胃泌素釋放肽及其受體在結(jié)直腸癌中的表達(dá)

廖江濤 劉 妍 陳銀蕓

（湖南省老年醫(yī)院消化內(nèi)科，湖南 長(zhǎng)沙 410016）

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胃泌素釋放肽及其受體在結(jié)直腸癌中的表達(dá)

廖江濤 劉 妍 陳銀蕓

（湖南省老年醫(yī)院消化內(nèi)科，湖南 長(zhǎng)沙 410016）

【摘要】目的 探討結(jié)直腸癌中胃泌素釋放肽與預(yù)后、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的關(guān)系，同時(shí)分析其在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中的預(yù)測(cè)價(jià)值。方法 收集我院62例診斷為結(jié)直腸癌患者的臨床及病理資料，采用前瞻性研究方法，利用免疫組化技術(shù)了解患者中胃泌素釋放肽（GRP）、胃泌素釋放肽受體（GRPR）蛋白的表達(dá)，結(jié)合腫瘤體積進(jìn)行分析，了解二者與結(jié)直腸癌患者預(yù)后、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的關(guān)系。結(jié)果 GRP、GRPR蛋白在結(jié)直腸癌組織中陽性表達(dá)率分別為79.0%和83.2%，二者表達(dá)存在相關(guān)性。GRP、GRPR蛋白水平與結(jié)直腸癌患者的預(yù)后及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移差異具有一定的相關(guān)性。GRP、GRPR能夠在一定程度上預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，敏感度及特異度為69.4%、71.3%及70.1%、65.5%。結(jié)論 GRP、GRPR能夠較好的預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌患者的預(yù)后及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，具有較好的敏感性及特異性。

【關(guān)鍵詞】胃泌素釋放肽（GRP）；胃泌素釋放肽受體（GRPR）；結(jié)直腸癌；預(yù)后；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移

胃泌素釋放肽（GRP）是一種胃腸激素，是蛙皮素類似物，存在于正常人腦、胃腸的神經(jīng)纖維及胎兒肺的神經(jīng)內(nèi)分泌組織［1］。胃泌素釋放肽受體（GRPR）則是GRP的受體，二者結(jié)合后，將在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中起到重要作用［2］。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌患者中GRP、GRPR存在較高程度的表達(dá)［3］，和病理嚴(yán)重程度存在一定的相關(guān)性。本次研究則將對(duì)GRP、GRPR與結(jié)直腸癌患者的預(yù)后、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)性進(jìn)行探討。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：收集我院62例診斷為結(jié)直腸癌患者的臨床及病理資料，所有患者均已完成病理診斷明確為結(jié)直腸癌。行影像學(xué)檢查了解62例患者均處于局限期。患者年齡為31～81歲，平均年齡為58.3歲。男性34例，女性28例。病情臨床分期為ⅠA期2例，ⅠB期為5例，ⅡA期為8例，ⅡB期為18例，ⅢA期為12例，ⅢB期為17例。所有患者均在入院后接受治療，包括手術(shù)治療、放化療治療。

1.2 試劑及方法：所有病例均行GRP、GRPR蛋白測(cè)定，抗GRP蛋白多克隆抗體購自美國(guó)R&D公司，抗GRPR多克隆抗體購自上海優(yōu)維寧生物科技有限公司。SP免疫組化試劑盒購自北京中杉生物技術(shù)公司。設(shè)置陽性及陰性對(duì)照，陽性對(duì)照為試劑公司提供，PBS代替一抗為陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定：采用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜中是否存在棕黃色顆粒。染色強(qiáng)度計(jì)分：未著色0分；淺黃色1分；棕黃色2分，黃褐色3分。陽性細(xì)胞比例計(jì)分：0分：未見陽性細(xì)胞；1分：≤10%；2分：10%～50%；3分：50%～75%；4分：＞75%。染色陽性判斷：計(jì)算染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞比例計(jì)分乘積，當(dāng)≤3時(shí)為陰性，4～6分為弱陽性，7～9分為中陽性，10～12分為強(qiáng)陽性。

1.4 療效判定：本次研究中采用生存率及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率判斷患者治療效果。生存率：根據(jù)患者生存期，采用Kaplan-Meier法分析患者生存情況；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率：采用Kaplan-Meier法，結(jié)合患者影像學(xué)檢查確定的首次轉(zhuǎn)移時(shí)間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析計(jì)算。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，Kaplan-Meier法計(jì)算患者生存率及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率；Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)探討GRP、GRPR相關(guān)性；Log-rank法進(jìn)行二者與預(yù)后、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的單因素分析。設(shè)定P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 基本資料：本次研究中共有3例患者失訪，失訪率為4.8%。死亡31例，病死率為50.0%。死于局部復(fù)發(fā)者為2例，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者為18例，局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者為11例。

2.2 GRP和GRPR蛋白表達(dá)的關(guān)聯(lián)性：GRP、GRPR蛋白在結(jié)直腸癌組織中陽性表達(dá)率分別為79.0%和83.2%，GRP和GRPR的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.731，P＜0.05）（表1）。

