92vs1.6±0.98)，色素情況(0.7±0.98vs1.4±1.13)，高度(0.4±0.35vs0.9±0.72)。治療1周及3周后，研究組患者的白介素6(IL-6)及干擾素γ(IFN-γ)水平顯著低于對照組，白介素2(IL-2)水平及CD4/CD8比值顯著高于對照組，兩組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)可作為真皮替代物，用于燒傷創(chuàng)面的修復(fù)，能夠減輕瘢痕增生，值得推廣應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：燒傷；移植,自體；皮膚,人工；真皮

真皮組織是維持皮膚軟組織功能與形態(tài)的重要部分，燒傷等原因?qū)е缕つw損傷后需要植皮修復(fù)[1-2]。目前，異源性的支架材料具有免疫源性且價格較貴，難以滿足患者的需求[3-5]。由于燒傷變形皮膚能夠恢復(fù)正常真皮功能和形態(tài)，因此，患者行燒傷創(chuàng)面切痂術(shù)后可回收變形皮膚，將其制備成燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)，用于修復(fù)患者自身的燒傷創(chuàng)面，該方法克服異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的免疫源性，且價格低廉，來源豐富[6-7]。本文選取80例燒傷患者為研究對象，評價燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)用于燒傷創(chuàng)面修復(fù)的可行性。

1資料與方法

1.1一般資料選取淄博市中心醫(yī)院2014 年9 月至2015 年2月收治的80例燒傷患者為研究對象，按照隨機數(shù)字表法，分為研究組和對照組，每組40例。其中研究組男22 例，女18 例； 年齡19～62 歲，平均年齡(42.62±1.87)歲；對照組男21例，女19 例； 年齡20 ～60歲，平均年齡(43.05±1.70)歲?；颊呔鶠樯睥颉慊颌蟆銦齻柽M(jìn)行創(chuàng)面修復(fù)，其中燙傷13例，電擊傷18例，化學(xué)燒傷8例，火焰燒傷39例，其他2例。排除標(biāo)準(zhǔn)：無全身感染；嚴(yán)重心肝腎功能不全。本研究經(jīng)淄博市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。兩組患者在治療前的一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，有可比性，見表1。

1.2變形脫細(xì)胞真皮的制備[8]取燒傷部位皮膚，置入0.1%苯扎溴銨溶液中浸泡30 min，隨后將皮片置入0.25%胰蛋白酶-0.5%Triton X-100混合溶液中，37 ℃持續(xù)振蕩24 h，每8 h換液一次，再使用PBS振蕩沖洗皮片24 h，最初10～20 min更換一次PBS溶液，共6次，隨后6 h換一次，最后將皮片浸于生理鹽水(滴加足量雙抗溶液)，4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3治療方法研究組患者手術(shù)方法[9-10]：創(chuàng)面逐層削痂至正常組織，出現(xiàn)密集滲血，充分止血，過氧化氫、氯已定及生理鹽水清洗，打孔的DADM覆蓋創(chuàng)面，無菌敷料加壓包扎。

對照組患者手術(shù)方法：創(chuàng)面逐層削痂至正常組織，出現(xiàn)密集滲血，充分止血，過氧化氫、氯已定及生理鹽水清洗，打孔的ADM(東慈真皮基質(zhì)，國食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2010第3641111號)覆蓋創(chuàng)面，無菌敷料加壓包扎。兩組患者均由同一醫(yī)師操作，并于手術(shù)后2 d更換外層敷料，此后隔日換藥。

1.4主要觀察指標(biāo)(1)患者的植皮成活率：患者手術(shù)后4周觀察，治療指數(shù)=(治療前面積-治療后面積)/治療前面積×100%，治療指數(shù)≥90%為痊愈；60%≤治療指數(shù)<90%為顯效；20%≤治療指數(shù)<60%為進(jìn)步；治療指數(shù)<20%為無效，總有效率= (痊愈+顯效+進(jìn)步) /總例數(shù)。(2)患者的瘢痕形成：患者手術(shù)后3月采用溫哥華評分表[11]進(jìn)行評定，并觀察移植區(qū)域硬度、色澤及瘢痕增生高度。該表分為4項，血管情況：正常為0分，粉紅色為1分，紅色為2分，紫紅色為3分；柔軟性：正常為0分，較柔軟為1分，能彎曲為2分，硬為3分，條索狀為4分，攣縮為5分；色素情況：正常為0分，色素減退為1分，混合為2分，色素沉著為3分；高度：平坦為0分，<2 mm為1分，≥2～<5 mm為2分，≥5 mm為3分。(3)患者的治療前后主要實驗室指標(biāo)：患者于治療前及治療后1周、3周清晨空腹抽取靜脈血5 mL，檢測抗炎因子白介素(Interleukin)2(IL-2)，促炎因子白介素6(IL-6)及干擾素-γ(IFN-γ)的變化情況。流式細(xì)胞儀檢測T淋巴細(xì)胞的CD3、CD4、CD8的水平。

2結(jié)果

2.1兩組患者的植皮成活率比較研究組的總有效率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=3.152，P<0.05)，表明采用自身燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的療效顯著強于異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)，見表2。

表2　兩組療效比較/例(%)

2.2兩組患者的愈合時間及瘢痕形成比較研究組患者的創(chuàng)面上皮化，表面平滑，顏色潮紅，無瘢痕增生；對照組患者的創(chuàng)面大部分愈合，存在點狀創(chuàng)面，愈合處不平，有瘢痕增生，見圖1。研究組的瘢痕評分顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，表明采用自身燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)較異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)能夠減輕瘢痕增生，見表3。