表1 GRP和GRPR蛋白的相關(guān)性研究

2.3 GRP和GRPR蛋白表達(dá)與結(jié)直腸癌患者臨床資料相關(guān)性：GRP和GRPR蛋白表達(dá)在結(jié)直腸癌患者不同年齡、性別等之間表達(dá)無明顯差異（P＞0.05）。行GRP和GRPR蛋白在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者中表達(dá)的差異，發(fā)現(xiàn)二者表達(dá)的陽性率在不同分期的患者中均存在明顯差異，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 GRP和GRPR蛋白陽性表達(dá)與結(jié)直腸癌患者分期差異

2.4 GRP和GRPR蛋白表達(dá)與預(yù)后、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)性分析：本次研究中62例患者的1年生存率為82.7%，2年生存率為61.2%；1年遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率為31.0%，2年遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率為55.4%。GRP和GRPR蛋白不同表達(dá)強(qiáng)度的患者1、2年生存率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。GRP和GRPR蛋白不同表達(dá)強(qiáng)度的患者1、2年遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表4。

表3 GRP和GRPR蛋白表達(dá)與患者生存率相關(guān)性分析

表4 GRP和GRPR蛋白表達(dá)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率相關(guān)性分析

2.5 GRP和GRPR蛋白對(duì)于結(jié)直腸癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)的敏感性及特異性：將62例結(jié)直腸癌患者GRP和GRPR蛋白表達(dá)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移構(gòu)建ROC曲線，隨后采用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)GRP和GRPR蛋白的曲線下面肌有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且均落在斜率直線上方。GRP和GRPR蛋白預(yù)測(cè)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的敏感度及特異度為69.4%、71.3%及70.1%、65.5%。

3 討 論

結(jié)直腸癌是最常見的消化道惡性腫瘤之一，其發(fā)病率呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)，目前對(duì)于結(jié)直腸癌發(fā)病后長(zhǎng)期生存率以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率等方面的研究仍較欠缺，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的影響因素仍不明確。GRP在許多惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、進(jìn)展等方面發(fā)揮著重要的作用［4-5］，是一個(gè)較好的腫瘤標(biāo)志物。GRPR是一種跨膜蛋白，在許多腫瘤組織中均有表達(dá)，與腫瘤的侵襲力、分化程度、分期等有關(guān)［6］。二者結(jié)合后能夠通過信號(hào)傳導(dǎo)途徑刺激腫瘤的發(fā)展、增殖、轉(zhuǎn)移等過程。

本次研究發(fā)現(xiàn)GRP、GRPR蛋白在結(jié)直腸癌患者中陽性表達(dá)較高，且部分患者呈現(xiàn)強(qiáng)陽性，提示二者可能參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展。既往研究表明，二者結(jié)合后作用于細(xì)胞間黏附因子-1，能夠促進(jìn)腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移［7-9］，本次研究中發(fā)現(xiàn)GRP、GRPR蛋白與結(jié)直腸癌的分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率相關(guān)，提示二者和患者病情嚴(yán)重程度相關(guān)［10］。在采用ROC曲線探討GRP、GRPR蛋白與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)的相關(guān)性后發(fā)現(xiàn)，二者對(duì)于遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)具有較高的敏感性及特異性，對(duì)其監(jiān)測(cè)可以在一定程度上起到患者病情評(píng)價(jià)的預(yù)測(cè)作用［11-12］。

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中圖分類號(hào)：R735.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1671-8194（2016）01-0001-02

基金項(xiàng)目：湖南省科技廳計(jì)劃支持項(xiàng)目（2012FJ3076）

Gastrin- releasing Peptide and Its Receptors Expression in Colorectal Cancer

LIAO Jiang-tao， LIU Yan， CHEN Yin-yun
（Department of Digestive Internal Medicine， Hunan Province Elderly Hospital， Changsha 410016， China）

［Abstract］Objective To investigate the gastrin-releasing peptide and prognosis in colorectal cancer， the relationship between distant metastases， and to analyze its predictive value in distant metastasis. Methods To collect 62 cases of patients with colorectal cancer was diagnosed in the clinical and pathological data of the prospective study method， using immunohistochemical techniques for gastrin-releasing peptide in patients with （GRP）， gastrinreleasing peptide receptor （GRPR） protein expression， analysis combined with tumor size， understand the relationship with the prognosis of patients with colorectal cancer， distant metastasis. Results GRP， GRPR protein expression in colorectal cancer tissues positive rate is 79.0% and 83.2%， respectively，both correlation expression. GRP， GRPR protein levels and differences in the prognosis of patients with colorectal cancer and distant metastasis has certain relevance. GRP， GRPR can predict distant metastatic colorectal cancer in a certain extent， the sensitivity and specifcity of 69.4%， 71.3% and 70.1%， 65.5%. Conclusion GRP， GRPR can better predict the prognosis of patients with colorectal cancer and distant metastasis， and has good sensitivity and specifcity.

［Key words］Gastrin-releasing peptide （GRP）； Gastrin-releasing peptide receptor （GRPR）； Colorectal cancer； The prognosis； Distant metastases