2.3兩組患者治療前后的炎癥因子指標(biāo)比較治療1周及3周后，研究組患者的IL-6及IFN-γ水平顯著低于對照組，IL-2水平顯著高于對照組，兩組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表1　兩組患者一般資料比較

注：研究組a：術(shù)前創(chuàng)面；b：術(shù)中削痂；c：自身燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)覆蓋創(chuàng)面；d：創(chuàng)面愈合；對照組e：術(shù)前創(chuàng)面；f：術(shù)中削痂；g：異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)覆蓋創(chuàng)面；h：創(chuàng)面愈合。

圖1　兩組患者的瘢痕形成比較

表4　兩組患者治療前后的主要實驗室指標(biāo)比較±s)

注：與治療前比較，aP<0.05。

2.4兩組患者治療前后的免疫功能比較治療1周及3周后，兩組患者的CD4/CD8比值升高，且研究組顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表5。

表5　兩組患者治療前后的免疫功能比較±s

注：與治療前比較，aP<0.05。

3討論

研究發(fā)現(xiàn)，真皮替代物用于治療燒傷創(chuàng)面，能夠減輕攣縮和瘢痕增生，且自身燒傷變形皮膚能夠恢復(fù)正常真皮功能和形態(tài)[12-13]。研究發(fā)現(xiàn)自身燒傷變形皮膚能夠恢復(fù)正常真皮功能和形態(tài)，因此，患者行燒傷創(chuàng)面切痂術(shù)后可回收變形皮膚，將其制備成燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)，用于修復(fù)患者自身的燒傷創(chuàng)面，來源豐富，且不存在免疫原性等缺點。使用自身真皮代替物修復(fù)燒傷創(chuàng)面，能夠重建皮膚組織的功能與結(jié)構(gòu)，改善關(guān)節(jié)等部位移植效果[14-15]。移植是否成功與真皮代替物有關(guān)，移植術(shù)后，自體皮層依靠創(chuàng)面滲液成活，真皮基質(zhì)新生血管形成后血供恢復(fù)[16]。采用溫哥華評分表作為評價指標(biāo)，分析燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的移植效果。

本文研究結(jié)果表明燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的療效顯著強于異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)。燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)較異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)能夠減輕瘢痕增生，研究組的瘢痕評分顯著低于對照組。說明應(yīng)用燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)能夠顯著改善燒傷皮膚組織的修復(fù)效果。溫哥華評分表中的移植區(qū)域硬度、色澤及瘢痕增生高度評分較低，說明應(yīng)用燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)能夠減輕燒傷創(chuàng)面的攣縮畸形和瘢痕增生。治療1周及3周后，研究組患者的IL-6及IFN-γ水平顯著低于對照組，IL-2水平及CD4/CD8比值顯著高于對照組。IL-2作為調(diào)控免疫應(yīng)答的重要因子，參與抗體反應(yīng)；IL-6作為促炎因子，刺激活化B細(xì)胞增殖，分泌抗體；IFN-γ的主要生物學(xué)活性為免疫調(diào)節(jié)作用；CD4/CD8比值是判斷人體免疫功能紊亂的臨床診斷敏感指標(biāo)。推測應(yīng)用燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的患者，其免疫排斥反應(yīng)較對照組低，傷口愈合時間較對照組短。本文中對瘢痕的評價是通過主觀判斷，目前還不存在客觀的檢測方法，若對移植區(qū)域硬度、色澤及瘢痕增生高度進(jìn)行定量檢測，更有助于評價燒傷創(chuàng)面的瘢痕增生情況。

綜上所述，燒傷變形脫細(xì)胞真皮基質(zhì)可作為真皮替代物，用于燒傷創(chuàng)面的修復(fù)，能夠減輕攣縮畸形和瘢痕增生，值得推廣應(yīng)用。

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Feasible study on application of denatured acellular dermal matrix in burn wound repair

LUAN Fang

(DepartmentofBurnsandPlasticSurgery,CentralHospitalofZibo,Zibo,Shandong255036,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the feasibility of denatured acellular dermal matrix for burn wound repair.Methods80 cases were chosen from February 2014 to February 2015 in our hospital as research objects and they were randomly divided into the study group (n=40) and the control group (n=40).In the study group,the patients were engrafted with denatured acellular dermal matrix.In the control group,the patients were engrafted with heterogeneity acellular dermal matrix.The survival rate of engrafts,scar hyperplasy and laboratory index were determined after treatment in both groups.ResultsThe curative effect of denatured acellular dermal matrix was much better than acellular dermal matrix(χ2=3.152，P=0.002).The scar hyperplasia under DADM treatment was much better than that under ADM,the scar scores in the study group were significantly higher thanthe control group(χ2=9.241，P=0.002),[healing time (18.2±5.76vs30.2 ±6.54),vascular condition score (0.8±0.78vs1.5±1.21),flexibility (0.9±0.92vs1.6±0.98),pigment (0.7±0.98vs1.4±1.13),and height (0.4±0.35vs0.9±0.72)].After 1 week and 3 weeks treatment,the levels of IL-6 and IFN-γ were significantly lower than the control group,and the levels of IL-2 and CD4 / CD8 ratio were significantly higher than the control group (P<0.05).ConclusionsDenatured acellular dermal matrix could serve as dermal template to repair the burn wound,thereby relieving scar proliferation,and it is worthy applying in the future.

Key words:Burns;Transplantation,autologous;Skin,artificial;Dermis

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.06.026

(收稿日期：2015-08-20 ，修回日期：2016-04-21 )